FasL基因表达对缺氧状态下直肠癌细胞增殖凋亡的影响

目的探讨直肠癌侵袭转移过程中FasL基因表达对细胞增殖凋亡的影响。方法采用北京军区总医院普通外科实验室构建的4组不同侵袭力的人直肠癌HR-8348细胞亚型HR-8348B、HR-8348L、HR-8348F和HR-8348As,并用化学缺氧法构建上述4组细胞的缺氧12h模型,以Western印迹法验证各组细胞内FasL蛋白的表达水平和缺氧状态下细胞内FasL蛋白的表达,流式细胞仪测定细胞周期分布并计算细胞增殖指数,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞增殖能力改变并计算细胞抑制率,末端标记法（TUNEL）测定细胞凋亡状况。结果Western印迹显示FasL蛋白于40000处显色。常氧条件下HR-8348F细胞内FasL的表达水平显著高于HR-8348B、HR-8348L和HR-8348As（F=361.149。P〈0.01）;缺氧12h时各组细胞均生长良好,形态较常氧状态皱缩;HR-834F,细胞内FasL的表达水平仍显著高于其他3组（F=278.766,P〈0.01）,但其自身常氧与缺氧状态下FasL的水平差异无统计学意义（t=1.762,P〉0.05）。缺氧12h后各组细胞增殖均受到抑制,HR-8348F细胞的增殖指数（60.43±3.72）显著高于HR-8348B（40.01±3.30）、HR-8348L（41.30±4.06）和HR-8348As（35.87±4.39）（F=39.477,P〈0.01）,增殖抑制率（17.30±1.98）和凋亡指数（13.10±1.04）显著低于HR-8348B（33.70±4.33和21.60±1.31）、HR-8348L（34.20±3.92和20.10±1.15）、HR-8348As（38.00±4.55和23.90±1.23）细胞（F分别为28.811和76.462,P〈0.01）。结论缺氧环境中,直肠癌细胞FasL表达增强可导致细胞增殖加速、凋亡减少和侵袭能力增强。促进细胞对微环境缺氧的耐受。     

磁感应热疗联合免疫佐剂对Wistar大鼠Walker-256肿瘤的异位效应的研究

目的观察不同加热温度及联合免疫佐剂对大鼠Walker-256肿瘤生长及CD4＋T细胞和CD8＋T细胞表达的影响。方法建立大鼠双侧腋下皮下移植Walker-256肿瘤模型,接种后7d随机分成6组：Ⅰ组（单纯植入热籽对照）;Ⅱ组（42～46℃单纯热疗）;Ⅲ组（42～46℃热疗＋免疫佐剂）;Ⅳ组（50～55℃单纯热疗）;Ⅴ组（50～55℃热疗＋免疫佐剂）;Ⅵ组（单纯免疫佐剂对照）。每3d测双侧肿瘤大小的变化,治疗后14d取肿瘤组织行HE染色,免疫组织化学方法检测肿瘤组织CD8＋T细胞的表达,免疫荧光法检测CD4＋T细胞的表达。结果热疗后14d,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组两侧肿瘤体积均有不同程度缩小,Ⅴ组治疗侧及对侧肿瘤体积分别缩小34.6%、60.1%,并有3只大鼠对侧肿瘤完全消退,与Ⅰ组、Ⅵ组2个对照组比较,有显著性差异（q=4.552,P〈0.05;q=4.400,P〈0.05）。组织学检查肿瘤细胞呈凋亡、坏死性改变,伴大量淋巴细胞浸润,V组还可见大量吞噬细胞,对侧未见明显坏死肿瘤细胞,淋巴细胞浸润较明显。免疫学检查加热后CD4＋T细胞和CD8＋T细胞较对照组（Ⅰ、Ⅵ组）明显增多,差异具有显著性（P〈0.05）,其中均以V组表达最多（P〈0.05）。结论50～55℃瘤内局部加热不仅能抑制乳腺癌生长,还可增强机体的细胞免疫功能并具有异位效应,免疫佐剂能增强其抑瘤作用及异位效应。     

