三唑类药物与环孢菌素A的体外联合抗真菌作用

目的〓〖HTK〗评价氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑分别与环孢菌素A联合应用时对敏感与耐药白色念珠菌的体外抗真菌效果。〖HTW〗方法〓〖HTK〗采用棋盘法测定两类药物联用的体外抗真菌效果，以OD值测定法判读MIC值，并以FICI法对联用结果进行评价。〖HTW〗结果〓〖HTK〗两类药物联用对耐药白色念珠菌全部表现为协同作用，对敏感菌大多表现为无关作用。〖HTW〗结论〓〖HTK〗对于耐药白色念珠菌，环孢菌素A对3种三唑类药物均有明显的增敏作用，但对敏感菌的增敏作用不明显。以OD值测定法判读MIC值具有客观、迅速简便的特点。     

白色念珠菌对五种抗真菌药物体外敏感性研究

目的了解白色念珠菌对常用抗真菌药物的敏感性情况,为临床正确选择抗真菌药物和有效控制该菌引起的感染提供依据。方法采用美国国家临床实验标准委员会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法,测定从临床标本中分离的102株白色念珠菌对五种抗真菌药的最低抑菌浓度(MIC)。结果酮康唑、氟胞嘧啶和伊曲康唑对102株白色念珠菌MIC较低,其MIC90分别为0.25μg/ml、0.5μg/ml和0.5μg/ml。两性霉素B和氟康唑MIC90分别为2μg/ml和8μg/ml。受试菌对氟胞嘧啶敏感率最高为100%,对氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为88.3%和75.5%。对氟康唑耐药的9株菌株也同时对伊曲康唑耐药。结论受试白色念珠菌对氟胞嘧啶敏感率最高,未发现耐药菌株;酮康唑对受试菌抗菌活性最强,对唑类药物存在耐药性,且该类药物之间存在交叉耐药。     

羽苔素E体外抗真菌活性及逆转氟康唑耐药的初步研究

目的 评价白色念珠茵对羽苔素E的体外敏感性,并观察羽苔素E和氟康唑合用对白念敏感株和耐药株的联合抗真菌作用.方法 采用微量稀释法,测定15株白念敏感株和4株白念耐药株对羽苔素E的敏感性,以最低抑菌浓度(MIC)表示.同时观察羽苔素E与氟康唑合用对白念敏感株和耐药株的联合抗真菌作用.结果 羽苔素E对敏感株的MIC值为16 mg·L-1,对耐药株的MIC值与敏感株基本一致.羽苔素E与氟康唑合用,对敏感株和耐药株分别表现出相加和协同的抗真菌活性,并明显减少氟康唑的用量.结论 羽苔素E具有中等的抗真菌活性,与氟康唑合用对耐药菌株表现出协同的抗真菌作用,提示羽苔素E有较好的抗真菌作用并有逆转氟康唑耐药的潜力.     

20种四氢萘类抗真菌化合物体外抑菌活性测定

目的:考察20种四氢萘类化合物体外抗真菌活性.方法:采用NCCLS的M27-A方案,以不同氟康唑敏感性的念珠菌及非念珠菌为供试菌进行体外药敏试验.对化合物22-1、31-1及其盐酸盐22、31,还有化合物34-1、26-1及其溴酸盐34、26进行时间生长曲线实验以及与其他结构抗真菌药进行体外联合药敏试验.结果:该类化合物均具一定抗真菌活性,尤其是化合物31-1对氟康唑敏感白念珠菌的抑菌活性明显强于氟康唑,持续抑菌时间超过54 h;化合物22和22-1对氟康唑耐药白念珠菌及近平滑念珠菌和红色毛癣菌作用强大,MIC50值均＜0.125 μg/ml,对于氟康唑耐药的白念珠菌抑菌活性强于酮康唑.此类药物与小檗碱或特比萘芬联用可产生协同作用.结论:四氢萘类化合物结构新颖,体外抗真菌活性显著,值得进一步研究开发.     

