不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相关性研究探讨

目的:分析与探讨不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相互关系。方法:精子DNA完整性的检验选用精子染色质扩散实验(sperm chromatin dispersion,SCD),以精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)表示。将符合条件的65例男性患者作为实验组,随机选取配偶有正常妊娠史且无流产史的65例男性患者作为对照组,并分别测定两组男性精液相关参数和精子DFI。结果:实验组与对照组比较,在年龄、禁欲时间、精液量、精子活率、精子密度差异无统计学意义(P0.05)。实验组的DFI为(40.89±14.50),对照组的DFI为(22.89±6.94),差异具有统计学意义(P0.01)。结论:不明原因复发性流产与精子DNA损伤存在一定的关系。     

精子核成熟度与早期不明原因复发性流产的相关性研究

目的:探讨精子核成熟度与早期不明原因复发性流产的相关性。方法:收集配偶具有早期不明原因复发性流产史的患者50例为URM组,正常生育的男性30例为对照组,通过计算机辅助精液分析仪检测精子的浓度和活动力等,精子染色质扩散实验检测精子DNA完整性,苯胺蓝染色法检测精子核蛋白组型转换,分别比较两组精子DNA完整性、精子核蛋白组型转换率和精液参数的差异。结果:URM组与对照组之间精液量(3.23±1.13 vs 3.37±1.23)mL、精子浓度(29.33±3.76 vs 31.16±4.29)×10~6/mL的比较差异没有统计学意义(P0.05);精子前向运动(35.19±7.26 vs 50.12±10.84)%、精子正常形态(2.07±2.94 vs 8.69±4.13)%、精子DNA碎片率(39.28±15.95 vs 23.16±15.17)%及精子核蛋白组型转换率(41.99±8.63 vs 18.81±7.53)%比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:早期不明原因复发性流产可能与精子核成熟度异常有关,建议RSA患者常规检测夫精精子核成熟度。     

高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性分析

目的:探讨高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性分析。方法:选取2014年1月至2016年6月于我院接受治疗的27例不明原因复发性流产夫妇(女方不明原因自然流产≥2次)高龄男性为观察组研究对象,另选取同时期于我院进行生殖健康体检的138例高龄男性为对照组研究对象,对其进行精液检测。比较两组患者的精液,并分析高龄男性精子质量与不明原因复发性流产相关性。结果:两组在精液量、精子p H值上不存在明显差异,而观察组在精子密度、精子存活率、精子活力包括a级、b级百分率上明显低于对照组(P<0.05)。精子密度、精子存活率、精子活力与不明原因复发性流产有关。结论:精子密度、精子存活率、精子活力等高龄男性精子质量因素与不明原因复发性流产有关。     

从免疫细胞的变化探讨不明原因复发性流产的病因和治疗

不明原因复发性流产作为生殖医学领域的疑难病症,其发病率一直呈现上升趋势。因其原因不明、机制不定,治疗便无从下手。目前国内外对其研究主要围绕免疫因素,而免疫细胞作为较直观的载体,有望通过检测其变化为明确不明原因复发性流产的病因和治疗提供方向。通过免疫球蛋白、间充质干细胞(MSCs)、免疫抑制剂等治疗后,不明原因复发性流产患者的高自然杀伤细胞(NK)及其被激活的细胞毒性、高辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17、调节性T细胞(Tregs)数量和功能的损伤或缺失、高巨噬细胞(M)1/M2、树突状细胞(DCs)功能和分化异常等情况分别得到改善。此外,食用禁忌保护特定母体人类主要组织相容性复合体(MHC)产生的调节性T细胞(Tr)和效应T细胞(Te),在新生儿刚出生后的关键时期建立有效的T细胞平衡;对母体补充醋酸盐的摄入,减少致肥饮食摄入、升高母乳miR103-3p水平,管理体重,能分别改善后代和母体上述免疫细胞的失衡。两者联合可作为免疫细胞平衡可持续发展的研究导向。     