siRNA沉默VEGF基因对肾癌细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨siRNA干扰血管内皮生长因子（VEGF）基因对人肾细胞癌细胞株（ACHN）细胞增殖与凋亡的影响.方法：化学合成针对VEGF的小干扰RNA,通过脂质体转染至ACHN中,利用Western印迹法检测细胞内VEGF的表达,采用台盼蓝拒染法测定细胞生长曲线,用MTT比色分析法检测细胞增殖抑制率（IR）,用TUNEL方法检测细胞凋亡率（AR）.结果：生长曲线提示,与空白对照组及阴性对照组相比,siRNA1组、siRNA2组ACHN细胞的生长明显减慢 在24 h、48 h、72 h,siRNA1的增殖抑制率为10.6%、18.0%、27.1%,siRNA2增殖抑制率为18.9%、32.7%、40.3%,均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0.05） siRNA1组的细胞凋亡率为10.7%、15.2%、20.3%,siRNA2组的细胞凋亡率为17.3%、26.2%、37.4%,均高于空白对照组及阴性对照组（P〈0.05） siRNA1组、siRNA2组VEGF蛋白表达水平明显低于空白对照组及阴性对照组,其中siRNA2对ACHN细胞的IR、AR和VEGF蛋白表达的抑制作用均显著高于siRNA1组（P〈0.05）.结论：VEGF在肾癌的发生发展中起着重要作用,化学合成的VEGF-siRNA能特异性抑制肾细胞癌ACHN细胞株中VEGF的表达,抑制细胞生长增殖,促进细胞凋亡.对于VEGF基因高表达的肾细胞癌患者,针对VEGF的RNAi技术有望成为肾细胞癌新的基因治疗手段.     

放射性125I粒子照射CL187结肠癌细胞系凋亡的研究

目的 探讨125^I粒子照射对CL187结肠癌细胞凋亡和周期的影响.方法 采用人CL187结肠癌细胞系体外培养,实验分4组：空白对照组、2 Gy照射组、5 Gy照射组、10 Gy照射组.照射组均选取9.25×104MBq活度的粒子,以2.77 cGy/h的初始剂量率照射.照射结束后48 h收集细胞,用膜联蛋白（annexin）和碘化丙啶（propidium iodide ,PI）双染色法测量细胞凋亡,用碘化丙啶单染测量细胞周期. 结果 照射后48 h,照射2、5、10 Gy组细胞凋亡指数分别为13.74%±1.63%、46.27%±3.82%、32.58%±3.61%,显著高于空白对照组1.67%±0.19%（q=7.594,P＜0.05;q=28.059,P＜0.05;q=19.447,P＜0.05）.空白组细胞G2/M期阻滞的比率26.44%±2.53%显著低于照射2、5、10 Gy组34.61%±2.79%、59.84%±4.96%、42.59%±3.21%（q=4.039,P＜0.05;q=16.513,P＜0.05;q=7.985,P＜0.05）. 结论 125^I粒子持续性低剂量率照射主要通过凋亡杀伤CL187肿瘤细胞,引起凋亡的主要机制为G2/M期阻滞.     

Fe_3O_4磁纳米介导磁感应治疗Wistar大鼠Walker-256肿瘤

目的探讨Fe3O4磁性纳米微球磁感应对Wistar大鼠Walker-256肿瘤的治疗作用。方法荷瘤鼠随机分为NS组（注入生理盐水而不接受磁场处理）、MF组（注入磁流体而不接受磁场处理）、MFH1组（注入磁流体在交变磁场中治疗1次）、MFH2组（治疗2次）和MFH3组（治疗3次）,共5组。治疗温度控制在50～55℃,分别观察肿瘤体积抑制率和生存期,以及肿瘤的病理改变。结果MFH2组和MFH3组的肿瘤在2周内有明显的肿瘤体积抑制作用,肿瘤体积抑制率分别为（65.0±3.5）%、（71.6±4.2）%。与NS组（35.5±5.6）d比较,MFH3组（41.9±6.5）d和MFH2组（42.1±5.0）d的生存期延长,差异有统计学意义（q=4.386,P〈0.05;q=4.558,P〈0.05）;MFH1组（39.0±5.3）d和MF组（36.1±6.6）d的生存期差异无统计学意义（q=2.406,P〉0.05）。NS、MF组肿瘤表面光滑,小灶性坏死区;癌细胞密度大,核仁明显,易见核分裂相。MFH2和MFH3组瘤内大片坏死残留的无结构红染物质,或空洞,部分胞核有固缩、碎裂及崩解。结论Fe3O4纳米磁流体介导的磁热疗能抑制大鼠Walker-256皮下肿瘤增殖。     