抗真菌苗药对白色念珠菌株的体外抑菌试验观察

目的:了解白色念珠菌特别是耐氟康唑的白色念珠菌对抗真菌苗药的敏感性,为耐药菌株的治疗寻找新的途径。方法:采用管碟法使用抗真菌苗药的含药血清进行两种菌株的体外抑菌试验。结果:两种白色念珠菌菌株的抑菌试验表明:含药血清抑制耐氟康唑的白色念珠菌株与对氟康唑敏感的白色念珠菌没有显著差异(P>0.05)。结论:采用抗真菌苗药含药血清对耐氟康唑的白色念珠菌菌株及对氟康唑敏感的白色念珠菌菌株进行体外抑菌试验,均表现出较明显的抑菌作用,抗真菌苗药对耐氟康唑的白色念珠菌抑菌作用与对氟康唑敏感的白色念珠菌抑菌作用没有显著差异(P>0.05),对于临床分离出的耐氟康唑的白色念珠菌可以考虑使用苗药,为拓宽中药制剂的用药范围,减轻耐药菌株的药物压力奠定了一定基础。     

特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑体外联合对白色念珠菌的后效应

目的探讨特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑体外联合对白色念珠菌的后效应。方法先将白色念珠菌YO1∶19在1/2最低抑菌浓度(MIC)氟康唑的沙堡培养基上培养,然后在含10%正常人新鲜血清的RPMI1640液体培养基中培养,采用洗涤离心法和菌落计数法测定特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑体外联合对白色念珠菌的后效应。结果单用特比萘芬、氟康唑、伊曲康唑对氟康唑预处理的白色念珠菌均有抗真菌后效应的作用,联合用药组较相应的单用药组抗真菌后效应时间长,并能产生相加作用。结论特比萘芬与氟康唑或伊曲康唑联合应用能延长对白色念珠菌的后效应,可延长给药的间隔时间。     

过氧化氢对5种唑类药物体外抗耐药白假丝酵母菌的协同作用

目的考察过氧化氢(H2O2)对5种唑类药物:氟康唑(FLC),伊曲康唑(ICZ),酮康唑(KCZ),咪康唑(MCZ)和硫康唑(SCZ)体外抗耐药白假丝酵母菌作用的影响。方法利用8株对氟康唑耐药,2株对氟康唑敏感的白假丝酵母菌,采用微量液基稀释法测定药物单用时的最低抑菌浓度MIC80值,采用棋盘式微量液基稀释法测定两药联用时的MIC80值,在此基础上计算部分抑菌浓度指数(FICI)即协同指数,依据FICI值判断H2O2与唑类药物联用是具有协同、无关还是拮抗作用。结果对所有耐药菌株,两药联用的FICI值均小于0.5,H2O2与唑类药物联用显现出协同作用;对2株敏感菌株,两药联用的FICI值大于0.5、小于2,显示为无关作用。结论 H2O2和唑类药物(氟康唑,伊曲康唑,酮康唑,咪康唑,硫康唑)联用有协同抗耐药白假丝酵母菌作用。     

肺感方对肺部多重耐药菌体外抑菌作用的研究

[目的]通过体外抑菌实验,评价肺感方单用或联用抗生素对临床分离的肺部多重耐药菌的抑制作用。[方法]用二倍稀释法分别测定肺感方、头孢哌酮舒巴坦钠、左氧氟沙星、哌拉西林他唑巴坦钠对标准金葡菌、临床耐药金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度(MIC);用微量棋盘稀释法检测肺感方分别与3种抗生素联用后对上述6种菌株的MIC。[结果]肺感方对这6种菌株均有较强的抗菌作用,MIC值为0.0195~0.156 g/ml,MBC值为0.156~0.3125 g/ml;肺感方联合头孢哌酮舒巴坦钠、左氧氟沙星对标准金黄色葡萄球菌和临床耐药金黄色葡萄球菌均表现为协同作用;联合左氧氟沙星对抗鲍曼不动杆菌为协同作用,联合头孢哌酮舒巴坦钠对抗鲍曼不动杆菌为相加作用,联合左氧氟沙星对抗铜绿假单胞菌为相加作用。[结论]肺感方对临床分离的6种耐药菌株有较强的抗菌作用,其联合抗生素对耐药菌有选择性协同或相加作用,并可明显降低抗生素的抑菌浓度。     

