内质网应激对2型糖尿病小鼠脂肪肝发生的影响

目的:探讨内质网应激(ERS)在2型糖尿病(T2DM)小鼠脂肪肝发生中的作用机制.方法:应用实时定量RT-PCR技术检测T2DM与非糖尿病小鼠肝脏ERS和脂代谢相关基因表达差异, 并进行血生化指标及肝脏形态学检测.结果:与同龄非T2DM小鼠相比T2DM小鼠表现为:(1)胰岛素抵抗、空腹血糖升高(30.76±4.52 vs 12.80±2.13, 14.73±2.74v s 4.61±1.12). (2)肝脏TG和F FA水平明显升高( P<0.01); 脂肪肝病变明显. (3)肝脏GRP78、XBP1、CHOP、EDEM1、GSK3β、apoB100、SREBP1c、ACCα及FAS的mRNA水平均显著上调( P<0.05). (4)血清TG、TC、LDL-C、FFA、ALT及AST显著升高( P<0.01).血清apoB100水平先升高, 后下降( P<0.05).结论:ERS参与调节肝脏脂质及apoB100的合成与代谢过程, 在T2DM小鼠脂肪肝发生过程中起着重要作用.     

内质网应激与肾脏疾病

各种肾脏疾病的晚期产生的尿毒症严重危及患者的生命,因此,研究各种肾脏疾病的发病机制成为众多学者所关注的课题。随着近年来人们对细胞水平应激反应研究的不断深入,发现各种细胞器的应激与多种肾脏病相关。亚细胞水平的应激包括内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)     

内质网应激对胰岛素抵抗和糖尿病的影响

内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激是细胞应激的重要组成部分,表现为内质网腔内错误折叠或未折叠蛋白的蓄积以及细胞内Ca2+平衡紊乱,与应激细胞的损伤或凋亡直接相关.     

内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用

目的探讨内质网应激相关的凋亡在糖尿病大鼠肾脏组织中的作用和机制。方法雄性SD大鼠随机分为3组:链脲佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠6周、12周模型组及正常对照组。采用腹腔注射STZ 60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型,分批处死,处死前测量大鼠24 h尿蛋白排泄量,取每只大鼠右肾用免疫组织化学法及半定量RT-PCR方法检测肾脏组织中GRP78、Caspase12蛋白及mRNA的表达;应用TUNNEL法检测肾脏细胞凋亡情况。结果GRP78、Caspase12在正常大鼠肾脏组织中少量表达,主要分布于肾脏内肾小球及肾小管细胞,糖尿病6周组GRP78、Caspase12在肾脏肾小球及肾小管细胞的表达量升高,糖尿病12周组表达量更高。结论内质网应激参与了糖尿病肾病的发病机制,肾脏细胞的内质网应激能力及相应的细胞凋亡随糖尿病病程延长而增强。     

内质网应激与糖尿病相关性研究进展

内质网应激(ERS)是一种特殊类型的细胞内应激,是由内质网内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及Ca+代谢紊乱所引起.研究表明,适度ERS通过激活未折叠蛋白反应起适应性的细胞保护作用,而过高和持久的ERS则通过诱导转录因子CHOP表达、激活caspase-12和c-Jun氨基末端激酶(JNK)等导致细胞凋亡.近年的研究显示,ERS通过促使胰岛β细胞凋亡及胰岛素抵抗参与糖尿病发病,而阻断ERS诱导的凋亡通路和胰岛素抵抗则可能为糖尿病治疗提供新的手段.     

内质网应激和2型糖尿病

胰岛素抵抗（IR）和胰岛β细胞功能减退是2型糖尿病（T2DM）发病的两个关键因素，但T2DM的病因和发病机制尚未完全阐明。近年来众多证据表明，肥胖时伴有细胞应激和炎症信号通路的激活，并提出炎症病因学说、氧化应激学说和炎症一氧化应激一炎症学说等，但引发细胞应激的起源尚不清楚。晚近研究发现，内质网在其中占重要地位，内质网应激与IR和β细胞功能减退密切相关。     

2型糖尿病内质网应激研究进展

众多研究均发现胰岛素抵抗在2型糖尿病发病之前就已经长期存在，但是并不是所有的胰岛素抵抗的个体均会进展为糖尿病，而确定个体是否从正常糖耐量（NGT）进展为糖调节异常（IGR）甚至糖尿病的关键点为此时的β细胞还能通过产生足够的胰岛素来代偿胰岛素抵抗。进一步来说，在疾病的早期，胰岛β细胞尚能通过增生和高分泌来适应胰岛素抵抗状态下的高胰岛素需求，因而能在一定程度上维持血糖水平的稳定，但是胰岛β细胞并不能无限制地适应持续存在胰岛素抵抗，而是在各种因素的作用下出现β细胞功能衰竭和细胞量的减少，     

内质网应激与糖尿病视网膜病变

内质网是多种蛋白的主要合成场所,当各种应激因素导致内质网稳态被打破,使过多的未折叠或错误折叠蛋白在内质网蓄积时,将引起内质网应激(ERS).糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病微血管并发症之一,也是成人非外伤性致盲的常见原因.近年的研究结果显示,DR中存在ERS,炎性反应与ERS在DR的病理生理过程中均起着重要作用.深入探讨炎性反应与ERS的相互作用,以及这两者与DR的联系,有望为DR的临床诊疗提供新的思路.     

