内皮素、一氧化氮与阻塞性黄疸肾功能障碍关系的实验研究

目的 研究内皮素(Endothelin ET)、一氧化氮(Nitric Oxide NO)与阻塞性黄疸(Obstructive Jaundice OJ)肾功能障碍的关系。方法 雄性SD大鼠胆总管结扎后随机分成5天、10天、15天三组，同时建立对应的假手术对照组。观察肾功能的变化，同时测定血和肾组织ET、NO水平及一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthetase NOS)活性，并用图像分析检测ET—1mRNA和NOS—mRNA表达的部位和量的变化。结果 随胆总管梗阻时间的延长，血和肾组织ET升高，NO下降，ET／NO比值与内生肌酐清除率(Creatinine clearance rate Ccr)、肾皮质血流(Renal cortex blood flow RCBF)呈负相关。肾组织ET—1mRNA和iNOS mRNA表达增加，血和肾组织NOS活性降低。结论 血和肾组织ET升高，NO下降，ET／NO比值升高是导致OJ时肾功能损伤的原因之一。     

阻塞性黄疸时L-精氨酸对肾功能的保护作用

目的：研究阻塞性黄疸（OJ）时，L－精氨酸（L－Arg)对肾功能的保护作用。方法：胆总管结扎大鼠30只，随机分成生理盐水对照（NS）组、L－精氨酸（L－Arg)组和L－硝基精氨酸（L－NNA）组，每组10只。胆总管结扎后第2天起分别腹腔注射1ml NS、1ml L-Arg(500mg/kg)、1ml L-NNA(10mg/kg)，连用9d；假手术（SO）组用1ml NS腹腔注射。观察各组肾功能的变化，同时测定血和肾组织内皮素（ET）、一氧化氮（NO）水平、一氧化氮合酶（NOS）活性和丙二醛（MDA）的含量。并用图像分析检测ET1 mRNA和NOS mRNA表达的部位及量的变化。结果：用L－Arg后，血和肾组织NOS活性增加，肾组织ET1 mRNA表达减少，血和肾组织ET下降，NO升高；同时伴有内生肌酐清除率（Ccr)、肾皮质平均血流（RCBF）的升高，肾组织MDA含量降低。结论：L－Arg通过增强血和肾组织NOS活性来增加体内NO水平、抑制ET1 mRNA表达、降低体内ET水平，从而提高Ccr与RCBF，减轻阻塞性黄疸时的肾功能损伤。     

烧伤后肾组织内皮素-1及其受体基因的表达

目的探讨烧伤后肾组织内皮素-1(ET-1)升高的效应部位以及效应的 ETR 亚型。方法采用斑点杂交和原位杂交技术对大鼠30％体表面积Ⅲ度烧伤模型的 ET-1及其受体亚型(ETA、ETB)的基因表达进行了研究。结果烧伤后1小时,ET-1、ETA、ETB、mRNA 均明显升高;烧伤后24小时仍维持较高水平。ET-1和 ETA mRNA 杂交信号于烧伤后3小时达高峰。ET-1mRNA 主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管,ETA 受体 mRNA 则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ETB 受体mRNA 于烧伤后6小时达高峰,主要分布髓质肾小管、集合管。结论烧伤后肾脏内皮素受体亚型上调在皮质以 ETA 为主,在髓质以 ETB 为主,它们分别与增强表达的 ET-1结合可能导致肾皮质缺血和水钠代谢异常,是烧伤后肾功能障碍的重要因素。     