纳米银和唑类药物联用抗耐药白色念珠菌作用及机制研究

【目的】 白色念珠菌是临床最常见的条件致病性真菌,能够引起多种疾病,然而随着唑类等药物长期大量使用,导致真菌耐药性普遍产生,成为临床治疗失败的主要原因。纳米银已经被证明具有抗菌活性,但是对白色念珠菌耐药菌株抗菌作用有限,因此本项目主要目的在于研究纳米银和唑类药物联用抗白色念珠菌耐药菌株作用及其作用机制。 【方法】 用电镜方法、紫外全波长扫描及zeta电位测定分析加入唑类药物对纳米银溶液稳定性的影响,体外抗菌实验采用微量稀释法,两药之间关系采用棋盘式微量稀释法并用FICI指数评价,用琼脂扩散法和杀菌曲线来进一步验证两药作用关系。细胞学作用机制解析包括从细胞学水平研究纳米银对白色念珠菌出芽及唑类药物促进纳米银粘附于白色念珠菌表面效应。分子机制解析包括从基因水平研究纳米银和唑类药物联用对麦角甾醇生物合成途径相关基因及细胞膜外排泵基因表达的影响。 【结果】 唑类药物的加入对纳米银系列物理化学表征没有明显影响。纳米银单用MIC是16~32 μg/mL,氟康唑及伏立康唑单用抗耐药白色念珠菌MIC分别是≥64和8 μg/mL。而当联合应用时,纳米银MIC是0.125~0.25 μg/mL,氟康唑MIC是0.125~1 μg/mL,伏立康唑MIC是0.125~0.5 μg/mL,FICI指数均<0.5。琼脂扩散法和杀菌曲线测定进一步确认纳米银和唑类联用抗白色念珠菌耐药菌株具有协同作用。细胞学机制方面联合用药减少了白色念珠菌出芽率,增加纳米银对白色念珠菌的粘附;分子机制方面,发现联合用药能显著降低麦角甾醇含量,并能增加ERG5、ERG6基因的表达。降低外排泵基因CDR1的表达。 【结论】 纳米银和唑类药物联用对耐药白色念珠菌具有显著的协同作用。本项目基于临床抗真菌耐药的现状,为寻找新的逆转真菌耐药的应对策略提供思路。     

多药耐药铜绿假单胞菌的体外联合药敏研究

目的评价美罗培南（meropenem,MEM）分别与依替米星（etimicin,ETM）、环丙沙星（ciprofloxacin,CIP）联合用药对临床分离多药耐药铜绿假单胞菌（muhipledrugresistantpseudomonasaeruginosa,MDRP）的体外抑菌作用。方法采用棋盘法设计,琼脂平板稀释法测定抗菌药物对38株临床分离的MDRP的最低抑菌浓度（MIC）,并计算抑菌指数（FIC指数）判断联合抑菌效应。结果MEM与ETM联用后,63．2％为协同作用,36．8％为相加作用,没有无关作用和拮抗作用;MEM与CIP联用后,73．5％为协同作用,21．2％为相加作用,5．3％为无关作用,没有拮抗作用。上述药物联用后,各药MIC50及MIC90均明显降低,浓度一累积抑菌率曲线均表现为左移。结论MEM分别与ETM、CIP联用对MDRP体外联合抗菌效应主要表现为协同和相加作用。     

氟康唑与5-氟胞嘧啶体外联合抗白念珠菌临床分离株的研究

目的评价白念珠菌临床分离株对氟康唑和5-氟胞嘧啶联合用药的敏感性及判断两药物之间相互作用的方式。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A推荐的棋盘微量稀释法,检测了30株白念株菌临床分离株对氟康唑、5-氟胞嘧啶及两药联合的体外药物敏感性,同时对两药的作用方式进行判定。结果联合用药时显著减少了每一药物MIC值的几何均数,在40％受试菌表现为协同作用方式,在53．3％的受试菌株表现为相加作用方式,在6．7％受试菌株表现为无关作用方式,未观察到拮抗作用出现。结论氟康唑和5-氟胞嘧啶联合比单一药物体外抗白念珠菌的活性高。     

