黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶对豚鼠心肌生理特性的影响

氧自由基的产生和堆积引起膜脂质过氧化是造成再灌性心律失常与心肌损害的重要原因。资料表明,自由基损害可使心肌细胞动作电位各参数一致降低,     

一种提纯黄嘌呤氧化酶的简便方法

于新鲜未灭菌的脱脂乳中加入等体积75℃的磷酸钾溶液(0.2mol/L K_2HPO_4,0.4mmol/L EDTA·Na_2,4m mol/L盐酸半胱氨酸,2m mol/L水杨酸钠),于冰浴中将温度降至30℃以下,即加入0℃的正丁醇和固体硫酸铵至最终浓度均达到15％(v/v或w/v),同时以5N NaOH调pH至7.8。间断搅拌30分钟后于4℃,2500×g离心20分钟,4℃下过     

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶对培养心肌细胞的损伤及硒的保护作用

向培养心肌细胞中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)后,动作电位的APA、OS、V_(max)及APD减少,MDP、TP水平上移;细胞在MEM中搏动率降低,加钡后细胞收缩频率迅速增加,且X-XOD作用时间越长,上述改变越显著。X-Mo的作用与此类似,但较轻。加硒则能逆转上述的细胞损伤性变化。这表明X-XOD和X-Mo均能造成心肌细胞损伤,硒对心肌细胞有保护作用。     

白藜三醇对黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致平滑机细胞增殖的干预作用

目的探讨红葡萄酒 (RW)是否对血管SMC增殖具有抑制作用。方法以培养幼兔主动脉平滑肌细胞为研究对象 ,分别给予不同浓度黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶和/或白藜三醇 ,采用免疫组织化学、3H -TdR掺入试验和MTT法技术检测不同处理对平滑肌细胞的增殖作用。结果RES呈剂量依赖性拮抗X/XO对VSMC的促增生效应 ;终浓度50umol/L的RES对X200umol/L/XO200u/L所致促VSMC的增殖效应即有抑制作用(P<0.05) ;终浓度200umol/L的RES对X200umol/L/XO200u/L所致促VSMC的增殖效应则具有极显著的抑制作用 (P<0.001)。结论红葡萄酒中的有效成份白藜三醇可拮抗黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致平滑肌细胞的作用 ,这可能有助于减轻或防治氧化损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响。     

尿酸、黄嘌呤氧化酶与类风湿关节炎疾病活动度的关系

目的 探究血清尿酸(UA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)表达水平与类风湿关节炎(RA)患者疾病活动度的关系。方法分析本院2019年3月至2021年1月接收的180例RA患者(RA组)的临床资料,根据28个关节的疾病活动度评分(DAS28)将患者分为缓解期组(86例)(DAS28评分<2.6分)和活动期组(94例)(DAS28评分≥2.6分),同时依据X线检查将患者分为骨损伤组(60例)和无骨损伤组(120例);对照组(176例)为健康体检者。血清UA水平的检测采用全自动生化分析仪,血清XOD水平的检测采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法;采用Pearson进行RA患者血清UA、XOD与疾病活动度的相关性分析;采用Logistic回归法分析UA、XOD对RA患者疾病活动度的影响。结果 RA组血清UA、XOD表达水平明显高于对照组(P<0.05)。活动期组血清UA、XOD表达水平明显高于缓解期组(P<0.05)。活动期RA患者UA与XOD、UA与DAS28评分、XOD与DAS28评分均呈正相关(r=0.721、0.622、0.571,P均<0.05)。缓解期RA患者...     