基于GEO数据库筛选不明原因复发性流产的枢纽基因及信号通路

目的 利用生物信息学方法筛选不明原因复发性流产(URSA)相关差异表达基因(DEGs)及信号通路,以期为URSA的诊断和治疗提供新思路。方法 从GEO数据库中筛选数据集,利用R软件DESeq 2包筛选DEGs,应用DAVID数据库对DEGs进行GO和KEGG分析,通过STRING数据库构建DEGs的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,再通过Cytoscape软件筛选出URSA的最显著模块及枢纽(Hub)基因,并对其进行可视化处理。采用GSE26787数据集验证Hub基因的差异表达。结果 经筛选共得到432个DEGs,其中121个DEGs上调,311个DEGs下调。GO富集分析显示,DEGs参与细胞分裂、有丝分裂核分裂、姐妹染色单体的凝聚力和信号转导等生物过程(BP);细胞成分(CC)位于纺锤体、染色体着丝粒点、纺锤体两极、中体;分子功能(MF)与蛋白结合、微管结合、受体活性等相关;KEGG富集分析表明,DEGs富集于自然杀伤(NK)细胞介导的细胞毒性、细胞周期、p53信号通路、抗原加工和呈递、精氨酸和脯氨酸代谢通路。通过PPI网络筛选得到与URSA密切相关的5个Hub基因,分别为CC...     

IL-2、IL-2Rα及IFN-γ SNPs与原因不明复发性流产的相关性研究

目的探讨白细胞介素-2基因(IL-2)、白细胞介素-2受体α基因(IL-2Rα)及γ干扰素基因(IFN-γ)单核苷酸多态性(SNPs)与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法采用病例对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对中国浙江地区145例URSA患者(观察组)及150例健康人(对照组)IL-2(rs6822844)G/T、IL-2Rα(rs2104286)A/G及IFN-γ(rs2430561)T/A进行分析。结果①URSA组IL-2Rα(rs2104286)AA基因型及A等位基因频率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。且A等位基因携带者URSA患病风险是G等位基因携带者的2倍(OR=2.11,95%CI=1.34-3.33,P=0.001),AA基因型较AG+GG基因型URSA患病风险增加约1倍(OR=2.32,95%CI=1.39-3.88,P=0.001);②URSA组及对照组IL-2 (rs6822844) GG基因型频率均为100%,差异无统计学意义(P0.05);③URSA组及对照组IFN-γ(rs2430561)位点均存在SNPs分布,但两组等位基因及基因型频率差异均无统计学意义(均P0.05)。结论 IL-2Rα(rs2104286)与浙江地区URSA相关,且A等位基因是本地区URSA的遗传易感基因;IL-2 (rs6822844)和IFN-γ(rs2430561) SNPs与浙江地区URSA无关。     

精子DNA碎片率对女性复发性自然流产的影响

目的:探讨精子DNA碎片率与女性复发性自然流产的关系。方法:收集2013年6月至2013年12月在本中心就诊的发生过2次或2次以上自然流产的患者。将此配偶有不明原因复发性流产史的80例作为实验组;另外选择配偶无流产史的80例作为对照组。分别测定两组男方精子DAN碎片率。结果:实验组精子DNA碎片检出阳性32例,对照组精子DNA碎片检出阳性12例,有统计学差异(P0.05)。结论:复发性自然流产组精子DNA碎片率阳性检出率显著高于对照组,提示精子DNA碎片率较高可能跟早期复发性自然流产有关。     

淋巴细胞主动免疫疗法在不明原因复发性流产患者中的应用

目的:探讨淋巴细胞主动免疫疗法治疗不明原因复发性流产患者的疗效。方法:在2012年1月至2013年12月期间对不明原因复发性流产的患者用ELISA法查封闭抗体,将封闭抗体检测结果为阴性的患者随机分成非免疫治疗组和免疫治疗组,随访两组患者至孕满28周经产前筛查无异常作为保胎成功的标准。结果:共有610例复发性流产患者进行了封闭抗体检测,有451例为阴性,阴性率为74%;自愿接受治疗且资料完整的患者有320例,其中非免疫治疗组130例,免疫治疗组190例,保胎成功率分别为71%和83%,两组差异有统计学意义(P0.01),因胎儿异常需终止妊娠的发生率分别为3.8%和3.7%,两组差异无统计学意义(P0.05)。结论:封闭抗体缺乏可能是不明原因复发性流产的一个潜在因素,淋巴细胞主动免疫疗法是针对不明原因复发性流产的一种有效安全的保胎方法。     

