XRCC1基因多态性与宫颈癌危险性的研究

目的:探讨XRCC1基因多态性与江苏人群宫颈癌易感性之间的关系.方法:采用基于医院的分子流行病学病例对照研究方法,选取436例经组织病理学确诊为宫颁癌的新发患者作为病例组和503例年龄(±5岁)、性别相匹配的非肿瘤者作为对照组;采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对XRCC1启动子区-77T>C和外显子10区的Arg399Glu基因多态性进行基因分型,比较不同基因型携带者患宫颈癌的危险性;通过分层分析探讨初潮年龄、患者年龄及产次对罹患宫颈癌的影响.结果:与XRCC1-77TT相比,-77TC/CC基因型可减少罹患宫颈癌的危险性(OR=0.64,95%CI=0.48～0.86).携带3～4个危险等位基因者比携带1～2个等位基因者患官颈癌的危险性更大(OR=1.44,95%CI=1.01～2.04).分层分析结果显示,年龄较大和产次较多且携带3～4个危险等位基因者罹患宫颈癌的危险性分别增加1.64倍(95%CI=1.02～2.64)和1.66倍(95%CI=1.01～2.72).本研究未发现XRCC1Arg399Glu多态性与宫颈癌之间存在显著性相关.结论:XRCC1基因启动子-77T>C多态性显著降低江苏地区汉族人群罹患宫颈癌的危险性.     

DNA修复基因XRCC1单核苷酸多态性与肺癌易感性

目的:探讨XRCC1基因单核苷酸多态性与肺癌易感性的关系.方法:以聚合酶链反应-限制性酶切片断多态性方法分析了肺癌病例(n=104)和按性别、年龄频数配比的健康对照者(n=121)XRCC1基因Arg194Trp和Arg399Gln位点的多态性,并比较不同基因型与肺癌风险的关系.结果:XRCC1 Arg 399 Arg和Arg 399Gln基因型频率在对照组和病例组中的分布差异无统计学意义(P＞0.05);病例组XRCC1 Gln399Gln突变纯合子基因型频率为13.46%,高于对照组3.31%(P＜0.01).与携带Arg399Arg野生纯合子基因型者比较,携带Gln399Gln突变纯合子基因型个体发生肺癌的风险增加6.11倍(校正OR=6.11,95%CI=1.70～22.0);携带Arg 399Gln突变杂合子基因型者患肺癌风险无显著增加(校正OR=1.03,95%CI=0.60～1.78).XRCC1 Arg194Arg、Arg194Trp和Trp194Trp基因型频率在对照组和病例组中的分布差异均无统计学意义(P＞0.05);与携带Arg194Arg野生纯合子基因型者比较,携带至少1个194Trp等位基因者(即Arg194Trp和Trp194Trp基因型)患肺癌风险无显著增加(校正OR=0.998,95%CI=0.97～1.03;校正OR=1.81,95%CI=0.30～11.08).结论:DNA碱基切除修复基因XRCC1 Gln399Gln突变纯合子基因型者患肺癌风险增加.     

CCND1基因 G870A多态性与卵巢癌遗传易感性的研究

目的:研究细胞周期蛋白D1(CCND1)基因第4外显子870位点单核苷酸多态性与卵巢癌遗传易感性的关系。方法:采用分子流行病学病例-对照研究,病例组为107例经病理组织学确诊的新发卵巢癌患者,同时按年龄相匹配选取114例正常对照者,使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测病例与对照的基因型,比较不同基因型与卵巢癌发病危险性之间的关系,分层分析年龄、初潮年龄、初次生育年龄、产次、流产数及是否绝经对罹患卵巢癌风险的影响。结果:病例与对照之间的等位基因频率无统计学差异,本研究未发现CCND1G870A多态性与卵巢癌之间存在显著性相关。结论:CCND1G870A多态性与中国人群卵巢癌的发生未见明显相关。     

ＪＷＡ基因-７６Ｇ＞Ｃ和４５４Ｃ＞Ａ多态性与宫颈癌易感性

目的:探讨JWA基因多态性与江苏人群宫颈癌易感性之间的关系.方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测227例宫颈癌患者和333例年龄、性别相匹配的非肿瘤者JWA-76G＞C、454C＞A和723T＞G多态性的频率和分布.比较不同基因型携带者患宫颈癌的危险性,通过分层分析探讨初潮年龄、初次生育年龄和产次对患宫颈癌的影响.结果:JWA-76GC和454AA基因型均可增加罹患宫颈癌的危险性.携带3-5个危险等位基因者比携带0-2个等位基因者患官颈癌的危险性更大(OR=1.70.95%CI=1.20～2.42).分层分析结果显示,初潮年龄早、生育年龄晚和产次多且携带3-5危险等位基因者能增加患宫颈癌的危险性.本研究未发现JWA基因723T＞G多态性与宫颈癌之间存在显著相关.结论:JWA基因-76G＞C和454C＞A多态性显著增加江苏地区汉族人群患宫颈癌的危险性.     

