不同PCR方法检测布鲁菌阳性样本的敏感性分析

目的利用布鲁菌分离株及对应的患者血液样本验证不同引物扩增的特异性及其敏感性,为将PCR方法应用于人布鲁菌病临床诊断提供参考。方法对血液样本进行传统布鲁菌分离培养,根据表型对分离株进行种型鉴定;用玻片凝集试验(PAT)和试管凝集试验(SAT)两种血清学方法检测培养阳性的血液模板;应用不同布鲁菌属引物B4/B5、BP26以及羊、牛和猪种引物对布鲁菌分离株进行鉴定,同时对其血液模板进行PCR检测。结果从急性发热患者血液分离到24株布鲁菌,经表型鉴定均为羊种。对分离株进行PCR鉴定,布鲁菌属引物B4/B5、BP26及羊种引物在分离株中均扩增到目的条带。应用不同引物PCR方法对血液模板检测的阳性率依次为B4/B5(79.17%),羊种(66.67%)和BP26(25.00%);B4/B5和羊种引物扩增同为阳性的符合率为41.67%,B4/B5或羊种引物扩增为阳性的符合率为91.67%。结论在布鲁菌分离培养阳性的血液样本中,应用单一引物PCR进行人布鲁菌病诊断的敏感性较低,将布鲁菌属B4/B5和地方流行种引物结合可提高PCR检测方法的敏感性和特异性。     

布鲁杆菌鉴定及抗菌药物体外药物敏感性分析CSCD

目的细菌学鉴定和PCR鉴定布鲁杆菌,并测定布鲁杆菌对8种抗菌药物体外敏感性,了解布鲁杆菌的药物敏感情况。 方法对定为布鲁杆菌菌株按布鲁杆菌标准鉴定方法采用传统的阳性血清、单相特异性血清（A、M和R）凝集试验、布鲁杆菌噬菌体裂解试验（Tb、BK2）,进行种、型鉴定,以参考菌株对照。布鲁杆菌表面蛋白-31（brucella surface protein-31,BCSP-31）-PCR和牛种、羊种、绵羊附睾和猪种布鲁菌（abortus melitensis ovis suis, AMOS）-PCR鉴定分型。用微量肉汤稀释法对来自血培养分离的27株布鲁杆菌测定8种抗菌药物（阿奇霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、多西环素、利福平、庆大霉素、四环素、链霉素）的最低抑菌浓度（minimun inhibitory concentration,MIC）。 结果27株菌经细菌学鉴定为布鲁杆菌羊种,其中21株为羊种Ⅲ型,6株为羊种Ⅰ型。BCSP-31-PCR鉴定27株菌为布鲁杆菌;AMOS-PCR方法鉴定为羊种布鲁杆菌。27株布鲁杆菌对环丙沙星、左氧氟沙星、多西环素、庆大霉素、四环素、链霉素均敏感,其中多西环素MIC90为0.064 mg/L,有3株布鲁杆菌对利福平中等敏感（MIC 2 mg/L）。 结论布鲁杆菌分离株对WHO推荐的治疗布鲁菌病的抗菌药物体外实验普遍敏感。定期评估布鲁杆菌对抗菌药物的敏感性有助于进行流行病学调查及抗菌药物耐药性监测。     

西藏地区首例血培养分离布鲁氏菌

目的 研究患者血液中分离出的病原菌生物学性状及布鲁氏菌病在西藏地区的病原学诊断。方法 按布鲁氏菌标准鉴定方法进行细菌学实验,包括形态学、培养特性、生化特征及血清学试验,并对患者的流行病学、临床资料、实验室资料进行分析。结果 患者血液中分离的病原微生物的形态学、培养特性、生化特征及血清学诊断结果均符合布鲁氏菌。结论 西藏地区首次从患者血液中分离到布鲁氏菌,说明临床机构已有病原诊断能力,同时要加强实验室生物安全。     

死亡海豚中分离到类鼻疽伯克霍尔德氏菌

目的分离鉴定致海豚死亡的致病菌。方法用常规的检验方法对送检标本进行分离培养及鉴定,包括形态学、培养特性、生化特征和血清学试验的研究。结果海豚各种组织所分离的细菌其形态学、培养特性、生化特征和血清学试验均符合类鼻疽伯克霍尔德氏菌,药敏试验对亚胺培南、头孢他啶、复方新诺明、哌拉西林/他唑巴坦均为敏感。结论海南海洋馆海豚的死亡为类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染所致。     

