HPLC法快速测定万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度

目的建立快速测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC法。方法以Hypersil BDS-C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱为分析柱,流动相:磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-甲醇（86:14,V/V）,流速1 mL·min^-1,检测波长236nm,柱温35℃,进样量20μL,万古霉素和去甲万古霉素互为内标;血清样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白离心后进行色谱分析。结果本法万古霉素和去甲万古霉素均在2～100 mg·L^-1间线性关系良好,两者平均回收率均为95%～105%,日内及日间RSD均<5%。结论本法操作简便、快速、准确,适用于临床血药浓度测定及人体药动学研究。     

RP-HPLC法测定万古霉素血药浓度

目的建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱（RP—HPLC）测定法,方法以替硝唑为内标,血浆样品处理采用30％硫酸锌沉淀法,色谱分析采用日本分光JASCO-1500系列高效液相色谱仪,Kromasil C18柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相组成为甲醇-0．05mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液=20：80（v／v）,流速为0．8mL·min^-1,进样量为20μl,柱温30℃,紫外检测波长236nm,灵敏度AUFs=0．02,以峰面积、内标法定量。结果本法在万古霉素浓度（X）为5．0～80mg·L^-1间呈良好线性关系,相关系数r=0．9985（n=5）,血浆最低检测浓度为2．5mg·L^-1（S／N≥3）,日内、日间RSD〈10％,稳定性考察RSD〈10％。结论此法采血量少,快速简便、灵敏度和准确度高,适合临床常规血药浓度监测及实验课题研究。     

HPLC法检测万古霉素血药浓度

目的利用单因素实验法建立和优化临床万古霉素HPLC分析方法,为临床监测万古霉素血药浓度、调整万古霉素临床给药剂量和个体化差异给药提供定量分析方法。方法比较国内外已报道的万古霉素HPLC测定方法,利用本院WA—TERS液相系统进行方法验证,以40％的硫酸锌沉淀处理血液标本,最终选择Waters0DS2（250mm×4．6mm,5ttm）色谱柱为分析柱。实验设计通过梯度改变柱温、pH、流动相的组成比例,验证每种条件对实验结果的容量因子（K）,拖尾因子（T）,分离度（R）的影响,最终得到最佳色谱条件为流动相0．05mol·L-1 KH2P04缓冲溶液（用磷酸调pH至2．85）-乙腈-甲醇（91．5：8：0．5）,紫外检测波长为200nm,流速为1mL·min-1,柱温30℃,进样量为20止。结果万古霉素的最低检测质量浓度为O．05mg·L-1,在0．1～64．0mg·L。时线性较好（r=0．9992）,相对回收率为97．5％～100．1％,日内、日问RSD均〈2％,R为2．1。结论该方法灵敏,快速,简便,特异性且稳定可靠,适用于临床万古霉素血药浓度的监测及临床药学的研究。     

微生物法测定血浆中万古霉素血药浓度的研究

目的:探讨血浆中万古霉素浓度的微生物测定方法.方法:采用微生物测定法,测定万古霉素血药浓度,枯草芽胞杆菌作为试验菌.结果:万古霉素在1.0～60.0 μg·ml-1范围内,线性关系良好(r=0.9992);日内、日间相对标准误差在3.3%～4.3%.结论:用微生物法测定万古霉素血药浓度,简便、准确,可用于临床治疗药物浓度监测.     

HPLC法测定万古霉素血药浓度

目的 利用高效液相色谱法(HPLC),旨在建立一种快速、方便、准确的人血浆中万古霉素的浓度测定方法 .方法内标物:去甲万古霉素;色谱柱:Axxlaim?PolarAdvantageⅡ-C18(4.6×250mm,5μm);流动相为甲醇:磷酸二氢钾(pH 3.1)=19:81;检测波长:281nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL;血浆样品采用10%(w/v)的硫酸锌直接沉淀蛋白后进样检测.结果 万古霉素在1.5~150μg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.0136X-0.009(R2=0.9989).日内精密度在0.08%~1.29%之间,日间精密度在1.28%~3.56%之间,样品稳定性符合方法学要求.结论 本方法操作简便、线性范围广、结果准确,可用于临床监测万古霉素血药浓度.     

