CFA—I重组克隆定居因子菌毛抗原的纯化及形态学观察

用基因重组技术获得的高效表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原Ⅰ（ＣＦＡ／Ⅰ）的重组克隆，通过匀浆破碎、硫酸铵分级盐析部分纯化，再经超速离心及ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０柱层析，得到了ＣＦＡ／Ⅰ的纯化样品，得率约为０．９ｍｇ／ｇ湿菌。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示一条蛋白质带，其分子量为１５ｋＤａ，与天然ＣＦＡ／Ⅰ相同。免疫扩散和蛋白质印迹试验证明，纯化的重组克隆ＣＦＡ／Ⅰ与天然ＣＦＡ／     

AN ANALYSIS OF 281 HOSPITALIZED CASES INJURED IN BICYCLE TRAFFIC ACCIDENTS

ＡＮＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦ２８１ＨＯＳＰＩＴＡＬＩＺＥＤＣＡＳＥＳＩＮＪＵＲＥＤＩＮＢＩＣＹＣＬＥＴＲＡＦＦＩＣＡＣＣＩＤＥＮＴＳＺＥＮＧＳｉ－ｑｉｎｇ（曾四清），ＸＩＡＬｉ－ｈｕａ（夏丽华），ＬＩＵＸｉａｏ－ｘｉａｎ（刘筱娴），ＳＨＩＪｕｎ－ｘｉｎ（...     

AN EVALUATION OF PREOPERATIVE CT SCANNING FOR SELECT-ING ADAPTIVE NAILS IN 78 CASES OF SHAFT FRACTURE

ＡＮＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＰＲＥＯＰＥＲＡＴＩＶＥＣＴＳＣＡＮＮＩＮＧＦＯＲＳＥＬＥＣＴ┐ＩＮＧＡＤＡＰＴＩＶＥＮＡＩＬＳＩＮ７８ＣＡＳＥＳＯＦＳＨＡＦＴＦＲＡＣＴＵＲＥＣＡＩＲｕ－ｂｉｎ（蔡汝宾），ＬＩＬｉ－ｑｕｎ（李力群），ＤＥＮＧＬｅｉ（邓磊...     

A Comparison in Healing of Skull Defect Repaired with Four Different Kinds of Graft Materials in Rabbits

ＡＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＩＮＨＥＡＬＩＮＧＯＦＳＫＵＬＬＤＥＦＥＣＴＲＥＰＡＩＲＥＤＷＩＴＨＦＯＵＲＤＩＦＦＥＲＥＮＴＫＩＮＤＳＯＦＧＲＡＦＴＭＡＴＥＲＩＡＬＳＩＮＲＡＢ┐ＢＩＴＳＤＩＮＧＺｈｅｎ－ｑｉ（丁真奇）１，ＴＡＮＦｕ－ｓｈｅｎｇ（谭富生）２，...     

重组人G-CSF构象异构体的分离与鉴定

目的：探索原核基因工程产品质量控制的指标。方法：以重组粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）为模型,将其中构象不均一组分进行分离,并对每个成分进行鉴定。结果：重组人Ｇ－ＣＳＦ在大肠杆菌中以包涵体形式表达,经纯化和复性后,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定为单一蛋白带,但在非变性ＰＡＧＥ中出现３条带,继而采用制备型非变性ＰＡＧＥ成功地将３种成分分离。３种成分在同样的缓冲体系中分别存放３个月,仍未见互变异构现象。经激光解析飞行时间质谱检测,３种成分相对分子质量相同,测序表明,Ｎ端连续的５个氨基酸残基排列安全相同。结论：３种成分为重组蛋白的不均一折叠形成的构象异构体。     

丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达

利用分子生物学技术,构建表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的人源单链可变区抗体（ＳｃＦｖ）的原核表达载体,并在大肠杆菌ＪＭ１０９中表达可溶性的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ。以重组的ＨＣＶ核心蛋白为包被抗原,利用噬菌体抗体库的表面展示技术,筛选到含有ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒,经ＮｃｏⅠ／Ｎｏｔ Ⅰ酶切鉴定,该ＳｃＦｖ基因由７５０ｂｐ组成。将其亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ表达载体中,转化大肠杆菌ＪＭ１０９,提取质粒进行ＤＮＡ序列测定,符合ＳｃＦｖ的重链可变区和轻链可变区基因结构特点。ＩＰＴＧ诱导转化的大肠杆菌ＪＭ１０９,在其培养上清中获得了可溶性ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ的表达。酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证实表达的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡ     

CHANGES AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF PLASMA ENDOTHE-LIN IN TRAUMA PATIENTS WITH HEMORRHAGIC SHOCK

ＣＨＡＮＧＥＳＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＰＬＡＳＭＡＥＮＤＯＴＨＥ┐ＬＩＮＩＮＴＲＡＵＭＡＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＨＥＭＯＲＲＨＡＧＩＣＳＨＯＣＫＤＵＤｉｎｇ－ｙｕａｎ（都定元）１，ＧＡＯＪｉｎ－ｍｏｕ（高劲谋）１，ＷＡＮＧＸ...     

