股浅动脉支架植入术后血清内皮素-1、内脂素水平变化与支架内再狭窄的关系

目的 探讨股浅动脉支架植入术(SFAS)后下肢股浅动脉粥样硬化闭塞症患者血清内皮素-1(ET-1)、内脂素水平变化与支架内再狭窄(ISR)的关系.方法 选取2017年3月至2020年7月合肥市第二人民医院招募的297例接受SFAS治疗的下肢股浅动脉粥样硬化闭塞症患者.术后随访9个月,根据随访期间是否发生ISR将患者分为...     

股浅动脉支架成形术后再狭窄腔内治疗进展

<正>近年来,随着血管腔内治疗技术的发展,以经皮血管腔内成形术(percutaneous transluminal angioplasty,PTA)和经皮血管腔内支架成形术(percutaneous transluminal stenting angioplasty,PTSA)为代表的血管腔内技术日益成熟,在股浅动脉(superficial femoral artery,SFA)硬化闭塞症的治     

人股动脉粥样硬化相关蛋白的鉴定及其生物学作用

目的 应用比较蛋白质组学方法探讨人动脉粥样硬化闭塞症(ASO)差异蛋白质的表达及其在ASO发病机制中的作用.方法 选取ASO股动脉8例及正常股动脉5例,提取组织蛋白质,行双向凝胶电泳分离、质谱分析及数据库查询,获得差异蛋白信息.结果　成功建立ASO和正常股动脉双向电泳图谱,含量相差大于2倍以上的蛋白质53个,27个上调,26个下调,质谱鉴定出13种蛋白质,主要与炎症、免疫、氧化应激、脂质代谢等相关.结论 ASO与正常股动脉蛋白质组明显差异,差异蛋白质可能在ASO中起重要作用.

Abstract：

Objective We used proteomic profiling in an attempt to differentiate and identify histological proteins that were associated with atherosclerosis obliterans (ASO) of human femoral artery.Methods We comparatively analyzed the proteome of 8 atherosclerotic and 5 normal femoral arteries. The differentially expressed proteins were visualized by two dimensional electrophoresis (2-DE) and sequenced by matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The protein identification program was used to search the National Center for Biotechnology Information (NCBI) database and International Protein Index (IPI). Results A total of 53 distinct spots corresponding to 13 different proteins were identified by MALDI-TOF-MS using the NCBI and IPI databases. The function information of these 13 proteins mainly involved the pathogenetic mechanisms such as inflammation, innate immunity, oxidative stress, lipid metabolism, amyloid degeneration and so on. Conclusion ASO is associated with distinct patterns of protein expression in the femoral arteries, and differentially expressed 13 proteins may contribute to the pathogenesis. These findings might provide needed biomarkers for ASO and new insight into its pathophysiology.     

腹腔镜术后肺损伤及miRNA的表达

【摘要】〓腹腔镜手术是近年来发展迅速的微创外科术式,具有创伤小、恢复快等特点,然而手术过程中建立CO²气腹所造成的腹腔内高压及酸碱平衡失调等因素均会引起肺组织损伤,导致术后肺功能不全,重者甚至可发展成为呼吸功能衰竭。微小RNA(miRNA)作为一类小分子的非编码调控RNA,在多个层面的生命过程中起调节作用,研究表明miRNA与各种肺部疾病的发生、发展及转归有密切的联系。随着腹腔镜技术的成熟和普及,腹腔镜术后肺损伤问题日益突显,更好地探索并理解其发生机制以及miRNA在其中发挥的作用,能为我们日后的诊断和治疗提供更好的依据。本文将就近年来国内外有关腹腔镜术后肺损伤机制以及miRNA在其中可能发挥的作用作简要阐述。     