基因多态性与急性呼吸窘迫综合征

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性进行性缺氧性呼吸衰竭[1],近年的临床流行病学调查表明其发病率在16/10万～28/10万,病死率达30%～60.9%[2,3]。多种危险因素都可导致ARDS的发生,其中也包括遗传因素。随着研究疾病相关基因定位理论与实验     

基因的多态性与广东人尖锐湿疣的关系

目的 研究低分子量多肽（LMP）基因多态性与尖锐湿疣发病的关系。方法 应用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）技术检测尖锐湿疣患者和正常人群低分子量多肽基因LMP2和LMP70。结果 LMP2＊B等位基因频率在尖锐湿疣患者中增高（P〈0．05），LMP7等位基因频率与正常对照组比较，差别无显著性（P〉0．05），LMP2和LMP7基因型频率与对照组比较差别无显著性（P〉0．05）。结论LMP2＊B等位基因可能与尖锐湿疣发病有关。     

ACE基因多态性与中国人甲状腺疾病的相关性

目的 探讨血管紧张素Ⅰ转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与中国人甲状腺疾病的相关性。方法 以ＡＣＥ基因为候选基因,随机挑选４１７例甲状腺疾病患者和１４３例正常人,用ＰＣＲ方法检ＡＣＥ基因的缺失／插入多态性。结果（１）正常对照组与各组之间的基因型及等位基因频率比较差镁无显著性意义,正常对照组与各组之间的ＤＤ＋ＤＩ／Ⅱ、ＤＩ＋Ⅱ／ＤＤ及ＤＤ／Ⅱ比较差异均无显著性意义。（２）正常人群ＡＣＥ基因型分布ＤＤ型最少,     

IL-1B及IL-1RN基因多态性与胃癌遗传易感性的关系

目的探讨炎症因子IL-1B（T-31C和C-511T）及其拮抗基因IL-1RN基因多态性与胃癌遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究,对经组织学确诊的胃腺癌病例180例及其年龄和性别频数匹配的对照308例,以限制性片段长度多态性（RFLP-PCR）方法进行多态性检测,比较不同基因型以及环境因素与胃癌发病风险的关系。结果IL-1B启动子区域T-31C和C-511T基因多态性呈高度连锁不平衡（D’=0.862,R^2=0.721,P=0.000）,未发现IL-1B（T-31C和C-511T）基因多态性与胃癌之间存在显著性关联,显性模型调整比值比（OR）及其95%可信区间（C I）分别为0.95（0.62-1.47）和0.85（0.55-1.31）;IL-1RN变异基因型（1/2和2/2）可增加胃癌的患病风险,但未达到统计学差异（调整OR=1.32,95%C I=0.71-2.36）;分层结果显示在幽门螺旋杆菌（H.pylori）感染组中,IL-1RN变异基因型（1/2、2/2）显著增加胃癌的患病风险（调整OR=2.03,95%C I=1.02-4.80）。结论IL-1RN基因多态性和H.pylori感染可能在胃癌的发生和发展中具有协同作用。     

武汉地区汉族人脂蛋白脂肪酶基因多态性的初步研究

应用聚合酶链反应技术对１０８名无亲缘关系的武汉地区健康汉族人检测了脂蛋白脂肪酶（ＬＰＬ）基因ＨｉｎｄⅡ位点的限制怀片段长度多态性，结果显示存在Ｈ＾＋和Ｈ＾－两种等位基因，构成Ｈ＾＋Ｈ＾＋，Ｈ＾＋Ｈ＾－，Ｈ＾－Ｈ＾－３种基因型，其中Ｈ＾＋Ｈ＾＋和Ｈ＾＋Ｈ＾－基因型之间血清甘油三酯（ＴＧ）和高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）水平有显著差异，提示ＬＰＬ基因ＨｉｎｄⅡ位点多态性可能与正常人群中血脂水平的个体     

