FK506在眼科的研究进展

ＦＫ５０６是一种新型强效的免疫抑制剂，它的免疫抑制机制与环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）相似，但免疫抑制功能却优于ＣｓＡ，副作用亦比ＣｓＡ少，临床研究表明，它有明显延长肝、肾、肺等移植存活时间，对自身免疫性疾病如葡萄膜炎有控制其表进展，本文对ＦＫ５０６的免疫药理作用，动物实验以及在眼科的基础怀临床应用进行了综述。     

FK506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的免疫病理学研究

目的 研究角膜移植免疫排斥反应的免疫病理学变化及免疫细胞和某些相关免疫分子在角膜移植免疫排斥反应中的作用,阐明了ＦＫ５０６的免疫抑制机理。方法 应用免疫组织化学染色方法检测ＦＫ５０６,环胞霉素Ａ及对照组角膜植片中ＣＤ＾＋４,ＣＤ＾＋８,巨噬细胞,白细胞介素－２受体,Ⅱ类主要组织相容性抗原,细胞间粘附分子－１及淋巴细胞功能相关抗原－１的表达。结果 排斥的角膜组织大表达上述免疫细胞和分子,ＦＫ５０６可     

FK506在眼科的应用

ＦＫ５０６是继环孢霉素Ａ后出现的又一新型强效免疫抑制剂。它能有效地抑制Ｔ淋巴细胞产生可溶性介质ＩＬ－２、ＩＬ－３和ＩＦＮ－γ有抑制Ｋ细胞和巨噬细胞的形成，抑制Ｉａ抗原的表达，还可能抑制ＩＬ－２和ＩＬ－２受体在Ｔ细胞表面的表达，从而选择性地抑制Ｔ细胞介导的免疫反应。其免疫抑制疚为环孢霉素Ａ的１００倍。现已用于科疾病的治疗。本对ＦＫ５０６的免疫药理学作用、实验以及临床应用进行了综述。     

FK—506抑制全角膜移植术后免疫排斥反应的研究

目的 观察ＦＫ－５０６抑制全角膜移植术（包括带环形巩膜瓣的全角膜移植术）后免疫排斥反应的临床疗产。方法 对７６例（７６只眼）全角膜移植术患者按随机原则分试验组（ＦＫ－５０６组）及对照组（ＣｓＡ组）各３８例（３８只眼）,观察术后不同时期角膜免疫排斥反应的发生率,平均随访时间６个月。结果 全角膜移植术后,局部应用ＦＫ－５０６可有效抑制新生血管的发生;随访期内,治疗组（ＦＫ－５０６组）移植片排斥反应发生     

一种新型强效免疫抑制剂—FK506在眼科领域的应用展望

ＦＫ５０６是一种新型强效的免疫抑制剂，其免疫抑制功能优于环孢霉素，副作用也比环孢霉素少，本回顾了自从有人提纯生产ＦＫ５０６至今的８年中，对于ＦＫ５０６所致的体外试验、动物实验，以及眼科基础领域和临床等方面的研究工作，展示了ＦＫ５０６在眼科领域良好的应用前景。     

一种新型强效免疫抑制剂─FK506在眼科领域的应用展望

ＦＫ５０６是一种新型强效的免疫抑制剂。其免疫抑制功能优于环孢霉素，副作用也比环孢霉素少。本文回顾了自从有人提纯生产ＦＫ５０６至今的８年中，对于ＦＫ５０６所做的体外试验、动物实验，以及眼科基础领域和临床等方面的研究工作，展示了ＦＫ５０６在眼科领域良好的应用前景。     