外周血25-羟基维生素D水平对下肢动脉硬化闭塞症支架植入术后血管再狭窄的预测价值

目的探讨外周血25-羟基维生素D[25-(OH)D]水平对下肢动脉硬化闭塞症(LASO)患者支架植入术后发生血管再狭窄的预测价值。方法收集2018年1月至2019年9月于安徽医科大学附属合肥医院行支架植入术的84例LASO患者的临床资料,对患者均进行了为期2年的随访,根据支架植入术后是否发生血管再狭窄将患者分为再狭窄组(n=38)和无再狭窄组(n=46)。比较两组患者的临床特征及外周血25-(OH)D水平;分析再狭窄LASO患者临床特征与外周血25-(OH)D水平的相关性,以及外周血25-(OH)D水平对LASO患者术后发生血管再狭窄的预测价值。结果84例LASO患者中,支架植入术后血管再狭窄的发生率为45.24%(38/84),平均发生时间为术后(18.15±4.84)个月。再狭窄组有吸烟史、有糖尿病史、发生下肢双侧病变、发生下肢完全闭塞的患者比例均高于无再狭窄组,下肢血管病变长度长于无再狭窄组,而外周血25-(OH)D水平低于无再狭窄组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,再狭窄组患者的外周血25-(OH)D水平与糖尿病史、下肢血管病变长度、下肢双侧病变情况、下肢完全闭塞情况均呈负相关(P<0.05),与吸烟史无相关性(P>0.05)。多因素分析结果显示,下肢血管病变长度、下肢完全闭塞是LASO患者术后发生血管再狭窄的独立危险因素,而25-(OH)D水平是LASO患者术后发生血管再狭窄的独立保护因素(P<0.05)。受试者操作特征(ROC)曲线分析结果显示,外周血25-(OH)D水平早期评估LASO患者术后发生血管再狭窄的曲线下面积为0.823(95%CI:0.744~0.972),最佳临界值为9.00 ng/ml,约登指数为0.619,灵敏度为86.05%,特异度为78.96%。结论LASO患者支架植入术后血管再狭窄的发生与外周血25-(OH)D水平密切相关,外周血25-(OH)D可作为预测LASO患者支架植入术后发生血管再狭窄的可靠血清标志物。     

miRNA在绝经后骨质疏松症肾阴虚证中的表达谱特征及生物信息学分析

目的探讨绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阴虚证miRNA的表达谱特征,及对差异表达的miRNA进行生物信息学分析。方法随机选择绝经后骨质疏松症受试者,中医辨证,分为3组:PMOP肾阴虚组3例,PMOP肾阳虚组3例,健康绝经后妇女3例作为对照组。采用人miRNA芯片检测外周血单个核细胞miRNA的表达水平。肾阴虚证组分别与其他两组比较,筛选共同的差异表达基因,实时荧光定量PCR验证芯片结果,并对差异表达的miRNA进行pathway分析及靶基因预测。结果肾阴虚证组与对照组、肾阳虚证组两组比较,筛选出20条共同差异表达miRNA;实时定量PCR验证hsa-miR-411-5p、hsa-miR-143-3p、hsa-miR-95-3p表达的结果与芯片结果相符;pathway分析结果显示,这些差异miRNA主要参与代谢通路、癌症通路、Rap1信号通路、粘着斑信号通路、PI3K-Akt、MAPK信号通路、钙离子信号通路、内质网蛋白加工、c GMP-PKG信号通路、Ras信号通路、Wnt信号通路的调控;结合多个数据库对差异表达的miRNA进行靶基因预测,最终筛选出9个靶基因(RC3H1、SOX11、FUT4、GABRA4、NUFIP2、ONECUT2、PHF20、PURB、ZNF148)。结论建立了PMOP肾阴虚证的miRNA基因表达谱,且这20个差异表达的miRNA可能通过调控PI3K-Akt、MAPK、Wnt等与骨代谢相关信号通路参与PMOP肾阴虚证的发生发展过程。     

颈椎后纵韧带骨化症肥胖相关基因的筛选及鉴定

目的：探索颈椎后纵韧带骨化症（OPLL）肥胖相关基因及其功能特征。方法：从高通量基因表达（GEO）数据库中下载颈椎OPLL相关的转录组数据集GSE69787,与Gene数据库中肥胖相关基因进行筛选,获得颈椎OPLL肥胖相关差异表达基因（DEGs）。使用DAVID软件和R软件对肥胖相关DEGs进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析,应用Cytoscape软件将数据可视化,并通过cytoHubba工具包计算得到中心基因。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测中心基因在颈椎后纵韧带组织中的表达水平。结果：通过GSE69787数据集与肥胖相关基因筛选得到24个颈椎OPLL肥胖相关DEGs,构建并计算这24个肥胖相关DEGs的蛋白质相互作用网络,最终筛选出10个中心基因。GO/KEGG富集分析结果显示这10个肥胖相关DEGs主要富集于蛋白激酶B信号通路及其调控、骨化、炎症反应调控、骨矿化及PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等生物学过程和生物信号通路。最后通过qRT-PCR验证发现LEP、IGF2、IL18、BMP2和LOX在颈椎OPLL组韧带组织中高表达（P...     

胃癌组织中KLF6和PTTG1的表达与胃癌淋巴结转移及预后的关系

目的 ：探讨Kruppel样因子6(KLF6)、垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在胃癌组织中的表达,并分析两者与胃癌淋巴结转移及预后的关系。方法：选取2018年4月—2019年10月诊治的80例胃癌患者,收集患者术中切除的癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组织化学法对KLF6、PTTG1的表达进行检测;Spearman法分析胃癌组织中KLF6和PTTG1表达的相关性;Logistic回归分析影响淋巴结转移的因素;Kaplan-meier法分析胃癌组织中KLF6和PTTG1表达与患者预后的关系;Cox回归分析患者预后的影响因素。结果：与癌旁正常组织相比,胃癌组织中KLF6低表达率、PTTG1高表达率明显升高(P<0.05);胃癌组织中KLF6、PTTG1表达呈负相关(r=-0.502,P<0.05);胃癌淋巴结转移患者KLF6低表达、PTTG1高表达比例明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05);KLF6是淋巴结转移的保护因素(P<0.05),PTTG1是淋巴结转移的危险因素(P<0.05)。KLF6高表达组生存率显著高于低表达组(χ²=8....     

