改良酶免疫法检测泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)引起的泌尿生殖道感染是我国目前最常见的性传播疾病之一。细胞培养法分离沙眼衣原体是传统的实验室诊断“金标准”。但鉴于该方法操作繁琐,且约需1周时间才能出结果,故未被普遍应用。基因诊断类检测方法经近几年世界范围内广泛临床验证,已被广泛认可为新一代“金标准”方法^[1]。     

细胞培养法检测淋病患者泌尿生殖道沙眼衣原体的研究

用衣原体细胞培养法和淋球菌培养法，对我中心脏病门诊的４５例初步诊断为淋病（涂片检查）的患者进行了泌尿生殖道标本检测。结果显示：４５份标本淋球菌培养均为阳性，其中衣原体细胞培养检测阳性的７份，阳性检出率为１５．６％。对资料的分析还提示，与淋病患者合并衣原体感染发病率显著相关的危险因素是性伴数和既往性病史。     

生殖道沙眼衣原体细胞培养和血清学研究

目的 研究孕妇、盆腔炎患者和ＳＴＤ门诊男女就诊者生殖道沙眼衣原休病原学、血清学及两者之间的关系,并与对照人群进行比较。方法 细胞培养检测生殖道沙眼衣原体;酶免疫和微量免疫荧光试验方法检测血清沙眼衣原体抗体。结果 孕妇、盆腔炎患者和ＳＴＤ男女就诊者生殖道沙眼衣原体阳性率分别为３．３％,６．７％,２０．４％和１５．６％;血清沙眼衣原本酶免疫法检测ＩｇＧ／微量免疫荧光试验方法ＩｇＧ抗体阳性率分别４６．７     

沙眼衣原体酶免疫法和细胞培养法的比较

目的　评价一种改进的沙眼衣原体酶免疫法 (ELISA)诊断沙眼衣原体感染的临床应用价值。方法　 2 0 0例性病门诊有泌尿生殖道症状的患者采用ELISA和细胞培养法检测泌尿生殖道标本中的沙眼衣原体 ,两种试验结果不符合者采用PCR检测。结果　 2 0 0例受检者中 ,ELISA阳性 19例 ,细胞培养阳性 2 0例。与“扩大金标准”比较 ,ELISA法和细胞培养的敏感性分别为 82 .68%和 68.96% ,特异性均为 10 0 % ,阳性预期值均为 10 0 %。结论　ELISA法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染 ,其敏感性和特异性高 ,且方便、快速 ,尤其适合大批量样本的检测 ,值得在临床应用。     

衣原体快速免疫法检测淋病患者中泌尿生殖道沙眼衣原体的研究

我们采用“立明”衣原体快速免疫法(Clearviewchlamydia,简称C-C快速法)对110例我院门诊的淋病患者进行了衣原体的检测,现将结果报告如下。资料和方法1.病例选择　110例中,男59例,女51例,年龄18～59岁,平均26.4岁。全部男性患者及18例女性患者有不洁性交史,33例是由其丈夫传染。男性有尿道炎症状及尿道口脓性分泌物,女性有白带增多或尿道刺激症状。本组病例在诊断前均未做过任何治疗。2.标本采集　同时取两份标本,1份做淋球菌镜检加培养,1份做衣原体检测。取材方法见文献[1]。无论男女病人均要取到柱状上皮细胞,这样才能提高检测的阳性率…     

连结酶链反应检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的研究进展

连结酶链反应检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的研究进展谭德友综述佟菊贞审校近十年来ＰＣＲ技术在临床的应用大大地提高病原菌的检出率，但其非特异性扩增带来的假阳性阻碍了它在临床上更广泛的应用。连结酶链反应（Ｌｉｇａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＬＣＲ）是近...     