一个简单敏感的检测IL-2活性的生物学方法

本文介绍了一种简单一次定量的检测IL-2生物活性的方法。它以培养纯CD3~+T细胞为基础,CD3~+T 细胞是从血液的单个核细胞中,用微球(M450)结合CD3McAb 筛选的。培养时,经抗CD3活化的T 细胞将表达IL-2受体而不产生IL-2。加入IL-2后,可引起增殖反应,IL-2浓度在0.01～20U/ml时,可以得到一个线性剂量-反应曲线。细胞对IL-1、IL-4、TNF-α、IFN-α、INF-γ、PHA、ConA 不反应。IL-2的反应性可为TNF-α增强,被IFN-α抑制。试验用的促分裂素不影响增殖反应。抗IL-2和抗IL-2受体的抗体可以抑制IL-2反应,并有一定的剂量依赖关系。本法既简单又特异,不用长期培养实验用的细胞。     

黄芪多糖抑制黄嘌呤氧化酶诱导的肺癌A549细胞自噬并调节自噬相关蛋白的表达

目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞的自噬作用及微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、beclin1蛋白表达的影响。方法 A549细胞分为对照组、模型组、100μg/mL APS处理组、200μg/mL APS处理组及400μg/mL APS处理组,除对照组,其余4组均需XOD诱导24 h建立自噬模型。采用透射电镜观察自噬体的形态、单丹磺酰尸胺(MDC)染色荧光显微镜观察自噬体数量的变化, Western blot法检测LC3B、mTOR、beclin1蛋白水平。结果与空白组比较,模型组细胞自噬体数量增多,且LC3B、beclin1蛋白水平升高, mTOR蛋白水平降低;与模型组比较,(200、400)μg/mL APS处理组细胞自噬体数量显著减少, LC3B、beclin1蛋白水平降低, mTOR蛋白水平升高。结论 APS可降低XOD诱导的A549肺癌细胞自噬水平,并降低LC3B、beclin1蛋白表达、增加mTOR蛋白表达。     

吞噬细胞NADPH氧化酶活性的调控

吞噬细胞NADPH氧化酶是一个多组分活化的酶复合体,是吞噬细胞抗菌系统的主要成分。此氧化酶体系包括膜结合的和可溶的胞浆蛋白,其主要特征为依赖刺激而活化,机制为复合体的胞浆因子磷酸化并转位至膜,在这里与细胞色素酶相关联,组装完全的复合体在功能上作为一个电子转运体系,从胞浆NADPH转移电子给分子氧形成超氧阴离子（O2-）,伴随着接下来的活性物质产生,也叫呼吸爆发,发挥抗菌和抗细胞毒素的活性。NADPH氧化酶的这一活化过程受调节亚基、上游调节子等多重因素的调控。     

黄嘌呤氧化酶在激素诱导成骨细胞凋亡过程中的作用及机制

目的探究黄嘌呤氧化酶在糖皮质激素诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)细胞凋亡过程中的作用及机制。方法将细胞分为空白组、模型组、5 mol/L组、10 mol/L组和15 mol/L组,接种完成后培养24 h,确认细胞贴壁后换液。空白组加入10%FBS培养基2 mL,模型组加入1 10-6 mol/L DEX培养基2 mL, 5 mol/L组加入5 mol/L别嘌醇DEX培养基2 mL,10 mol/L组加入10 mol/L别嘌醇DEX培养基2 mL,15 mol/L组加入15 mol/L别嘌醇DEX培养基2 mL。培养72 h后检测Caspase-3、STAT-1、Bax、Bcl-2等蛋白表达情况,检测细胞凋亡情况以及活性氧簇含量。检测细胞内黄嘌呤氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量及线粒体膜电位。结果模型组中Caspase-3、STAT-1和Bax蛋白表达量明显升高,Bcl-2蛋白表达量降低,细胞凋亡比例增高,细胞内活性氧簇含量增高,细胞内黄嘌呤氧化酶活性、丙二醛含量增高,而线粒体膜电位降低,与空白组、5 mol/L组、10mol/L组和15 mol/L组相比,差异有统计学意义(P 0.05)。结论黄嘌呤氧化酶通过产生过量的活性氧簇从而导致成骨细胞氧化应激损伤,通过激活STAT-1和Bax蛋白来诱导成骨细胞凋亡,同时诱导线粒体膜电位稳态崩溃触发内源性线粒体凋亡途径。别嘌醇可以较好地抑制黄嘌呤氧化酶的活性,减少活性氧簇的产生,通过减少Caspase-3、STAT-1和Bax蛋白表达,稳定线粒体膜电位,从而减少成骨细胞凋亡。     

