N-甲基小檗胺对依Ca~(2+)性内皮源松弛因子释放的影响

在无Ca~(2+)krebs-Henseleit液中,Ach诱发兔主动脉松弛受抑制,恢复Ca~(2+)后抑制解除。用NA0.5μmol/L诱发收缩反应,NMBA50、100μmol/L,Ver1、10μmol/L对肌条的Ach松弛均呈抑制,而且随剂量增加,抑制作用增强。结果提示兔主动脉EDRF释放与Ca~(2+)有关,NMBA及Ver对EDRF释放有抑制作用。     

牛磺酸对Ca~(2+)引起的脂质体聚集的影响

在人工生物膜—脂质体上观察了牛磺酸对Ca~(2+)引起的脂质体聚集的影响。结果表明,牛磺酸对Ca~(2+)引起的脂质体聚集的影响呈双向性,即低Ca~(2+)浓度(5μmol/L)时促进,而高Ca~(2+)浓度(5mmol/L)时抑制脂质体聚集。牛磺酸的上述作用受脂质体内Na~+和K~+浓度的影响。实验结果提示,牛磺酸具有缓冲Ca~(2+)效应的作用,这可能是牛磺酸能有效调节细胞钙稳态的机理之一。     

人参皂苷Rg_1对H_2O_2诱导的HT22细胞凋亡及胞内Ca~(2+)变化的影响

目的研究人参皂苷Rg_1对H_2O_2诱导的HT22细胞凋亡及胞内Ca~(2+)浓度变化的影响。方法以0、6.25、12.5、25、50、100μg/L人参皂苷Rg_1预处理细胞24 h,采用Ca~(2+)荧光染料探针Fluo-3/AM负载细胞1 h后,50 mmol/L H_2O_2刺激细胞,多功能酶标仪测定荧光强度,激光共聚焦显微镜实时监测[Ca~(2+)]i变化,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡。结果 H_2O_2可诱导细胞内Ca~(2+)浓度增加(P0.01),并增加细胞凋亡率(P0.01)。不同浓度人参皂苷Rg_1可呈剂量依赖性的抑制H_2O_2诱导的HT22[Ca~(2+)]i增加(P0.01),抑制细胞凋亡(P0.01),以50μg/L的作用为最强(P0.01)。结论人参皂苷Rg_1可通过降低H_2O_2诱导的HT22细胞内Ca~(2+)水平的升高,抑制氧化应激引起的细胞凋亡。     

野黄芩甙元及其类似物对蛋白激酶C的抑制作用

本实验测定了19种黄酮类化合物对蛋白激酶C(PKC)活性的影响,并初步探讨了化学结构与活性之间的关系。其中从中药灯盏花中分离得到的野黄岑甙元和从黄芩中分离得到的黄芩素抑制PKC的IC_(50)分别为48μmol/L和76μmol/L,并观察到野黄芩甙元在Ca~(2+)浓度10~(-2)至10~(-7)mol/L时都显示对PKC的抑制作用,这种作用也不因二油酰甘油酯或底物组蛋白的浓度增加而逆转,说明野黄芩甙元对PKC的作用属于非竞争性抑制。     

人体精子的钙吸收:特征与机制

采用安全简便的方法对人体精子的基础钙(~(45)Ca~(2 ))吸收问题进行了分析研究。结果发现~(45)Ca~(2 )的吸收呈时间依赖性过程,其最高吸收值为0.23nmol/mg蛋白质,这是在实验开始后400秒时达到的。即使将钾的浓度从0.7mmol增至50mmol(并降低相应的氯化钠浓度)也不能促进~(45)Ca~(2 )吸收。 ~(45)Ca~(2 )吸收以剂量依赖性方式被异搏定、三氟拉嗪和抗霉素A抑制,其最大抑制浓度的半数值分别是130μmol、7μmol和50nmol。 氯化钾和钙通道阻滞剂异搏定20μmol的去极化浓度不能改变~(45)Ca~(2 )的转运,但在高于20μmol异搏定浓度情况下,发生了剂量依赖性钙吸收抑制。这就很难用通道阻滞剂的门控电压来解释。事     