烧伤后肾组织内皮素-1 及其受体基因的表达

目的探讨烧伤后肾组织内皮素－１（ＥＴ－１）升高的效应部位以及效应的ＥＴＲ亚型。方法采用斑点杂交和原位杂交技术对大鼠３０％体表面积Ⅲ度烧伤模型的ＥＴ－１及其受体亚型（ＥＴＡ、ＥＴＢ）的基因表达进行了研究。结果烧伤后１小时，ＥＴ－１、ＥＴＡ、ＥＴＢ、ｍＲＮＡ均明显升高；烧伤后２４小时仍维持较高水平。ＥＴ－１和ＥＴＡｍＲＮＡ杂交信号于烧伤后３小时达高峰。ＥＴ－１ｍＲＮＡ主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管，ＥＴＡ受体ｍＲＮＡ则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ＥＴＢ受体ｍＲＮＡ于烧伤后６小时达高峰，主要分布髓质肾小管、集合管。结论烧伤后肾脏内皮素受体亚型上调在皮质以ＥＴＡ为主，在髓质以ＥＴＢ为主，它们分别与增强表达的ＥＴ－１结合可能导致肾皮质缺血和水钠代谢异常，是烧伤后肾功能障碍的重要因素。     

梗阻性黄疸大鼠血浆和肾组织内皮素含量的变化及与肾功能关系的研究

目的：了解血浆，肾组织内皮素（ET）在梗阻性黄疸（OJ）大鼠模型上不同梗阻时间的变化情况，探讨循环ET和肾内ET与梗阻性黄疸时肾功能损害的关系。方法：胆总管结扎及假手术组各32只Wistar大鼠分别于术后5，10，15，20d（每小时n=8)采用放射免疫法测定血浆和肾皮质，髓质细胞匀浆ET含量，同时测定血清肌酐（Cr)，尿素氮（BUN）和直接胆红素（DB）浓度，并对肾脏行光镜下病理形态学观察。结果；血浆ET浓度及肾皮质，髓质ET含量在梗阻5d即升高，且随OJ时间延长进一步升高，伴有血清Cr,BUN,DB的升高和肾脏病毒形态的进行性改变。血浆ET，肾皮质ET在大部分或部分时相与Cr,BUN呈明显正相关，血浆ET在大部分时相与DB呈明显正相关。结论：梗阻性黄疸时循环和肾内ET水平持续性升高；血浆和肾皮质ET的升高可能参与了肾脏滤过功能的损害；肾髓质ET的升高可能是导致OJ早期尿浓缩功能异常的介质之一；高胆红素血症可能是血浆ET升高的原因之一。     

内皮素在大鼠梗阻性黄疸肝脏损伤中的作用

目的：观察大鼠胆管梗阻后内皮素在肝组织及血液中的分泌状况及甘胆酸的变化，探讨内皮素与甘胆酸之间的关系。方法：用放射免疫法观察大鼠胆管梗阻后5、10、15、20、25天时血及肝组织中内皮素含量，组织病理切片观察肝脏的病理改变。结果与结论：内皮素含量随梗阻性黄疸后时间延长而递增,与甘胆酸升高水平呈正相关（P＜0.01），说明内皮素可能是参与梗阻性黄疸致肝脏损伤的重要因素之一。     

内毒素引起阻塞性黄疸大鼠肾功能障碍的机制

目的 探讨阻塞性黄疸(obstructive jaundice,OJ)时内毒素引起肾功能障碍的机制.方法 SD大鼠60只,胆总管结扎后,分5 d(B1),10 d(B2),15 d(B3)三组,每组各10只,同时建立相应对照组(A1,A2,A3),另30只胆总管结扎后分3组(SHUD,LAC,NS),每组各10只,分别用2 ml舒胆合剂、乳果糖液、生理盐水灌胃,连用9 d.观察内毒素、血和肾组织中内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性及肝、肾功能的变化.结果 血内毒素与血、肾组织ET含量,ET/NO比值呈显著正相关(P＜0.05,r=0.630,0.438,0.496,0.453),与肌肝清除率(creatinine clearance,Ccr)和肾皮质血流量(renal cortical blood flow,BCBF)呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.600,-0.410).血、肾组织ET/NO比值与Ccr,RCBF呈显著负相关(P＜0.05,r=-0.449,-0.558,-0.626,-0.731).血和肾组织内NO水平与内毒素水平呈负相关(P＜0.05,r=-0.518,-0.441),与Ccr、RCBF呈正相关(P＜0.05,r=0.422,0.496,0.400,0.659).SHUD组与LAC血内毒素、ET水平组明显降低,血和肾组织NO,NOS活性以及Ccr,RCBF较NS组明显升高.结论 OJ时内毒素可通过刺激ET的释放,提高ET/NO比值,使肾内缩血管因子与扩血管因子比例失调而损伤肾功能.     