磁流体热疗对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡和周期的影响

目的探讨磁流体热疗对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞的凋亡和周期的影响。方法接种Lewis肺癌细胞悬液于C57BL／6小鼠的皮下，等肿瘤长至直径约为（0．8±0．1）cm时，随机分为4组：对照组、磁场组、磁流体组、实验组。加温治疗后48h，眼球取血，检测血中白细胞的变化，切取肿瘤标本，流式细胞仪检测细胞凋亡率和周期的变化。结果热疗后4组血中自细胞没有明显的变化（F=0．62，P=0．613）；肿瘤细胞凋亡率实验组为（63．55±8．39）％，对照组、磁场组、磁流体组分别为（28．43±6．29）％，（32．75±5．07）％，（32．42±6．15）％，实验组肿瘤细胞凋亡率明显高于其他3组（q=11．925，P〈0．05；g=10．458。P〈0．05；g=10．570，P〈0．05）；实验组细胞周期出现明显G1／G0期阻滞为（68．13±5．73）％显著高于对照组（47．95±9．98）％（q=5．501，P〈0．05），磁场组（49．23±6．62）％（q=5．152，P〈0．05），磁流体组（52．28±9．64）％（q=4．320，P〈0．05）。结论磁流体热疗可明显提高Lewis肺癌细胞的凋亡率，抑制Lewis肺癌细胞G1期向S期的进程。     

下肢深静脉血栓形成导管接触溶栓与外周静脉系统溶栓早期疗效的对比研究北大核心CSCD

目的探讨经不同途径导管接触溶栓（catheter-directed thrombolysis,CDT）和外周静脉系统溶栓治疗下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）的疗效。方法回顾性分析2010年1月~2015年11月我科85例DVT的临床资料,其中CDT组47例（动脉CDT组25例,静脉CDT组22例）,静脉系统溶栓组38例,3组均在抗凝基础上给予尿激酶100万U/d持续泵入,CDT组同期行下腔静脉临时滤器植入术,比较3组患肢深静脉溶栓率、消肿率和并发症发生率。结果中央型DVT血栓溶栓率静脉CDT组最高（81.3±18.4）%,显著高于动脉CDT组（45.1±17.6）%（q=6.648,P〈0.05）和静脉系统溶栓组（32.1±10.1）%（q=9.524,P〈0.05）。周围型DVT血栓溶栓率动脉CDT组最高（66.7±22.3）%,与静脉CDT组（45.8±21.7）%无统计学差异（q=2.807,P〉0.05）,但显著高于静脉系统溶栓组（43.7±15.2）%（q=3.614,P〈0.05）。混合型DVT血栓溶栓率3组间有统计学差异,其中静脉CDT组最高（71.7±18.2）%,显著高于动脉CDT组（55.1±9.3）%（q=3.714,P〈0.05）和静脉系统溶栓组（38.6±12.5）%（q=7.817,P〈0.05））。静脉CDT组消肿率（61.7±19.1）%,显著高于动脉CDT组（41.2±10.1）%（q=7.157,P〈0.05）和静脉系统溶栓组（33.6±12.2）%（q=10.540,P〈0.05）。3组并发症发生率分别为12.0%（3/25）、9.1%（2/22）、22.6%（8/35）,无统计学差异（χ2=2.319,P=0.314）。结论 CDT治疗下肢DVT疗效好于外周静脉系统溶栓。中央型和混合型DVT,静脉CDT为首选方案;周围型DVT,动脉CDT疗效优于静脉途径。     