FK-506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的建立近交系大鼠穿透性角膜移植动物模型,观察结膜下注射ＦＫ５０６对角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法将近交系Ｌｏｕ大鼠２８只作受体,１４只Ｆ３４４大鼠作供体,分为３组,术后结膜下分别按每公斤体重注射０．１ｍｇＦＫ５０６、３ｍｇＣｓＡ及生理盐水,共２周。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管３项指标作为临床评估标准。结果３组角膜植片的存活时间分别为（２２１±５１７）、（１８４±１４）及（１２１±２１３）天,三者间差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＦＫ５０６能显著延长大鼠角膜植片的存活时间,是一种有效的新型免疫抑制剂。     

FK-506抑制同种异体角膜缘移植术后免疫排斥反应的研究

目的：探讨ＦＫ－５０６抑制角膜缘干细胞移植术后免疫排斥反应的临床可行性与有效性。方法：应用前瞻性评估研究方法,将角膜缘移植术后病例６４只眼按随机原则分投药组及对照组各半,投药组应用０．５％ＦＫ－５０６滴眼液,对照组应用１％ＣｓＡ滴眼液。平均随访期半年,以术后角膜缘植片新生血管、水肿、混浊及溶解程度为临床主要评估指标。结果：随访期内在新生血管指数、上皮排斥发生率、移植排斥指数及假性胬肉指数四项指标投     

FK506的免疫抑制作用及其在葡萄膜炎治疗中的应用

ＦＫ５０６是一种强效的免疫抑制剂,通过抑制钙神经素的活性抑制白细胞介素２（ＩＬ－２）等细胞因子的基因表达,从而发挥免疫抑制作用。动物实验表明ＦＫ５０６能够预防实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎（ＥＡＵ）的发生或者降低其严重程度。临床治疗证明了ＦＫ５０６对葡萄膜炎,尤其是顽固性内源性葡萄膜炎有较好的治疗效果。副作用主要有肾毒性、胃肠道症状和神经毒性等。通过选择合适的适应证、使用适当的剂量和监测ＦＫ５０６的血药质量浓度,可以取得较好的治疗效果并避免一些副作用的发生。     

FK506对大鼠正位穿透性角膜移植排斥反应发生过程中外周血淋巴细胞免疫功能的影响

目的研究ＦＫ５０６对角膜移植排斥反应的防治作用机制。方法纯系大鼠正位穿透性角膜移植后球周注射ＦＫ５０６，以后每周注射二次，术后不同时间尾部取血，行双标激光流式细胞分析。结果术后不同时间对照组ＣＤ４、ＣＤ８及ＣＤ４／ＣＤ８比值的差别无明显的统计学意义，但ＣＤ８＋／ＣＤ２５＋及ＣＤ８＋／Ｉａ＋Ｔ细胞逐渐增加，直至角膜移植排斥反应出现。ＦＫ５０６治疗组动物ＣＤ４细胞逐渐降低，ＣＤ８细胞增加，ＣＤ４／ＣＤ８比值降低。ＣＤ８＋／ＣＤ２５＋Ｔ细胞在各时间点无统计学差异，ＣＤ８＋／Ｉａ＋Ｔ细胞在术后第６天升高具有明显统计学差异，但升高值低于对照组。结论ＦＫ５０６球周注射后通过局部作用及吸收作用抑制淋巴细胞活化，延长角膜移植片存活时间。     

FK506对大鼠穿透性角膜移植排斥反应的免疫抑制作用

采用纯系大鼠正位穿透性角膜移植排斥反应动物模型，观察ＦＫ５０６结膜下注射成角膜移植排斥反应的防治效果，结果表明，ＦＫ５０６能显著延长大鼠角膜移植片的存活时间，缓解植片混浊，但不能阻止新生血管的发展，组织学观察提示，治疗组植片内浸润的细胞明显减少，ＦＫ５０６注射部位有药物结晶折出并被巨噬细胞所吞噬。     

