缺氧大鼠心肌线粒体呼吸功能、ATP含量变化的研究

缺氧大鼠心肌线粒体呼吸功能、ＡＴＰ含量变化的研究第三军医大学病理生理教研室（重庆６３００３８）第三军医大学高原医学研究室罗刚谢增柱张国斌刘福玉我们观察了急性和慢性间断缺氧大鼠心肌线粒体呼吸功能（ＳＴ３、ＳＴ４、ＲＣＲ、ＡＤＰ／Ｏ、ＡＴＰ生成速率），Ｆ...     

缺氧大鼠心肌胶原网架改建及拉西地平的防治作用

缺氧大鼠心肌胶原网架改建及拉西地平的防治作用第三军医大学病生教研室（重庆６３００３８）刘兵谢增柱王仕军本文观察了慢性间断缺氧大鼠心肌胶原浓度（ＣＣ）和胶原总量（ＴＣＣ）及右心室结构、功能和心肌胶原分布的变化，测定了血浆Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）含量及心肌Ⅰ...     

预缺氧对急性缺氧大鼠心肌线粒体功能及ATP含量的影响

目的：观察预缺氧对急性缺氧大鼠心肌线粒体功能及ＡＴＰ含量的影响。方法：实验大鼠分三组。１常氧对照组;２急性缺氧组;３预缺氧组。测定了心肌ＡＴＰ含量及线粒体呼吸功能,以荧光偏振法测定线粒体膜流动性。结果：经预缺氧处理的大鼠遭受急性缺氧后ＡＴＰ含量从（３１８±２４２）ｍｇ１·ｇ－１增加到（６０５５±３．５２）ｍｇ－１·ｇ－１（Ｐ＜００１）;线粒体呼吸控制率（ＲＣＲ）从１８４±０５８上升到４５５±０３２（Ｐ＜００１）;线粒体膜流动性（ＭＭＦ）明显增加（Ｐ＜００５）,Ｆ０Ｆ１－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性分别提高６６％和２５％。结论：预缺氧可有效改善缺氧大鼠心肌能量代谢,其作用环节可能和提高线粒体膜流动性,改善线粒体呼吸功能有关。     

缺氧对右心室最大心肌血流量的影响

缺氧对右心室最大心肌血流量的影响第三军医大学病理生理教研室（重庆６３００３８）谢增柱刘福玉黄庆愿罗刚张国斌本文观察急性缺氧对右心室心肌最大血流量变化，以期了解冠状贮备能力变化。４４只大鼠分三组：１．常氧对照组（ｎ＝１４只）；２．急性缺氧组（ｎ＝１６只...     

急慢性缺氧对大鼠心肌和肝细胞线粒体~3H－亮氨酸掺入量及DNA含量的影响

本文采用￣３Ｈ－亮氨酸活体注入法观测了急性连续缺氧（模拟高原５０００ｍ）３、１２，３６和７２小时以及慢性间断缺氧１４，２８和４２（每天８小时）对大鼠肝脏及心肌线粒体的￣３Ｈ－亮氨酸掺入的影响。结果显示心肌线粒体的￣３Ｈ－亮氨酸掺入量多于肝脏。急性缺氧可显著抑制亮氨酸掺入，随后逐渐上升。缺氧７２小时末心肌和肝线粒体的亮氨酸掺入量分别达１７３％和１４８％。慢性缺氧可致心肌及肝脏线粒体的亮氨酸掺入量降低。以荧光法测定慢性缺氧心肌线粒体的ＤＮＡ含量，结果显示缺氧１４天无显著变化，２８天及４２天ＤＮＡ量显著升高。本实验结果提示，急性缺氧可显著抑制￣３Ｈ－亮氨酸掺入线粒体，但随后线粒体蛋白合成增强，慢性缺氧动物心肌线粒体蛋白合成受抑而ＤＮＡ复制增加。     