RNA干扰体内抑制HBeAg表达

目的 在机体水平观察小干扰RNA(siRNA)对HBeAg表达的影响.方法 通过尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(psiHBV4)共注射,于注射后第6天取血测HBeAg的表达,并用RT-PCR检测肝组织HBV prec/c mRNA转录子的水平.结果 注射后第6天血清中,HBsAg、HBeAS在造模组中高表达.psiHBV4干扰组中HBeAg的表达受到了明显的抑制,与对照组相比有显著差异(P<0.05),RT-PCR显示肝内HBV prec/c mRNA水平亦明显降低,而无关干扰对照组则无相应的干扰作用.结论 RNAi能特异,高效的抑制小鼠体内HBeAS的表达,为乙型肝炎的治疗带来了新的希望.     

一种改良的抗氧化活性测定方法

活性氧自由基在生物体内参与生理，病理过程并起重大作用，在筛选和评价抗氧化药物时，越来越需要一种快速，简便，价廉而又可靠的抗氧化活性测定方法，本文发展了一种具备了上述优点新方法，ＳＯＤ（超氧化物歧化酶）及其模拟物的工作已有很多，很多文献报道了其活性一；Ｃｕ（Ⅱ）。本文着重研究了另一个金属辅基，Ｚｎ＾２＋并且发现了Ｚｎ＾２＋独特的，但为人们忽视了的；抗氧化活性加强作用。     

心血管变异性的一个简单的数学模型

目的：建立心血管变异性的数学模型,探讨变异性频谱的主要频率成分机理。方法：建立了包含血流动力学和自主神经系统,尤其考虑了心血管中枢整合的闭环控制数学模型。结果：成功地模拟了心血管变异性频谱中的三个主要频率峰。高频峰的频率是呼吸频率与心率之比,低频和极低频可能与交感和副交感神经调节心率的非可加性有关。     

心血管变异性的一个简单的数学模型

目的建立心血管变异性的数学模型,探讨变异性频谱的主要频率成分机理.方法建立了包含血流动力学和自主神经系统,尤其考虑了心血管中枢整合的闭环控制数学模型.结果成功地模拟了心血管变异性频谱中的三个主要频率峰.高频峰的频率是呼吸频率与心率之比,低频和极低频可能与交感和副交感神经调节心率的非可加性有关.     

藻酸双酯钠抑制蛋白激酶C活性

大鼠肝脏经匀浆、硫酸铵盐析和DEAE-纤维素柱层析,得到部分纯化的蛋白激酶C。将此酶制剂在体外与藻酸双酯钠孵育,藻酸双酯钠对蛋白激酶C活性呈剂量依赖性的抑制作用。     

淋巴细胞母细胞化抑制因子的肿瘤生长抑制活性

淋巴细胞母细胞转化抑制因子(LBIF)系人巨噬细胞样细胞株U937产生,是一种新的免疫调节分子(Mr45000)。作者应用快速蛋白液相色谱分析法研究了LBIF 对18株不同肿瘤细胞生长的影响,并与IFN α、     

湘蕾金银花提取物对马铃薯多酚氧化酶活性的影响

马铃薯是一种重要的经济作物,但马铃薯的多酚氧化酶（PPO）催化生成一系列色素物引起的褐变现象一直制约着马铃薯的开发利用。金银花（Lonicera japonica Thunb.）中含有绿原酸、异绿原酸、木犀草素等不饱和化合物,其中的酚羟基结构极易与自由基反应,故具有显著的抗氧化特性。     

国产甲磺酸培氟沙星体内抗菌活性试验

甲磺酸培氟沙星为新的氟喹诺酮类药。该药在体内对大肠杆菌、克氏肺炎杆菌和绿脓杆菌引起的小鼠全身性感染无论口服和静脉注射均有显著的保护作用,其疗效(ED_(50))与诺氟沙星相当或更好,明显地优于庆大霉素。甲磺酸培氟沙星静脉给药的体内抗菌活性比口服给药更好。