转移因子对单疱病毒性角膜炎患者红细胞免疫功能的影响

目的研究单疱病毒性角膜炎（ＨＳＫ）患者红细胞免疫功能状态，观察转移因子（ＴＦ）对ＨＳＫ患者红细胞免疫功能的影响。方法４２例ＨＳＫ患者随机分为对照组（２０例）和ＴＦ治疗组（２２例），３～４周后检测红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＣＲ）和红细胞免疫复合物花环率（ＲＩＣＲ）。结果ＨＳＫ患者红细胞免疫功能低下，ＴＦ治疗前后ＲｃＲ差异有显著性（Ｐ＜０．０１），与对照组比较亦有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＴＦ能显著提高ＨＳＫ患者的红细胞免疫功能。     

组织激肽释放酶在糖尿病视网膜病变患者血清中的变化及其调节血管新生机制

目的　检测组织激肽释放酶（ｔｉｓｓｕｅｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ,ＴＫＬＫ）、血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）和可溶性细胞间黏附分子-１（ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｎｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌ-１,ｓＩＣＡＭ-１）在糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）患者血清中的变化,观察ＴＫＬＫ在低氧条件下对人视网膜微血管内皮细胞（ｈｕｍａｎｒｅｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＲＭＥＣｓ）中ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１表达的影响。方法　收集２型糖尿病患者６０例,按照ＤＲ分期标准将患者分为糖尿病无ＤＲ组（ＤＭ组）、非增生性ＤＲ组（ＮＰＤＲ组）和增生性ＤＲ组（ＰＤＲ组）,收集同期在本院体检的志愿者作为对照组,每组２０例。ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１的水平。体外ＨＲＭＥＣｓ分别进行常氧和低氧培养,不同浓度重组ＴＫＬＫ处理后,检测细胞增殖、凋亡以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达。结果　ＤＭ、ＮＰＤＲ和ＰＤＲ组患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平明显高于对照组,４组总体差异有统计学意义（Ｆ＝２８．８０５,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝３２．０４１,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝２６．１６９,Ｐ＝０．００１）;ＰＤＲ患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平显著高于ＤＭ和ＮＰＤＲ组（均为Ｐ＜０．００１）。ＴＫＬＫ与ＶＥＧＦ（ｒ＝０．６２３,Ｐ＜０．０１）和ｓＩＣＡＭ-１水平（ｒ＝０．５９８,Ｐ＜０．０１）均呈正相关。１０μｇ?ｍＬ－１ｒｈＴＫＬＫ可显著抑制低氧诱导的ＨＲＭＥＣｓ增殖以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达,并可促进细胞凋亡（Ｐ＜０．０５）。结论　ＴＫＬＫ通过与ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１相互作用而影响ＤＲ的进展。     

Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的　探讨Ｎｏｔｃｈ１信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-１［Ｐｏｌｙ（ＡＤＰ-ｒｉｂｏｓｅ）ｐｏｌｙｍｅｒａｓ-１,ＰＡＲＰ-１］和核因子-κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢ,ＮＦ-κＢ）的ｐ５０亚单位（ＮＦ-κＢ５０）介导的人视网膜血管内皮细胞（ｒｅｔｉｎａｌｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＲＶＥＣｓ）凋亡的抑制作用。方法　体外培养人ＲＶＥＣｓ及ＨＥＫ２９３Ｔ细胞,并进行传代,同时构建高糖（葡萄糖浓度为３０ｍｍｏｌ?Ｌ－１）人ＲＶＥＣｓ细胞模型。构建ｐＣＭＶ-Ｓｃｒｉｐｔ-Ｎｏｔｃｈ１和ｐＣＭＶ-Ｓｃｒｉｐｔ-ＤＬＬ４质粒,酶切鉴定后ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成ｓｉＮｏｔｃｈ１并转染高糖培养的人ＲＶＥＣｓ,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测Ｎｏｔｃｈ基因敲除效果。应用免疫共沉淀及ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测ｓｉＮｏｔｃｈ１对高糖下ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ的相互作用的影响;应用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测高糖条件下Ｎｏｔｃｈ１／ＤＬＬ４上调和下调后人ＲＶＥＣｓ中ＰＡＲＰ-１、ｐ-ＡＫＴ、ＮＦ-κＢ５０及ｃａｓｐａｓｅ-３的表达变化。结果　人ＲＶＥＣｓ复苏后２４ｈ贴壁,细胞呈扁平梭形,３ｄ左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人ＲＶＥＣｓ其ＰＡＲＰ-１结合的ＮＦ-κＢ５０的量较正常对照组增加;将ｓｉＮｏｔｃｈ１转染高糖组培养的人ＲＶＥＣｓ后或同时加入ＤＬＬ４,则人ＲＶＥＣｓ中ＰＡＲＰ-１结合的ＮＦ-κＢ５０的量较前增加显著,提示Ｎｏｔｃｈ能抑制高糖下ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ５０的相互作用。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测结果显示高糖条件下,Ｎｏｔｃｈ１和ＤＬＬ４上调后其ＰＡＲＰ-１及ｃａｓｐａｓｅ-３表达量较前显著降低;Ｎｏｔｃｈ１下调后其ＰＡＲＰ-１及ｃａｓｐａｓｅ-３表达量较前增加;ｐ-ＡＫＴ表达量则相反;提示Ｎｏｔｃｈ信号能抑制高糖诱导的ＰＡＲＰ-１及ｃａｓｐａｓｅ-３的激活及表达。结论　高糖情况下Ｎｏｔｃｈ信号可调控ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ的相互作用,并抑制ＰＡＲＰ-１激活引起的人ＲＶＥＣｓ的凋亡。     

眼表重建术后局用FK-506及rhEGF临床观察

目的：寻找眼表重建术后主要并发症的有效治疗措施。方法：对３２例３２只严重化学伤患眼施眼表重建术（板层角膜移植、角膜移植羊膜移植术）,按随机方法将研究对象分为治疗组及对照组各１６眼;治疗组于术后一周局部应用０．５ｍｇ／ｍｌ的ＦＫ－５０６及２０ｕｇ／ｍｌ的ｒｈＥＧＦ滴眼液,对照组应用１％ＣｓＡ及Ｓｏｌｃｏｓｅｒｙｌ Ｅｙｅ Ｇｅｌ,观察两组移植组织的排斥反应及上皮细胞愈合质量。结果：在随访期内,治疗组     

中心性浆液性脉络膜视网膜病变靛青绿血管造影

目的探讨中心性浆液性脉络膜视网膜病变（ｃｅｎｔｒａｌｓｅｒｏｕｓｃｈｏｒｏｉｄｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＣＳＣ）的发病机理。方法用激光扫描检眼镜（ｓｃａｎｎｉｎｇｌａｓｅｒｏｐｈｔｈａｌｍｏｓｃｏｐｅ，ＳＬＯ）对２０例ＣＳＣ患者进行无赤光（蓝色光）眼底检查、眼底荧光素血管造影（ｆｕｎｄｕｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ，ＦＦＡ）及靛青绿血管造影观察。结果（１）蓝色光眼底检查可清晰见到ＣＳＣ的神经视网膜脱离及色素上皮脱离的隆起。（２）ＦＦＡ能清晰显示渗漏点，还可见脉络膜背景荧光增强及晚期视乳头的强荧光。（３）ＩＣＧＡ早期可见脉络膜的充盈迟缓、高灌注和小叶扩张，中晚期可见较ＦＦＡ更多的强荧光点，患眼１００％有弥漫性的脉络膜渗漏，患者的“健眼”或以前ＣＳＣ已临床治愈的眼均可见脉络膜强荧光点，此外尚可见涡静脉异常等。结论ＣＳＣ患者有明显的脉络膜循环紊乱。用ＳＬＯ对ＣＳＣ患者进行无赤光、ＦＦＡ和ＩＣＧＡ眼底血管检查，对了解ＣＳＣ的发病机理和对治疗的评价均有重要意义     

眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞与正常成纤维细胞形态与生长增殖特性差异

目的　对眼睑基底细胞癌相关成纤维细胞（ｂａｓａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ-ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ,ＢＣＡＦｓ）及眼睑正常成纤维细胞（ｎｏｒｍａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ,ＮＦｓ）进行分离、培养、纯化和鉴定,初步研究ＢＣＡＦｓ与ＮＦｓ细胞形态、生长增殖等生物学性状的差异。方法　用组织块贴壁法培养获得原代眼睑ＢＣＡＦｓ和眼睑ＮＦｓ,通过胰蛋白酶差速消化法和反复传代法进行细胞的分离、纯化;通过倒置相差显微镜对照观察ＢＣＡＦｓ和ＮＦｓ细胞形态,应用免疫细胞化学染色检测细胞表达的特异性蛋白鉴定ＢＣＡＦｓ,ＭＴＴ法检测细胞生长增殖特性。结果　在接种后３ｄ便可见原代ＢＣＡＦｓ从组织块爬出,呈放射状生长,约７ｄ铺满瓶底。ＮＦｓ生长缓慢,接种后４ｄ才见稀疏的ＮＦｓ在组织块周围生长,约１１ｄ铺满瓶底。传代后的ＢＣＡＦｓ在形态上未发生明显改变,但生长速度增快,与ＮＦｓ在形态结构特征和生长方式上存在差异;眼睑ＢＣＡＦｓ和ＮＦｓ的免疫细胞化学染色,前者波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞活化蛋白呈阳性,细胞角蛋白呈阴性,后者仅波形蛋白呈阳性,角蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞活化蛋白均呈阴性;与ＮＦｓ相比,眼睑ＢＣＡＦｓ生长增殖较快,倍增时间较短。结论　与眼睑ＮＦｓ相比,ＢＣＡＦｓ在形态结构、蛋白表达、生长方式等方面均有差异,且增殖能力强。     

2.0mm小切口飞秒激光角膜基质透镜取出术与飞秒激光辅助的LASIK矫正近视的疗效比较

目的　比较２．０ｍｍ微切口飞秒激光角膜基质透镜取出术（２．０ｍｍｓｍａｌｌｉｎｃｉｓｉｏｎｌｅｎｔｉｃｕｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ,２．０ｍｍＳＭＩＬＥ）与飞秒激光辅助的ＬＡＳＩＫ（ｌａｓｅｒｉｎｓｉｔｕｋｅｒａｔｏｍｉｌｅｕｓｉｓｗｉｔｈｆｅｍｔｏｓｅｃｏｎｄｌａｓｅｒ,ＦＳ-ＬＡＳＩＫ）矫正近视的疗效。方法　研究纳入行２．０ｍｍＳＭＩＬＥ的近视患者４８例（９６眼）,同期行ＦＳ-ＬＡＳＫ者５０例（１００眼）,记录并比较两组术前及术后１ｄ、１周、１个月、３个月及６个月的裸眼视力（ｕｎｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＵＣＶＡ）、最佳矫正视力（ｂｅｓｔｃｏｒｒｅｃｔｅｄｖｉｓｕａｌａｃｕｉｔｙ,ＢＣＶＡ）、屈光度、生活质量量表（ｑｕａｌｉｔｙｏｆｌｉｆｅ,ＱＯＬ）得分及手术满意度量表评分。结果　在术后１周以后ＳＭＩＬＥ组视力高于ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组,且状态较ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组更为稳定。术后１个月、３个月、６个月ＳＭＩＬＥ组ＵＣＶＡ≥术前ＢＣＶＡ的比例高于ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后早期（术后１周）ＳＭＩＬＥ组存在１例过矫,而ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组存在１例欠矫,但在术后１个月、３个月、６个月两组手术患者均在±１．００Ｄ范围内。术后平均角膜前表面形态变异指数及垂直不对称指数在各时间点均为ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组大于ＳＭＩＬＥ组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。两组术前及术后６个月ＱＯＬ得分组间比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,术后６个月ＱＯＬ得分均较术前有所增加,且差异均有统计学意义（ＳＭＩＬＥ:ｔ＝－１３．８５,Ｐ＝０．００;ＦＳ-ＬＡＳＩＫ:ｔ＝－１３．２１,Ｐ＝０．００）,而两组术后６个月ＱＯＬ得分比较,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。两组均有较高的再次手术选择率及手术推荐率,并且未发生严重的并发症。结论　２．０ｍｍＳＭＩＬＥ与ＦＳ-ＬＡＳＩＫ均具有良好的有效性、稳定性以及可预测性,术后都可获得良好的视力及良好的生活质量,前者更好地保持了角膜前表面的形态。     