巢式PCR技术检测泌尿生殖道标本中沙眼衣原体的研究

采用巢式ＰＣＲ检测５１３例泌尿生殖道感染病人标本中的沙眼衣原体（ＣＴ）。结果显示：经主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因引物第一次扩增阳性率为９．９４％（５１例），第二次扩增后阳性率为２１．８０％（１１２例）。表明应用巢式ＰＣＲ检测沙眼衣原体ＭＯＭＰ基因具有敏感、特异等优点     

应用VIDAS—酶联免疫荧光法（CHL）检测泌尿生殖道沙眼衣原体

目的:用VIDAS-酶联免疫荧光法(CHL)法检测男性尿道及女性宫颈管标本的沙眼衣原体。方法:用细胞培养、VIDAS—CHL法、“立明”衣原体快速免疫法(C—C法)平行检测539例有症状和277例无症状患者的拭子标本。结果:与扩大金标准比较,VIDAS—CHL法检测有症状患者拭子标本的敏感性为90.70％,特异性为96.65％;C—C法的敏感性为74.17％,特异性为98.45％;两者差异有显著性(x2=7.07,P<0.05);VIDAS—CHL法检测无症状患者拭子标本的敏感性为92.00％,特异性为98-81％;C—C法的敏感性为76.00％,特异性为98.41％;两者差异无显著性(x2=0.581,P>0.05);结论:VIDAS—CHL法具有高度敏感性和特异性,可用来检测男性尿道和女性宫颈管中沙眼衣原体。     

沙眼衣原体培养、LCR与荧光PCR在检测泌尿生殖道沙眼衣原体的意义

为了比较细胞培养、连接酶链反应（LCR）和荧光PCR技术在检测性传播疾病门诊患者标本沙眼衣原体的意义。分别在国内5家临床医院性传播疾病门诊收集到673份尿道／宫颈拭子标本，进行沙眼衣原体培养和荧光PCR检测，检测结果不相符合的标本采用LCR复检，比较分析PCR与培养、LCR以及综合结果的相符性。结果合格病例616例，培养和荧光PCDR的检测阳性率分别为6．33％和27．1％，与培养相比，荧光PCR法的敏感性为100％。LCR复核标本200份，与之相比，荧光PCR的敏感性为98．6％，特异性89．5％，YI指数为0．881。综合分析证明荧光PCR检测沙眼衣原体的敏感性为98．78％，特异性为98．67％，YI指数0．9745。结果临床表现发现，男性患者出现尿道炎症体征意义大于症状，而在女性患者症状或体征均不特异。结果表明国产荧光PCR技术检测尿道／宫颈拭子沙眼衣原体具有较高的敏感性与特异性，可以用于临床试验， 控与监督是本方法得以正确应用的关键。     

沙眼衣原体微量细胞培养和鉴定

目的细胞培养沙眼衣原体,并应用四种方法对培养结果进行鉴定。方法将McCoy细胞在细胞培养板中培养至致密单层后,接种沙眼衣原体标准株和临床株,培养44～48h后,用卢戈氏碘液染色、Giemsa染色、单克隆荧光抗体和内源性质粒扩增四种方法鉴定培养结果。结果四种鉴定方法结果均呈阳性,证实沙眼衣原体培养成功。结论沙眼衣原体培养的成功将为该病原体的致病机理、免疫机制、药物敏感性检测和保护性疫苗等方面的研究奠定基础。     

男性无症状性病高危人群尿沉渣检测沙眼衣原体

目的　研究能否用尿沉渣代替尿道拭子检测沙眼衣原体 (Ct)。方法　分别用Wellcozymechlamydia法和PCR法对 35 2例男性无症状的性病高危人群首段尿沉渣进行Ct检测 ,两法经尿沉渣、尿道拭子配对研究。结果　以尿道拭子Ct培养为金标准 ,两种方法的敏感性和特异性分别为 5 0 98% (P <0 0 5 )和 10 0 % (P >0 0 5 ) ,98 0 4% (P >0 0 5 )和 96 6 8% (P >0 0 5 )。结论　对Ct的检测 ,用Wellcozymechlamydia法时 ,不宜用尿沉渣代替尿道拭子作标本 ;而用PCR法时 ,可用尿沉渣代替尿道拭子作标本。     

三种方法检测沙眼衣原体感染宫颈标本的比较研究

采用ＤＩＧ标记的沙眼衣原体ＤＮＡ探针斑点杂交、细胞培养和免疫荧光三种方法对５４０例高危人群宫颈标本沙眼衣原体感染进行了检测，其阳性率分别为３０．０％、２９．６２％和３０．３７％。并发现ＤＩＧ标记的ＤＮＡ探针检测标本与细胞培养法具有相似的敏感性和特异性，高于免疫荧光法。因而可作为一种简单、快速、准确的沙眼衣原体检测方法。     