股骨假体近端应力遮挡对成骨细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨股骨假体近端不同强度的应力遮挡对成骨细胞增殖和凋亡的影响。方法根据股骨近端应变的有限元分析结果,在体外分组模拟应力遮挡的细胞力学环境,A组应变保持不变（对照组）、B～E组应力遮挡分别为25%、50%、75%和100%,观察不同强度的应力遮挡环境对成骨细胞相对活性、增殖指数和凋亡百分比的影响。结果C、D和E组成骨细胞的相对活性明显降低,分别为0.72±0.09、0.68±0.11和0.76±0.15,与对照组（0.92±0.13）相比差异有显著性（P〈0.05）;D组和E组成骨细胞增殖指数降低至47.87±6.58和51.65±7.71,与对照组（64.31±7.92）相比差异有显著性（P〈0.05）;C组和D组成骨细胞凋亡的百分比与对照组（7.36±0.59）相比差异有显著性（P〈0.05）,分别增高至18.76±2.82和16.78±1.69。B组成骨细胞的相对活性、增殖指数和凋亡百分比与对照组相比差异无显著性（P〉0.05）。结论股骨假体近端的应力遮挡能抑制成骨细胞增殖并（或）刺激其凋亡,两者皆存在“阈值”现象而缺乏强度依赖性。应力遮挡下凋亡的启动较增殖的抑制更为敏感。     

股骨头坏死组织中半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3与细胞凋亡的关系

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3在无菌性股骨头坏死（avascular/aseptic necrosis of femoral head,ANFH）进展过程中的表达及意义。方法21例（22髋）ANFH取股骨头病灶周围骨松质,其中早期ANFH组（6髋）,中期ANFH组（8髋）,晚期ANFH组（8髋）;另取19例（19髋）新鲜股骨颈骨折的股骨头对应部位骨松质为对照组。采用原位末端标记（TUNEL）法、空骨陷窝计数法检测细胞凋亡水平,比色法检测股骨头组织Caspase-3活性。结果骨陷窝空虚百分率（F=45.43,P=0.000）、成骨细胞凋亡率（F=120.86,P=0.000）等凋亡指标均随ANFH临床分期进展而显著升高,ANFH早、中期组显著高于对照组（q=18.899,P〈0.05;q=6.398,P〈0.05）,但并不随着ANFH病变进展而增强,而呈现进行性下降;ANFH晚期组Caspase-3活性与对照组Caspase-3活性无统计学差异（q=2.021,P〉0.05）。Caspase-3活性与细胞凋亡率统计学相关性不显著（r=0.126,P=0.425）。结论在ANFH进展过程中,Caspase-3可能不是细胞凋亡的主要执行分子;Caspase-3在ANFH进展中可能发挥非凋亡作用。     

牛磺酸减轻碘海醇诱导的人肾小管上皮细胞损伤

目的 探讨牛磺酸能否减轻碘海醇导致的HK-2细胞（人近端肾小管上皮细胞）损伤及作用机制。 方法 不同碘浓度（25、50、100、125 gI/L）的碘海醇作用HK-2细胞6 h;碘浓度为100 gI/L的碘海醇作用HK-2细胞不同时间（2 h、4 h、6 h）,观察细胞损伤程度。选用碘海醇（100 gI/L、6 h）作为刺激组,用不同浓度牛磺酸（3、12、24 mmol/L）共孵育进行干预。细胞增殖-毒性试剂盒（CCK-8）测定细胞活力。Hoechst33342染色、荧光显微镜下观察细胞凋亡形态。流式AnnexinⅤ-FITC-PI双染和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性比色法观察细胞凋亡。Western印迹检测Bcl-2、Bax的表达。流式DCFH-DA细胞内标记法测定细胞内活性氧（ROS）。 结果 碘海醇呈碘浓度和时间依赖性诱导HK-2细胞活力下降、凋亡增加（P ＜ 0.05）。碘海醇（100 gI/L、6 h）导致HK-2细胞ROS升高（P ＜ 0.05）。牛磺酸呈浓度依赖性增加HK-2细胞活力,减轻凋亡。牛磺酸（3、12、24 mmol/L）干预组与碘海醇刺激组比较,细胞活力分别为（88.0±1.00）%、（91.33±0.58）%、（95.67±1.52）%比（76.67±1.53）%（均P ＜ 0.05）;细胞凋亡率分别为（8.84±1.75）%、（7.86±1.82）%、（6.30±1.50）%比（11.98±0.39）%（均P ＜ 0.05）;caspase-3的活性分别为（1.33±0.10）、（1.27±0.0）、（1.10±0.04）比（1.42±0.1）（均P ＜ 0.05）。牛磺酸上调HK-2细胞Bcl-2表达,降低了细胞内ROS的升高（均P ＜ 0.05）。 结论 碘海醇可致HK-2细胞凋亡增加。氧化应激参与了HK-2细胞损伤。牛磺酸通过减轻细胞内氧化应激、促进Bcl-2表达上调,减轻碘海醇诱导的HK-2细胞凋亡和损伤。     