多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡

目的　探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-１［ｐｏｌｙ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ-ｒｉｂｏｓｅ）ｐｏｌｙｍｅｒａｓ-１,ＰＡＲＰ-１］和核因子-κＢ（ｎｕ-ｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ-κＢ,ＮＦ-κＢ）在高糖人视网膜血管内皮细胞（ｒｅｔｉｎａｌｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＲＶＥＣ）中的相互作用及其在人ＲＶＥＣ中的表达定位及作用机制。方法　体外培养人ＲＶＥＣ及ＨＥＫ２９３Ｔ细胞,并进行传代,同时构建高糖人ＲＶＥＣ细胞模型。构建ＰＡＲＰ-ＥＧＦＰ及Ｆｌａｇ-ＮＦ-κＢ质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人ＲＶＥＣ,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法和免疫共沉淀法检测高糖人ＲＶＥＣ中ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ的相互作用。ＰＡＲＰ-ＥＧＦＰ和Ｆｌａｇ-ＮＦ-κＢ质粒共转染人ＲＶＥＣ,激光共聚焦扫描显微镜检测ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ在高糖人ＲＶＥＣ中的定位及其相互作用。结果　人ＲＶＥＣ复苏后２４ｈ贴壁,细胞呈扁平梭形,３ｄ左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。成功构建ＰＡＲＰ-ＥＧ-ＦＰ及Ｆｌａｇ-ＮＦ-κＢ质粒,并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ是相互作用的蛋白质,高糖组ＮＦ-κＢｐ５０的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下ＰＡＲＰ-１结合ＮＦ-κＢ的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示ＰＡＲＰ和ＮＦ-κＢ均表达于正常的人ＲＶＥＣ的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ均集中表达于细胞核内,尤以ＮＦ-κＢ最显著。结论　ＰＡＲＰ-１和ＮＦ-κＢ是相互作用的蛋白质,血糖增高时,ＰＡＲＰ-１可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的ＮＦ-κＢ,激活ＮＦ-κＢ信号通路,引起ＲＶＥＣ凋亡,导致ＤＲ的发生。     

糖尿病视网膜病变患者红细胞膜ATPase活力及红细胞内离子水平临床研究

测定非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）视网膜病变（ＤＲ组）患者２０例红细胞膜ＡＴＰａｓｅ活力及红细胞内离子水平，并与无急慢性并发症的单纯性ＮＩＤＤＭ（ＤＭ组）患者和健康志愿者（Ｃ组）各２０例比较。结果ＤＲ组Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活力明显低于正常Ｃ组，红细胞内Ｎａ＋和Ｃａ（２＋）明显高于正常Ｃ组，Ｍｇ（２＋）明显低于Ｃ组，Ｍｇ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ及Ｋ＋与Ｃ组比较差别不显著。上述变化在ＤＭ组亦有表现，但在ＤＲ组更为明显，其中Ｍｇ（２＋）在ＤＲ组明显低于ＤＭ组（Ｐ＜０．０５）。