Y染色体无精子症因子区及男性不育相关基因研究进展

本文综述Y染色体无精子症因子(AZF)区及其与精子生成相关候选基因的研究进展。在人类Y染色体有一段与无精子症相关的缺失区域,即AZF区,它分为a、b和c区。AZFa缺失一般表现为唯支持细胞综合征(SCOS),区域内有USP9Y、DBY和UTY等与精子生成相关的候选基因;AZFb区的缺失一般为从SCOS到生殖细胞阻滞等表型,区域内有RBMY、SMCY、EIF1AY和CDY2等候选基因;AZFc区缺失的性状较分散,主要候选基因有DAZ、CDY1等。不育男性中AZF区总缺失率约为8.2%,不同报道结果不同,这可能与人种、研究方法和病例的纳入标准有关。在卵胞浆内单精子注射(ICSI)等辅助生育技术日益普及的今天,进行不育男性Y染色体微缺失筛查对防止这种基因缺陷的遗传具有重要意义。     

Toll样受体4及NF-κB与动脉粥样硬化关系的实验研究

目的 观察球囊损伤后动脉粥样硬化兔颈动脉干Toll样受体4(TLR4)、NF-κB及其表达变化.方法 本实验首先通过球囊损伤颈总动脉的方法在高脂饲养的兔子体内引起一个持续性的低水平的局部炎性介质反应,建立双因素干预的动物粥样硬化模型,以促进兔颈总动脉的血管病变,同时将全部动物分为对照组、高脂饲养组和模型(双因素)组,8...     

阿托伐他汀预处理对脊髓缺血再灌注损伤大鼠损伤脊髓microRNA表达的影响

目的:检测他汀类药物预处理对脊髓缺血再灌注损伤大鼠损伤脊髓组织中microRNA(miRNA,miR)表达谱的影响,探讨他汀神经保护作用的机制.方法:18只雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组和药物组,每组6只,其中手术组和药物组以阻断腹主动脉的方法建立大鼠急性脊髓缺血再灌注损伤模型,假手术组在开腹后于腹主动脉上绕线而不阻断动脉.药物组大鼠给予胃内灌注10mg/kg/d阿托伐他汀14d后再行建模手术,手术组在建模术前仅给予等容量生理盐水.对各组分别在术后6、12、24和48h应用BBB评分评价脊髓神经功能.在术后48h处死动物,取腰骶段脊髓组织.对组织切片后采用HE染色和2,3,5,-triphenyltetrazoliumchloride (TTC)染色明确神经组织病理变化及损伤情况,对缺血面积和脊髓横断面面积行定量检测并计算缺血百分比;应用miRNA芯片检测组织中miRNA表达谱;分别用假手术组和手术组RNA为模板,采用实时定量PCR对芯片结果进行验证.结果:手术组在术后各时间点的BBB评分较假手术组显著下降(P＜0.05),药物组在术后各时间点的BBB评分均较手术组明显增高(P＜0.05)但仍低于假手术组(P＜0.05).HE染色显示手术组和药物组均存在脊髓缺血性损伤,但药物组较手术组减轻.TTC染色显示假手术组、手术组和药物组的缺血百分比分别为(2.1±0.1)％、(77.3±5.1)％和(43±3.2)％,手术组缺血百分比较假手术组显著增大(P＜0.05),而药物组缺血百分比与手术组比较显著缩小(P＜0.05)但仍显著高于假手术组(P＜0.01).芯片检测miRNA表达谱显示,手术组与假手术组相比,其中48种miRNA表达明显改变,38种上调1.6～4.9倍,另有10种miRNA表达下调;与手术组相比,药物组有13种miRNA表达发生改变,并可逆转缺血再灌注损伤后的8种miRNA,包括miR-365、miR-323、miR-672*、miR-760-5p、miR-376b-5p、miR-369-5p、miR-210和miR-199a.miRNA表达的实时定量PCR结果和芯片结果比较无显著性差异(P＞0.05).结论:阿托伐他汀预处理可对大鼠脊髓缺血再灌注损伤发挥神经保护作用,其机制可能与其对miRNA的调控有关.     