外周血及蜕膜组织中CD4~+ CD25~+调节性T细胞比例和炎症因子原因不明复发性流产的关系研究

目的:探究外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例以及相关炎症因子对原因不明复发性流产的影响。方法:选取2014年5月至2015年5月就诊于我院门诊的原因不明复发性流产(URSA)患者90例为观察组,并选取同期在妇产科门诊手术室的行人工流产手术的正常患者90例为对照组;分析两组患者的一般资料、外周血及蜕膜组织中CD4~+CD25~+调节性T细胞比例、调节性T细胞特异调节因子Foxp3和EBi3的表达以及血清炎症因子(包括TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10)水平,研究其相关性。结果:与正常妊娠组相比,反复流产组外周血及蜕膜组织中Treg细胞比例明显降低,Foxp3和EBi3因子mRNA的表达水平明显降低,且无论URSA患者或者是正常对照组,蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达,外周血TNF-α、IL-2水平明显升高,而IL-6和IL-10水平要明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蜕膜中各因子的表达均高于外周血中的表达提示妊娠过程的主要免疫反应部位是"母-胎界面",Treg细胞比例、Treg细胞因子和Th2型因子IL-6、IL-10水平可能参与妊娠的维持,调控"母-胎界面"局部免疫耐受。对于复发性流产的发病过程具有一定的影响作用。     

高原地区淋巴细胞主动免疫治疗原因不明习惯性流产120例临床观察

目的：探讨淋巴细胞主动免疫治疗高原地区原因不明习惯性流产患者的临床疗效。方法：选择120例接受淋巴细胞主动免疫治疗原因不明习惯性流产患者为研究对象,对所有病例进行封闭抗体检测,并分离患者丈夫淋巴细胞,采用前臂皮下注射的方式进行封闭抗体治疗。结果：接受治疗后,120例患者中有103例封闭抗体转为阳性,转阳率为85.8%。阳性妊娠成功88例,成功率85.4%,仍有17例患者为阴性,其中仅5例妊娠成功,成功率29.4%,两组比较差异具有统计学意义（χ^2=6.63,P〈0.05）。全部病例中,有93例妊娠成功,成功率为77.5%。结论：针对高原地区原因不明习惯性流产患者,淋巴细胞免疫治疗的方法简单、廉价、可靠,能取得较高的妊娠成功率,患者容易接受,具有较高的临床应用价值。     

静脉滴注丙种球蛋白联合低分子肝素联合治疗42例复发性流产临床疗效观察

目的：探讨静脉滴注丙种球蛋白联合低分子肝素对于复发性流产孕妇的临床疗效及安全性。方法：将本院收治的84例抗心磷脂抗体（ACA）阳性的复发性流产患者随机分为实验组和对照组,实验组患者给予静脉滴注丙种球蛋白联合低分子肝素治疗,对照组患者给予黄体酮联合HCG的传统保胎治疗,比较两组患者保胎成功率及不良反应的发生情况。结果：实验组保胎成功率81．0％,对照组保胎成功率31．0％,实验组保胎成功率显著高于对照组（P〈0．05）。两组患者均无严重不良反应发生。结论：对于ACA阳性的复发性流产患者,静脉滴注丙种球蛋白联合低分子肝素疗效显著且安全性高,值得临床推广应用。     

精子DNA碎片指数与精液参数的相关性研究

目的：探讨男性精子DNA碎片与精液常规参数及精子顶体酶活性之间的关系。方法：收集生殖中心门诊553例男性患者精液标本,采用改良精子染色质扩散实验（SCD）检测精子DNA碎片指数（DFI）,按精子DFI结果分为DFI〈15%（I组）、15%≤DFI〈25%（II组）、DFI≥25%（III组）,同时检测精子密度、总数、（a＋b）级精子百分率、畸形率及顶体酶活性,对DFI与精液各项参数的相关性进行分析。结果：精子密度及精子总数与DFI无显著相关性;前向运动精子百分率随DFI升高逐渐降低,III组与I组间存在显著性差异;精子正常形态率随DFI的增加有下降的趋势,但是差异不显著;精子顶体酶活性随DFI升高而降低,组间均有显著性差异。结论：精子DNA碎片指数与前向精子百分率及精子顶体酶活性呈负相关。因此DFI可作为评估精子功能的一个较好的参考指标。     