EXPERIMENTAL STUDY AND CLINICAL OBSERVATION ON CHANGES OF β-ENDORPHIN AFTER HEAD INJURY

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＮＣＨＡＮＧＥＳＯＦβ┐ＥＮＤＯＲＰＨＩＮＡＦＴＥＲＨＥＡＤＩＮＪＵＲＹＺＨＡＮＧＧｕａｎｇ－ｊｉ（张光霁），ＺＨＵＣｈｅｎｇ（朱诚），ＪＩＡＮＧＪｉ－ｙａｏ（江基尧），...     

EFFECTS OF NIMODIPINE ON CALCIUM CURRENTS IN CORTICAL NEURONS AFTER IMPACTING BRAIN INJURY

ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＮＩＭＯＤＩＰＩＮＥＯＮＣＡＬＣＩＵＭＣＵＲＲＥＮＴＳＩＮＣＯＲＴＩＣＡＬＮＥＵＲＯＮＳＡＦＴＥＲＩＭＰＡＣＴＩＮＧＢＲＡＩＮＩＮＪＵＲＹＮＩＮＧＫｅ（宁可），ＷＡＮＧＺｈｅｎｇ－ｇｕｏ（王正国），ＣＨＥＮＣｈａｎｇ－ｃａｉ（陈长才...     

FAS抗原胞外区片段GST融合蛋白的产生

目的：获得重组ＦＡＳ抗原，用于抗体制备及进一步的功能分析。方法：用ＰＣＲ技术从完整的ＦＡＳｃＤＮＡ克隆上扩增其编码胞外区的部分，将ＰＣＲ产物直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体系统，ＤＮＡ序列分析证实序列完全正确；用ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ将ＦＡＳ胞外区片段切出，定向克隆到经同样酶切处理的ｐＧＥＸ－ＫＧ表达载体，转化大肠杆菌，经优化ＩＰＴＧ的诱导条件，获得了ＦＡＳ胞外区与谷胱甘肽－Ｓ－转移酶的融合蛋白高效表达；用亲合层析法从细菌粗提物中纯化了ＧＳＴ－ＦＡＳ融合蛋白，免疫家兔制备了抗ＦＡＳ抗体。结果：用重组ＦＡＳ为免疫原制备的抗体能诱导Ｕ９３７细胞产生细胞凋亡。结论：重组ＦＡＳ抗原和制备的抗体能用于对ＦＡＳ系统的功能研究     

烟雾吸入伤后肺表面活性物质蛋白A含量的动态变化及意义

目的探讨烟雾吸入伤后肺表面活性物质蛋白Ａ（ＳＰ－Ａ）含量的变化、可能机理及其与肺表面活性物质（ＰＳ）活性抑制和肺功能损害的关系。方法采用大鼠烟雾吸入伤模型，分别检测正常对照及致伤２ｈ、６ｈ、１２ｈ和２４ｈ动物的动脉血气，肺水量，静态肺顺应性（Ｃｓｔ），支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）表面张力特性，ＢＡＬＦ中ＳＰ－Ａ、丙二醛（ＭＤＡ）、总蛋白（ＴＰ）含量及弹性蛋白酶（Ｅｌａ）活性。结果动物伤后出现急性呼吸衰竭和肺水肿，Ｃｓｔ显著降低；ＢＡＬＦ的最小表面张力（ＳＴｍｉｎ）升高，滞后环面积下降；ＢＡＬＦ中ＳＰ－Ａ、ＭＤＡ、ＴＰ含量及Ｅｌａ活性明显升高，但ＳＰＡ－Ａ的相对含量（％ＴＰ）降低，且与Ｅｌａ、Ｃｓｔ和ＳＴｍｉｎ的变化相关显著。结论烟雾吸入伤早期ＳＰ－Ａ相对含量减少，可能是导致肺表面活性物质活性抑制及肺功能障碍的主要原因之一。氧化及Ｅｌａ可能是引起ＳＰ－Ａ含量和（或）功能异常的重要因素。     

EXPERIMENTAL STUDY ON EARLY REPAIR OF MANDIBULAR DEFECT FOLLOWING HIGH VELOCITY MISSILE WOUND

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＮＥＡＲＬＹＲＥＰＡＩＲＯＦＭＡＮＤＩＢＵＬＡＲＤＥＦＥＣＴＦＯＬＬＯＷＩＮＧＨＩＧＨＶＥＬＯＣＩＴＹＭＩＳＳＩＬＥＷＯＵＮＤＬＩＵＹａｎ－ｐｕ（刘彦普），ＬＥＩＤｅ－ｌｉｎ（雷德林），ＺＨＡＮＧＨａｉ－ｘｉａ（张...     