内皮素在大鼠梗阻性黄疸肝脏损伤中的作用

目的：观察大鼠胆管梗阻后内皮素在肝组织及血液中的分泌状况及甘胆酸的变化，探讨内皮素与甘胆酸之间的关系，方法：用放射免疫法观察大鼠胆管梗阻后5、10、15、20、25天时血及肝组织中内皮素含量，组织病理切片观察肝脏的病理改变。结果与结论：内皮素含量随梗阻性黄疸后时间延长而递增，与甘胆酸升高水平呈正相关(P<0．01)，说明内皮素可能是参与梗阻性黄疸致肝脏损伤的重要因素之一。     

阻塞性黄疸中肝细胞凋亡及机制的研究

目的：观察阻塞性黄疸中肝细胞凋亡，并进一步探讨其分子机制。方法：结扎Wistar大鼠胆总管建立阻塞性黄疸模型，应用普通组织学、原位末端标记方法检测阻塞性黄疸不同时期肝细胞凋亡，及解除梗阻后病理学和细胞凋亡的变化情况；采用ELISA、生物化学等方法检测血清胆红素、肿瘤坏死因子（TNF）－α、三酰甘油浓度；并应用免疫组化方法检测肝脏转化生长因子（TGF）－β1的表达。结果：大鼠胆总管结扎术后3天，即可见肝胆管扩张，细胞凋亡明显增多，早期随着胆红素升高，肝细胞凋亡数量与之呈正相关，后期纤维组织大量增生，肝细胞凋亡相对减少；解除梗阻后，细胞凋亡逐渐减少，直至正常。结扎胆总管后，其血清TNF－α和三酰甘油值相应增高，肝脏开始表达TGF－β1并逐日增多；解除梗阻后，又逐日减少直至正常。结论：细胞凋亡方式存在于阻塞性黄疸肝脏中，与胆红素、TNF－α、TGF－β1等密切相关。     

缺血再灌流肾组织内皮素—1及其受体基因表达的实验研究

为了探究内皮素１（ＥＴ１）对肾功能的影响和作用方式，采用斑点杂交和原位杂交方法对大鼠缺血６０分钟再灌注肾组织ＥＴ１及其受体亚型（ＥＴＡ、ＥＴＢ）的基因表达进行了研究。结果发现：再灌流１小时，ＥＴ１、ＥＴＡ、ＥＴＢｍＲＮＡ均明显升高；再灌流２４小时仍维持较高水平。ＥＴ１和ＥＴＡｍＲＮＡ杂交信号再灌流３小时达高峰。ＥＴ１ｍＲＮＡ主要分布肾皮质小血管内皮细胞、髓质肾小管和集合管，ＥＴＡ受体ｍＲＮＡ则分布于上述小血管的平滑肌细胞。ＥＴＢ受体ｍＲＮＡ于再灌流６小时达高峰，主要分布髓质肾小管、集合管。说明缺血再灌流肾内皮素受体亚型上调在皮质以ＥＴＡ为主，在髓质以ＥＴＢ为主，分别与增强表达的ＥＴ１结合导致肾皮质缺血和水钠代谢异常。     