急慢性缺氧对大鼠心肌和肝细胞线粒体^3H—亮氨酸参入量及DN…

本文采用＾３Ｈ－亮氨酸活体注入法观测了急性连续缺氧（模拟高原５０００ｍ）３、１２、３６和７２小时以及慢性间断缺氧１４、２８和４２（每天８小时）对大鼠肝脏及心肌线粒体的＾３Ｈ－亮氨酸掺入的影响。结果显示心肌线粒体的＾３Ｈ－亮氨酸掺入量多于肝脏。急性缺氧可显著抑制亮氨酸掺入，随后逐渐上升。缺氧７２小时末心肌和肝线粒体的亮氨酸掺入量分别达１７３％和１４８％。慢性缺氧可致心肌及肝脏线粒体的亮氨酸掺入量降低     

缺氧对大鼠心肌线粒体能量代谢和腺苷酸转位酶活性的影响

目的： 探讨高原低压缺氧暴露过程中大鼠心肌能量代谢及腺苷酸转位酶活性变化特点。 方法： 雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、缺氧1 d组、5 d组、15 d组和30 d组。缺氧组于模拟海拔 5 000 m高原低压舱内连续缺氧23 h/d。提取心室肌线粒体，Clark氧电极法测定线粒体氧化呼吸活性；HPLC法测量线粒体内腺苷酸含量；［3H］-ADP掺入法测量线粒体ANT转运活性。 结果： 大鼠经缺氧1 d、5 d、15d 后， ST3和RCR显著降低，缺氧30 d时ST3仍显著低于对照组， ST4在缺氧1 d、5 d、15 d时显著升高，缺氧30 d时降低，RCR在30 d时接近正常。缺氧1 d和5 d心肌线粒体ATP含量、ANT活性明显下降，缺氧15 d时接近正常，缺氧30 d时则再次降低。 结论： 缺氧对心肌线粒体氧化呼吸功能的抑制是导致线粒体内ATP含量下降的主要原因。缺氧过程中ANT活性与线粒体内ATP含量成协调变化。     

衰老大鼠心肌细胞器形态的定性定量改变及其调探钙离子能力分析

目的 探讨心肌衰老机制。方法 采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分老龄组（２２月龄）和成年组（７月龄）。用透射电镜观察心肌细胞器形态定性改变；用体视学方法测定心肌细胞器形态定量改变；用Ｘ射线性谱仪分析心肌细胞器调控Ｃａ＾２＋能力。结果 与成年组比较，老龄组大鼠心肌改变：（１）核有切痕、肌原纤维不规整、闰盘离解、线粒体和肌浆网肿胀、脂褐素和残余体增多。（２）在心肌组织内，非肌细胞所占体积份数增加，线粒体和肌浆网体密度减少，线粒体外膜比面积、内膜＋嵴比面积、肌浆网比面积减少。（３）在舒张状态下，肌原纤维和线粒体内Ｃａ＾２＋增加，肌浆网内Ｃａ＾２＋减少。结论 衰老心肌的舒缩力减退，心肌细胞器形态呈明改变，心肌衰老与线粒体和肌浆网的形态改变及其调控Ｃａ＾２＋能力有直接关系。     

雌二醇对离体大鼠缺氧─复氧心脏的保护作用

本实验采用离体大鼠心脏灌注模型，观察雌二醇（３．３ｎｇ／ｍｌ）对缺氧─复氧心脏收缩功能及超微结构的影响。结果表明，雌二醇对缺氧─复氧心肌具有一定的保护作用，这一作用与雌激素能相对提高缺氧─复氧心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性和相对降低其Ｃａ￣（２＋）含量有关。     

内毒素休克大鼠线粒体质子跨膜转运的改变

内毒素休克大鼠线粒体质子跨膜转运的改变重庆第三军医大学野战外科研究所第二研究室（重庆４０００４２）杨鹤鸣陆松敏刘建仓李萍朱正坤郭素清跨线粒体内膜质子电化学梯度（△ｕＨ＋）是ＡＴＰ合成的动力，质子跨膜转运是△ｕＨ＋形成的基础。本实验用荧光探针（ＡＣＭＡ...     

