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相似文献
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1.
目的研究银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响.方法用L929细胞结晶紫染色法检测TNFα的含量,用电泳迁移率改变检测法检测NF-κB的结合活性.结果1和10 μmol·L-1银杏内酯R能够显著抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα的生成,其IC50为0.26μmol·L-1:1 mg·L-1LPS和1 nmol·L-1PAF均可活化大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB;银杏内酯B能够抑制LPS或PAF刺激的NF-κR活化.结论银杏内酯B能够抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB的活化.PAF参与LPS激活NF-κB的过程.  相似文献   

2.
胡玉芳  郭颖  程桂芳   《药学学报》2001,36(3):161-164
目的 研究非甾体抗炎药吲哚美辛(indomethacin)和美洛昔康(meloxicam)对细菌脂多糖(LPS)诱导表达的C57小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子NF-κappaB(NF-κB)的抑制作用。方法 NF-κB的测定采用电泳迁移率改变法。结果 小鼠腹腔巨噬细胞经LPS诱导后细胞NF-κB含量明显增高。Indomethacin和meloxicam在10-5-10-7mol.L-1浓度下可明显降低LPS激活的小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB活化。结论 Indomethacin和meloxicam对NF-κB活化的抑制作用可能是两者的抗炎作用机理之一。  相似文献   

3.
聂珍贵  王文杰 《药学学报》2003,38(2):98-102
目的 研究银杏内酯B对血小板活化因子(PAF)刺激的大鼠中性粒细胞粘附、趋化及脱颗粒功能的影响。方法 从大鼠外周血分离中性粒细胞,用MTT比色法、Boyden小室法及β-葡萄糖苷酸酶释放法分别检测PAF诱导的粒细胞粘附、趋化及脱颗粒反应。结果10 μmol·L-1 银杏内酯B可显著抑制中性粒细胞的粘附反应;1~1 000 nmol·L-1 可剂量依赖性抑制10 nmol·L-1 PAF诱发的粒细胞趋化反应,其IC50为4.84 nmol·L-1; 0.01~10 μmol·L-1可抑制1 μmol·L-1 PAF诱发的粒细胞释放β-葡糖苷酸酶,其IC50为3.56 μmol·L-1。结论银杏内酯B能够抑制PAF刺激的大鼠中性粒细胞粘附、趋化及脱颗粒反应。  相似文献   

4.
目的考察银杏内酯B(ginkgolide B,BN52021)对血小板活化因子(PAF)引起的小鼠腹腔巨噬细胞趋化反应和丝状肌动蛋白(F-actin)聚合作用的影响。方法Boyden小室法检测化合物对巨噬细胞趋化的影响;流式细胞术检测特异性标记的巨噬细胞中F-actin的变化。结果PAF可显著刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生趋化效应,PAF受体拮抗剂BN52021(0.01 nmol·L-1~0.1 μmol·L-1)可明显抑制该作用。此外,在含钙缓冲液中,BN52021可显著抑制PAF引起的丝状肌动蛋白聚合。结论BN52021可能通过抑制丝状肌动蛋白的聚合作用,从而抑制PAF引起的巨噬细胞趋化,并且这种作用是钙依赖性的。表明BN52021的抗炎作用途径之一是抑制PAF诱导的趋化作用。  相似文献   

5.
目的 观察银杏内酯B对大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶及细胞内钙水平的影响。方法 反相高效液相色谱及Fura-2/AM荧光指示剂法。结果 银杏内酯B在0.1-10μmol·L-1范围内,使花生四烯酸释放量降低10.9%-22.2%;0.1-50μmol·L-1时,LTB4和5-HETE生成量分别降低29.4%-88.6%和26.2%-89.3%;在0.1-100μmol·L-1使PAF和fMLP刺激引起的细胞内游离钙浓度分别降低13.9%-51.4%和2.2%-36.6%。结论 银杏内酯B能抑制体外大鼠中性白细胞花生四烯酸代谢酶的活性及细胞内游离钙浓度的升高。  相似文献   