不育男性禁欲时间对精子核损伤和精液基本参数的影响

目的探讨不育男性禁欲时间对精子核损伤和精液基本参数的影响。方法选取2018年1月至12月宁波市妇女儿童医院生殖中心诊治的3 702名男性不育症患者为研究对象,按照禁欲时间长短将其分成3组,A组<2天,403例;B组2~7天(WHO推荐组;包含7天),2 953例;C组>7天,346例。采用精子染色质结构分析试验(SCSA)对样本分别计算DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)和高DNA可染性(HDS),并进行精液常规参数分析,了解禁欲时间长短与核损伤程度和精液基本参数的相关性。结果三组患者射精量、精子总数、精子浓度、活动精子百分率、不动精子百分率、精子DFI指数比较,其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。禁欲时间与射精量、精子总数、浓度、不动精子百分率、精子DFI指数呈正相关(r值分别为0.276,0.234,0.111,0.089,0.187),与活动精子百分率、精子HDS值呈负相关(r值分别为-0.089,-0.067)。结论随着禁欲时间的延长,可能导致精液射精量、浓度、总数、不动精子百分率、DFI指数上升,HDS下降;禁欲时间长短与精液质量有一定相关性,合理的禁欲时间有助于优化精子质量从而提高受孕机率。     

不育症患者性激素水平与精子DNA完整性相关性研究

目的:研究男性不育症患者性激素中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(TTE)水平与精子DNA完整性之间的相关性。方法:选取该院收治男性不育症患者75例作为研究对象,测定血清性激素中FSH,LH,TTE的含量,进行分组分析,并行精子DNA碎片率检测(DFI),分析三种性激素水平与精子DFI之间相关性。结果:对男性不育症患者血清中FSH、LH、TTE三种性激素进行Spearman相关分析可知,患者血清FSH水平与LH水平呈正相关(r=0.510,P0.001);多元线性回归分析显示,FSH、LH及TTE与DFI呈负相关(R~2=0.899,F=132.898,P0.001)。结论:血清性激素FSH、LH与TTE水平较低可能导致精子DNA损伤程度增加,对男性不育症的诊治有一定指导意义。     

生殖激素与男性不育症患者精子形态的相关性分析

目的：研究生殖激素与男性不育症患者精子形态,探讨两者的相关性。方法：对象为2008年8月至2012年我院600例男性不育症患者,根据正常形态精子所占比例大小分为三个组,每组200例。结果：三组患者血清游离睾酮（free testosteron,FT）水平与生物活性睾酮（bioavailable testosterone,Bio-T）水平,均只有在第1组与第3组之间存在统计学的差异。另外,血清FT、Bio-T水平与正常形态精子百分率之间均存在正相关（P〈0.05）。结论：男性不育症患者血清FT和Bio-T水平越高,则正常形态精子百分率越高,提示生殖激素与男性不育症患者精子形态存在着相关性。     

130例颜面再发性皮炎变应原点刺试验结果分析

目的探讨气传变应原在颜面再发性皮炎的作用。方法对130例颜面再发性皮炎患者进行常见气传变应原的皮肤点刺试验(SPT),并分析其与发病的相关性。结果 130例颜面再发性皮炎患者中,对1种或1种以上变应原反应阳性有104例,总阳性率为80.00%;SPT反应程度为(+++)及以上的变应原主要是屋尘螨(30.00%)、粉尘螨(19.12%)、蟑螂(11.49%)。结论重庆地区颜面再发性皮炎患者存在对一种或多种气传变应原的致敏,与临床疾病相关性较大的变应原主要是螨类和春季花粉;对此类患者进行常见吸入性变应原的检测可协助找出该病的诱发因素,为疾病的预防和治疗提供依据。     

复发性阴道念珠菌病念珠菌的菌种及药敏分析

目的：了解复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)临床分离菌株及其对几种常见抗真菌药物的敏感性：方法：分别采用念珠菌显色培养基和ROSCO纸片扩散法进行RVVC念珠菌菌种鉴定和药敏试验。结果：62株阳性标本中,分离出白念珠菌47株(75．81％),热带念珠菌4株(6．45％),光滑念珠菌2株(3．23％),克柔念珠菌5株(8．06％),其他念珠菌4株(6．45％)．62株念珠菌对4种常用的抗真菌药物,即两性霉素B、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为：100．00％(62／62)、88．71％(55／62)、96．77％(60／62)、95．16％(59／62)。结论：RVVC的主要致病菌仍是白念珠菌,但非白念珠菌所占比例呈上升趋势：RVVC分离菌株对咪唑类抗真菌药物仍有较高的敏感率。