两种方法检测白色念珠菌对氟康唑的体外药敏结果比较及耐药原因分析

目的 比较纸片扩散(K-B)法和微量肉汤稀释(MIC)法检测18株临床分离白色念珠菌和4株标准白色念珠菌对氟康唑体外药敏试验的检测结果,并分析白色念珠菌对氟康唑的耐药原因。方法 根据K-B法和MIC法检测白色念珠菌对氟康唑体外药敏试验,比较两种方法结果的一致性;通过甲基四氮盐(XTT)减低法测量白色念珠菌生物膜的形成及其与氟康唑耐药的关系。结果 K-B法和MIC法检测白色念珠菌对氟康唑的体外药敏实验结果,经比较二者无明显差异,对氟康唑耐药的白色念珠菌其OD值远远高于对氟康唑敏感的白色念珠菌的OD值。结论 K-B法和MIC法对于检测白色念珠菌对氟康唑的体外药敏试验结果具有较高的一致性;白色念珠菌对氟康唑的耐药与其形成生物膜有重要相关性。     

两种工艺提取的龙血竭体外抗真菌活性比较

【目的】对两种工艺提取的龙血竭进行体外抗真菌试验，测定其最低抑菌浓度(MIC)值。【方法】采用试管液基稀释法进行试验。【结果】测得免加热工艺提取的龙血竭抗白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、须癣毛癣菌的MIC50为1．25，5，0．313，1．25，5，0．175mg／ml，传统工艺提取的龙血竭的MIC50为1．25，5，2．5，2．5，5，1．25mg／ml。【结论】免加热工艺提取的龙血竭抗近平滑念珠菌和须癣毛癣菌的作用比传统工艺提取的龙血竭作用强。     

耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌耐药机制及治疗策略研究

目的 探索耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌耐药机制及治疗对策.方法 收集来自该院的17株耐碳青霉烯类弗劳地枸橼酸杆菌临床资料,采用PCR方法扩增碳青霉烯类耐药基因;采用琼脂稀释法和肉汤稀释棋盘法测磷霉素单药及联合用药最低抑菌浓度(MIC)值,计算部分抑菌浓度指数(ΣFICI).结果 8株菌产blaNDM-1,9株菌产blaIMP,blaKPC、blaoxA-48、blasPM均未检出;磷霉素联合亚胺培南协同作用和相加作用占75.oo％,其中协同作用高达56.25％,磷霉素联合头孢哌酮/舒巴坦钠协同作用和相加作用占50.oo％.结论 磷霉素联合亚胺培南或头孢哌酮/舒巴坦钠体外有较好的抗菌活性,亚胺培南联合磷霉素效果可能更好.     

碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的联合药敏研究

目的 评价头孢哌酮/舒巴坦(CFS)与利福平(RFP)、米诺环素(MIN)及左氧氟沙星(LEV)对临床分离碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的体外联合抑菌作用.方法 采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定抗菌药物对60株临床分离的CRAB的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FIC指数)判断联合抑菌效应.结果 CFS与RFP联用后,80％为协同作用,16.7％为相加作用,3.3％为无关作用,无拮抗作用;CFS与MIN联用后,11.7％为协同作用,45％为相加作用,35％为无关作用,8.3％为拮抗作用;CFS与LEV联用时,6.7％为协同作用,40％为相加作用,53.3％为无关作用,无拮抗作用.上述药物联用后,各药MIC50均明显降低,浓度-累积抑菌率曲线均表现为左移.结论 CFS与RFP、MIN联用对CRAB体外联合抗菌效应主要表现为协同和相加作用.CFS与LEV联用主要表现为无关作用,但仍有近半数菌株表现为协同和相加作用.     