四氢小■碱对离体豚鼠右心房的影响

四氢小蘖碱(THB)3～300μmol/L呈浓度依赖性地减慢离体心房自动收缩频率(P<0.05或P<0.01)。1C_(50)值为19.44μmol/L,300μmol/L可使右房率降低61.3%。THB3、10和30μmol/L可抑制CaCl_2的正性变时作用时间效应。并呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01),THB10和30μmol/L可拮抗ISO诱发的心房率加快,使量—效曲线非平行右移,最大反应压低。表现为非竞争性拮抗作用。非竞争性拮抗剂与受体的亲和力的PD_2值为5.32。结果表明THB负性变时作用可能与阻滞Ca~(2+)内流有关。     

碘杂环化合物对离体豚鼠心乳头肌动作电位和收缩力的作用

采用细胞内微电极记录技术,同步观察了3,6-[二甲氨基]-二苯并碘因甲酸盐(IHC-64)对豚鼠心乳头肌细胞动作电位和收缩力的作用。50μmol/L IHC-64抑制心肌收缩力,而不影响快反应动作电位。增加IHC-64浓度,动作电位0相最大峰值(APA)、除极速率(dp/dt_(max))和复极50％和90％时程(APD_(50)、APD_(90))被明显抑制。IHC-64抑制慢反应动作电位,提高细胞外钙浓度可拮抗这种抑制。结果提示,IHC-64主要抑制慢Ca~(2+)内流,同时也部分抑制快Na~+内流,它可能是一种新型B类钙通道阻滞剂。     

小儿肺炎心衰时脂质过氧化与血清钙离子浓度的变化

测定了109例小儿肺炎、肺炎并心力衰竭(简称肺炎心衰)时血清超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物和血清钙离子浓度的改变。结果:肺炎组:88例、SOD:227.22±28.09μg/L,LPO:4.4±2.0nmol/L,Ca~(2+):2.23±0.21mmol/L;与正常对照组比较,SOD、LPO均增高,Ca~(2+)浓度降低均有显著性差异;肺炎心衰组21例,SOD:193.85±17.52μg/L,LPO:5.94±3.10nmol/L,Ca~(2+):2.07±0.15mmol/L;与正常对照组比较,LPO升高,SOD,Ca~(2+)降低,均有显著差异。提示:肺炎心衰时机体失代偿,产生SOD能力降低,自由基产生增加,过剩的自由基破坏细胞结构,形成脂质过氧化物,Ca~(2+)因细胞内外巨大浓度差内流,进一步造成细胞损害。     

依脉特灵对Ca^2＋所致小鼠离体子宫平滑肌收缩的拮抗作用

本文观察到IT对小鼠离体子宫平滑肌高K~+去极化后Ca~(2+)所致的收缩有显著抑制作用。CaCl_2量效曲线IT对其呈非竞争性拮抗。在无Ca~(2+)高K~+溶液中,IT10μM抑制OXY依赖细胞内Ca~(2+)引起的收缩,而IT50μM对依赖细胞内外Ca~(2+)所致子宫肌收缩均有抑制作用。Ver对小鼠离体子宫的作用,远较IT的强。但Ver较高浓度(59nM)只抑制依赖细胞内Ca~(2+)的收缩,对依赖细胞外Ca~(2+)的收缩影响甚少。IT与Vcr拮抗ca~(2+)的作用相似。IT为Ca~(2+)拮抗剂。     

三氧化二砷对成纤维细胞分泌巨噬细胞炎症蛋白1α mRNA表达的影响

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对3T3成纤维细胞分泌巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)mRNA表达的影响.方法 体外培养NIH3T3成纤维细胞,用含As2O3浓度分别为0+μmol/L(DMEM对照组)、2μmol/L和4μmol/L的DMEM培养液分别作用于成纤维细胞,24h和48h后MTT法观察细胞生长抑制情况;As2O3各组作用细胞24h后原位杂交方法检测MIP-1αmRNA表达的水平.结果 As2O3可显著抑制NIH3T3成纤维细胞增殖,且呈剂量-效应关系(P＜0.01).DMEM对照组及2 μmol/L和4μmol/L As2O3组均可检测到MIP-1α mRNA的表达.其中2μmol/L和4μmol/L As2O3组MIP-1α mRNA表达较DMEM对照组减弱(P＜0.01),呈剂量-效应关系(P＜0.01).结论 As2O3以剂量依赖方式抑制NIH3T3成纤维细胞增殖和MIP-1α mRNA的表达.     