2009-2012年宁夏人群感染布鲁氏菌种型分布特征

目的鉴定2009—2012年宁夏分离的布鲁氏菌,掌握感染人群的主要布鲁氏菌种型。方法采用血培养瓶从试管凝集试验（SAT）抗体阳性的病人血液中分离布鲁氏菌,利用传统生物学特性鉴定方法结合聚合酶链式反应（PCR）和A,M,O,S-聚合酶链式反应（AMOS-PCR）方法进行种型鉴定。结果从目标人群中共分离22株菌,PCR检测均扩增出223bp的特异性条带,鉴定为布鲁氏菌。AMOS-PCR中均扩增出178bp和731bp的特异性条带,鉴定为羊种布鲁氏菌,结合染料抑菌试验、噬菌体裂解和特异性血清凝集试验结果,22株菌均为羊种3型布鲁氏菌。结论2009—2012年宁夏人群感染布鲁氏菌主要为羊种3型布鲁氏菌,PCR和AMOS-PCR可作为布鲁氏菌分离鉴定的辅助方法推广使用。     

从野生动物岩羊体中分离到的布鲁氏菌的鉴定报告

本文介绍了从青海省野生动物岩羊体内分离到的8株布氏菌,经噬菌体裂解试验、氧化代谢试验和常规分型鉴定,结果定为羊种布氏菌1生物型的有4株、3生物型的有2株,猪种布氏菌1生物型1株,另有1株为难以定种非典型株。     

内蒙古兴安盟地区蒙古族与汉族人群布鲁菌株分型及药敏对比研究

目的对蒙古族与汉族人群布鲁菌型和体外药物敏感性进行差异性分析。方法采集和培养蒙古族、汉族布病患者样本各24份,并用全自动细菌生化鉴定仪、H2S试验、噬菌体试验、抑菌试验及AMR凝集试验等方法进行种型鉴定,再用肉汤微量稀释法对48株布鲁菌进行11种药敏试验检测。结果内蒙古兴安盟地区主要流行布鲁菌种型为羊种3型,占67%(32/48),其次是羊种1型,占33%(8/24),其中蒙古族人群羊种3型株较多,占63%(20/48),而汉族人群羊种1型较多,占62%(10/16)。所有菌株均对多西环素等药物敏感,而对阿奇霉素耐药,复方新诺明部分耐药,且汉族患者人群耐药率33%(4/12)略高于蒙古族人群25%(3/12),对利福平、头孢曲松耐药率介于敏感与中介之间,不同族群间无明显差异。结论兴安盟地区主要流行羊种型布鲁氏菌,蒙古族与汉族人群体外药物敏感性无差异性。     

贵州省2013年人间布鲁氏菌病病原体种/型鉴定与分析

目的对2013年贵州省人间布鲁氏菌病疑似病例进行病原学诊断与分析,为病例的确诊和疫情控制提供病原学依据。方法采用传统方法和分子生物学方法对从布鲁氏菌病疑似患者血液分离的可疑布鲁氏菌进行鉴定和分析。结果从疑似患者血液分离出可疑菌株13株,传统方法将其中的11株经鉴定为羊种生物3型布鲁氏菌,其余2株未能定种/型。布鲁氏菌属特异性PCR(BCSP31-PCR)将13株菌株鉴定为布鲁氏菌属细菌,种/型特异性PCR(AMOS-PCR)将其中的11株鉴定为羊种布鲁氏菌,其余2株未能定种/型。结论 2013年贵州省人间布鲁氏菌病病例共分离出13株布鲁氏菌,羊种生物3型布鲁氏菌为贵州省2013年人间布鲁氏菌病病原体的主要流行菌种/型,占84.6%(11/13),该研究结果为布病病例的确诊和疫情的控制提供了病原学依据。     

内蒙古乌兰察布布氏菌分离株种型鉴定及流行病学特征分析

目的 鉴定临床分离布氏菌种型,并分析患者的流行病学特征。方法 以牛种、羊种、猪种标准参考菌株为试验对照,采用经典方法和VITEK2.0进行初步鉴定,用AMOS-PCR进行确证,并分析患者的流行病学特征。结果 经典鉴定115株均为羊种菌,羊3型93株,羊1型22株;115株菌ProA、TyrA、URE和GlyA全部阳性;91株ELLM阳性、14株APPA阳性,提示均为布氏菌,其中羊种菌91株,猪种菌14株。与经典实验的鉴定符合率比较鉴定布氏菌属100%,鉴定布氏菌种为79%(91/115);AMOS-PCR均获得了约731 bp的特异性扩增条带,证实全部为羊种菌。初诊患者84例,构成比为73%;临床表现以疼痛、发热、乏力、多汗居多;88例患者就诊前无用药史,2例有布病治疗史。结论 VITEK2.0是一种高效的布氏菌鉴定方法,但不能替代经典方法;羊种3型菌为该地区的主要流行菌种,再感染可能是慢性患者或有布病治疗史患者分离到布氏菌的主要因素,初诊、未用抗生素且症状典型是分离布氏菌的重要指标。     