益气温阳、活血化瘀方对兔血管成形术后再狭窄PDGF-B mRNA表达的影响

目的探讨中药复方对兔实验性经皮腔内血管成形术(PTA)血管成形术后血管壁血小板衍生生长因子B链(PDGF-B)mRNA表达的影响。方法新西兰兔54只随机分为假手术组、模型组、中药组,采用一次球囊导管损伤方法制备兔颈动脉球囊损伤模型,于术后1周、2周、4周取材,HE染色进行定量组织形态学分析和RT-PCR法半定量检测分析PDGF-B mRNA的表达。结果中药组、模型对照组与假手术组相比,管腔狭窄程度明显加重,内膜与中膜面积之和明显增大;与模型组相比,中药组在2周、4周时管腔面积明显增大、管腔的狭窄程度、内膜与中膜面积之和显著降低,在1周、2周时PDGF-B的mRNA表达水平明显增高。结论益气温阳、活血化瘀方可能通过下调血管壁PDGF-B的mRNA表达水平,从而抑制平滑肌细胞的增殖和血管成形术后再狭窄。     

冠状动脉内膜剥脱斑块脂质分析及影响术后再狭窄机制初探

目的:分析冠状动脉内膜剥脱斑块的脂质成分,并探讨其影响内膜剥脱术(coronary endarterectomy,CE)中、长期疗效的机制。方法:自2018年1月至2019年12月,选取北京安贞医院冠状动脉外科术前合并高脂血症病史的弥漫性冠状动脉病变(diffuse coronary artery disease,DC...     

血管成形术后再狭窄中细胞增殖与凋亡的研究

目的　动态观察血管成形术后不同时间段增生内膜细胞凋亡、增殖的变化过程。方法　将新西兰大白兔 35只随机分成 7组 ,应用 2次损伤法建立兔髂动脉再狭窄模型 ,检测血管成形术后 5 6d内 7个不同时间段 ( 0、3、7、14、2 8、42、5 6d)增生内膜的细胞增殖、凋亡指数及内膜面积、内膜细胞数。结果　血管成形术后内膜细胞凋亡与增殖的变化并不是同步的 ,术后第 7天凋亡指数达到高峰 ,为 ( 2 2 .81± 4.19) % ,增殖指数在术后第 14～ 2 8天最高 ,但峰值较低 ,分别为( 16 .2 1± 1.78) %、( 15 .49± 1.6 1) %。结论　内膜细胞增殖与凋亡的失衡是决定再狭窄的重要因素。     

Fluorescence microscopic and histologic analysis of photosensitizer uptake in human atherosclerotic lesions

Photodynamic therapy (PDT) using haematoporphyrin derivatives (HPD) activated by laser light is a well-established treatment modality for superficial tumours. PDT might therefore have a role in the prevention of restenosis in diseased human blood vessels following intraluminal therapy. This experiment addresses the possibility of using Photofrin in such a role and specifically addresses the preferential uptake of PHotofrin into atherosclerotic lesions. Normal (n=15) and atherosclerotic (n=52) human vessel segments were incubated with a medium containing 2.5 or 5 μg ml⁻¹ Photofrin. Quantitative fluorescence detection was used to measure the Photofrin content in the normal or diseased wall at intervals of 15, 30, and 60 min and 24 h of incubation. Fluorescence was concentration dependent and the maximum uptake was reached after 1 h incubation. Photofrin was preferentially taken up by diseased tissue and the quantified uptake in the ratio primary atherosclerosis: restenotic vessel: normal vessel was 4∶5∶1. Highly cellular plaque segments showed markedly increased fluorescence as compared to an acellular atherosclerotic matrix. Photofrin was quickly and selectively taken up by atherosclerotic lesions and this may form the basis for a selective photodynamic therapy for primary and restenotic atheroma.     

Assessment of the profiling MicroRNA expression of differentiated and dedifferentiated human adult articular chondrocytes

MicroRNA has an important role in regulating gene expression during cell differentiation. In this study we identified the expression pattern of microRNA in the differentiated and dedifferentiated chondrocytes. Adult human articular chondrocytes were cultured in monolayer. RNA was isolated from the differentiated chondrocytes (collected after isolation) and the fifth‐passage (dedifferentiated) chondrocytes, and subjected to gene expression analysis using microRNA and cDNA microarray analysis. Real‐time RT‐PCR was also performed to confirm the differentially expressed genes. Furthermore, we integrated microRNA and cDNA microarray data together with computational approaches, such as microRNA gene target prediction algorithms, to reveal the role of microRNAs involved in chondrocyte homeostasis. The results showed a dramatic change in expression of microRNA between the two cell types. Thirteen up‐regulated and 12 down‐regulated microRNAs were detected in differentiated chondroctes. We also revealed microRNA–gene target pairs potentially involved in dedifferentiation process. Our results revealed novel findings of differential expression of microRNA in dedifferentiation, and microRNA could have an important role in the maintenance of chondrocytes homeostasis. MicroRNA may be a target for cartilage tissue engineering and regenerative medicine. © 2011 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 29: 1578–1584, 2011