肺结核患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测及意义

[目的]通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义。[方法]采用流式细胞技术多色荧光分析法,测定84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性者之间的差别。[结果]肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P0.05);各型结核之间、抗酸杆菌阳性与阴性之间的差异有统计学意义(P0.05);初治肺结核与复治肺结核也有一定的差异,但无统计学意义(P0.05)。[结论]CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免疫功能的指标,它对肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义。     

吸毒人员外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3调节性T细胞表达

目的:探讨外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞与吸毒人员机体免疫的关系。方法:采集114名吸毒人员外周血,根据不同吸毒方式和吸毒年限进行分组,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达。结果:不同吸毒方式的吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达,以口吸、静脉注射、混合吸顺序递减(49.07%±14.88%、34.96%±13.41%、26.72%±8.49%),各组间两两比较,差别有统计学意义(P<0.01);同一吸毒方式不同吸毒年限的吸毒人员CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞表达相比较,≤10年的口吸组(51.79%±10.44%)较>10年口吸组(37.14%±12.29%)明显降低(P<0.01),而混合吸毒组明显升高(27.06%±8.99%到35.47%±11.02%,P<0.05),静脉注射组变化不明显(P>0.05)。结论:通过检测吸毒人员外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞的表达,反映了不同吸毒方式和吸毒年限的吸毒人员机体免疫功能损伤程度,不仅可作为一项准确、可靠监测指标,也将为吸毒人员的免疫功能的检测提供新的思路。     

CD4+ CD25+ Treg、IL-10、TGF-β水平与子宫内膜癌发生发展的相关性

近几年,越来越多的证据表明[1],在肿瘤形成过程中除了细胞的癌基因和抑癌基因活化和失活,机体免疫监视系统的逃逸也是不容忽视的重要因素,肿瘤细胞可以通过某些途径逃逸或者抑制机体免疫反应而确保其自身的发生发展.而Treg是一群具有免疫抑制功能的负调控细胞,它们在维持外周免疫耐受,预防自身免疫疾病的发生过程中起着重要作用.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究上皮性卵巢癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量及其相关基因Foxp3 mRNA的表达特点,探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法:采用流式细胞术检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA表达水平。结果:卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量均明显升高(P<0.05);Foxp3 mRNA在卵巢浆液性囊腺癌和粘液性囊腺癌患者外周血PBMC中表达明显增高(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+调节性T细胞可能在卵巢癌免疫耐受中发挥重要作用。     

CD4+CD25+T细胞在溃疡性结肠炎患者中的表达及意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞和其特异性标志物Foxp3的表达及其在UC不同病期的变化,探讨其在UC发病机制中的意义。方法研究纳入2007年2月至2008年12月在我院就诊的UC患者40例,其中活动期23例,缓解期17例;同时选择33例肠易激综合征（IBS）患者及32名健康者作为对照。用流式细胞仪检测UC患者、IBS患者和正常对照者的外周血CD4＋CD25＋T细胞阳性率,用RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3mRNA的表达,用酶联免疫吸附实验检测血清中白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF—β）的浓度。结果活动期和缓解期UC患者、IBS患者、正常对照者外周血CD4＋T细胞总数相比差异无统计学意义（P=0．126）。CD4＋CD25＋T细胞在CD4＋T细胞中所占比例在活动期和缓解期UC患者中均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．01）,活动期患者较缓解期患者更低（P〈0．001）,并且与疾病活动指数（r=-0．660,P〈0．001）及红细胞沉降率（r=-0．572,P=0．001）均呈显著负相关,而IBS患者和正常对照者间差异没有统计学意义（P=0．343）。PBMC中Foxp3mRNA的表达在活动期和缓解期UC患者均明显低于IBS患者和正常对照组（P均〈0．001）。而血清IL-10和TGF—β的浓度在活动期和缓解期UC患者、IBS患者和正常对照者4组间无明显差异（P均〉0．05）。结论活动期UC患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞明显降低,缓解期UC患者的表达有所升高,并且与临床疾病活动相关,提示这类细胞可能参与了UC疾病的发生发展,Foxp3表达降低可能是导致CD4＋CD25＋T细胞发育障碍的重要因素。     