血管紧张素1-7与糖尿病及糖尿病肾脏内质网应激关系的研究

目的 调查糖尿病患者血管紧张素1-7(Ang1-7)水平和评价Ang1-7对糖尿病大鼠肾脏内质网应激的影响.方法 选取2014年12月至2015年6月于天津市海滨人民医院未诊断为糖尿病的95名体检人员为研究对象,所有受试者均进行口服葡萄糖耐量试验,根据血糖水平分为健康组(n=31)、血糖异常组(n=32)和糖尿病组(n=32).检测其体重、腰围、血压、肝功能、肾功能、Ang1-7、血管紧张素转换酶(ACE)2等指标.分析血糖与Ang1-7、ACE2的相关性.另外,选取10只150～200 g健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠,通过腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型,全部成功,根据随机数字法,分为糖尿病组和Ang1-7组,每组5只,分别皮下泵人生理盐水和Ang1-7,另选取5只健康SD大鼠作为正常组.干预2周后处死所有大鼠,留取肾组织标本,Western印迹和实时荧光定量PCR检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录活性因子4(ATF4)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)水平.结果 与健康组相比,血糖异常组和糖尿病组甘油三酯、ACE2、Ang1-7水平均升高;糖尿病组较健康组升高更明显(F=5.57,6.12,5.44,P均＜0.01).Pearson相关分析显示,糖尿病组、血糖异常组的空腹血糖、餐后血糖均与Ang1-7呈正相关(r=0.69,0.45,P均＜0.01;r =0.54,0.52,P均＜0.01).与正常组相比,糖尿病组大鼠肾脏GRP78、ATF4和CHOP水平明显升高;与糖尿病组相比,Ang1-7组GRP78、ATF4和CHOP水平明显下降(t=20.3,25.7,19.6,P均＜0.05).与同期正常组比较,糖尿病组大鼠肾组织GRP78、ATF4和CHOP的mRNA均显著上调.与糖尿病组比较,Ang1-7组大鼠肾组织GRP78、ATF4和CHOP的mRNA的表达受到显著抑制(t=15.1,11.6,12.3,P均＜0.05).结论 Ang1-7水平随着受试者血糖浓度的升高而升高,另外,Ang1-7可降低糖尿病大鼠肾脏内质网应激蛋白水平.     

替米沙坦对糖尿病大鼠肾脏组织中内质网应激介导相关细胞凋亡的保护作用

探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病大鼠肾脏组织中内质网应激相关的细胞凋亡的影响.31只雄性SD大鼠分为正常对照组、糖尿病组、替米沙坦干预组.12周试验结束后测量大鼠体重、24h尿蛋白量,检测血糖、血胰岛素、血肌酐等.肾脏细胞凋亡用TUNEL法检测;肾脏细胞内质网应激信号通路分子糖调节蛋白78( GRP78)、caspase12和CHOP用免疫组化及实时定量PCR法检测.糖尿病组的血糖、24h尿蛋白量、血肌酐显著高于对照组(P＜0.05);体重和血胰岛素较对照组低(P＜0.05).替米沙坦干预组的24h尿蛋白量、血肌酐较糖尿病组明显减少(P＜0.05),凋亡指数也显著低于糖尿病组(P＜0.05).大鼠内质网应激信号通路分子GRP78、caspase12、CHOP蛋白及其mRNA的表达,糖尿病组显著高于对照组和替米沙坦干预组(P＜0.05).内质网应激参与了糖尿病大鼠肾脏细胞的凋亡,替米沙坦对内质网应激介导相关的肾脏细胞凋亡有保护作用.     

巨噬细胞内质网应激与糖尿病大血管病变

糖尿病大血管病变是糖尿病慢性并发症之一,其主要病理特征是动脉粥样硬化.近年来的研究表明,巨噬细胞内质网应激与大血管动脉粥样硬化的发生、发展密切相关,糖尿病状态下的胰岛素抵抗,糖、脂代谢异常以及慢性炎性反应可诱导巨噬细胞内质网应激,从而促进动脉粥样硬化,最终加重了糖尿病大血管病变.关注巨噬细胞内质网应激在糖尿病大血管病变中的作用,将为抗动脉粥样硬化、治疗糖尿病大血管病变提供一个新方向.     