梗阻性黄疸兔血浆内毒素和内皮素1含量与血流动力学改变的关系

研究梗阻性黄疸内毒素血症对血管内皮细胞产生内皮素１（ＥＴ－１）的作用及ＥＴ－１与梗阻性黄应时血流动力学改变的关系。方法用肝总管结扎法建立梗阻性黄疸（ＯＪ）兔模型,偶氮显色法定量测定血内毒素含量,特异性放射免疫分析法测定血浆ＥＴ－１,生理记录仪和电磁血流计测定心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、心输出量（ＣＯ）、肝动脉血流量（ＨＡＢＦ）、门静脉血流量（ＰＶＢＦ）、门静脉压力（ＰＶＰ）及内脏血管阻力（ＳＡＲ）。结果ＯＪ组血浆内毒素含量明显高于正常对照（ＮＣ）组;血浆ＥＴ－１低于ＮＣ组。ＯＪ组血浆内毒素与血浆ＥＴ－１含量呈负相关;ＯＪ组血浆ＥＴ－１含量与ＭＡＰ、ＨＡＢＦ、ＰＶＢＦ及ＳＡＲ呈正相关。结论梗阻性黄疽时血浆ＥＴ－１水平降低,内毒素血症不能刺激血管内皮细胞产生ＥＴ－１,血浆ＥＴ－１水平下降在系统血流动力学改变中起一定的作用。     

Endothelin-1, endothelin-3 and their receptors (endothelinA and endothelinB) in chronic renal transplant rejection in rats1

Endothelins (ET) are a family of vasoactive peptides that play an important role in several disorders affecting kidneys. In this study we investigated the expressions of ET-1, ET-3, and their receptors, ET_A and ET_B, in a rat chronic renal transplant rejection model. Renal allografts were performed (F344 → Lewis) with bilateral nephrectomy in recipients. For isograft control, lewis → lewis transplantations were performed. All recipients were sacrificed 140 days after transplantation and the grafts were analyzed histologically. ET-1 and ET-3 protein expression in grafts was measured by immunohistochemistry and ELISA. Semiquantitative RT-PCR methods were used for mRNA levels of ET-1, ET-3, ET_A and ET_B. No evidence of chronical rejection was manifested in isografts. The allografted rats showed proteinuria and increased serum creatinine levels. Histologically, renal allografts showed atrophy and sclerosis of the glomeruli, cortical scarring and vascular intimal thickening. Immunohistochemically, ET-1 and ET-3 were localized in the convoluted tubules, collecting ducts, endothelium and smooth muscle cells of the large blood vessels. Significantly increased staining for ET-1 and ET-3 were found in allografts compared to isografts. Simultaneously, ELISA for ET-1 and ET-3 showed elevated protein concentrations in allografts compared to isografts. Allografts showed significantly increased ET-1- and ET-3 mRNA compared to isografts. On the other hand, a significant down regulation of the ET_A mRNA was noted, and the ET_B mRNA remained unchanged. The data from the present study suggest that alteration of ET system may be of importance in the pathogenesis of chronic renal transplant rejection. Received: 19 January 1999 Revised: 17 December 1999 Accepted: 28 January 2000     

Multivariate analysis of factors associated with renal dysfunction in patients with obstructive jaundice

BACKGROUND: The aim was to evaluate the factors determining preoperative renal dysfunction in patients with obstructive jaundice. METHODS: In a prospective cross-sectional observational study, 63 patients, 27 with benign and 36 with malignant obstructive jaundice, were investigated at admission and compared with 25 healthy control subjects. Variables analysed included extracellular body water (ECW) compartment, plasma levels of aldosterone, renin, atrial natriuretic peptide, vasopressin, nitric oxide, endothelin (ET) 1 and prostaglandin E2 (PGE2), urinary nitric oxide and PGE2, serum albumin and renal function. RESULTS: The metabolic profile of obstructive jaundice was characterized by a depletion of the ECW (P = 0.004), and increased plasma levels of atrial natriuretic peptide (P < 0.001), ET-1 (P = 0.044), vasopressin (P = 0.017), aldosterone (P = 0.005) and renin (P = 0.001). Increased plasma (P < 0.001) and urinary (P = 0.001) PGE2 levels were also found. Fifty-four per cent of patients had a creatinine clearance of less than 70 ml/min. In multivariate analysis, serum bilirubin, renin, ET-1, PGE2, decreased urinary sodium excretion and age were identified as predictors of renal dysfunction. CONCLUSIONS: Renal dysfunction in patients with obstructive jaundice was associated with the degree of biliary obstruction, age of the patient and reduced urinary sodium excretion. These alterations were closely related to derangements in sodium- and water-regulating hormones.     