肺结核患者细胞免疫功能与CD4＋T淋巴细胞凋亡相关性研究

目的 检测肺结核患者外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡及免疫功能状态,探讨其与结核病发病的临床意义.方法 分离结核病患者和正常人外周血单个核细胞,标记后用流式细胞仪测定CD4＋T淋巴细胞凋亡率;用链霉亲和素碱磷酶法（SAP法）检测其外周血CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T淋巴细胞及CD4/CD8比值;采用酵母菌花环法检测其红细胞受体花环率及红细胞免疫复合物花环率.结果 结核病患者外周血CD4＋T淋巴细胞凋亡率（15.882 ±4.65）％、CD8＋T淋巴细胞比例（27.69±0.74）％、红细胞免疫复合物阳性率（19.40±0.58）％显著高于对照组（P＜0.01）,CD3＋T淋巴细胞比例（46.48±1.34）％、CD4＋T淋巴细胞比例（28.12±0.69）％,CD4/CD8比值（1.0223±0.09362）和红细胞C3b受体阳性率（17.73±0.63）％明显降低（P＜0.01）;结核病患者CD4＋T淋巴细胞凋亡率与CD4＋T淋巴细胞比例之间以及T淋巴细胞亚群与红细胞免疫功能之间存在一定的相关性.结论 结核病患者CD4＋T淋巴细胞凋亡率显著增加致CD4＋T淋巴细胞数减少,T淋巴细胞免疫功能与红细胞免疫功能存在正相关,且均有所下降,可能与肺结核的免疫发病有关.     

新生儿脐带血CD4＋CD25high调节性T细胞Foxp3的表达探析

目的：对新生儿脐带血CD4＋CD25high细胞中调节性Treg细胞的Foxp3表达进行研究。方法：采用密度梯度离心法提取新生儿（A组）脐带与成年人（B组）外周血液中的单个细胞核后,使用流式细胞仪测定CD4＋CD25high细胞中的Treg细胞数量,并对细胞内的转录因子（Foxp3）进行检测,并记录检测结果。结果：A组CD3＋CD4＋细胞中Treg细胞所占比例为（3．86±1．63）％,明显高于B组的（0．87±0．74）％：A组Treg细胞中表达Foxp3的比例为（23．21±8．9）％,明显低于B组的（71．3±11．6）％,差异均有统计学意义（P〈O．01）。结论：虽然新生儿脐带血中CD4＋CD25high的细胞数量较高,但新生儿Foxp3细胞相对于成年人却相对较低,这也进一步说明新生儿Treg细胞的Foxp3表达能力尚未完全发育并未成熟。     

胃癌组织中CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞的表达及意义

目的 探讨CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞在胃癌患者胃组织中的表达及意义.方法 利用流式细胞仪对76例胃癌及癌旁组织中的CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞与CD8+T淋巴细胞进行定量及量化关系分析.结果 CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞的阳性率在胃癌、癌旁组织、正常时照组分别为(11.2±0.9)%、(6.4±1.1)%、(4.1±0.8)%.癌组织与癌旁组织和对照组比较,差异有统计学意义(t=2.03、2.05,P<0.05).在肿瘤组织,随着CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞的增加,CD8+T淋巴细胞出现了快速减少趋势.而在癌旁组织中却没有此现象出现.结论 CD4+、CD25+调节性T淋巴细胞通过对CD8+T淋巴细胞的抑制参与胃癌细胞抗肿瘤免疫的作用.     

CD4+CD25+T细胞与复发性流产

CD4+CD25+T细胞是一类具有免疫调节功能的细胞.正常情况下在体内发挥免疫抑制作用.该类细胞分泌白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β),表达CD25(IL-2Rα)、叉头蛋白(FOXP3蛋白)及细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)分子等,通过细胞间直接接触或细胞因子间接方式广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.妊娠类似同种异体移植,妊娠时脱落人母体循环的胎儿抗原刺激CD4+CD25+T细胞的产生并在母胎界面形成免疫耐受微环境,防止胎儿受到母体排斥.CD4+CD25+T细胞数量或功能失调则会导致各种疾病的发生,如自身免疫病,移植物抗宿主病,流产等.在复发性流产患者体内CD4+CD25+T细胞数目及功能明显下降.实验表明增强CD4+CD25+T细胞数量或功能可以阻止移植物抗宿主病和治疗复发性流产.     

