10例获得性骨髓衰竭综合征患者端粒长度的检测

目的 探讨端粒酶基因突变与端粒长度变化间的关系.方法 收集来自北京协和医院、河北廊坊市中医院诊断明确的10例骨髓衰竭综合征患者外周血标本,提取有核细胞DNA,筛查TERC基因及TERT基冈的突变,Southern blot法测定患者端粒长度,并与2例血液系统恶性疾病患者及45名同龄健康对照者的端粒长度进行比较.结果 经基凶突变筛查,10例患者中2例携带端粒酶基因突变患者(其中1例为重型再生障碍性贫血,1例最终证实为先天性角化不良)端粒长度严重缩短,小于同龄正常对照长度的50%,与部分恶性血液病如骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(MDSRAEB Ⅱ)患者的端粒长度重叠,提示有恶性转化的可能.部分无突变的骨髓衰竭综合征患者端粒也有缩短,只有同龄正常对照长度的50%～80%,但缩短程度不及有突变者.结论 端粒酶基因突变患者端粒长度较同龄正常对照严重缩短(＜正常对照长度50%),提示可能为基因突变的结果 .部分无突变患者也存在端粒长度的缩短,但不及有突变者.     

白血病患者端粒酶活性及相关基因的表达

目的 研究端粒酶活性和相关基因表达在白血病患者中的变化及其在白血病发病机制中的意义。方法 通过半定量端粒重复序列扩增（TRAP）－银染和RT－PCR方法检测了47例白血病患者骨髓细胞的端粒酶活性和相关基因hEST2、TP1、hTR mRNA表达水平。结果 42例白血病进展阶段标本的端粒酶活性和相关基因表达水平高于急性白血病完全缓解期、慢性粒细胞白血病（慢粒）慢性期、正常和贫血标本（P＜0．01）;14例急性白血病完全缓解期和（或）慢粒慢性期标本端粒酶活性和TP1、hTR基因表达水平高于正常和贫血标本（P＜0．05）;在部分正常和贫血标本中检测到相对低水平的端粒酶活性和相关基因表达,3例贫血标本经短期常规培养后检测到端粒酶活性和基因表达增高。结论 端粒酶活性和相关基因表达异常升高是造血细胞恶性转化的特异性标记之五,检测端粒酶活性和相关基因表达有助于白血病患者的疗效观察。正常骨髓的端粒酶活性与具有增殖分化能力的造血干细胞有关。hEST2可能是端粒酶的正调控结构基因,hTR基因表达与端粒酶的反馈调控机制有关。     

端粒-端粒酶与造血干细胞

端粒是真核细胞染色体末端结构,其长度与细胞的复制及衰老有关。端粒酶是一种逆转录酶,能利用自身的RNA成分为模板合成端粒重复序列,阻止端粒缩短。造血干细胞的端粒酶活性阳性,但它的端粒仍然会随着干细胞的增殖而缓慢缩短,测定供体端粒长度对于筛选更好的干细胞以重建造血有重要意义。     

端粒—端粒酶与造血干细胞

端粒是真核细胞染色体末端结构，其长度与细胞的复制及衰老有关，端粒酶是一种逆转录酶，能利用自身的ＲＮＡ成分为模板合成端粒重复序列，阻止端粒缩短。造血干细胞的端粒酶活性阳性，但它的端粒仍然会随着干细胞的增殖而缓慢缩短，测定供体端粒长度对于筛选更好的干细胞以重建造血有重要意义。     

端粒-端粒酶假说与白血病

端粒-端粒酶系统异常正成为肿瘤发生机制的一种新假说而日益受到关注。本文着重阐述了端粒、端粒酶的生物学特性,在造血系统的分布特征及其与白血病等造血系统恶性疾病的关系。     

Notch及其配体在血液系统中的作用

Notch是一组普遍存在于造血干／祖细胞、胚胎肝细胞、外周血淋巴细胞等多种细胞表面的跨膜蛋白。Notch在其配体的作用下可直接作为基因转录调节因子,对造血细胞的增殖、分化与抗凋亡能力起重要调节作用,研究证实Notch及其配体的正常表达是机体维持正常造血功能的重要条件,并在部分血液系统恶性疾病包括白血病及淋巴瘤的发生和发展中起重要作用。     