黄芪对梗阻性黄疸大鼠肾功能的保护作用

目的:探讨黄芪对梗阻性黄疸大鼠肾功能的保护作用及机理.方法:SD大鼠胆总管结扎后分2组,每组20只,术后分别用3 mL黄芪或生理盐水腹腔注射.假手术组20只.术后10 d、20 d(每小组n=10)心脏取血测定血浆内皮素(ET-1)、血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,同时测定血清肌酐(Cr)尿素氮(BUN)和直接胆红素(DB),对肾脏行病理形态学观察.结果:血浆ET-1、血清MDA浓度在梗阻10 d即升高且随胆道梗阻时间延长进一步升高,SOD在梗阻10 d即下降,同时伴有血清Cr、BUN、DB的升高和肾脏病理形态学的进行性改变.黄芪治疗组ET-1及MDA显著低于对照组,而SOD显著高于对照组,并能改善肾组织病理形态.结论:大鼠梗阻性黄疸时血浆ET-1升高及氧自由基损害是肾损伤的原因,黄芪通过降低ET-1水平、抗氧化作用对梗阻性黄疸大鼠肾脏起保护作用.     

内毒素血症与梗阻性黄疸病人肾功能损害的关系

目的: 探讨梗阻性黄疸(梗黄)病人血浆内毒素(ET)水平与肾功能的关系.方法: 动态观察30例梗黄(梗黄组)手术前后血浆ET、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及内生肌酐清除率(Ccr)变化,并与21例无黄疸病人(对照组)进行同步比较.结果: 梗黄组外周血ET水平显著升高(P<0.01),Ccr显著降低(P<0.01);门静脉血ET水平又显著高于外周血(P<0.05),术后5 d内ET水平降低不明显;术后第1天ET反而升高(P<0.05),Ccrr更趋下降(P<0.05),并伴有血Cr、BUN升高(P<0.05);5 d后随ET水平逐渐下降,Cor逐步上升,第15天ET、Ccr两项指标接近正常水平;ET与Ccr呈显著负相关(r=-0.55,P<0.05).对照组血浆ET呈低水平,Ccr在100ml/min左右,手术前后变化均不显著(P>0.05).结论: 肠源性内毒素血症是梗黄肾功能损害的重要原因,围手术期以手术后一周内最为严重.     

精氨酸对梗阻性黄疸病人肾脏损害的保护作用

目的 观察精氨酸对梗阻性黄疸（梗黄）病人肾功能的保护效应。方法34例梗黄病人,随机分为两组,分别在术前给予一般治疗（梗黄组）和精氨酸治疗（治疗组）,连续治疗7d,观察手术前后血ET（内毒素）及Ccr（内生肌酥清除率）变化,并与20例无黄疸的慢性胆囊炎、胆囊结石病人（对照组）比较。结果（1）入院时梗黄组与治疗组外周血ET及Ccr水平比较,差别无显著意义（P>0.05）,但上述两组ET均显著高于对照组（P<0.01）,Ccr显著低于对照组（P<0.01）;（2）梗黄组术后第1天血ET较术前升高（P<0.05）,Ccr更趋下降（P<0.05）,7d后随血ET水平下降,Ccr逐渐升高,第14天ET和Ccr两项指标接近正常水平;ET与Ccr呈显著负相关（P<0.05）;（3）治疗组用药后血ET水平下降,术后保持较低水平,而Ccr用药后升高,第7天ET、Ccr两项指标已接近正常水平。结论 术前使用精氨酸可显著降低梗黄病人内毒素血症,提高内生肌酥清除率,对肾功能具有良好的保护作用。