糖类的高效毛细管电泳分析

目的：探讨糖类物质的检测方法。方法：通过文献，结合HPCE方法的特点进行糖类物质的测定。结果：通过柱前衍生、不经衍生的直接和间接紫外检测、荧光检测和电极脉冲安培检测均可对糖类物质进行分析。结论：HPCE技术对糖类物质分析提供了有效的保证。     

HPLC-ELSD法同时测定葡萄糖原料药中6种糖类有关物质的含量

目的:建立同时测定葡萄糖原料药中果糖、麦芽糖、异麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖等6种糖类有关物质的方法.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法.色谱柱为XBridge Amide,流动相为乙腈-水(75:25,V/V),流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL;检测器为蒸发光散射检测器,载气为...     

柱后衍生化-HPLC法检测硫酸新霉素的有关物质

目的 建立硫酸新霉素有关物质检查的柱后衍生化-HPLC-荧光检测法，并与新建的HPLC-电化学检测法进行比较。方法 色谱柱为COSMOSIL 5C18-PAQ(4.6mm×250mm, 3.5μm)；以pH3.4缓冲液[取庚烷磺酸钠一水合物4.35g和无水硫酸钠16g，加水溶解并稀释至1000mL，用冰醋酸调节pH值至(3.4±0.1)]-乙腈(95:5)为流动相A，pH3.4缓冲液-乙腈(60:40)为流动相B；梯度洗脱；柱温为30℃；流速为1.0mL/min。柱后衍生化试液为邻苯二甲醛溶液[pH值为(10.4±0.1)]；流速为0.3mL/min。电化学检测法采用脉冲安培检测器，金电极为工作电极，四电位波形工作模式。结果 柱后衍生化法与电化学检测法均检出24个杂质。柱后衍生化法的检测限和定量限分别为1.1和3.5ng。结论 柱后衍生化-HPLC法操作简便，灵敏度高，重复性好，可作为硫酸新霉素有关物质检查的常规方法。     

糖蛋白寡糖及单糖色谱分析的研究进展

对的二十年来糖蛋白中寡糖及单糖的色谱分析方法进行了综述，重点介绍气相色谱、液相色谱、电泳分析法的新进展。此外，还对糖蛋白寡糖链结构的质谱分析做了简要介绍。     

毛细管电泳及其在滥用物质检测中的应用

毛细管电泳 (ｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ,ＣＥ)是２０世纪８０年代出现的一种灵敏度高、应用范围广的分离技术 ,被广泛应用于化学、医学、生化和药理学等各个领域。现以“ＣＥ”为主题词在“分析化学文摘”数据库查到的引文量超过４０００篇 ,用同样的主题词和Ａｌｔａｖｉｓｔａ搜索引擎 ,可在网络上查到２０００余篇文献［１］ 。ＣＥ的原理是基于Ｔｉｓｅｌｉｕｓ［２］的电泳理论 ,但在此基础上加快了分离速度 ,扩宽了分离物的范围 ,节省了试剂和分离液。Ｗｅｉｎｂｅｒｇｅｒ等［３］在２０世纪９０年代首先将…     

青霉素V及相关物质的分析测定

用高效毛细管电泳（HPCE）和高效液相色谱（HPLC）两种方法，对青霉素V的发酵过程及提炼过程进行了跟踪检测，找到了青霉素V及相关物质的变化规律，为实际生产中发酵效价和提炼收率的提高，提高了可靠数据。     

高效毛细管电泳法分离土霉素及其相关物质的方法研究

目的：采用高效毛细管电泳法分离土霉素及其相关物质。方法：以含1mmol/L的EDTA的25mmol/L柠檬酸钠溶液（用0．1mol/L的氢氧化钠液调pH值至11．5）作为运行缓冲液，未涂层毛细管柱为70cm*50um.i.d)，有效长度为64cm，采用压力方式由毛细管柱的阳极旱样5s，运动电压为15kV，分离温度为20度，检测波长为254nm，并将方法测得的结果与药典规定方法测得的结果进行了比较，结果：所确定的实验条件可使土霉素与数种相关物质得到令人满意的分离，其分离效率较法定方法的为高，结论：本方法可使土霉素与数种相关物质分离，分析时间较短，能有效控制我国现行工艺生产的土霉素质量以及监控储存条件对质量的影响。     

衍生化HPLC/MS法测定有机羧酸物质的研究进展

利用高效液相色谱-质谱联用 (HPLC/MS) 法对体液中微量的羧酸化合物进行定量检测仍然是一个难题。近年的研究显示采用衍生化质谱增敏法成为解决这一问题的重要方法。本文综述了近年来应用此类方法测定微量羧酸物质的研究,并对研究中所采用的衍生化试剂和化学反应进行了总结。     