不同剂量维生素E对去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的影响

目的：观察不同剂量维生素E对去甲肾上腺素(NE)诱导心肌细胞肥大的影响。方法：培养乳鼠心肌细胞暴露于NE(20μmol／L)和维生素E(5μmol／L，50μmol／L，500μmol／L)36h，检测心肌细胞^3H-亮氨酸掺入率和蛋白质含量的变化。结果：NE可导致心肌细胞^3H-亮氨酸掺入率和蛋白质含量明显增高，50μmol／L，500μmol／L的维生素E干预可抑制NE的致心肌细胞肥大的作用。结论：NE的促心肌细胞肥大作用可能与活性氧生成增加有关，维生素E以剂量依赖方式抑制NE的促肥大作用。     

罗哌卡因对离体人脐动脉收缩性的影响及其机制

目的 研究不同浓度罗哌卡因对离体人脐动脉平滑肌的收缩作用,并分析其可能的机制.方法 采用离体脐动脉环灌流模型,用MedLab生物信号采集系统测定并记录血管的张力变化情况,观察累积浓度罗哌卡因对去内皮血管环的收缩效应,并同时观察细胞外Ca~(2+)"浓度、L-型Ca~(2+)通道阻滞剂维拉帕米、内质网三磷酸肌醇受体阻滞剂肝素和兰尼定受体阻滞剂钌红对罗哌卡因血管效应的影响.结果 罗哌卡因诱发剂量关联性双相脐血管反应:在低浓度(1.0×10~(-5)～1.0 × 10(~4)moL/L)时收缩张力逐渐升高,较高浓度(3.0×10~(-4)～3.0×10~(-3)mol/L)时收缩张力依次回落.在无钙液中罗哌卡因未能诱发脐动脉环收缩,而随细胞外液钙离子浓度增加较低浓度罗哌卡因致脐动脉收缩张力增加.维拉帕米可显著抑制罗哌卡因对脐动脉环的收缩反应,而维拉帕米+钌红、维拉帕米+肝索并不增加维拉帕米的抑制作用.结论 罗哌卡因可诱发离体人脐动脉剂量关联性双相收缩效应.细胞外Ca~(2+)通过L-型钙通道内流,而非肌质网Ca~(2+)释放,使细胞内[Ca~(2+)]升高介导了罗哌卡因诱发的血管平滑肌收缩反应.     

去甲肾上腺素与脂质过氧化关系的研究

本实验观察到,一定浓度的去甲肾上腺素可显著抑制自由基发生系统引起的离体大鼠肝细胞及磷脂脂质体的过氧化,减轻脂质过氧化所致肝细胞LDH漏出及细胞内 Ca~(2+)积聚。10~(-4)mol/L去甲肾上腺素明显抑制花生四烯酸的过氧化。     

彗星电泳法检测阿魏酸 咖啡酸对脱氧核糖核酸氧化损伤的影响

目的研究在细胞水平阿魏酸、咖啡酸对脱氧核糖核酸（DNA）氧化损伤的影响。方法分别用不同浓度（50、100、500μmol/L）阿魏酸、咖啡酸对人外周血淋巴细胞预处理后,过氧化氢（H2O2）于4℃下作用10 min,并用500μmol/L咖啡酸对细胞进行处理（未经H2O2作用）,采用单细胞凝胶电泳法,以彗星尾距为指标进行测量、分析。结果阿魏酸各浓度组彗星尾距较阳性对照组都有显著减小,并随剂量的增加,尾距呈减小趋势;咖啡酸在100μmol/L时尾距较阳性对照组显著减小,而在500μmol/L时尾距较低浓度组有所增加,并与100μmol/L浓度之间差异有统计学意义;用500μmol/L咖啡酸对细胞进行处理（未经H2O2作用）,尾距较对照组显著增加。结论阿魏酸在细胞水平显示出较强的抗氧化保护DNA的作用,而且保护作用有随作用浓度增加而增强的趋势;咖啡酸保护DNA的作用较弱,高浓度组咖啡酸（500μmol/L）表现出明显的DNA损伤作用,证明咖啡酸具有抗氧化和氧化增强的双重作用。     

