阿托伐他汀对百草枯中毒损伤肺组织MMP-9及TIMP-1表达的调控

目的 研究阿托伐他汀对大鼠百草枯中毒所致肺损伤的保护作用及其对基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)的影响。 方法 取45只雄性Wister大鼠,随机数字表法分为对照组、染毒组、治疗组,每组各15只。染毒组及治疗组均以百草枯50 mg/kg灌胃建立大鼠肺纤维化模型;治疗组每日给予阿托伐他汀20 mg/kg。分组后分别于灌胃7、14、28 d后观察大鼠一般情况并解剖,取肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,光镜观察。用免疫组化、RT-PCR、Western-blot等方法检测肺组织中MMP-9及TIMP-1水平。用RT-PCR法检测肺组织成纤维细胞中MMP-9及TIMP-1水平。用ELISA法检测血清中MMP-9及TIMP-1水平。 结果 HE染色结果显示,染毒组有明显的肺损伤,治疗组肺损伤较染毒组减轻。治疗组肺组织中MMP-9、TIMP-1表达量高于正常对照组,但低于染毒组。染毒组动物血清中的MMP-9的浓度在肺泡炎症阶段(7 d)最高,14 d、28 d后呈下降趋势,但均高于治疗组。治疗组血清中的MMP-9的浓度低于染毒组,但差异无统计学意义(P>0.05),相同时段三组TIMP-1浓度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。各组动物肺组织成纤维细胞中,治疗组表达量低于染毒组,高于对照组。 结论 阿托伐他汀具有抑制百草枯中毒大鼠肺内MMP-9、TIMP-1的表达上调的作用。阿托伐他汀对血液中系统分泌的MMP-9、TIMP-1的浓度无显著影响。     

百草枯中毒致大鼠肺纤维化模型中肺组织的胎盘生长因子表达

目的观察在百草枯（PQ）致大鼠肺纤维化模型中肺组织胎盘生长因子（PLGF）的变化。方法将42只健康成年雌性SD大鼠随机分为对照组和染毒组，每组21只，分别观察7、14和28d。染毒组于实验开始一次性灌胃染毒PQ（40mg／kg），对照组予以等量的生理盐水。取肺组织行半定量的病理组织学检查、羟脯氨酸测定，并利用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化方法测定PLGFmRNA和蛋白表达。结果PQ染毒后大鼠肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高，肺组织羟脯氮酸含量明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈O．01）。7、14、28d时肺组织PLGFmRNA表达分别1．28±0．29、0．80±0．07、0．65±0．13，均高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫组化阳性指数在3个时点分别为2．27±0．34、1．78±0．41、1．25±0．69，明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论PQ中毒大鼠肺组织PLGFmRNA和蛋白水平的表达明显上调。     

百草枯致肺纤维化机制的研究进展

百草枯是一种高效能除草剂。在我国,口服大量百草枯造成的急性中毒死亡事件屡见不鲜。百草枯对全身多器官均可产生毒性,肺组织是最重要的靶器官之一。在各种肺组织损伤中又以肺纤维化损伤最为突出。该文就近年来关于百草枯所致肺纤维化发生机制的研究进展进行综述。     

PDTC对百草枯致肺损伤大鼠TGF-β1及MMP-2和TIMP-1表达的影响

目的 探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine Dithiocarbamate,PDTC)对百草枯(paraquat,PQ)致肺损伤大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)表达的影响.方法 54只SD大鼠随机分为对照组(生理盐水组)、单纯染毒组(4个组)和干预组(4个组).除对照组外,各组均一次性灌胃PQ40mg/kg染毒,PDTC干预组在PQ染毒后立即一次性腹腔注射PDTC 120 mg/kg.在染毒后3、7、14、21 d各取1组动物,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及荧光定量PCR法检测肺组织中TGF-β1、MMP-2和TIMP-1基因的表达,并观察肺组织病理改变.结果 与对照组相比.染毒组大鼠血浆TGF-β1蛋白、肺组织TGF-β1、MMP-2mRNA表达随时问延长呈现先升高后降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),TIMP-1表达持续增高,差异有统计学意义(P<0.01).PDTC干预组3、14 d TGF-β1mRNA表达分别为0.54±0.08、0.72±0.04,7、14 dMMP-2 mRNA表达分别为1.62±0.50、1.97±0.34,7、21 d TIMP.1 mRNA表达分别为1.79±0.21、2.00±0.34,与单纯染毒组相比,均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 PDTC对肺损伤大鼠不同时期肺组织中TGF-β1、MMP-2及TIMP-1的mRNA表达均有一定的下调作用,可能是通过减轻中毒早期炎症的损伤、调整MMPs/TIMPs间的平衡,从而延缓肺纤维化的进程.     