万古霉素的血药浓度监测

万古霉素是糖肽类窄谱抗生素,对多数革兰阳性菌包括球菌和杆菌具有杀灭作用。盐酸万古霉素静脉滴注适用于葡萄球菌属（包括甲氧西林耐药菌株和多重耐药菌株）所致心内膜炎、骨髓炎、肺炎、败血症或软组织感染等。其不良反应有听力减退、耳鸣或耳部饱满感（耳毒性）、血尿、呼吸困难、嗜睡、尿量或排尿数显著增多或减少、食欲减退、恶心或呕吐、异常口渴、软弱（肾毒性）以及“红颈综合征”等。     

互为内标法测定去甲万古霉素与万古霉素的血药浓度

目的:建立人血清中去甲万古霉素与万古霉素HPLC测定法.方法:血样处理采用10%三氯醋酸沉淀法,色谱分析采用Agilent C18分析柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(8:1:91,pH 3.2),紫外检测波长236 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,去甲万古霉素和万古霉素互为内标.结果:去甲万古霉素和万古霉素的线性范围均为1～80 mg·L-1;平均回收率分别为100.6%和100.8%;日内、日间RSD均＜5%.结论:此法具有采血量少,检测快速、稳定、灵敏度高而成本低等特点,适合临床常规血药浓度的监测.     

HPLC法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的 建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法,便于指导临床血药浓度的监测.方法 色谱柱为symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈(85∶10∶5);流速为1.0mL·min-1;检测波长为236nm,柱温为35℃,采用乙腈-6%高氯酸=1∶6的沉淀剂处理后进样,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为6.065min和4.958min;标准曲线回归方程分别为Y=28.34X+0.33,r=0.9998(n=3),Y=91.41X-0.24,r=0.9992(n=3),线性关系良好;方法回收率均＞95%,绝对回收率均＞95%,日内RSD均＜4.0%.结论 本测定方法快速、准确、简便,为万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度监测提供依据.     

HPLC和微生物法测定万古霉素的血药浓度

目的 比较HPLC和微生物法测定万古霉素血药浓度的差异。方法 30名病人静脉滴注万古霉素1.0 g,1次·d^-1,分别用HPLC和微生物法测定用药前后的血药浓度。结果 HPLC法在5.0～80 μg·mL^-1浓度内线性关系良好,回收率97.3%～101.6%,日内、日间RSD分别为1.74%～4.06%和1.22%～4.21%;微生物法线性范围在5.0～60 μg·mL^-1,回收率：98.2%～100.8%,日内、日间RSD分别为4.22%～5.51%和4.59%～6.49%。结论 2种测定方法回收率和精密度均符合要求,测得的血药浓度无显著性差异。     

高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度

目的：建立人血浆中万古霉素ＨＰＬＣ测定法,为临床测血药浓度以调整万古霉素剂量提供方法学基础。方法：采用液－液萃取作提取法,并选用去甲万古霉素为内标,色谱条件：ＹＷＧ－ＲＰ１８分析柱,流动相为乙腈－０．０５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（８：９２）,紫外２３６ｎｍ检测。结果：本法在１．０５～８４μｇ／ｍｌ间线必耵关系数Ｒ＝０．０９９８（Ｎ＝５）,日内、日间精密度ＲＳＤ均〈１％。绝对回收率均〉７０％,结论：本     

反相高效液相色谱法检测人血浆中的劳拉西泮

目的建立检测人血浆中劳拉西泮浓度的高效液相色谱方法.方法血浆经乙醚萃取浓缩,以ZORBAx Eclipse XDB-C8(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;以乙腈-水(38.8:61.2)为流动相,流速为1.0mL·min-1;以紫外230nm为检测波长.结後果劳拉西泮浓度在5.00～150.00μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测限为2.50μg·L-1;平均回收率为(99.08±6.86)%,日内、日间RSD分别为(5.40±3.32)%和(7.35±3.13)%.内标物地西泮的绝对回收率为(78.87±4.29)%;峰面积变异为5.48%.结论方法简便、快速、准确可靠,适用于劳拉西泮血浓度的测定和药代动力学研究.     

血浆和腹膜透析液中万古霉素浓度的测定及在腹膜透析相关性腹膜炎患者中的应用

目的:建立测定血浆和腹膜透析液中万古霉素浓度的HPLC法,为腹膜透析相关性腹膜炎患者的药物浓度监测提供参考.方法:采用 Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇∶ 乙腈∶ 0.05 mol/L KH2PO4 = 11 ∶2 ∶ 87为流动相,检测波长236 nm,柱温...     