大鼠膀胱出口梗阻致膀胱重构的形态结构研究

目的观察大鼠膀胱出口部分梗阻不同时期的膀胱逼尿肌细胞增生、凋亡及间质中胶原纤维的变化情况。方法 Wistar大鼠40只,采用经会阴途径球部尿道部分结扎的方法建立膀胱出口部分梗阻模型,随机分为假手术组10只,梗阻2周组15只,梗阻4周组15只。采用免疫组化方法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况;通过末端转移酶标记(TUNEL)法测逼尿肌细胞凋亡指数;运用VG染色分析胶原纤维占膀胱逼尿肌面积比例变化情况。结果假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组PCNA阳性表达率分别为(17.19±1.37)%、(50.74±3.15)%、(33.58±2.80)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P0.05),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P0.05)。假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组逼尿肌细胞凋亡指数分别为(20.22±1.70)%、(33.90±1.86)%、(51.18±3.30)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P0.05),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P0.05)。假手术组、梗阻2周组和梗阻4周组胶原纤维占膀胱逼尿肌面积比例分别为(7.07±0.67)%、(13.19±1.50)%、(22.98±2.89)%,梗阻组之间差异有统计学意义(P0.01),梗阻组与假手术组之间差异有统计学意义(P0.01)。结论不同时期大鼠膀胱出口梗阻的膀胱逼尿肌形态结构的变化,可能是膀胱逼尿肌细胞增生、凋亡以及间质中胶原纤维占膀胱逼尿肌比例变化的综合作用结果。     

B超引导下经皮肾镜手术建立皮肾通道的学习曲线

目的探讨B超引导下经皮肾镜取石术中建立皮肾通道的学习曲线。方法回顾分析2006年1月～2007年7月由一名泌尿外科医生完成的B超引导下经皮肾镜取石术60例的临床资料,按手术时间先后顺序分为6组,每组10例,比较各组皮肾通道建立时间及清石率等指标的差异。结果第1组建立皮肾通道时间为（15.0±2.7）min,第2组为（14.0±2.1）min,第3组为（10.2±1.2）min,第4组为（5.8±0.7）min,第5组为（7.5±1.2）min,第6组为（6.6±0.9）min。方差分析组间皮肾通道建立时间有显著差异（F=5.77,P=0.000）,2组间比较第1组与第4组（q=5.655,P〈0.05）、第1组与第5组（q=4.610,P〈0.05）、第1组与第6组（q=5.163,P〈0.05）、第2组与第4组（q=5.040,P〈0.05）、第2组与第5组（q=3.995,P〈0.05）、第2组与第6组（q=4.549,P〈0.05）皮肾通道建立时间有显著统计学差异,其余2组间比较均无显著统计学差异（P〉0.05）。6组的清石率分别为70%、60%、70%、80%、90%及70%,各组比较无显著统计学差异（χ2=2.727,P=0.742）。结论学习经皮肾镜手术是个渐进的过程,完成30例手术后开始熟悉B超引导下建立皮肾通道,缩短建立皮肾通道的时间。     