PDTC对百草枯致肺纤维化大鼠结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的动态变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,探讨PQ致肺纤维化机制及PDTC干预作用.方法 SD大鼠随机分为对照组(6只)、PQ染毒组(56只)、PDTC干预组(46只).染毒组和干预组给予PQ(80 mg/kg)一次性灌胃后2h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC(100mg/kg)一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.于不同处理后1、3、7、14、25、56 d蛋白免疫印迹法(Western blot)测定大鼠肺组织CTGF蛋白表达;实时荧光定量多聚酶链式反应(real-time PCR)测定CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达水平;同时测定肺组织羟脯氨酸(hyp)含量,观察中毒大鼠的肺组织病理变化.结果 染毒组大鼠肺组织CTGF蛋白表达随时间延长而逐渐升高,3～14d升高幅度缓慢,28～56d增幅较大,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).染毒组大鼠肺组织CTGF mRNA表达水平于染毒后1d即明显升高,3～14d表达迅速升高,28～56 d维持在较高水平,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).染毒组染毒后1、3 d Col Ⅰ mRNA表达无明显变化,7d表达略微增强,14～56 d水平大幅度升高,与对照组比较,7～56 d mRNA水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);染毒组ColⅢmRNA水平于染毒后1d即开始升高,7d达到高峰,之后呈下降趋势,各时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);Masson染色可见染毒后14～28 d成纤维细胞大量增殖,胶原纤维数量逐渐增多.与染毒组比较,PDTC干预组大鼠肺组织CTGF蛋白表达降低、CTGF、Col Ⅰ、ColⅢmRNA表达下调,相应时点的差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 CTGF表达持续增高;可能通过上调Col Ⅰ、ColⅢ转录水平,增加胶原分泌和基质合成,在PQ所致肺纤维化中起重要作用;PDTC抑制了上述因子的表达,可以减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

急性百草枯中毒大鼠肺组织中MMP-2和 MMP-9表达的变化研究

[目的]观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶（MMP-2和MMP-9）的表达变化,探讨其在百草枯中毒致肺纤维化中的表达及意义。[方法]SD大鼠50只,随机分为染毒组和对照组,染毒组用PQ按50mg/kg灌胃染毒,对照组代以等剂量生理盐水灌胃。灌胃后1,3,7,14和28d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法,观察其MMP-2,MMP-9蛋白及其 mRNA的动态变化。[结果]①PQ灌胃后1d成纤维细胞MMP-2表达增高,7d达高峰,为对照组的3.187倍（t=23.667,P﹤0.001）;MMP-9在PQ灌胃作用后1d表达增高,7d达对照组的3.503倍（t=11.399,P﹤0.001）;②MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的转录从PQ灌胃后1d就开始升高。[结论]PQ灌胃后,肺间质成纤维细胞上调MMP-2和MMP-9的表达,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维化的发生。     

结缔组织生长因子及α平滑肌肌动蛋白在百草枯致大鼠肺纤维化中的作用

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平的变化,探讨PQ致肺纤维化的机制.方法 SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)和染毒组(PQ).染毒组给予生理盐水稀释的PQ(80 mg/kg)一次性灌胃,对照组给予生理盐水1ml/kg一次性灌胃.于不同处理后1、3、7、14、28、56 d分别以免疫组化(SABC)法检测大鼠肺组织中CTGF及α-SMA的表达强度和定位;免疫印迹(Western blot)法检测肺组织中CTGF及α-SMA蛋白的表达水平;初步分析两者表达的相关性及其表达与肺组织纤维化指标的相关性;同时观察中毒大鼠的肺组织病理变化.结果 与对照组比较,免疫组化和Western blot法检测染毒后大鼠肺组织中CTGF、α-SMA的表达变化规律较为一致,均随时间延长而逐渐升高,3、7 d时升高幅度缓慢,14～56d时增幅较大,各时段均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).CTGF与α-SMA、病理评分及羟脯氨酸含量均呈正相关(r=0.74,r=0.87,r=0.71,P＜0.05或P＜0.01).病理学Masson染色可见大鼠肺组织中14～28 d时成纤维细胞大量增殖,胶原纤维数量逐渐增多.结论 在染毒大鼠肺组织中CTGF及α-SMA的表达持续增高;CTGF可能通过促使肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,增加胶原分泌和基质合成,在PQ所致肺纤维化的发生发展中起重要作用.     