1例输入性类鼻疽的病原学诊断及溯源分析

目的 对1例输入性类鼻疽患者进行病原学诊断及溯源分析,为山西省类鼻疽防控提供科学依据。方法 患者血培养阳性,分离菌株鉴定为泰国伯克霍尔德菌。采用生化试验及微生物质谱仪进行菌株鉴定,核酸提取后进行全基因组测序,分析MLST型和耐药基因携带情况,同时构建系统进化树。结果 此次分离株经生化试验及微生物质谱仪检测均鉴定为类鼻疽伯克霍尔德菌,MLST型为ST366,全基因测序分析与海南省3个分离株进化亲缘关系较近,同源性较高。结论 此例类鼻疽病例经分子溯源分析及流行病学调查确定为海南省输入,提示医疗机构及疾控部门应加强对类鼻疽的认识,提高诊疗能力。     

Recombination and segregation of resistance and auxotrophic characters in crosses of nocardia species (mycobacterium rhodochrous [overbeck] Gordon a. Mihm)

Nocardial recombination appears to be controlled by multiple mating factors of unknown characteristics. A single linear linkage group is indicated by studies of the segregation of unselected characters. In this single linkage group are all of the auxotrophic and resistance characters investigated to the present time. Because of the close relationship between the mycobacteria and nocardiae, it seems likely that similar hereditary control exists in the mycobacteria and can be studied by similar means.     

从云南蝙蝠及牛蜱中分离出两株森林脑炎病毒

1990年7月从捕自云南省临沦地区的微小牛蜱及大马蟑蝠脑组织中分离出两株病毒。对其进行了理化特性、电子显微镜、交叉血凝抑制、间接免疫荧光、交叉中和等试验的检测鉴定,结果表明这两株病毒为蜱媒森林脑炎病毒。对我省森林脑炎流行病学的研究具有重要参考价值。     

日本血吸虫SjCa8基因的原核表达及其免疫学特征分析

目的表达和纯化日本血吸虫钙结合蛋白(SjCa8),研究其免疫学特征。方法重组质粒pET32a ( )-SjCa8经诱导表达后,获取纯化蛋白SjCa8,利用ELISA、Western-blot和动物保护性实验检测SjCa8的免疫学特征。结果成功获取了纯化蛋白SjCa8,该蛋白能免疫识别血吸虫感染小鼠血清和血吸虫病患者血清。SjCa8免疫Balb/c小鼠可获得较高滴度的特异性抗体,诱导宿主产生35．31%的减虫率和35．68%的减卵率。结论纯化蛋白SjCa8具有良好的免疫原性和免疫反应性,具有作为血吸虫病免疫诊断和疫苗候选分子的研究价值。     

Influence of smoking cues in movies on craving among smokers

Aims   Research has shown that smoking-related cues are important triggers for craving. The objective of the present study was to test whether smoking cues in movies also function as triggers to evoke craving. To accomplish this, we conducted a pilot study in which we examined smokers' reactivity to smoking cues from a particular movie in a common cue–reactivity paradigm using pictures. In the main study, we tested whether smokers who are confronted with smoking characters in a movie segment have a greater desire to smoke than smokers confronted with non-smoking characters.
Design   Using an experimental design, participants were assigned randomly to one of two movie conditions (smoking versus non-smoking characters).
Setting   In a laboratory, that reflected a naturalistic setting, participants watched a 41-minute movie segment.
Participants   A total of 65 young adults who smoked on a daily basis participated in the experiment.
Measurements   Craving was assessed before and after watching the movie.
Findings   The pilot study revealed that pictures of smoking characters had strong effects on craving. However, when smokers actually watched a movie segment, no differences in craving were found between those who watched smoking characters and those who watched non-smoking characters. This finding was not affected by baseline craving, the time of the last cigarette smoked and daily smoking habits.
Conclusions   No effect of smoking cues in movies on craving was found, in contrast with research supporting the cue-craving link. Thus, if replicated, this might indicate that smoking cues in such contexts do not affect smokers' desire to smoke as expected.     