不同年龄医生应用腹腔镜模拟训练器的效果分析

目的 探讨不同年龄段医生参与腹腔镜模拟训练器的培训效果.方法 按年龄分3组,每组10人,低龄组(年龄≤25岁)、中龄组(年龄＞25 ～≤35岁)和大龄组(年龄＞35 ～≤45岁).训练内容为腹腔镜下夹取黄豆、剪切图形和缝合打结训练,分别在训练前、训练3次、训练6次记录1 min内的拾豆数,剪切一个几何图形所需的时间及10 min内的缝合打结数,各计数3次,取平均值.结果 训练前3组夹取黄豆数分别为(9.2±1.7)、(10.2±1.2)、(9.0±1.4)个/min,无统计学差异(F=1.97,P=0.159),训练3次后低龄组1 min夹豆数(17.2±2.1)个/min明显多于中龄组(14.2±1.9)个/min(q=5.342,P ＜0.05)和大龄组(11.3±1.2)个/min(q=10.507,P＜0.05),中龄组明显多于大龄组(q=5.164,P＜0.05);训练6次后3组比较无统计学差异(F=2.27,P=0.123).训练前3组剪裁几何图形所需时间分别为(11.2±1.6)、(10.2±1.2)、(10.2±1.2)min,无统计学差异(F=1.84,P=0.178),训练3次后低龄组剪裁几何图形所需时间(5.2±1.1)min明显少于中龄组(8.2±1.3)min(q =8.105,P＜0.05)和大龄组(11.2-1.1)min(q =16.210,P＜0.05),中龄组明显少于大龄组(q=8.105,P＜0.05),训练6次后3组比较有统计学差异(F=62.80,P=0.000)).训练前3组缝合打结数分别为(1.9±0.3)、(2.2±1.2)、(2.5±1.4)个/10 min,无统计学差异(F=0.77,P=0.471),训练3次后低龄组10 min缝合打结数(8.9±1.2)个/10 min明显多于中龄组(5.1±1.6)个/10 min(q =8.924,P＜0.05)和高龄组(4.3±1.2)个/10 min(q=10.802,P＜0.05),训练6次后3组比较有统计学差异(F=35.76,P=0.000).3组在训练前后1 min夹豆数、剪裁几何图形所需时间、10 min缝合打结数均有统计学差异(P＜0.05).结论 腹腔镜模拟训练可以提高不同年龄参与者的腹腔镜操作技巧,年纪越轻培训的优势越明显.     

参附注射液对前列腺癌PC-3细胞凋亡诱导的影响

目的:研究参附注射液(SF)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及可能机制。方法:实验设立对照组和SF 50、100、200μl/ml组,Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR检测p53 mRNA表达。结果:与对照组比较,作用24、48、72 h后,SF 50、100、200μl/ml组PC-3细胞存活率显著减少(P均0.05)。SF各组24 h存活率分别为(93.76±2.63)%、(81.21±1.80)%、(18.01±3.84)%;48 h存活率分别为(94.67±1.11)%、(78.33±2.89)%、(10.34±1.44)%;72 h存活率分别为(91.30±0.47)%、(36.67±1.56)%、(1.33±0.32)%,呈浓度和时间依赖性。作用48 h后,p53 mRNA表达明显升高(P0.05)。结论:SF可以诱导PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与p53表达增高相关。     

经皮肾镜及输尿管软镜治疗孤立肾肾盂结石的临床疗效及对肾功能影响的比较

目的 比较经皮肾镜及输尿管软镜对孤立肾肾盂结石的治疗效果及对肾功能的影响。方法 选取2011年7月～2013年6月我院泌尿外科收治的58例孤立肾肾盂结石,其中30例行经皮肾镜钬激光碎石术（经皮肾镜组）,28例行输尿管软镜钬激光碎石术（输尿管软镜组）,对手术时间、出血量、结石清除率进行比较,同时测定2组患者术前24h和术后3、24、48h血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）。结果 经皮肾镜组结石清除率76.7％（23／30）,输尿管软镜组结石清除率75.0％（21／28）,2组比较无统计学差异（X^2=0.022,P=0.882）。输尿管软镜组出血量（50.3±21.5）ml,显著少于经皮肾镜组（80.2±20.5）ml（t=5.422,P=0.000）;手术时间（60.5±25.1）min,显著长于经皮肾镜组（45.34-10.5）rain（t=-3.045,P=0.004）。术后3h2组血NGAL浓度均明显升高,其中输尿管软镜组从术前（3.6±0.6）μg／L上升到（7.9±0.8）μg／L（g：33.457,P〈0.05）,经皮肾镜组从术前（3.8±0.7）μg／L上升到（6.3±0.5）μg／L（q=22.068,P〈0.05）,输尿管软镜组高于经皮肾镜组,有显著性差异（t=-9.200,P=0.000）,术后24h开始下降,但48h仍未降低至术前水平（q=4.414,P〈0.05;g=8.559,P〈0.05）。2组血BUN、Cr术前后无明显变化（P〉0.05）。结论 经皮肾镜及输尿管软镜均是治疗孤立肾盂结石的有效方法,且2种方法对肾功能均有不同程度影响,但其影响都是可恢复的。     