阿托伐他汀对急性心肌梗死患者MMP-2、MMP-9的影响

目的阿托伐他汀对急性心肌梗死患者血清MMP-2、MMP-9的作用及意义。方法选择诊断为急性心肌梗死患者86例,随机分为非阿托伐他汀组和阿托伐他汀组,均给予溶栓、氯吡格雷、消炎及抗氧化药物等标准治疗,实验组除标准治疗外,予以口服阿托伐他汀40 mg/d,检测两组治疗前及连续用药12 w后,患者MMP-2、MMP-9的变化。结果治疗后阿托伐他汀组MMP-2、MMP-9、TC、LDL-C变化明显(p<0.05)。结论阿托伐他汀对急性心肌梗死患者具有降脂及稳定冠脉斑块的作用,其可能机制是降低MMP-2、MMP-9的水平。     

缺氧诱导因子-1α与百草枯中毒致急性肺损伤早期肺纤维化的关系

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织急性肺损伤早期肺纤维化中的作用.方法 将48只健康SD大鼠随机分为对照组(6只)和PQ染毒组(42只).对照组大鼠予生理盐水1 ml,一次性灌胃;将质量分数为20％的PQ用生理盐水稀释,对染毒组大鼠一次性灌胃染毒1 ml(500 mg/kg),按灌胃后2、6、12、24、48、72及120 h分为7个亚组,每组6只.分别测定各组大鼠的动脉血氧分压(PaO2);进行肺组织HE染色、Mason染色,观察病理学变化;肺组织荧光染色观察肺组织变化及HIF1-a蛋白表达;用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测HIF-1α蛋白表达.结果 染毒72h组大鼠动脉血PaO2为(62.33±0.22) mm Hg,与对照组[(96.00±5.20) mm Hg]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).HE染色可见,染毒后2h大鼠肺泡毛细血管内皮细胞、肺泡上皮细胞和肺间质的急性弥漫性损害,广泛肺间质炎性细胞浸润,增厚;染毒后12h肺间质水肿减轻,肺泡间距变窄;染毒后120 h,肺泡结构紊乱,较多量片状分布瘢痕条索,成纤维细胞明显增多,外周炎症吸收.Masson染色可见,染毒后2h大鼠肺泡上皮出现明显胶原沉积;24、48 h蓝染的胶原纤维逐渐增加;染毒后120 h肺泡组织明显破坏,大片纤维结缔组织沉积.免疫荧光及Westem blot法均显示,染毒组大鼠染毒后2h肺组织中HIF1-a蛋白表达明显升高,至12h达峰值,24、48 h逐渐下降,但仍高于对照组,染毒组各时间点HIF-1α蛋白表达与对照组的差异有统计学意义(P＜0.05).染毒组各时间点HIF-1α蛋白表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PQ中毒大鼠肺组织早期即出现肺纤维化及HIF-1α蛋白的表达,HIF-1α可能参与了肺纤维化的形成.     

葛根素抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的实验研究

目的探讨葛根素对百草枯致肺纤维化的治疗作用。方法采用大鼠百草枯致肺纤维化模型,给予葛根素进行干预治疗,并于第3、7、14、28d测定血清中超氧化物歧化酶、丙二醛和肺组织中羟脯氨酸含量,观察组织病理学改变,对比分析各组动物肺细胞损伤及肺纤维化程度。结果葛根素能明显降低百草枯肺纤维化大鼠肺组织中羟脯氨酸和血清中丙二醛的含量,提高大鼠体内超氧化物歧化酶的活力;病理组织学观察表明,葛根素能明显改善实验性肺纤维化的程度.结论葛根素对百草枯诱导大鼠肺纤维化具有一定的拮抗作用。     

雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用及其机制。方法Wistar大鼠雌雄各半30只随机等分为三组:生理盐水对照组(N组6只)、百草枯组(B组12只)(灌胃)及雪莲组(T组12只)(胃中注入百草枯并给予雪莲腹腔注射)。采用HE染色观察肺纤维化的情况,碱水解法测羟脯氨酸含量,ELISA法检测肺组织匀浆中转化生长因子β1(TGF-β1)水平的变化。结果雪莲组与百草枯组比较,第28天肺纤维化减轻。百草枯组肺羟脯氨酸含量增高,雪莲组减少。雪莲组组织匀浆中TGF-β1水平于各时间点低于百草枯组。结论雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1水平有关。     

百草枯致小鼠肺纤维化作用的实验研究

目的探讨百草枯(PQ)对小鼠肺纤维化的作用机制。方法将8周龄健康清洁级雄性C57BL小鼠48只分为百草枯组和对照组(生理盐水),每组24只。百草枯组腹腔注射5mg/ml的百草枯(20mg/kg)连续3d。每天观察并记录各组小鼠的行为学改变。分别于染毒后第1、3、7天处死动物,取肺组织进行普通病理和免疫组化染色,统计肺组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)阳性细胞数。结果染毒后3d,百草枯组小鼠均出现不同程度的运动障碍、动作迟缓、震颤、竖毛和活动减少。光镜下观察,静脉瘀血、局部出血,中性粒细胞轻度增多,纤维母细胞增多,肺局部纤维组织增生;染毒后7d,出现慢性炎症、出血,局部区域可明显见纤维组织增生,间质增厚。百草枯组小鼠肺组织中MMP-2、MMP-9的表达均强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);且MMP-2、MMP-9的表达随着时间的延长而增强。结论百草枯可引起小鼠肺组织纤维化,MMP-2、MMP-9可能参与了百草枯致肺纤维化的过程。     

依达拉奉联合乌司他汀对百草枯中毒的疗效观察

目的：探讨依达拉奉联合乌司他丁对急性百草枯中毒的治疗效果。方法：选择本院收治的急性百草枯中毒患者55例为研究对象,按治疗方法分为常规治疗组24例（A组）和依达拉奉联合乌司他丁治疗组31例（B组）,A组采用常规治疗,B组在常规治疗组基础上加用依达拉奉和乌司他丁。比较两组患者发生肺纤维化、多器官功能障碍综合征（MODS）及病死率之间的差异。结果：与A组相比,B组肺纤维化、MODS的发生率及病死率均降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：依达拉奉联合乌司他丁治疗急性百草枯中毒能够有效改善脏器功能、降低肺纤维化及MODS的发生率,改善预后,降低病死率。     

前列地尔治疗急性百草枯中毒肺损伤的疗效分析

目的分析前列地尔治疗急性百草枯中毒(PQ)肺损伤的疗效。方法将30例百草枯中毒患者随机分组分为治疗组15例和对照组15例,所有患者均接受序贯性血液净化(血浆置换+血液灌流+血液透析)联合综合治疗。对照组静脉注射甲泼尼龙;治疗组在对照组治疗基础上加用前列地尔。结果对照组40%患者有效,治疗组75%患者有效,两组间有效比例差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后PaO2、PaCO2、PaO2/FiO2改善较对照组显著(P<0.05)。治疗组治疗后X线胸片提示肺损伤好转9例,显著多于对照组5例(P<0.05);死亡率两组无差异。结论前列地尔注射液可以显著改善动脉血气、呼吸参数,对急性PQ中毒肺损伤有积极的治疗作用。     

前列地尔治疗急性百草枯中毒肺损伤的疗效分析

目的分析前列地尔治疗急性百草枯中毒（PQ）肺损伤的疗效。方法将30例百草枯中毒患者随机分组分为治疗组15例和对照组15例,所有患者均接受序贯性血液净化（血浆置换＋血液灌流＋血液透析）联合综合治疗。对照组静脉注射甲泼尼龙;治疗组在对照组治疗基础上加用前列地尔。结果对照组40％患者有效。治疗组75％患者有效,两组间有效比例差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组治疗后PaO2、PaCO2、Pa02／FiO2改善较对照组显著（P〈0．05）。治疗组治疗后x线胸片提示肺损伤好转9例,显著多于对照组5例（P〈0．05）;死亡率两组无差异。结论前列地尔注射液可以显著改善动脉血气、呼吸参数。对急性PQ中毒肺损伤有积极的治疗作用。     

白藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究

目的观察白黎芦醇(RES)对博来霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的逆转作用。方法将60只SD大鼠分为对照组、模型组、RES中剂量干预组(50mg/kg)及RES高剂量干预组(100mg/kg),以气管内滴注BLM制造肺纤维化模型;于第14d起用RES进行干预,分别取第17d、24d及31d三个时间点对大鼠肺组织行MASSON染色、羟脯氨酸含量(HYP)测定及TGF-β1mRNA测定。结果模型组第17天,大鼠肺组织呈现典型肺纤维化,RES各干预组较模型组纤维化程度随时间变化而有所减轻;模型组中HYP含量(751.80±22.5、996.00±39.48、1197.60±105.98)明显高于对照组(266.00±24.08、307.00±16.40、318.00±18.7,P<0.05);RES高剂量干预组中各时间点HYP含量(657.45±18.31、514.34±9.78,504.20±13.16)均较模型组(751.80±22.52、996.00±39.48、1197.60±105.98)下降(P<0.05);模型组中TGF-β1mRNA含量在第17天(1.000±0.782)较对照组(0.490±0.039)高表达,使用RES高剂量干预后TGF-β1mRNA各时间点(0.788±0.205、0.472±0.199、0.474±0.310)较模型组(1.000±0.782、0.759±0.226、0.603±0.147)均降低(P<0.05)。结论 RES可能通过调节TGF-β1对已形成的大鼠肺纤维化有逆转作用。     

刍藜芦醇对大鼠肺纤维化逆转作用的研究

目的观察白黎芦醇（REs）对博来霉素（BLM）致大鼠肺纤维化的逆转作用。方法将60只SD大鼠分为对照组、模型组、RES中剂量干预组（50mg／kg）及R_ES高剂量干预组（100mg／kg）,以气管内滴注BLM制造肺纤维化模型;于第14d起用RES进行干预,分别取第17d、24d及31d三个时间点对大鼠肺组织行MASSON染色、羟脯氨酸含量（HYP）测定及TGF-／31mRNA测定。结果模型组第17天,大鼠肺组织呈现典型肺纤维化。RES各干预组较模型组纤维化程度随时间变化而有所减轻;模型组中HYP含量（751．80±22．5、996．00±39．48、1197．60±105．98）明显高于对照组（266．00±24．08、307．00±16．40、318．00±18．7,P〈0．05）;RES高剂量干预组中各时间点HYP含量（657．45±18．31、514．34±9．78,504．20±13．16）均较模型组（751．80±22．52、996．00±39．48、1197．60±105．98）下降（P〈0．05）;模型组中TGF邛1mRNA含量在第17天（1．000±0．782）较对照组（0．490±0．039）高表达,使用RES高剂量干预后TGF—β1mRNA各时间点（0．788±0．205、0．472±0．199、0．474±0．310）较模型组（1．000±0．782、0．759±0．226、0．603±0．147）均降低（P〈0．05）。结论RES可能通过调节TGF-β1对已形成的大鼠肺纤维化有逆转作用。     

谷胱甘肽对大鼠肺纤维化模型的干预作用

目的　观察谷胱甘肽对博莱霉素 (Bleomycin ,BLMA5)致大鼠肺间质纤维化模型的干预作用。方法　大鼠随机分为对照组、BLM模型组、谷胱甘肽组。按BLM 5mg·kg-1体重复制大鼠肺间质纤维化模型 ,2 4h后谷胱甘肽组每天腹腔内注射谷胱甘肽注射液 12 0mg·kg-1。于 7、14、2 8d观察各组肺间质纤维化形成的病理变化和肺匀浆中谷胱甘肽 (GSH)及胶原的含量变化。结果　与模型组比较 ,谷胱甘肽组病理变化与模型组一致 ,但较BLM模型组减轻 ;肺组织匀浆GSH含量明显增高 (P <0 0 1) ,胶原含量无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　腹腔内注射谷胱甘肽具有对抗氧自由基、保护肺脏免受氧化损伤的作用 ,但对BLM引起的肺脏胶原沉积无明显保护作用