男性泌尿生殖道沙眼衣原体感染的两种免疫检测方法的比较

目的 比较VIDS衣原体试验（VIDAS CHL）和“立明”衣原体快速法（C－C法）的敏感性和特异性。方法 同时用细胞培养（Tc)、聚合酶链反应技术（PCR）、VIDAS CHL、C－C法对230例男性患者进行了衣原体检测。结果 以Tc为金标准,VIDAS CHL、C－C法的敏感性和特异性分别是97．9％、95．6％,85．4％、99．5％,两者间差异无显著性;而以扩大金标准来比较,它们的敏感性特异分别是96．2％、98．3％,79．2％、100％,在敏感性方面两者之间差异有显著性。结论 VIDAS CHL是一种检测沙眼衣原体的自动酶联免疫荧光方法,由于其阳性和可疑结果可以经阻抑试验证实,故保证了结果的准确性,而且其敏感性更高,显示了比C－C法更优的应用前景。     

104例泌尿生殖道沙眼衣原体感染的临床分析

目的：分析近四年西京医院皮肤性病门诊患者中生殖道沙眼衣原体检测阳性的感染特点及混合感染状况。方法：回顾性分析2007年11月～2011年6月确诊的104例生殖道沙眼衣原体感染者临床资料。结果：104例生殖道沙眼衣原体感染者中,男性感染者71例（68.27%）,女性感染者33例（31.73%）。单一衣原体感染39例（37.50%）,其中男性35例（89.74%）,占所有男性患者的49.30%（35/71）,女性4例（10.26%）,占所有女性患者的12.12%（4/33）。其余65例均为混合感染（62.50%）,其中男性36例（55.38%）,占所有男性患者的50.70%（36/71）,女性29例（44.62%）,占所有女性患者的87.88%（27/33）。女性的混合感染率高于男性,男、女性的混合感染率均高于单一衣原体感染率。结论：单一发生泌尿生殖道沙眼衣原体感染率不高,大多以混合感染形式存在,临床应对STI患者及其性伴做全面检查。     

四种检测泌尿生殖道沙眼衣原体方法的比较与评价

目的对胶体金免疫层析、酶免疫(EIA)、直接荧光抗体测定(DFA)和细胞培养四种检测泌尿生殖道沙眼衣原体的方法进行比较与评价。方法分别应用胶体金,EIA,DFA和细胞培养四种方法检测不同稀释倍数的沙眼衣原体E型标准株。35例临床疑为泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者的宫颈或尿道拭子分别应用胶体金,EIA,DFA进行检测。结果能测出沙眼衣原体E型标准株为阳性的最大稀释倍数在胶体金,EIA,DFA和细胞培养法中分别为:104,106,108和104倍;35例临床标本的阳性率在胶体金,EIA和DFA法中分别为:11.43%,25.71%和40.00%,胶体金和DFA法之间差异有统计学意义(P<0.05),敏感性最高的为DFA法。结论 DFA法检测泌尿生殖道沙眼衣原体的敏感性较胶体金、EIA和细胞培养方法高,临床上可提倡应用。     

竞争性聚合酶链反应定量检测沙眼衣原体

为了便于研究沙眼衣原体(CT)感染的致病机理,我们建立了一种竞争性聚合酶链反应(PCR)定量检测CT的方法。合成、克隆并定量了一与CT主要外膜蛋白基因(ompl)靶序列具有相同引物位点的内参标(IS),通过共同扩增已知数量克隆的CTompl野生型模板和IS,构建竞争性PCR标准曲线。恒定拷贝数(1000个分子)的IS与每一待测模板共同扩增,用靶序列与IS的PCR产物的密度比值定量标本中的CT.对11份培养阳性的泌尿生殖道标本进行了CT的定量检测。结果发现,一个培养包涵体形成单位大约相当于75个DNA分子。研究表明:竞争性PCR提供了一种可靠且敏感、可定量临床标本中CT的方法。