腹腔镜阑尾切除术阑尾根部3种处理方法的比较

目的比较腹腔镜阑尾切除手术中分别应用3种不同方法处理阑尾根部：丝线结扎、塑料夹（Hem—O—lok）夹闭、圈套器（Endoloop）套扎的效果。方法2010年2月～2011年8月168例因急性阑尾炎接受急诊腹腔镜阑尾切除术,采用3种不同方法处理根部：阑尾根部用丝线结扎50例（丝线组）,用Hem—O—lok夹闭65例（Hem—O—lok组）,用Endoloop套扎53例（Endoloop组）,比较3组术中、术后情况。结果3组术后并发症、术后住院时间无显著性差异（P〉0．05）。丝线组手术时间（54．7±5．6）min,显著长于Hem—O-lok组（44．7±5．5）min（q=13．903,P〈0．05）和Endoloop组（49．1±5．1）min（q=7．428,P〈0．05）。丝线组手术费用（3285．2±55．4）元,显著多于Hem．O—lok组（3083．3±80．0）元（q=23．402,P〈0．05）,但显著少于Endoloop组（3646．5±50．8）元（q=39．957,P〈0．05）。结论3种处理阑尾根部的方法都是安全、有效的,但Hem—O—lok夹闭比丝线结扎和Endoloop套扎,更省手术时间和手术费用,并且更适合于初学者。     

腹腔镜下猪胰肠吻合的学习曲线分析

目的：评价腹腔镜下猪胰肠吻合的手术效果，探讨其学习曲线。方法2012年9月～2013年2月我科由同一手术团队完成40头家猪腹腔镜下胰肠吻合手术，按家猪实验的时间顺序分为4组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组），每组10例，比较4组手术时间、吻合效果。结果40头家猪腹腔镜下胰肠吻合手术均成功完成。4组手术时间有统计学差异，其中Ⅳ组手术时间（112．7±8．3）min显著短于Ⅰ组（145．1±16．6）min（q＝9．154，P＜0．05）、Ⅱ组（133．0±8．7）min（q＝5．735，P＜0．05）、Ⅲ组（137．2±9．0）min（q＝6．922，P＜0．05），Ⅱ组与Ⅰ组手术时间无统计学差异（q＝3．419，P＞0．05），其他各组间手术时间无统计学差异，表明腹腔镜下猪胰肠吻合的学习曲线约为30例，手术频数约为6．7例／月。4组吻合效果无统计学差异（χ2＝0．586，P＝0．900）。结论腹腔镜下猪胰肠吻合动物实验是可行的，学习曲线约为30例。     

黄芩对大鼠肝硬化内毒素血症肠黏膜损伤的保护性机制研究

目的：探讨黄芩对大鼠肝硬化内毒素血症肠黏膜损伤的保护性机制。方法复合因素造模法建立肝硬化内毒素血症大鼠模型。模型确立后将大鼠随机分为3个实验组,即模型组、黄芩组治疗组和谷氨酰胺治疗组,每组各20只;另设正常对照组大鼠10只。各组大鼠给予灌胃治疗,共2周。实验结束后,采用ELISA法检测大鼠血清内毒素水平,TUNEL法检测各组大鼠肠黏膜细胞凋亡并计算凋亡率,采用RT-PCR检测肠黏膜细胞凋亡相关基因Bcl-2 RNA和Bax RNA的表达水平。结果3个实验组较正常对照组大鼠内毒素组水平均显著升高（F =3.31,P ＜0.05）;其中模型组显著高于黄芩治疗组（q =5.12,P =0.0000）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =3.74,P =0.0123）。3个实验组与正常对照组比较,肠黏膜细胞的凋亡率均显著升高（F =4.77,P ＜0.01）;其中模型组显著高于黄芩治疗组和谷氨酰胺组（q =4.56、4.35,P均＜0.01）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =3.78,P =0.012）。3个实验组与正常对照组比较,肠黏膜组织Bcl-2 mRNA水平显著下降（F =3.55, P ＜0.05）;其中模型组显著低于黄芩治疗组和谷氨酰胺治疗组（q =3.89、3.40,P ＜0.05）;黄芩治疗组显著高于谷氨酰胺组（q =2.77,P ＜0.05）。3个实验组大鼠肠黏膜Bax mRNA水平则显著高于正常对照组（F =3.67,P ＜0.05）;模型组显著高于黄芩治疗组和谷氨酰胺治疗组（q =3.62、2.91,P ＜0.05）;黄芩治疗组显著低于谷氨酰胺组（q =2.85,P ＜0.05）。结论黄芩能够通过降低肠黏膜细胞的凋亡而减少肝硬化内毒素血症的发生。     