ACE基因多态性与巴马壮族人长寿的相关性

目的 探讨血管紧张素转换酶(angiotensin coverting enzyme,ACE)基因插/缺失(I/D)多态性与广西巴马长寿的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)与直接测序技术,研究百岁组(≥100岁)27例、90岁组(90～99岁)56例、老年组(60～89岁)114例老人的ACE基因I/D多态性,以79例60～70岁自然死亡人群为对照组.结果 在ACE基因I/D多态基因型中,百岁组L/I、L/D、D/D型频率分别为37.04%、33.33%和29.63%,I、D等位基因频率分别为53.70和46.30%.百岁组D/D基因型频率和D型等位基因频率高于老年组(P<0.05)且明显高于对照组(P<0.01),但与90岁组比较,无论是I/I、I/D或D/D基因型,所占百分率均比较接近,差异无显著性(P>O.05).D/D基因型经SSCP证实全部相同,无差别.直接测序结果再次验证ACE(I/D)多态性判断准确.结论 ACE基因I/D多态性与长寿密切相关.长寿受多种因素影响.     

应用变性高效液相色谱对EPHX1基因进行分型

目的 基于变性高效液相色谱技术,建立一种快速检测环氧化物水解酶(EPHX1)基因多态位点rs4653436(G＞A)的基因分型方法.方法 标准酚-氯仿法提取275例健康人外周血基因组DNA,应用聚合酶链反应/变性高效液相色谱(PCR/DHPLC)方法检测rs4653436(G＞A)位点基因型.结果 275例无关个体中,基因型GG、GA和AA分别有176例、93例和6例,各占64.0%、33.8%和2.2%,G和A等位基因的频率分别为80.9%和19.1%.结论 变性高效液相色谱技术检测EPHX1 rs4653436基因型简便、准确,为研究rs4653436多态性与华法林用量个体差异的相关性打下基础.     

中国人获得性血友病A患者中一个FⅧ基因多态性位点的发现

目的 研究8例中国人获得性血友病A患者的FⅧ基因变异,尝试寻找与疾病相关的潜在基因位点.方法对患者进行表型检测,包括APTT﹑FⅧ：C和FⅧ抑制物浓度的测定;采用LD-PCR和多重PCR分别检测FⅧ基因内含子22倒位和内含子1倒位,采用PCR产物直接测序的方法对FⅧ基因进行序列分析,寻找突变和多态性位点.结果 8例患者均表现为APTT延长,FⅧ：C降低,并且能够检测出浓度不等的FⅧ抑制物.在FⅧ基因3＇UTR区域内发现c.8899 G/A（rs1050705）的多态性位点,其等位基因＂A＂的频率远高于另一等位基因＂G＂的频率.结论 c.8899 G/A（rs1050705）多态性位点的等位基因频率可能与获得性血友病A患者中FⅧ抑制物的形成存在一定的联系,这对进一步研究该疾病的分子发病机制具有重要意义.     

变性高效液相色谱分析检测人类糖皮质激素受体基因变异

目的：以变性高效液相色谱分析(DHPLC)检测糖皮质激素受体基因(NR3C1)在中国人群中的变异情况：方法：提取64例中国人基因组DNA，参照文献所报道的引物序列，PCR方法扩增糖皮质激素受体基因编码区(2～9α外显子)及其邻近的部分内含子序列，琼脂糖凝胶电泳鉴定产物后，以DHPLC检测PCR产物，对洗脱曲线异常者进行DNA测序。结果：经DHPLC分析和DNA测序证实，研究人群的NR3C1基因中存在8处变异，5处为新发现；其中有2组变异呈紧密连锁的单倍型，均为首次报道，它们在人群中的基因型频率达3．1％与14.1％；另一处变异出现频率相对较低。结论：成功地建立了以DHPLC检测NR3C1基因变异的方法及技术参数，证实在中国人群中NR3C1基因存在变异，其中2种频率较高的单倍型为新发现。     

高效液相色谱法测定天麻素含量

对含天麻的中药复方水煎液中天麻素含量进行高效液相色谱法测定．以ＹＷＧ Ｃ１８为固定相，磷酸二氢钠 乙腈为流动相，ＵＶ检测波长为２２２ｎｍ，天麻素进样量为２～１０μＬ，与峰面积呈良好的线性关系，回归方程为Ｙ＝０．２８５２Ｘ－３５．７３０，ｒ＝０．９９９８，平均回收率为９８．８％，相对标准偏差为０．４６５％（ｎ＝３）．     