MEKC与HPLC测定头孢菌素有关物质的互补性分析

目的:探索利用胶束毛细管电泳(MEKC)与高效液相色谱法(HPLC)分析原理的互补性,评价HPLC系统有效性的方法。方法:利用加速降解实验,比较HPLC和MEKC分析头孢地嗪钠和头孢米诺钠降解杂质的能力。结果:头孢地嗪钠和头孢米诺钠的MEKC和HPLC结果具有互补性。MEKC具有较强的杂质分离能力,但其检测限(LOD)较高。实际应用中,借助于加速实验,将MEKC分离出的杂质峰数目与HPLC分离出的含量大于MEKC LOD的杂质峰数目进行比较,当两者基本相对时,可以认为HPLC方法具有较满意的分离能力。结论:MEKC为评价HPLC方法的有效性提供了新的手段。     

不同水解模式下琼二糖多聚体的HPLC定量分析

目的琼二糖多聚体具有多种生物活性 ,建立不同水解模式下的琼二糖聚合体的定量分析方法具有重要意义。方法将降解产物用Sephadex柱纯化得到聚合度为 2～ 10的琼寡糖 ,对每一种寡糖进行α 萘胺衍生化后采用高效液相色谱分析 ,并利用此方法对 4种水解模式 (盐酸、柠檬酸、固态酸及羟基自由基降解 )的产物进行分析。结果各种聚合度的寡糖衍生物在HPLC上得到了很好的分离 ,最低检测限达到 0 .1～ 2 μg·mL 1。应用固态酸降解琼胶 ,其产物中的寡糖含量可达 33.2 % ,其中琼二糖含量高达 5 7.8% ;盐酸降解产物较为分散 ,包含 2～ 10糖 ;柠檬酸降解产率过低 ;羟基自由基降解产物过杂。结论建立的琼胶寡糖定量方法可有效地应用于寡糖制备分析中。     

Determination of S 12024 enantiomers in human plasma by liquid chromatography after chiral pre-column derivatization

S 12024-2 is a new drug in phase II development that possesses cognitive enhancing properties. As its molecular structure has a chiral centre, a stercoselective method for the analysis of both enantiomers in human plasma has been developed. The method involves pre-column derivatization of the amine moiety with a homochiral reagent (+)-1-(9-fluorenyl)ethyl chloroformate (FLEC), and chromatographic separation of the two diastereoisomers on an achiral reversed-phase cyanopropyl column, with fluorimetric detection (λ_ex = 260 nm; λ_em = 310 nm). A liquid—liquid extraction procedure with diethyl ether—dichloromethane (70:30, v/v) was used for sample preparation. This technique provides a linear response for both enantiomers over a concentration range of 10–500 ng ml⁻¹ and the quantitation limit was set at 5 ng ml⁻¹ in human plasma. Within-day and between-day precision and accuracy are within 9% limits for all concentrations assessed. This procedure was therefore used for determining both enantiomers in human plasma following oral administration of racemic S 12024-2 to elderly healthy subjects.     

柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定大鼠血浆中硫普罗宁

建立了测定大鼠血浆中硫普罗宁含量的柱前衍生-高效液相色谱荧光法。血浆样品经二硫苏糖醇(DTT)还原后，再经N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)衍生化后进样测定。以0.2%乙酸(含0.015 mol·L^-1磷酸二氢钾)-乙腈(56∶44)为流动相，采用Kromasil C₁₈色谱柱分离，在λ_ex=340 nm，λ_em=375 nm下荧光检测。硫普罗宁线性范围为0.1～10.0 μg·mL^-1，定量下限为0.1 mg·L^-1，日内、日间精密度(RSD)分别为5.3%～10.8%和7.0%～10.8%，提取回收率在73.7%～79.7%。大鼠单剂量给予硫普罗宁后，药代动力学行为符合二室模型。该法准确可靠，专属性强，适用于硫普罗宁的药代动力学研究。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖的含量

目的建立柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖(2-DG)含量的方法。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)为柱前衍生化试剂,将2-DG在碱性条件下衍生化后直接进样测定。分离柱为HypersilODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH 5.5)-乙腈(78∶22),流速1.0 mL·min-1,波长249 nm。结果 2-DG在19.68~393.6μg·mL-1浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997);其定量限(S/N=10)和最低检出限(S/N=3)分别为7.8和3.1 ng;平均回收率为101.21%,RSD 0.63%。结论该方法简便实用、检测灵敏度高、测定结果准确,适用于2-DG的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定血清中丙戊酸浓度

目的建立适于普遍应用的丙戊酸血浓度测定方法.方法本文采用BrMMC将丙戊酸转化为可紫外检测的酯,再经RP-HPLC测定.结果在15～200μg*ml-1范围内,丙戊酸衍生物和内标的峰高比与浓度呈良好的线性关系,r=0.9991;平均回收率为100.9%.应用于34例患者的治疗药物监测,取得良好的临床效果.结论方法准确、灵敏、选择性强、重现性好,操作简便快速.本法适于临床研究与应用.     