甲醛对人外周血淋巴细胞遗传毒性的研究

目的:研究甲醛对人外周血淋巴细胞染色体的影响。方法:用不同浓度(5、25、125、500μmol/L)的甲醛溶液处理培养中的人外周血淋巴细胞,观察其微核率及SCE频率的变化。结果:低浓度(5、25μmol/L)甲醛处理后,人外周血淋巴细胞微核率和SCE频率与阴性对照组相比,无明显增加(P>0.05);而甲醛浓度(125、500μmol/L)较高时,细胞微核率和SCE频率均显著高于阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论:较高浓度甲醛对人外周血淋巴细胞染色体有不同程度的损伤作用。     

莱菔子素诱导结肠癌细胞株Caco-2凋亡的研究

目的:探讨莱菔子素(SFN)诱导结肠癌细胞凋亡的抗肿瘤机制。方法:体外培养人结肠腺癌细胞Caco-2,观察10-100μmol/L SFN对Caco-2细胞增殖动力学的影响。MTT法检测细胞生长抑制率, 倒置相差显微镜及扫描电镜观察凋亡细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。结果: 30-100μmol/L浓度范围的SFN抑制细胞增殖,且呈剂量和时间依赖效应。倒置相差显微镜及扫描电镜观察,25μmol/L处理组无明显改变,50、75、100μmol/L处理组细胞形态学发生明显变化,典型者出现凋亡小体。流式细胞仪检测结果表明,随着SFN浓度的增高,细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞于G0-G1期, 与对照组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SFN对Caco-2细胞的生长增殖具有抑制作用,呈剂量和时间依赖效应;大剂量SFN诱导Caco-2细胞凋亡。SFN对Caco-2的生长增殖抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖两条途径实现的。     

小鼠脑Ca~(2+)/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ的鉴定及苄普地尔对其酶活力的抑制作用

用DE_(52)、磷酸纤维素和Sephaery S—300柱层析从小白鼠脑中提纯了Ca~(2+)/CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ并进行了鉴定。凝胶过滤法测定全酶分子量为55万,在SDS-PAGE中显示出两条区带,其亚基分子量分别为5万和5.7万。该酶活力依赖于Ca~(2+)和CaM,AC_(50)分别为28μmol/L和2.2μmol/L。苄普地尔对酶有抑制作用,IC_(50)约为250μmol/L。     

家兔化学裸露心肌标本制备及其张力-pCa关系

家兔右室乳头肌在含3mM EDTA、5mM Na_2ATP、10mM Tris、140 mM KCl的溶液中浸浴150min,其Ca~(2+)通透性显著增高。Ca~(2+)浓度为10~(-7)M时,便可产生张力,10~(-4.6)M时,张力达到最大。相对张力-pCa(Ca~(2+)浓度的负对数)关系近似一S形曲线,产生50％最大张力的Ca~(2+)(pCa_(50))约为10~(-6.6)M。同法制备的大鼠乳头肌Ca~(2+)通透性未见增高。     

重金属离子对骨骼肌肌动球蛋白的超沉淀作用

从家兔骨骼肌中提取肌动球蛋白,并对重金属离子对其超沉淀的影响进行了研究。低浓度的Cd~(2+)和Pb~(2+)表现出与Cd~(2+)类似的激活作用,主要是加快超沉淀的速度,Hg~(2+)的激活作用较小。离子浓度大于100μmol/L,Cd~(2+)和Pb~(2+)开始表现抑制作用,即抑制超沉淀的速度和幅度。Hg~(2+)的抑制效应最为强烈,浓度大于10μmol/L即开始出现抑制,大于20μmol/L便可阻止超沉淀的发生。重金属离子作用于肌钙蛋白调节体系,为金属中毒机制提供了新的佐证。     

镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca~(2+)及钙调素影响的研究

采用体外实验方法，观察CdCl2对培养24h的人外周血淋巴细胞内游离Ga2+浓度及CaM活性的影响。结果表明：细胞内游离Ca2+浓度与镉浓度（≤100μmol／L）及染毒时间（≤60min）存在明显的剂量及时相相关，在≤50μmol／LCdCl2作用下，CaM活性随染毒剂量增加而升高，50μmol／LCdCl2使CaM活性增至0μmol／L组的190．22％（P＜0．05），但100μmol／LCaCl2则对CaM无激活作用。在一定镉浓度（0～50μmol／LCdCl2）及染毒时间（0～40min）内，细胞内游离Ca2+浓度与CaM活性呈*一致性变化，提示镉的免疫毒作用机制与Ca2+、CaM系统有关。