CLINICAL AND EXPERIMENTAL STUDIES ON RENAL INJURIES AFTER EXTRACORPOREAL SHOCK WAVE LITHOTRIPSY

ＣＬＩＮＩＣＡＬＡＮＤＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＩＥＳＯＮＲＥＮＡＬＩＮＪＵＲＩＥＳＡＦＴＥＲＥＸＴＲＡＣＯＲＰＯＲＥＡＬＳＨＯＣＫＷＡＶＥＬＩＴＨＯＴＲＩＰＳＹＦＡＮＧＹｕ－ｈｕａ（方玉华），ＪＩＡＮＧＪｕｎ（江军），ＤＵＷｅｉ－ｇｕｏ（都卫...     

抗人重组Cu－Zn超氧化物歧化酶单克隆抗体的制备及其在纯化抗原中的应用

本研究利用重组质粒ｐＣＺＳ转化大肠杆菌，制备出入重组Ｃｕ－Ｚｎ超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ），进一步建立了３株鼠抗ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。经鉴定，它们分泌的ＭｃＡｂ分别属于ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ亚类，能特异性地识别人ＣｕＺｎＳＯＤ，与ｐＣｚＳ空载菌蛋白无交叉反应。将此ＭｃＡｂ制备了免疫亲和层析柱，从大肠杆菌的粗提液中纯化出ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ，ＳＤＳ－ｐＡＧＥ显示单一条带，纯度＞９８％，回收率５０％，酶化活达１０９７１．３Ｕ／ｍｇ蛋白。ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ－ＭｃＡｂ的制备为ＣｕＺｎＪｉＤ产品的纯化和抗辐射等应用研究提供了有效的工具。     

基因重组干扰素γ对骨髓增生异常综合征

用基因重组干扰素（ＩＦＮ－γ）对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人造血祖细胞的作用进行了体外观察，结果：①ＩＦＮ－γ体外对非血液病对照组病人的红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）无明显促增殖作用，而对ＭＤＳ病人的ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ有明显促增殖作用。其作用呈剂量依赖型，在ＩＵ／ｍｌ时作用最小，１００Ｕ／ｍｌ时作用最强；②ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ原ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ增殖正常组加入ＩＦＮ－γ后集落数增加最明显，而对增殖明显减低组集落数无明显增加；③ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ不同亚型病人ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ作用不同，其中对转化中原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ－Ｔ）型病人有效率较高。     

制备电泳中蛋白质区带定位与染色方法的比较

制备电泳中蛋白质区带定位与染色方法的比较张津辉蒋中华陈惠鹏军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和非解离聚丙烯酰胺凝胶电泳（非解离ＰＡＧＥ）在实验室中常用于制备少量天然或重组蛋白质以供研究其理化性质和...     

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符；其蛋白含量分别为０．３５ｍｇ／ｍｌ，０．４ｍｇ／ｍｌ和０．３ｍｇ／ｍｌ；Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ均为单一反应区带；ＥＬＩＳＡ反应滴度分别为１∶６４０、１∶１２８０和１∶３２０。结果说明，由制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗析方法制备的日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白多价分子疫苗，具有纯度高、制备快、回收率高等优点，且不影响所纯化的抗原活性     

癫痫发作期和发作间期~（99m）Tc－ECD脑断层显像

癫痫发作期和发作间期~（９９ｍ）Ｔｃ－ＥＣＤ脑断层显像［英］／ＧｒｕｎｗａｌｄＦ…∥ＪＮｕｃＩＭｅｄ．－１９９４，３５（１２）．－１８９６～１９０１方法：１６例患者行２３次脑ＳＰＥＣＴ（ＣＥＲＡＳＰＥＣＴ）显像研究，其中８次为发作期显像，１５次为发作?..     

AN EPIDEMIOLOGICAL ANALYSIS ON PATTERNS OF TRAFFIC IN-JURIES AND TYPES OF COLLISION

ＡＮＥＰＩＤＥＭＩＯＬＯＧＩＣＡＬＡＮＡＬＹＳＩＳＯＮＰＡＴＴＥＲＮＳＯＦＴＲＡＦＦＩＣＩＮ┐ＪＵＲＩＥＳＡＮＤＴＹＰＥＳＯＦＣＯＬＬＩＳＩＯＮＬＩＮＨａｎ－ｓｈｅｎｇ（林汉生），ＷＡＮＧＳｈｅｎｇ－ｙｏｎｇ（王声涌）ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｒｅｖ...     

PERIPHERAL NERVE REPAIR IN RATS USING VASCULARIZED FROZEN IN-SITU MUSCLE AUTOGRAFT

ＰＥＲＩＰＨＥＲＡＬＮＥＲＶＥＲＥＰＡＩＲＩＮＲＡＴＳＵＳＩＮＧＶＡＳＣＵＬＡＲＩＺＥＤＦＲＯＺＥＮＩＮ┐ＳＩＴＵＭＵＳＣＬＥＡＵＴＯＧＲＡＦＴＷＡＮＧＹａｎ（王岩）１，ＺＨＵＳｈｅｎｇ－ｘｉｕ（朱盛修）１，ＨＵＮＧＬＫ２，ＬＥＵＮＧＰＣ２１．Ｄｅｐ...