糖尿病性心肌病与内质网应激的关系

内质网应激（ERS）在维持内质网稳态的适应性应答中发挥着关键作用。近年来关于糖尿病(DM)的研究越来越多,研究显示在糖尿病性心肌病(DCM)早期,高血糖症、过多的游离脂肪酸以及炎症等多种致病因素均可导致ERS,ERS在DM的发展及其并发症形成中发挥着极为重要的作用。本文对ERS的经典通路、内质网功能紊乱与细胞自噬、凋亡的联系以及由于内质网功能紊乱导致机体产生胰岛素抵抗和DCM的过程进行了综述。     

内质网应激对中性粒细胞趋化作用的影响

目的：探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导脐静脉内皮细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)对中性粒细胞趋化作用的影响。方法实验分4组：正常对照组、CSE刺激组、ERS抑制剂组和阴性对照组。培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs),给予不同浓度的 CSE 刺激24 h,Real time-PCR 法检测糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、趋化因子8(CXCL-8)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)、E-selectin mRNA 的表达水平;用 ERS 抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)干预,ELISA法检测各组 HUVECs 的 CXCL-8蛋白表达水平,Transwell趋化实验检测各组培养上清对正常人外周血中性粒细胞的趋化作用。结果 CSE 增强 GRP78及CXCL-8、ICAM-1、E-selectin mRNA的表达,并在一定范围内具有浓度依赖性;ERS 抑制剂4-PBA减少CXCL-8的分泌(q=8.370,P<0.05),并减弱中性粒细胞的趋化作用(q=4.808,P<0.05)。结论 CSE诱导 HUVECs ERS,并上调 CXCL-8、ICAM-1、E-selectin的基因转录;4-PBA 减弱中性粒细胞的趋化作用,可能与减少CXCL-8分泌作用有关。     

应激对糖尿病的影响

机体内环境的稳定有利于维持正常的生理功能 ,当机体受到精神上痛苦或社会环境、生物学和物理化学方面的侵袭时 ,可引起全身性的适应反应。这种对各种有害刺激产生的非特异性反应称为应激 (stress)。对人和动物模型的研究表明 ,应激时肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、促肾上腺皮质激素、糖皮质激素、生长素、催乳素、β内啡肽、β促脂素、血管紧张素、胰升糖素、加压素、神经肽 Y等激素均可升高。除了对神经内分泌系统的影响 ,应激还可通过细胞因子对免疫系统产生影响。应激在糖尿病的发生、发展与治疗过程中起着重要的作用。一、应激对糖…     

同型半胱氨酸经内质网应激介导小鼠心肌损伤

目的:旨在探讨同型半胱氨酸(Hcy)是否对心肌有损伤作用及其可能机制。方法:5周龄ApoE基因敲除小鼠27只,将其随机分为:对照组、高蛋氨酸组(HM组)、4-苯基丁酸组(4-PBA组),每组9只。对照组给予普通小鼠维持饲料喂养,HM组给予HM饲料喂养,4-PBA组经HM饲料喂养16周后给予腹腔注射4-PBA。所有小鼠继续原饲养方法喂养12周后处死,检测小鼠血清Hcy水平,光镜下观察心肌组织结构,电镜下观察心肌细胞超微结构,免疫组化及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关蛋白表达。结果:HM组和4-PBA组分别与对照组比较,血清Hcy水平均升高,差异均有统计学意义(P均0.05),4-PBA组与HM组Hcy水平差异无统计学意义(P0.05);光镜下三组小鼠心肌组织结构无明显差异。电镜下观察各组小鼠心肌细胞内质网形态,HM组内质网明显肿胀、排列紊乱,4-PBA组内质网肿胀及紊乱较HM组减轻。心肌组织切片行免疫组化检测内质网氧化还原酶α(ERO1α)表达,与对照组比较,HM组和4-PBA组表达明显增多,差异均有显著性统计学意义(P均0.01),4-PBA组较HM组表达减少,差异有显著性统计学意义(P0.01)。Western blot检测内质网应激相关蛋白表达,结果示,与对照组比较HM组胰腺内质网激酶(PERK)、激活CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、ERO1α表达均增加;与HM组比较,4-PBA组PERK、CHOP、ERO1α表达较HM组明显下降,各因子差异均有统计学意义(P均0.05)。结论:Hcy是心肌损伤的危险因素,通过内质网应激介导心肌细胞损伤,而4-PBA抑制内质网应激减轻高Hcy所致的心肌损伤。     

脂肪细胞的内质网应激

肥胖常伴有炎性反应、胰岛素抵抗和全身代谢紊乱,脂肪细胞内质网应激在其中发挥莺要作用,内质网有合成、折叠和运输蛋白质的作用.脂肪细胞内质网还可以合成脂肪和感受营养物质的变化.在肥胖状态下,脂肪细胞受到营养过剩、细胞内胰岛素抵抗及氧化应激等因素的刺激后,内质网的生理功能发生紊乱.导致内质网应激,内质网应激的表现主要是未折叠蛋白质反应被激活以后,可以通过炎性反应和氧化应激等通路加重胰岛素抵抗.导致全身代谢紊乱.维持和增强内质网功能可能是改善胰岛素抵抗有效的方法之一,一些可以缓解内质网应激的化学分子伴侣是有前景的治疗药物.     