端粒—端粒酶假说与白血病

端粒－端粒酶系统异常正成为肿瘤发生机制的一种新假说而日益受到关注。本文着重阐述了端粒、端粒酶的生物学特性，在造血系统的分布特征及其与白血病等造血系统恶性疾病的关系。     

Notch及其配体在血液系统中的作用

Notch是一组普遍存在于造血干／祖细胞、胚胎肝细胞、外周血淋巴细胞等多种细胞表面的跨膜蛋白。Notch在其配体的作用下可直接作为基因转录调节因子，对造血细胞的增殖、分化与抗凋亡能力起重要调节作用，研究证实Notch及其配体的正常表达是机体维持正常造血功能的重要条件，并在部分血液系统恶性疾病包括白血病及淋巴瘤的发生和发展中起重要作用。     

肾细胞癌端粒酶活性测定的研究

目的研究端粒酶活性与肾细胞癌之间的关系。方法采用改良的TRAP法对肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中端粒酶活性进行检测,结果肾癌组织中和癌旁正常肾组织中端粒酶活性阳性率差异有显著性(P<0．01);高分化组与低分化组端粒酶活性差异无显著性(P>0．05);早期肾癌组与中晚期肾癌组端粒酶活性差异无显著性(P>0．05)。结论肾细胞癌组织中端粒酶活性较正常组织高,肾癌端粒酶活性与其恶性程度无相关性,端粒酶活性测定可能作为肾癌诊断的分子水平标志物。     

脱落细胞端粒酶活性检测对良恶性胸腹水的鉴别

常规胸腹水检查由于受经验、技术条件等因素的影响,敏感性较低,对良恶性胸腹水有时很难定性诊断。正常细胞除生殖细胞、造血干细胞外,不表达端粒酶活性,而85％-90％的肿瘤细胞表达端粒酶活性,端粒酶活性检测对肿瘤的诊断具有较强的专一性。本文用免疫组化方法检测胸腹水脱落细胞端粒酶的活性,旨在探讨其在良恶性胸腹水鉴别诊断中的价值。     

STAT5在造血调控及相关血液疾病发生中的作用

信号转导与转录活化因子5(STAT5)是一种广泛存在于多种组织细胞胞浆内的转录因子,在被激活后能够进入细胞核与特异性DNA序列结合,从而发挥转录调控作用。STAT5有STAT5A和STAT5B两种异构体,二者具有96%的同源性,但其生理功能并不完全相同。研究显示,STAT5能够调节造血细胞的生存、增殖、分化和凋亡,它的过度激活与多种血液系统恶性疾病的病理发生过程密切相关,所以STAT5在临床上可能成为一个新的治疗靶点。本文就该分子在造血调控及相关血液疾病中发挥的作用加以阐述。     

恶性血液病细胞中tankyrase表达与端粒酶活性关系研究

为研究以白血病为主的恶性血液病细胞中端粒酶活性正向调控基因tankyrase的表达与端粒酶活性的关系并初步探讨tankyrase对端粒酶活性调控的机理和意义 ,以实时定量RT PCR技术对髓细胞系白血病细胞株K5 6 2 ,HL 6 0 ,U937,NB4 ,THP 1,HEL ,Dami,T淋巴细胞性白血病细胞株 6T CEM ,Jurkat和B细胞淋巴瘤细胞株Raji中tankyrase的表达进行检测 ,同时检测端粒酶逆转录酶hTERT的表达确定端粒酶活性 ,并以经磁珠分离的正常人CD3 ,CD19 和CD33 细胞和 10份正常人骨髓单个核细胞做对照。结果发现 :tankyrase在恶性血液病细胞株中的表达明显高于正常对照 (U =19,P <0 .0 1) ,其中髓系白血病细胞株中的表达高于正常人CD33 细胞 ,T淋巴细胞性白血病细胞株和B细胞淋巴瘤细胞株中的表达分别高于正常人CD3 和CD19 细胞。髓系恶性血液病细胞株tankyrase的表达 (0 .0 0 32± 0 .0 0 10 )明显低于淋系恶性血液病细胞株的表达 (0 .0 12± 0 .0 0 16 ) (F =2 3,P <0 .0 1)。Tankyrase与hTERT的表达呈正相关 (相关系数为 0 .395 ,P <0 .0 5 )。结论 :tankyrase在恶性血液病细胞株中呈高表达 ,与端粒酶活性呈正相关 ,提示tankyrase可能是恶性血液病中端粒酶活性增高的原因之一。     