缺氧－复氧幼狗心肌细胞冷冻蚀刻电镜观察

本实验以幼狗心脏为实验对象，应用冷冻蚀刻技术观察ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞，尤其是膜结构的影响。结果表明，缺氧－复氧对照组心肌细胞损伤较重，而ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２组心肌细胞损伤轻ｑ提示，ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞质膜、线粒体等超微结构有保护作用。     

缺氧——复氧幼狗心肌细胞冷冻蚀刻电镜观察

本实验以幼狗心脏为实验对象，应用冷冻蚀刻技术观察ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞，尤其是膜结构的影响。结果表明，缺氧－复氧对照组心肌细胞损伤较重，而ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２组心肌细胞损伤轻。提示，ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞质膜、线粒体等超微结构有保护作用。     

热应激大鼠心肌线粒体功能的变化

目的：观察不同强度热应激大鼠心肌线粒体氧化磷酸化功能和钙储存功能的变化。方法：用Ｋｌａｒｋ氧电极极谱方法测定线粒体氧化代谢功能,用生物发光法测定心室肌ＡＴＰ含量及线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性,用电感藕合等离子体－原子放射光谱仪测定心肌线粒体内钙含量。结果：热应激大鼠心肌线粒体呼吸控制率（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｃｏｎｔｒｏｌｒａｔｉｏ,ＲＣＲ）及氧化磷酸化效率（Ｐ／Ｏ）均随动物直肠温度的升高逐步显著降低,当大鼠直肠温度超过４２℃时,ＲＣＲ与Ｐ／Ｏ分别较对照下降３１４％,１１０５％。直肠温度４２℃以上,大鼠的心室肌ＡＴＰ含量仅为对照的３７５％。热应激大鼠心肌线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和钙含量亦明显降低,直肠温度４２℃以上大鼠的该两项指标可较对照值降低达３２６％和３１３％,显示了线粒体钙代谢的异常变化。结论：热应激机体心肌线粒体的氧化代谢和钙功能受损是热应激时心功能紊乱的重要原因。     

雌二醇对离体大鼠缺氧—复氧心脏的保护作用

本实验采用离体大鼠心脏灌注模型，观察雌二醇对缺氧－复氧心脏收缩功能及超微结构的影响。结果表明，雌二醇对缺氧－复氧心肌具有一定的保护作用，这一作用此雌激能相对提高缺氧－复氧心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性和相对降低其Ｃａ＾２＋含量有关。     

大鼠脑线粒体UCPs活性改变对缺氧过程中氧化磷酸化效能的影响

 目的：通过观察GDP对缺氧大鼠离体脑线粒体UCPs活性的影响，探讨UCPs活性改变在高原缺氧大鼠脑线粒体氧化磷酸化效能改变中的作用。方法： 健康成年SD大鼠随机分为对照组、急性缺氧组和慢性缺氧组，分别于模拟海拔5 000米高原环境连续缺氧暴露0 d、3 d和30 d，分离脑线粒体，通过体外GDP干预后采用［3H］-GTP结合法测定UCPs的活性（以Scatchard作图法计算两者结合的解离常数Kd和最大结合量Bmax），采用Rhodamine123法和Clark氧电极法分别测定线粒体膜电位（MMP）和线粒体呼吸氧耗。结果：急、慢性缺氧使大鼠脑组织线粒体UCPs与［3H］-GTP的最大结合量（Bmax）均显著升高，而解离常数（Kd）、线粒体膜电位（MMP）和呼吸控制率（RCR）均显著降低，但解偶联呼吸氧耗增加。给予GDP干预后，各组UCPs的活性均被显著抑制，表现为Kd升高，Bmax降低；而MMP和RCR则升高，其中急性缺氧组的变化最显著。结论： 模拟高原缺氧条件下GDP能通过抑制UCPs的活性提高大鼠脑线粒体呼吸活性和膜电位，提示UCPs的活性改变是高原缺氧条件下脑线粒体氧化磷酸化效率改变的原因之一。     