煤工尘肺壹期患者周围血CD4+ CD25+调节性T细胞与CD4+ 、CD8+T细胞表达及意义

目的 探讨周围血CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)与CD4+、CD8+T细胞在煤工尘肺(CWP)壹期中的水平变化及临床意义.方法 采用流式细胞术检测103例CWP壹期患者(CWP组)、45例具有与CWP组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘对照组)及48例井上健康检查人员(正常对照组)周围血CD4+ CD25+ Treg及其CD4+、CD8+T细胞水平.结果 与接尘对照组和正常对照组比较,CWP组CD4+ CD25+ Treg、CD4+T细胞水平及CD4+CD25 +/CD4+、CD4+ CD25 +/CD8+比值明显升高,差异具有统计学意义(均P＜0.01),CD8+T细胞则无明显改变(P＞0.05),但接尘对照组CD8+T细胞水平明显低于正常对照组(P＜0.05).CWP组吸烟患者CD4+ CD25+ Treg水平和CD4+ CD25 +/CD4+比值均明显高于非吸烟患者,差异有统计学意义(均P＜0.01).CWP组CD4+ CD25+ Treg与CD4+T细胞呈正相关[相关系数(r) =0.627,P＜0.01],与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.362,P＜0.01),CD4+T细胞与CD8+T细胞呈负相关(r=-0.436,P＜0.01).结论 CWP壹期患者周围血CD4+ CD25+ Treg表达增加,可能影响CD4+T细胞和CD8+T细胞的分布平衡,导致细胞免疫功能紊乱;吸烟可加重T细胞亚群分布失衡.     

实验性矽肺模型大鼠外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]研究实验性矽肺大鼠在染尘后病情发展不同阶段外周血CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg细胞）的频率,初步探讨Treg细胞在矽肺发生发展中的可能作用。[方法]将40只健康雄性SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组24只,对照组16只。模型组以非暴露方式气管内一次性注入1mL石英粉尘悬液（40mg／mL）建立大鼠矽肺模型,对照组大鼠气管内一次性注入等容量的灭菌生理盐水。染尘后第7、14、21及28天分别处死6只模型组和4只对照组大鼠,用流式细胞术检测大鼠外周血CD4＋CD25＋细胞及Treg细胞的百分率。[结果]第7天,急性肺泡炎期间,模型组CD4＋CD25＋T细胞和Treg细胞较正常对照组频率明显降低（P〈0．05）;第14天,矽性肉芽肿形成期,模型组CD4＋CD25＋细胞和Treg细胞数量回升,接近正常水平;第21天,矽性肉芽肿增多期间,模型组CD4＋CD25＋T细胞和Treg细胞频率较正常对照组略高,但差异不具有统计学意义;第28天矽性肉芽肿增多并大量纤维化期间,模型组CD4＋CD25＋T细胞和Treg细胞频率明显增加,与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。[结论]Treg细胞可能在维持免疫耐受和矽肺的发生发展中发挥重要作用。     

1,25二羟基维生素D3对大鼠脾调节性T细胞及其特异性转录因子表达的影响

目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响. 方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组.分别给予对照组和LPS组赋形剂,VitD3组用1,25(OH)2VitD3(0.25 μg/只·d-1),连续灌胃14 d.第15天LPS组和VitD3组腹腔注射致死剂量LPS(10 mg/kg).6 h后处死,用流式细胞仪检测脾CD4 CD25 调节性T细胞比例,用Realtime RT-PCR检测脾中Foxp3 mRNA的表达. 结果:1,25(OH)2VitD3明显上调大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞的比例及其特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达. 结论:1,25(OH)2VitD3预干预对大鼠Th1免疫应答中脾CD4 CD25 调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3的基因表达有显著影响.1,25(OH)2VitD3有可能通过促进CD4 CD25 调节性T细胞的发育,发挥其免疫调节作用.     