SLP-2对前列腺癌PC-3细胞增殖和早期凋亡的影响

目的探讨SLP-2（stomatin-like protein2）基因对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法合成和构建SLP-2沉默和过表达载体,用Lipofectamine TM2000分别转染5组人前列腺癌PC-3细胞：pcDNA3．1-SLP-2组,空质粒pcDNA3-1组,siRNA—SLP-2组,siRNA阴性对照组以及空白对照组。采用Q-PCR和Western-Blot分别检测PC-3细胞中SLP-2的mRNA和蛋白表达量;用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测PC-3细胞增殖;采用细胞线粒体膜电位JC-1试剂盒检测PC-3细胞的早期凋亡情况。结果转染pcDNA3．1-SLP-2质粒和siRNA-SLP-2后PC-3细胞SLP．2基因mRNA表达水平分别为（324．884±16．508）和（0．195±0．016）,蛋白表达水平分别为（5．013±0．284）和（0．296±0．011）,与空白对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）;转染pcDNA3-1-SLP-2基因48h、72h、96h后Pc。3细胞增殖吸光度值（OD值）分别为（0．714±0．007）、（1．103±0．018）、（1．348±0．018）,均显著高于空白对照组（P〈0．05）。采用siRNA沉默SLP．2基因48h、72h、96h后PC-3细胞增殖率分别为（0．571±0．004）、（0．875±0．010）、（1．044±0．008）,均显著低于空白对照组（P〈0．05）;细胞凋亡结果显示,转染pcDNA3．1-SLP．2和siRNA-SLP-2的PC-3细胞早期凋亡率分别为（2．433±0．577）和（9．197±0．602）,与空白对照组（4．993±0．710）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论SLP-2可促进人前列腺癌PC-3细胞的增殖,并抑制细胞的早期凋亡。     

经皮肾镜治疗肾盂输尿管连接部狭窄合并肾结石

目的探讨经B超引导经皮肾镜下应用自制电刀腔内切开治疗。肾盂输尿管连接部狭窄（ureteropelvic junction obstruction,UPJO）,同时应用气压弹道联合超声碎石处理肾结石的疗效。方法2008年8月～2009年12月,18例UPJO合并肾结石,采用EMS第3代气压弹道联合超声碎石机清除结石,然后用自制电刀直抵肾盂输尿管连接处狭窄段,分别于6、9点位置处纵行全层切开输尿管壁,直到显露输尿管壁周围脂肪,术后留置海马管1—3个月。结果18例均一次手术成功,手术时间40～65min,平均38min。术后住院7～11d,平均9d。术后1周,3、6个月肌酐分别为（252．54±71．6）、（127．1±35．6）、（107．1±35．7）μmol／L,比术前（292．8±62．8）μmol／L明显下降（g=3．173,P〈0．05;q=13．048,P〈0．05;q=14．622,P〈0．05）;术后1周,3、6个月尿素氮分别为（10．5±1．2）、（8．9±1．6）、（7．8±0．9）mmol／L,比术前（11．8±2．2）mmol／L明显下降（q=3．551,P〈0．05;g=7．921,P〈0．05;q=10．926,P〈0．05）;术后3、6个月超声提示肾盂集合系统分离指数分别为（40．6±6．3）、（34．8±11．8）mm,较术前（52．94-13．6）mm明显下降（g=4．587,P〈0．05;q=6．750,P〈0．05）。18例随访3—16个月,平均11个月,16例腰痛、腰胀、尿频症状缓解,静脉肾盂造影显示狭窄段基本消失,2例仍有腰痛、腰部酸胀,静脉肾盂造影显示部分仍存在狭窄。结论经皮肾镜腔内切开治疗UPJO,同时处理肾结石疗效满意。