Peripheral blood stem cell grafts in allogeneic hematopoietic cell transplantation: It is not all about the CD34+ cell dose

Allogeneic Hematopoietic Cell Transplantation is a curative approach in various malignant and non-malignant disorders. The majority of adult transplants in the current era are performed using mobilized stem cells, harvested from the peripheral blood by leukapheresis. Peripheral blood stem cell (PBSC) collections are designed to target a dose of stem cells that will result in safe engraftment and hematopoietic recovery; however, 99 % of the cells contained in a PBSC graft are not stem cells and a growing number of studies attempt to characterize the associations between graft composition and transplant outcomes. A better understanding of the impact of the quantity and quality of various cell types in PBSC grafts may lead to development of novel collection strategies or improved donor selection algorithms. Here we review relevant findings from recent studies in this area.     

胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞（ESC）是来源于哺乳动物早期胚胎的内细胞团中的一种二倍体细胞,具有发育的全能性。ESC的体内和体外分化在分子水平有许多相似之处。在现有培养条件下。小鼠ESC体外分化的细胞类型或结构主要有4种：内皮细胞与血管,肌细胞和心肌、造血细胞和神经细胞,最近的研究提示;造血干细胞（HSC）来源于胚胎内的特定区域,HSC的产生可能受尚未发现的胚胎生长因子调节。ESC为从胚胎着手明确早期造血过程提供了方便有效的实验途径。人ESC的研究及应用尚面临一系列伦理问题,对ESC的研究具有广阔的应用前景。     

再论造血干细胞研究的若干新动向

当今造血移植物工程发展的方向造血干细胞非血缘移植的继续发展面临四大障碍 :供源少 ,植入难 ,GVHD重 ,恶性病复发多。各种造血干细胞异基因移植方案 ,诸如尽量清除T细胞的骨髓移植 ,固然可以减轻GVHD ,却使植入难 ,复发更多 ;动员的外周血移植 ,如果CD34 细胞的剂量达10 6 kg ,明显提高植入率 ,但由于外周血中过多的成熟T细胞而使GVHD加重 ;动员的外周血超大剂量(megadose)CD34 细胞移植可以提高植入率、减轻或不发生GVHD ,但复发率又增高等。总之 ,目前没有一种造血异基因移植物能全面解决植入、GVHD和复发等问题。供源缺乏…     

Essential role for the p55 tumor necrosis factor receptor in regulating hematopoiesis at a stem cell level

Hematopoietic stem cell (HSC) self-renewal is a complicated process, and its regulatory mechanisms are poorly understood. Previous studies have identified tumor necrosis factor (TNF)-alpha as a pleiotropic cytokine, which, among other actions, prevents various hematopoietic progenitor cells from proliferating and differentiating in vitro. However, its role in regulating long-term repopulating HSCs in vivo has not been investigated. In this study, mice deficient for the p55 or the p75 subunit of the TNF receptor were analyzed in a variety of hematopoietic progenitor and stem cell assays. In older p55(-/-) mice (>6 mo), we identified significant differences in their hematopoietic system compared with age-matched p75(-/-) or wild-type counterparts. Increased marrow cellularity and increased numbers of myeloid and erythroid colony-forming progenitor cells (CFCs), paralleled by elevated peripheral blood cell counts, were found in p55-deficient mice. In contrast to the increased myeloid compartment, pre-B CFCs were deficient in older p55(-/-) mice. In addition, a fourfold decrease in the number of HSCs could be demonstrated in a competitive repopulating assay. Secondary transplantations of marrow cells from primary recipients of p55(-/-) marrow revealed impaired self-renewal ability of p55-deficient HSCs. These data show that, in vivo, signaling through the p55 subunit of the TNF receptor is essential for regulating hematopoiesis at the stem cell level.     