高效液相色谱法测定丙戊酸血浓度

本文建立了采用BrMMC将丙戊酸转化为可紫外检测的酯,再经RP-HPLC测定的丙戌酸血浓度测定方法.在15-200μg/ml范围内,峰高比与浓度呈良好的线性关系,r=0.9991;平均回收率为101.2%.方法准确、灵敏、选择性强、重现性好,操作简便快速.应用于34例患者的治疗药物监测,取得良好的临床效果,本法适于临床研究与应用.     

Comparative evaluation between capillary electrophoresis and high-performance liquid chromatography for the analysis of florfenicol in plasma

A capillary electrophoresis (CE) and a reversed phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method with UV detection have been developed for florfenicol analysis in plasma samples. The suitabilities of both methods for quantitative determination of florfenicol were approved through validation specification, such as linearity, precision, selectivity, accuracy, limit of detection and quantification. The capillary electrophoresis (CE) and high-performance liquid chromatography (HPLC) assay were compared by analyzing a series of plasma samples containing florfenicol in different concentrations using the two methods. The extraction procedure is simple and no gradient elution or derivatization is required. Furthermore, the analysis time of the CE method is two times shorter than the respective parameter in HPLC and solvent consumptions is considerably lower. The calibration curve were linear to at least 0.05–10 μg/ml (r = 0.9998) and 0.1–10 μg/ml (r = 0.9998) for CE and HPLC, respectively. The separation efficiency are good for both methods. The detection limits for florfenicol were 0.015 μg/ml with CE and 0.03 μg/ml with HPLC and CE method gave lower value, even though UV detector was applied in the both cases. The both methods were selective, robust and reliable quantification of florfenicol and can be useful for clinical and biomedical investigations.     

色谱法在麻黄生物碱手性分析中的研究进展

生物碱为麻黄中的主要活性兼毒性成分,以3对互为光学非对映异构体的苯异丙胺类生物碱形式存在,这些生物碱不仅对与对之间的药理作用存在显著差异,而且互为非对映异构体的一对生物碱之间作用也不同.此外,通过合成途径获得的几种麻黄生物碱,总是掺杂少量的相应对映体,这些对映体由于失去活性而以杂质的形式存在.因此,为有效合理地控制麻黄及麻黄制剂的质量,应对所存在的异构体分别进行测定.近几年,麻黄生物碱的手性分析成为研究的热点.将近年来麻黄生物碱手性分析的色谱方法进行综述,主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法,并对各方法的优劣进行讨论.     

5-氨基酮戊酸的柱前衍生化HPLC-荧光法测定

建立了柱前衍生化HPLC-荧光法测定5-氨基酮戊酸.以荧光胺为荧光衍生化试剂,使用C18柱,以乙腈-0.1％三氟乙酸溶液(30∶70)为流动相,激发波长和发射波长为398和480 nm.5-氨基酮戊酸在0.047 5～47.5 μg/ml浓度范围内线性关系良好.回收率为99.2％,RSD为1.46％.     

高效液相色谱荧光检测法测定健康志愿者血浆中氟罗沙星

目的建立测定人血浆中氟罗沙星浓度的高效液相色谱方法,并用于其药代动力学研究。方法采用加替沙星为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后直接进样。色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相为1%三乙胺-磷酸缓冲液(pH4.8)/乙腈(80/20,V/V),流速1.0mL·min-1。采用荧光检测器,激发波长290nm,发射波长458nm。结果氟罗沙星血浆浓度0.025~8.00μg·L-1范围内线性关系良好(W=1/x,r=0.9999),低、中、高浓度质控样品的日内、日间精密度不超过5.16%,方法精密度99.1%~100.9%,提取回收率86.7%~92.0%。氟罗沙星血浆样品实验条件下均稳定。结论该方法灵敏度高、定量准确,适用于氟罗沙星人体药代动力学研究。     

Determination of alloxan by fluorometric high-performance liquid chromatography

A fluorometric, reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method that allows quantitation of low levels of alloxan has been described. The method involved derivatization of alloxan with 500–200,000-fold excess of 1, 2-phenylenediamine (PD) in 0.1?M acetate buffer, pH 4.5 for 15?min at room temperature. The fluorescent product alloxazine (excitation: 382?nm; emission: 435?nm) was then analyzed by RP-HPLC using an Eclipse XDB-C18 (4.6?×?150?mm) column and a mobile phase consisting of 0.1% trifluoroacetic acid in 15/85 (v/v) acetonitrile/water at a flow of 1?mL/min (injection volume: 20?μL). The method is robust, and as low as 0.1 pmol of the analyte could be successfully detected and quantified. Following a minimal pre-treatment such as ultrafiltration (molecular weight cut-off 5000?Da) or protein precipitation using perchloric acid, acetonitrile, or phosphotungstic acid, the method is suitable for analysis of alloxan in complex physiological fluids (e.g. fetal bovine serum) and tissue homogenates (e.g. heart and kidney). The method has been rigorously evaluated and adapted in the laboratory for routine analysis and determination of alloxan added to cell cultures.