血管紧张素Ⅱ对离体心肌线粒体呼吸功能和膜电位的影响

本实验用血管紧张素Ⅱ灌流离体大鼠心脏、观察其对离体心肌线粒体能量转换功能诸参数，发中Ｓｔａｔｅ３，Ｓｔａｔｅ４耗氧量、ＲＣＲ、ＡＴＰａｓｅ合成活性和水解活性，跨膜电位的变化，探讨血管紧张素Ⅱ对心肌线粒体能量代谢的影响及其作用机制。     

钙激活钾通道在缺氧后处理对心肌保护的作用

目的： 探讨缺氧后处理在全心停灌缺氧模型中是否具有对抗心肌缺氧/复氧（A/R）损伤的作用，以及钙激活钾通道（KCa）和线粒体透性转换孔道（mPTP）是否参与缺氧后处理的抗心肌缺氧/复氧损伤。方法： 采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型，全心缺氧30 min、复氧120 min复制A/R模型。测定心室力学指标和复灌各时点冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）含量。实验结束测定心肌组织甲臜（formazan）含量。分离心肌线粒体，测定高钙诱导下mPTP的开放情况。结果： 缺氧后处理心肌细胞的formazan含量明显高于、而复灌期间冠脉流出液中LDH含量低于单纯A/R组，明显改善心室力学指标，缓解冠脉流量的减少。KCa通道阻断剂paxilline能明显阻断缺氧后处理的心肌保护作用。缺氧后处理心肌细胞的mPTP开放程度显著低于A/R组。结论： 缺氧后处理具有抗心脏缺氧/复氧损伤的作用，这种保护作用可能与其抑制KCa通道的开放和降低mPTP的开放有关。     

IHC-66对培养心肌细胞缺氧后再给氧损伤的影响

ＩＨＣ－６６［３，６－ｄｉ（ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ）－ｄｉｂｅｎｚｏｐｙｒｉｏｄｏｎｉｕｍｏｆｆｅｒｉｃ，ＥＤＴＡ］系化学合成物，具有抗心律失常与抑制心肌收缩力的作用，本文以培养的大鼠乳鼠心肌细胞为标本，观察了ＩＨＣ－６６对缺氧后再给氧损伤心肌...     

牛磺酸对大鼠在体缺血再灌注心肌线粒体呼吸酶系的影响

观察牛磺酸对大鼠缺血再灌注损伤心肌线粒体呼吸酶活力变化的影响及机理。结果表明：牛磺酸保护组的琉珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）、ＳＯＤ及ＧＳＨ·Ｐｘ活力均较缺血再灌注损伤非保护组有显著升高（Ｐ＜０．０１）,而ＭＤＡ含Ｒ则明显降低（Ｐ＜０．０１）。提小牛碘酸对缺血再灌注损伤心肌线粒体ＳＤＨ及ＣＣＯ活力有很好的保护作用,其机理可能是通过提高对氧自由基清除及抑制脂质过氧化作用而实现。     

血管舒张因子对缺氧时鼠平滑肌细胞增生的效应

血管舒张因子对缺氧时鼠平滑肌细胞增生的效应第三军医大学二院呼吸内科研究所（重庆６３００３７）王关嵩杨晓静钱桂生胡义德陈维中目的：观察缺氧时平滑肌细胞（ＳＭＣ）受血管扩张因子的作用。方法：分常氧（Ｎ）、缺氧（Ｈ）、Ｈ＋ＮＯ（ＣＯ）组，用电镜、流式细胞仪...