实验性抗磷脂综合征小鼠CD4~+CD25~+调节性细胞及foxp3表达的变化

目的:观察实验性抗磷脂综合征(experimental anti-phospholipid antibody syndrome,EAPS)进展过程中小鼠CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)数量和功能变化。方法:以重组人β2糖蛋白1(rhβ2GP1)主动免疫BALB/c小鼠建立实验性APS模型,免疫12周后检测抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)、抗心磷脂抗体(ACA)、流产率(%)、活化部分凝血活酶时间(aPTT)、血小板计数(PLT PBC)。以流式细胞术检测小鼠PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率,RT-PCR检测转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。结果:模型小鼠anti-β2-GP1、aCL水平明显升高,aPTT延长,PLT PBC降低,流产率提高,差异有统计学意义(P0.05)。模型小鼠PBMC中foxp3基因表达在4周短暂高于对照组(P0.05),8周后随着APS进展开始逐渐降低,12周后明显低于对照组(P0.05)。PBMC中CD4+CD25+Treg细胞频率8周前与对照组相比差异无统计学意义(P0.05),12周后逐渐减少,明显低于对照组(P0.05)。结论:CD4+CD25+Treg数量和功能下降参与抗磷脂综合征的发病机制。     

子痫前期患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在子痫前期患者(PE)外周血中的比例变化,探讨其在子痫前期发病中意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测22例子痫前期患者外周血中CD4+CD25high和CD4+CD25+Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+CD25+Foxp3+的表达显著降低,而且其CD4+CD25+Foxp3+的表达与平均动脉压呈负相关。结论:子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+的表达明显减少,表明调节性T细胞的降低可能打破了母胎之间的耐受,参与了子痫前期的病理进程。     

自身免疫性糖尿病患者CD_4~+CD_(25)~+T细胞的变化

目的通过观察自身免疫性糖尿病患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,探讨其在发病中的可能作用。方法流式细胞仪检测20例LADA、20例T1DM、20例T2DM及21例正常对照外周血CD4+CD25+、CD3+CD8+T细胞。结果①LADA、T1DM组外周血CD4+CD25+T细胞低于T2DM、正常对照组(p均<0.05)。②LADA、T1DM患者外周血CD3+CD8+T细胞较T2DM、正常对照组增高(LADAvs正常对照p<0.01,其余p<0.05)。结论自身免疫性糖尿病患者免疫调节性CD4+CD25+T细胞减少,不能有效维持对胰岛自身抗原的耐受;外周细胞毒性CD3+CD8+T细胞增多进而破坏胰岛β细胞,导致自身免疫性糖尿病的发生和发展。     

非耐药与耐多药肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的变化

目的对非耐药(DS)及耐多药(MDR)肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的变化及意义进行探讨。方法 对某医院及某结核病防治所2011年7月-2012年7月住院的肺结核患者（其中DS肺结核患者20例,MDR肺结核患者15例）以及医院同期26例健康体检者（对照组）外周血的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群进行检测;同时检测外周血干扰素（IFN） γ、白细胞介素（IL） 10,对3组数据进行比较。结果DS肺结核组、MDR肺结核组及对照组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05);3组患者CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞绝对值比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;各组间两两比较,差异亦有统计学意义（P＜0.05),其中对照组CD3+［（1 426±485）/μL］、CD4+［（825±306）/μL］、CD8+T淋巴细胞［（516±213）/μL］绝对值最高,MDR肺结核组最低［分别为（746±358）/μL、（461±204）/μL、（213±101）/μL］。3组间IFN γ浓度比较,差异有统计学意义（P＜0.01);各组间两两比较,差异亦有统计学意义（P＜0.05),其中对照组浓度 ［（65.04±36.31）pg/mL］最高,MDR肺结核组 ［（23.32±14.04）pg/mL］最低。3组间IL 10浓度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论人类痰菌阳性肺结核及MDR肺结核患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞绝对值及血清IFN γ有不同程度下降,其下降可能促进了结核病情进展,且可能为耐药肺结核形成的原因之一。