间充质干细胞在造血调控中的作用

间充质干细胞（MSC）作为造血微环境主要细胞成分的来源，具有自我更新和多向分化的潜能，通过与造血细胞直接接触、分泌细胞外基质及多种细胞因子维持造血微环境结构和功能的完整性，进而实现对造血的精细调控。本文结合近几年来国内外MSC的研究进展，就MSC在造血调控中的作用，诸如MSC分泌多种支持造血的细胞因子，MSC表达与造血细胞相互作用的黏附分子，联合移植MSC对造血重建的支持作用及其临床应用前景作一综述。     

破骨细胞参与调控骨髓造血微环境

骨髓造血微环境存在于全身骨骼的骨髓腔内，是机体造血以及免疫细胞发育的场所。骨髓造血微环境中的破骨细胞由造血干细胞分化发育而来，在骨重塑中发挥重要作用。近年来的研究表明，破骨细胞与微环境稳定、应激时造血干祖细胞动员及骨免疫密切相关。深入探究破骨细胞与骨髓造血微环境中其它细胞的相互关系，有利于寻找造血、骨免疫疾病和肿瘤等方面新的治疗策略。本文就破骨细胞的发育来源与鉴定、破骨细胞与造血干细胞动员的调节及破骨细胞与骨免疫进行综述。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病

为观察异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗急慢性白血病的疗效 ,从 1997年 3月至 2 0 0 3年 1月共进行了 2 1例急慢性白血病的Allo PBSCT。 2 1例的供者中 19例为HLA Ⅰ /Ⅱ抗原完全相合的同胞 ,1例慢性粒细胞白血病急粒变患者的供者为HLA半相合母亲 ,1例女性急性淋巴细胞白血病患者的供者为 1个B位点不合的胞妹。 2 1名供者均用rhG CSF动员 ,第 5天起用CS 3 0 0 0plus分离外周血单个核细胞 1-3次 ,预处理方案采用常用的TBI与联合化疗方案。所有病人均采用环胞菌素A和短程MTX进行移植物抗宿主病的预防。结果表明 ,移植后粒细胞恢复至≥ 0 .5× 10 9/L平均为 12天 ,血小板恢复至≥ 2 0× 10 9/L为 15天。 17例患者中发生急性GVHD 8例 (47% ) ,其中 1例为子母间移植 ;慢性GVHD 12例 (70 % ) ;4例存活的女性患者 ,包括 1例 1个B位点不合的ALL患者 ,均无急、慢性GVHD发生。 10 0天移植相关死亡 3例 (14 % ) ,复发 2例 (9.5% ) ,均为移植时未缓解患者。至报告时无病存活 11例 (52 .4% ) ,存活时间平均 40 (15-70 )个月。结论 :Allo PBSCT后造血恢复较快、白血病复发率相对较低 ,急性和重度GVHD的发生并无明显增加 ,但慢性GVHD发生率明显增高 ,并成为影响患者生存的主要并发症     

造血发育和内皮细胞的关系

研究造血和血管内皮在胚胎发育中的关系，包含对造血细胞和内皮细胞的发育起源以及相关分子调控的探讨。以已有的研究结果为基础，对造血细胞和血管内皮细胞发育关系提出了成血血管细胞（hemangioblast）和生血内皮（hemogenic endothelium）的两种模式。在卵黄囊和P—Sp／AGM区，造血和内皮细胞的发育关系分别表现出不同的特点：二者在卵黄囊共同来源于成血血管细胞；在AGM区则更多表现为生血内皮的模式。造血和血管内皮相关分子的表达和调控作用的研究，不仅体现了造血和内皮在发育中的密切关系，同时也加深了对造血发育调控的认识。本文就原始造血和永久造血的发育、造血和血管内皮发育相关的两种模式及造血和内皮发育相关分子问题进行了综述。