6.
炎性刺激剂对小鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的诱导   总被引:1,自引:0,他引:1  
郭颖  胡玉芳  程桂芳 《药学学报》1999,34(8):586-589
目的:建立炎性刺激剂诱导细胞核因子κB(Nuclear factor κB, NF-κB)的模型,研究传统非甾体抗炎药阿斯匹林(aspirin)作用机理。 方法:用脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)刺激小鼠腹腔巨噬细胞,用电泳迁移率改变检测法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测。结果:LPS 1 μg.mL-1及3 μg.mL-1,PMA 2 ng.mL-1均能诱导细胞核内NF-κB的含量。阿斯匹林10-5 mol.L-1可以显著抑制LPS(1 μg.mL-1)和PMA(PMA 2 ng.mL-1)对细胞核内NF-κB的活化。结论:所建立的以LPS和PMA为刺激剂,诱导细胞核内NF-κB的模型,可用于非甾体抗炎药的抗炎机理的研究。  相似文献   

7.
4种刺激剂对小鼠腹腔巨噬细胞生成白细胞介素6的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
用白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)依赖细胞株B9的MTT法,研究了4种刺激剂PMA,A23187,fMLP和LPS对小鼠腹腔巨噬细胞生成及分泌IL-6的影响。分别检测了巨噬细胞培养上清液及胞溶部分IL-6的含量。结果表明,PMA(0.1~10μmol·L-1),A23187(0.01~1μmol·L-1),fMLP(0.025~2.5μmol·L-1)均能促进巨噬细胞生成及分泌IL-6,且有量效关系。LPS(0.1~10μg·mL-1)能增加巨噬细胞培养上清液中IL-6的含量,但对胞溶部分无影响。结果提示:巨噬细胞IL-6的生成及分泌与蛋白激酶C(PKC)和钙离子通道活化有关;LPS与其他3种刺激剂对胞溶部分IL-6生成的不同作用提示可能存在不同作用机制。  相似文献   

8.
研究了血小板激活因子(PAF)和PAF拮抗剂银杏内酯B对洗涤兔血小板中cAMP含量的作用. 结果表明PAF(0.1-1.0 μmol·L-1)对血小板的基础cAMP水平无影响, 但对前列腺素E1(PGE1) 2 μmol·L-1及4,5-二氢-6-[4-(1H-咪唑-1)苯基]-5-甲基-3-(2H)-哒嗪酮(CI-930) 20 μmol·L-1引起的cAMP升高有显著的抑制作用. 银杏内酯B能完全拮抗PAF抑制PGE1和CI-930升高cAMP的作用, IC50分别为4.7和12.5 μmol·L-1. 合用磷酸肌酸/磷酸肌酸激酶和阿司匹林对PAF和银杏内酯B的作用均无影响. 提示PAF对磷酸二酯酶的激活作用及腺苷酸环化酶的抑制作用是PAF的直接作用,与其同PAF受体结合有关.  相似文献   

9.
李叶静  谈弋 《安徽医药》2017,21(8):1384-1387
目的 研究紫草素抑制由脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症的机制.方法 以淀粉培养基注射BALB/c小鼠腹腔,诱导并分离巨噬细胞,以APC标记F4/80染色,并用流式细胞仪检测分离巨噬细胞情况;用1 mg·L-1的LPS刺激上述分离的巨噬细胞,分组如下:DMSO溶剂对照组,LPS对照组,LPS+低剂量紫草素组(0.1 μmol·L-1);LPS+中剂量紫草素组(1 μmol·L-1);LPS+高剂量紫草素组(10 μmol·L-1);通过ELISA和实时定量PCR(qRT-PCR)方法分别测定各处理组培养上清液以及细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)的表达情况;Western blot分别测定Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)的p65亚基磷酸化表达情况.结果 流式细胞检测可知,APC标记的F4/80染色巨噬细胞的纯度可达97.8%;ELISA和实时定量PCR结果显示,紫草素处理后可以抑制由LPS刺激细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05),并增加IL-10的表达(P<0.05),且呈现出一定的浓度依赖性;Western blot结果显示,紫草素能下调由LPS刺激的TLR4的表达水平和NF-κB的p65亚基磷酸化表达.结论 紫草素的抗炎机制可能是通过TLR4介导的信号通路活化NF-κB,抑制IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,并促进IL-10的分泌.  相似文献   

10.
目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加,PAF受体抑制剂银杏内酯B(0.6 g·L-1)和CV3988(30μmol·L-1)分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明,银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化,以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高,银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达,分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。  相似文献   

11.
目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4 μmol·L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFα mRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性。结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFα mRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用。结论 T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生。  相似文献   