地菍醇提物对糖尿病模型小鼠血糖的影响

目的研究地菍醇提物对糖尿病模型小鼠血糖的影响。方法分别以肾上腺素、四氧嘧啶、链脲佐菌素(STZ)造成小鼠糖尿病模型,动物分为正常组、模型组、阳性对照组、地菍醇提物高、中、低剂量组(60、40、20 g/kg),连续灌胃给药10 d,观察地菍醇提物的的降血糖作用。结果地菍醇提物对肾上腺素致小鼠急性高血糖有显著拮抗作用(P<0.05),对四氧嘧啶致糖尿病小鼠高血糖有显著的降糖作用(P<0.01,P<0.05),对STZ致糖尿病小鼠也有显著降糖作用(P<0.01,P<0.05)。结论地菍醇提物有显著的降血糖作用。     

内质网应激对胃癌细胞迁移与侵袭的影响

目的:探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)对胃癌细胞迁移及侵袭能力的影响及其机制.方法:5μg/mL衣霉素处理胃癌细胞系SGC7901或BGC823 0、12、24及36 h,Western blot检测各时间点葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)、金属基质蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达;划痕实验检测衣霉素处理不同时间后对胃癌细胞迁移能力的影响,各时间点均设未加药对照组;Transwell侵袭实验检测衣霉素处理不同时间后对胃癌细胞侵袭能力的影响,各时间点均设未加药对照组.结果:与相应的0 h组相比,衣霉素处理胃癌细胞系SGC7901或BGC823 12、24及36 h后,GRP78、MMP9及VEGF的蛋白表达量均明显增加(P0.05);衣霉素处理12、24及36 h后,胃癌细胞的划痕愈合度及胃癌细胞侵袭到Transwell下室的细胞数均明显高于0 h组(P0.05).结论:ERS可上调MMP9及VEGF,促进胃癌细胞的迁移与侵袭.     

骨化三醇对糖尿病大鼠肾脏白细胞介素17表达的影响

目的 探讨骨化三醇对糖尿病大鼠肾脏白细胞介素17（IL-17）表达的影响.方法 8周龄健康雄性SD大鼠45只,链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组、低剂量骨化三醇治疗组（低剂量组,0.03μg/kg）、高剂量骨化三醇治疗组（高剂量组,0.10 μg/kg）,每组各15只.选取健康同龄大鼠10只作为正常对照组.治疗12周后,检测体重、血糖、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血清IL-17、24 h尿白蛋白定量（UAlb）.处死动物后计算肾重指数（KI）;免疫组化法检测肾皮质内IL-17、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子-β1（TGF-βl）的表达;光镜下观察肾脏组织形态学变化.多组间比较采用单因素方差分析.结果 （1）糖尿病组大鼠BUN、Scr、UAlb均较对照组显著上升[分别为（16.1±1.6）比（6.9±1.8） mmol/L,（75±11）比（46±9）μmol/L,（1.14±0.13）比（0.45 ±0.ll）mg/24 h,t=12.627、7.534、12.762,均P＜0.05],而经骨化三醇干预后上述生化指标显著改善[低剂量组分别为（12.1±1.5） mmol/L、（58±8） μmol/L、（0.86±0.10） mg/24 h].（2）糖尿病组大鼠血清IL-17、肾皮质内IL-17水平（吸光度）均较正常对照组显著上升[分别为（510±47）比（133±22） ng/L,（164±9）比（82±4）,t=17.244、20.757,均P＜0.05],而骨化三醇干预后显著改善,且高剂量组[（253±27） ng/L、119±5]较低剂量组[（324±35） ng/L、132±5]改善更显著,差异均有统计学意义（t=3.379、3.615,均P＜0.05）.（3）光镜下显示正常对照组肾脏结构未见异常,糖尿病组肾脏系膜细胞增生及系膜基质增多,并可见近端肾小管上皮细胞空泡样变性,骨化三醇组肾脏病理较糖尿病组明显改善.结论 骨化三醇对糖尿病肾脏有保护作用,其机制可能是通过上调糖尿病大鼠血清及肾皮质内IL-17的表达.