从正常屠宰猪扁桃体中分离到致病性猪链球菌2型

目的从江苏省某屠宰场采集的40份屠宰猪的扁桃体中分离到一株细菌,通过玻片凝集试验、培养特性、菌体形态、菌落形态、染色特性、生化试验、PCR检测试验,确定为猪链球菌2型,编码为HA0610。进一步研究发现,该菌株含有已知的8种主要毒力因子基因,动物试验显示对猪和兔均有较强的致病性。结果表明,在正常猪扁桃体中可携带对猪有高度致病性的猪链球菌2型。     

云南玉龙及古城区鼠疫自然疫源地判定及初步研究

目的确定云南玉龙县及古城区鼠疫自然疫源地的存在,提出防控策略。方法采用常规调查方法,通过血清学、细菌学、基因诊断等技术进行判定。结果共分离到5株鼠疫杆菌,均酵解甘油、麦芽糖、阿胶糖,不酵解鼠李糖、密二糖,脱氮试验阳性。均带有Pgm 、PstI 、FI 、Vwa 等毒力决定因子;疫区犬血清阳性率为23.5%;猫血清阳性率为26.7%。结论细菌学证实玉龙县为鼠疫自然疫源地,目前鼠疫流行处于活跃期;血清学证实古城区为新的鼠疫疫源区(县);阳性血清动物分布面积210km2,并有进一步扩散趋势;齐氏姬鼠及大绒鼠是本地区优势鼠种,玉龙绒鼠有局部分布。特新蚤指明亚种,方叶栉眼蚤为优势蚤种;分离的鼠疫菌与滇西纵谷型及滇闽居民区型菌株生化特性不同,与西藏北部青藏高原型鼠疫菌的生化特性接近。     

二维图像及多普勒超声血管模式在颈部淋巴结病变诊断应用

目的探讨二维图像及彩色多普勒超声血管模式在颈部淋巴结结核诊断中的应用价值,为临床诊断提供参考。方法分析我院149例颈部淋巴结肿大患者,分析指标包括淋巴结的长径/短径、边界清楚与否、淋巴门有无、淋巴结的内部回声等,同时结合彩色多普勒超声淋巴结血管模式。结果 79例经病理证实为淋巴结结核,55例经病理证实为良性淋巴结(其中淋巴结炎37例,反应性增生淋巴结18例),15例经病理证实为恶性淋巴结(其中淋巴瘤3例,转移性淋巴结12例),恶性肿大淋巴结长短径比1.5,良性肿大淋巴结长短径比2,结核性肿大淋巴结1.5。结核性肿大淋巴结内部多见无回声区及钙化,77.2%的结核性肿大淋巴结可见边缘型或中央型血管模式,常出现无血供淋巴结。结论根据二维图像及血管模式特征,颈部淋巴结结核大多都能做出明确诊断。     

Does behavior reflect phylogeny in swiftlets (Aves: Apodidae)? A test using cytochrome b mitochondrial DNA sequences.

Swiftlets are small insectivorous birds, many of which nest in caves and are known to echolocate. Due to a lack of distinguishing morphological characters, the taxonomy of swiftlets is primarily based on the presence or absence of echolocating ability, together with nest characters. To test the reliability of these behavioral characters, we constructed an independent phylogeny using cytochrome b mitochondrial DNA sequences from swiftlets and their relatives. This phylogeny is broadly consistent with the higher classification of swifts but does not support the monophyly of swiftlets. Echolocating swiftlets (Aerodramus) and the nonecholocating "giant swiftlet" (Hydrochous gigas) group together, but the remaining nonecholocating swiftlets belonging to Collocalia are not sister taxa to these swiftlets. While echolocation may be a synapomorphy of Aerodramus (perhaps secondarily lost in Hydrochous), no character of Aerodramus nests showed a statistically significant fit to the molecular phylogeny, indicating that nest characters are not phylogenetically reliable in this group.     

e抗原阴性慢性乙型肝炎临床病理相关性分析

目的了解HBeAg阴性慢性乙型肝炎临床和病理表现的相互关系。方法对154例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者进行血生化、病毒标志物及病毒定量检测，与肝组织病理进行相关性分析。结果病理诊断中、重度患者数量多于临床分度数量（80例对37例），白蛋白／球蛋白和凝血酶原活动度（PTA）对重度肝炎诊断有一定的临床价值，HBVDNA水平和抗-HBe是否阳性与肝脏损害程度无关，血清透明质酸水平与肝纤维化程度相关（χ^2=6．9376，P=0．039）。结论HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者应尽可能行肝脏病理检查以明确诊断，并指导治疗。