高效液相色谱法和荧光偏振免疫法测定万古霉素血清浓度的比较

目的:比较高效液相色谱(HPLC)法与荧光偏振免疫(FPIA)法分别测定血清万古霉素浓度的结果,探讨两者的相关性。方法:收集临床检测万古霉素药物浓度的血清43份,分别用HPLC法和FPIA法进行测定,运用配对t检验,Bland-Altman分析和线性回归分析比较2种方法的测定结果。结果:HPLC法和FPIA法测定的万古霉素血清浓度具有良好的相关性, 回归方程为:Y_FPIA=1.103X_HPLC+0.831 5(R²=0.957 2); Bland-Altman评价分析2种方法一致性较好;配对t检验显示2种方法测定结果之间有显著统计学差异(P<0.000 1)。结论:相较于FPIA法,HPLC法测定不受代谢和降解产物干扰,能准确检测血清万古霉素浓度,适合应用于治疗药物监测。     

反相高效液相色谱法快速测定去甲万古霉素血药浓度

目的 :建立去甲万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱测定法。方法 :血样处理采用 Zn SO4 沉淀法 ,色谱分析采用 Diam onsil TM(钻石 ) C1 8色谱分析柱 ,流动相为甲醇 -磷酸二氢钾缓冲液 (p H 3.2 ) =2 4∶ 76 ,紫外检测波长 2 36 nm ,灵敏度为0 .0 15 AUFs,实验数据用 Gilson715液相色谱工作站处理 ,以峰面积、外标法定量。结果 :本法在万古霉素浓度 (x)为 0 .5～6 0 μg/ ml间呈良好线性关系 ,相关系数 r=0 .9998(n=6 ) ,血浆最低检测浓度为 0 .2 μg/ m l(S/ N≥ 2 ) ,日内、日间 RSD均 <6 %。结论 :此法采血量少、快速简便、灵敏度和准确度高 ,适合临床常规血药浓度监测及实验课题研究。     

用HPLC法测定人血浆中两种10-羟喜树碱含量

目的:建立同时测定人血浆中羟喜树碱(HCPT)两种活性成分羧酸型羟喜树碱(C-HCPT)和内酯型羟喜树碱(L-HCPT)含量的HPLC法,并且考察HCPT的稳定性。方法:采用HPLC-荧光法,检测器激发波长为363 nm,发射波长为530 nm。色谱柱为Lichrospher C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.075 mol/L乙酸铵缓冲液(32∶68,pH6.4),流速1.0 mL/min,内标法计算药物浓度。结果:人血浆样品中C-HCPT和L-HCPT峰分离良好,最低检测浓度均为5 ng/mL。L-HCPT在16.99~2 175.00 ng/mL,C-HCPT在14.94~1 912.50 ng/mL浓度范围内线性关系良好。C-HCPT和L-HCPT的相对回收率分别为96.79%~119.64%和100.23%~112.93%,日内和日间RSD均<10%。经1 mol/L盐酸溶液处理后,93.34%~97.18%的C-HCPT转化为L-HCPT。样品于-20℃保存28 d基本稳定。结论:本方法专属性强,灵敏、可靠,适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的监测和体内药动学研究。     

血浆中阿克他利的高效液相色谱检测法

目的建立血浆中阿克他利(Actarit,Acta)的高效液相色谱检测法.方法采用高效液相色谱联用紫外检测器,检测血浆中阿克他利.结果血浆中阿克他利最低检测浓度0.098 mg·L-1,检测限4.9 ng,Acta在0.098～12.5 mg·L-1之间呈线性关系,回归方程y=32315.5X-100.9(r=0.9994,P＜0.05),回收率在86.79%～90.7%,日间、日内变系数均在7.29%以下,符合生物样品分析要求.结论能够利用该方法进行阿克他利的人体药代动力学试验和相对生物利用度的研究.     

固相萃取—高效液相色谱法测定人血浆中对乙酰氨基酚

目的 :建立一快速、灵敏的对乙酰氨基酚 (PAC)体内浓度的测定方法 ,并用于其生物利用度的研究。方法 :以茶碱为内标 ,采用固相萃取的 HPL C分析法 ,取样 0 .2 m l。YWG- C1 8色谱柱 ,流动相为甲醇 /乙腈 /水 (2 5 /15 /36 0 ,V/V) ,流速 1.0 ml/min,检测波长 2 5 4nm。结果 :PAC的最低检测浓度为 0 .0 5︼g/m l。线性范围 0 .2 0～ 15 .0︼g/ml。平均批内、批间 RSD均 <6 % ,方法回收率接近 10 0 % ,RSD<5 %。结论 :本方法快速灵敏、干扰少、重现性好 ,符合 PAC生物利用度研究的要求。