12.
抗炎药物对HEK293细胞NF-κB活化的调节作用   总被引:2,自引:1,他引:2  
殷红  白金叶  程桂芳 《药学学报》2005,40(6):513-517
目的探讨不同作用机制的抗炎药物对内源性和TNFα诱导的NF-κB的调节作用。方法利用荧光素酶报告基因测定法检测细胞内NF-κB活化水平,MTT法测定细胞增殖,PI染色-流式细胞仪测定细胞凋亡。结果 一定浓度的美洛昔康和地塞米松能够明显降低HEK293细胞内源性和10 ng·mL-1 TNFα诱导的NF-κB活化,1×10-9 mol·L-1氢化考的松分别明显增加和降低这两种活化,而吲哚美辛对内源性活化无明显影响。4种药物对HEK293细胞增殖均无明显作用。地塞米松单独或联合TNFα、吲哚美辛联合TNFα能够引起细胞凋亡。结论不同类型的抗炎药物对内源性和TNFα诱导的NF-κB活化影响不同。提示NF-κB活化调节可能成为药物作用机理研究的有效靶点之一。  相似文献   

13.
青藤碱对核转录因子κB及其抑制因子IκB的影响   总被引:13,自引:0,他引:13  
  相似文献   

14.
Rat peritoneal polymorphonuclear leukocytes (PMNs) showed a single class of high affinity binding sites for platelet-activating factor (PAF) with an equilibrium dissociation constant (KD) of 4.74 (+/- 2.59) nM. Each cell contained 2.79 (+/- 1.40) x 10(4) receptors. In the isolated membranes at pH 7.0 in 10 mM MgCl2, 10 mM Tris and 0.25% bovine serum albumin, the KD value was 0.61 (+/- 0.1) nM, which is roughly identical to the KD values reported previously for various membrane systems under identical ionic conditions. The receptors were highly specific for PAF. Several receptor antagonists that are reported to inhibit the binding of [3H]PAF and the PAF-induced function in platelets could fully displace the binding. The biologically inactive enantiomer (enantio-C16-PAF), a PAF analog, azido-PAF, and an indene derivative of the PAF receptor antagonist, L-651,142, had different potencies to inhibit [3H]PAF binding to rat and human PMN membranes. L-652,731, a tetrahydrofuran analog of the PAF receptor antagonist was about 10 times more potent to inhibit the binding in rat liver tissues than in rat PMNs. These results suggest that PAF receptors on human and rat PMNs are not identical and that PAF receptor subtypes may exist in rat liver and PMNs.  相似文献   

15.
16.
Aim: To elucidate the mechanisms underlying homocysteine (Hcy)-induced chemokine production. Methods: Human whole blood was pretreated with inhibitors of calmodulin (CAM), protein kinase C (PKC), protein tyrosine kinase (PTK), mitogen-activated protein kinase (MAPK), and NF-kB and activators of PPARγ for 60 min followed by incubation with Hcy 100 μmol/L for 32 h. Thelevels of mitogen chemokine protein (MCP)-I and interleukin-8 (IL-8) were determined by enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA). Results: Inhibitors of PKC (calphostin C, 50-500 nmol/L and RO-31-8220, 10-100 nmol/L), CaM (W7, 28-280 μmol/L), ERK1/2 MAPK (PD 98059, 2-20 μmol/L), p38 MAPK (SB 203580, 0.6-6μmol/L), JNK MAPK (curcumin, 2-10μmol/L), and NF-kB(PDTC, 10-100 nmol/L) markedly reduced Hcy 100 μmol/L-induced production of MCP-1 and IL-8 in human cultured whole blood, but the inhibitors of PTK(genistein, 2.6-26 μmol/L and tyrphostin, 0.5-5 μmol/L) had no obvious effect on MCP-1 and IL-8 production. PPARγ activators (ciglitazone 30 μmol/L andtroglitazone 10 μmol/L) depressed the Hcy-induced MCP-1 production but not IL-8 production in the cultured whole blood. Conclusion: Hcy-induced MCP-1 and IL-8 production is mediated by activated signaling pathways such as PKC, CaM, MAPK, and NF-kB. Our results not only provide clues for the signal transduction pathways mediating Hcy-induced chemokine production, but also offer a plausible explanation for a pathogenic role of hyperhomocysteinemia in these diseases.  相似文献   

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