利用高效液相色谱法测定天麻素的含量研究

目的:应用高效液相色谱技术测定化工合成天麻素的含量。方法:以YWG-C18为固定相,乙腈-磷酸二氢钠为流动相,UV检测波长为220nm,天麻素进样量为4～12μL。结果:与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.2852X-35.730,r=0.9998,平均回收率为101.4%,相对标准偏差为1.27%(n=9)。结论:该方法简便,重复性好,结果准确可靠,样品测定周期短,可作为天麻素含量的测定方法。     

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3′-非翻译区单核苷酸多态性

目的 :探讨变性高效液相色谱 (DHPLC)在胰岛素受体底物 2 (IRS 2 )基因 3′ 非翻译区单核苷酸多态性 (SNP)检测中的应用。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR) ,DHPLC ,单链构象多态性 (SSCP)和DNA序列分析对 30例正常对照和 30例 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区进行SNP和突变检测。结果 :PCR DHPLC检测出 4例PCR SSCP分析未能发现的 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区的SNP ,并得到测序验证。结论 :DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术。它为进一步研究IRS 2基因 3′ 非翻译区的变异与 2型糖尿病的关系奠定了基础。     

应用变性高效液相色谱技术筛查一个正常血钾性周期性麻痹家系的SCN4A基因突变

目的 应用变性高效液相色谱(DHPLC)技术筛查一发生Met1592Val替换的正常血钾性周期性麻痹(normoKPP)家系的SCN4A基因,证实该突变为疾病相关突变,并总结其在此家系的临床表型特点。方法 总结一normoKPP家系14例患者的临床特点,应用DHPLC技术筛查SCN4A基因全部24个外显子,并对发现异常洗脱峰者进行测序。结果 该家系具有典型的normoKPP临床特征,无肌强直表现及早显、性别偏移现象,病程呈良性过程,发病早晚与症状严重程度及预后无相关。DHPLC筛查发现在外显子1及24存在杂合二倍体,测序及连锁分析证实位于外显子1的突变为良性多态性,外显子24的Met1592Val替换为疾病相关突变。结论 国人存在Met1592Val突变,此突变可导致normoKPP。normoKPP与高钾性周期性麻痹临床表现相似,两者可存在共同突变。     

应用部分变性高效液相色谱技术检测胃癌组织、血清中基因突变的研究

目的:探讨部分变性高效液相色谱(DHPLC)在检测胃癌组织、血浆中基因突变中的应用.方法:应用DHPLC对39例胃癌组织及血清中p53基因突变进行检测,并测序验证.结果:本研究中p53基因的突变率为21%(8/39);其中肠型胃癌突变率40%(6/15)明显高于弥漫型胃癌8.33%(2/24)(P＜0.01);发现既往未见报道突变3例.血清标本中50%(4/8)可扩增出目的片段,但均未检出突变.结论:DHPLC是一项较好的检测胃癌组织中基因突变的筛查方法,在血清中的应用仍需探讨.     

高效液相色谱法测定牛磺酸注射液的含量

目的采用高效液相色谱法测定牛磺酸注射液的含量。方法采用HiQsilC18W柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.04mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH7.2)乙腈(85:15),流速为1.0mL·min-1,检测波长为360nm。结果牛磺酸在0.12～0.28mg·mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.9991);平均回收率为100.3%,RSD=0.87%(n=9)。结论本法检测快速,定量准确,可用于牛磺酸注射液的含量测定。     

高效液相色谱法测定面粉中偶氮甲酰胺的含量

目的：建立面粉中偶氮甲酰胺（azodicarbonamide,ADC）的高效液相色谱检测方法。方法：样品经丙酮提取,正己烷脱脂,进入高效液相色谱后采用Eclipse XDB-CN柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）进行分离,以乙腈-20 mmol/L乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器检测波长为245 nm。结果：ADC在1.0～90.0 mg/kg范围内线性关系良好,相关系数（r）大于0.99,定量限为5 mg/kg（S/N≥10）,在5.0、10.0、45.0 mg/kg 3个添加水平下回收率在68.6%～116.9%之间,相对标准偏差均小于7.0 %。结论：建立的面粉中ADC液相色谱方法简单快捷,准确可靠,适用于面粉中ADC的测定。