白色念珠菌体外人工诱导耐药模型的建立

目的：研究白色念珠菌耐药性产生的过程,建立白色念珠菌的体外耐药模型。方法：采用最低抑菌浓度（MIC）倍倍增加方法对白色念珠菌标准菌株和临床分离敏感菌株进行氟康唑和氟康唑加阿苯达唑（2 mg·L^-1）2种不同诱导途径的体外耐药性 诱导,得到的耐药子代在无药酵母抽提物蛋白胨葡萄糖（YEPD）液体培养基中进行传代培养,观察MIC的变化情况。结果：经2种不同途径进行耐药性诱导,受试菌株均获得耐药性,但其耐药程度不同;耐药 子代经过42 d的无药传代后MIC值无明显变化。 结论：通过体外人工诱导获得了白色念珠菌氟康唑耐药模型,并且该获得性耐药稳定性较好;阿苯达唑可促进耐药性的产生。     

Bp3抗耐氟康唑白念珠菌活性研究

目的研究五环三萜类活性单体（saikosaponines,Bp3）的抗耐氟康唑白念珠菌（fluconazole-resistant candida albicans,FRCA）作用及其与氟康唑的协同作用。方法对柴胡进行有效成分分离,并对其抗菌作用明确的成分进行结构测定,确定其分子结构,得到结构明确的单体Bp3,参照（national committee for clinical laboratory standard,NCCLS）标准,测定Bp3对20株FRCA的最低抑菌浓度值（minimal inhibitory concentration,MIC）及其与氟康唑的协同作用。结果联合用药时显著减少了每一药物的MIC值,在20株FRCA均表现为协同或相加作用方式。结论结构明确的五环三萜类单体Bp3对FRCA有一定的抑制作用,且与氟康唑有协同或相加作用。     

中药香莲外洗液对40株白色念珠菌的药敏分析

目的 初步探索中药香莲外洗液对白色念珠菌临床株的最低抑菌浓度值（MIC值）和最低杀菌浓度值（MFC值）范围。方法 参照1997年CLSI(美国临床和实验室标准化协会)《肉汤稀释法酵母菌抗真菌药物敏感性试验参考方法》(M27-A),采用微量液基稀释法测定香莲外洗液和氟康唑对40株白色念珠菌临床株的MIC值及香莲外洗液对临床菌株的MFC值,质控菌株为克柔念珠菌ATCC6258。结果 质控菌株ATCC6258在M27-A的质控MIC结果内。40例菌株的香莲外洗液MIC范围为（3.20±2.83）mg/mL,MFC范围为31.25～62.5mg/mL;氟康唑MIC范围为(4.00±2.94)?g/mL;两药物的抑菌作用差异无显著性(P>0.05)。结论 体外抗真菌药敏试验证实香莲外洗液在一定浓度范围内对白色念珠菌有较满意的抑杀作用,其抑菌作用和氟康唑差别不大。     

两性霉素B和5-氟胞嘧啶的体外联合药敏试验

参照美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)提出的标准，采用棋盘微量稀释法对28株隐球菌和念珠菌进行两性毒素B和5—氟胞嘧啶的体外联合药敏试验。结果显示联合用药时各药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration，MIC)几何均值比单独用药显著降低(P＜0．01)；两性毒素B和5—氟胞嘧啶的协同相加作用较为明显，而且末发现有拮抗作用，部分抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index，FICI)的平均值为0．8。提示两性毒素B和5—氟胞嘧啶对致病酵母主要表现为协同相加作用。     

青橄榄叶提取物体外抑菌活性研究

[目的]测定青橄榄叶提取物及大孔树脂AB-8不同极性洗脱产物对供试菌株的体外抑菌活性.[方法]采用96孔板微量稀释法测定青橄榄叶总提取物及不同极性洗脱产物对白色念珠菌、铜绿假单胞杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐药白色念珠菌、酿酒酵母和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC).[结果]大孔树脂水洗极性部位对白色念珠菌的MIC为20.62 g/ml,50％乙醇洗脱部分对铜绿假单胞杆菌的MIC为82.5 μg/ml,90％乙醇洗脱部分对白色念珠菌、铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐药白色念珠菌、酿酒酵母和金黄色葡萄球菌的MIC分别为41.25,20.62,20.62,10.32,165.0和2.58μg/ml.[结论]青橄榄叶洗脱产物的水、50％乙醇及90％乙醇洗脱部分对白色念珠菌、铜绿假单胞杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐药白色念珠菌、酿酒酵母和金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性,尤其是90％乙醇洗脱部位的抑菌范围广,活性强且呈现量效依赖关系.