抗氧化微量营养素对糖尿病小鼠细胞因子基因表达的调控作用

目的　研究抗氧化微量营养素 (Antioxidantmicronutrients,AM)对糖尿病小鼠细胞因子基因表达调控作用 ,寻找AM作用的敏感基因 ,探索防治糖尿病的分子生物学策略。方法　通过腹腔注射 2 %四氧嘧啶制备IDDM模型 ,经灌胃方法联合给予硒 (Se)、维生素E(VE)、钒 (V)和铬 (Cr) ,应用流式细胞仪测定外周血淋巴细胞表达IL 2、IL 10、IFN γ和TNF α细胞数百分比以及脾活性氧 (ROS)含量。结果　IDDM模型组小鼠外周血表达IL 2和IL 10水平明显低于AM组和正常组 (P <0 0 1) ;而表达IFN γ水平明显高于其他两组 (P <0 0 1) ;各组表达TNF α无明显差异 (P >0 0 5 ) ;IDDM模型组脾ROS含量明显增高 (P <0 0 1) ,AM组脾ROS含量较模型组明显降低 (P <0 0 1)。结论　联合应用AM可上调糖尿病小鼠IL 2、IL 10基因表达 ,下调IFN γ基因表达 ,并可降低糖尿病小鼠脾中ROS含量 ,从而起到拮抗糖尿病的作用。     

生长分化因子11对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用及机制研究

目的探讨生长分化因子11(GDF11)对瘦素受体基因纯合突变(db/db)糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用及影响机制。方法将20只8周龄的C57B/6J野生型小鼠制备为db/db糖尿病模型,并随机分为GDF11组和DM组,每组各10只;GDF11组小鼠给予GDF11重组蛋白注射,DM组小鼠给予磷酸盐缓冲液(PBS)注射,连续注射6周;并选取10只同龄正常小鼠作为对照组(NC组),给予6周PBS干预。观察GDF11对小鼠生理生化指标、胰岛β细胞功能以及胰岛Smad2、P-Smad2表达水平的影响。结果经GDF11干预后,db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBS)、糖化血红蛋白(Hb A1C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)均明显低于DM组及NC组小鼠(P<0.05);db/db糖尿病小鼠的糖耐量水平显著改善,GDF11组小鼠的血清胰岛素、血清胰升糖素均明显低于DM组(P<0.05),且均高于NC组(P<0.05);GDF11组小鼠的胰岛内胰岛素的水平明显高于DM组(P<0.05),但低于NC组(P<0.05);DM组与GDF11组小鼠的胰岛内胰升糖素无显著差异(P>0.05),且均高于NC组(P<0.05);经实时荧光定量PCR检测发现GDF11组小鼠胰岛胰十二指肠同源异型盒基因(Pdx-1)、亮氨酸拉链蛋白Maf家族A(MafA)、Nk同源异型盒基因家族6.1(Nkx6.1)、Insulin2基因表达上调;小鼠的p-Smad2、Smad2蛋白水平明显高于NC组小鼠(P<0.05)。结论GDF11可控制糖尿病小鼠胰升糖素分泌水平,调节β细胞转录因子表达,改善β细胞功能和含量,促进胰岛素的分泌合成,从而延缓糖尿病的发生和发展;GDF11对胰岛β细胞的保护作用可能与胰岛Smad2信号通路密切相关。     

抗氧化微量营养素对糖尿病小鼠胰岛细胞形态影响

目的　研究抗氧化微量营养素对糖尿病小鼠胰岛细胞形态的影响。方法　使用链脲佐菌素 (STZ)制备糖尿病小鼠模型 ,经每日灌胃补充硒 (Se)、钒 (V)、铬 (Cr)、维生素E(VE)等抗氧化微量营养素 ,每周监测血糖和体重 ,补充 7周后处死动物 ,石蜡包埋胰腺组织 ,制备HE染色切片及免疫组织化学检测。结果　补充抗氧化微量营养素可明显降低糖尿病小鼠血糖水平 ,改善胰岛形态结构。结论　抗氧化微量营养素可调节糖尿病小鼠糖代谢水平 ,对胰岛 β细胞有一定的保护作用。     

十二指肠空肠旁路术对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能恢复的作用

目的:研究十二指肠空肠旁路手术(duodenal jejunal bypass sugery,DJB)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞功能恢复的影响。方法:采用高糖高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射建立T2DM动物模型,将成模大鼠随机分为T2DM组(T2DM-C)和T2DM手术组(T2DM-DJB),普通饮食大鼠为空白对照组(WC)。分别检测3组大鼠基础代谢指标、空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMAIR)。术后20周处死大鼠,留取胰腺组织放入4%多聚甲醛中固定。用HE染色、免疫荧光双标法和电镜检测胰岛病理学形态、胰岛β细胞和α细胞比例变化和胰岛超微结构。结果:术后T2DM-DJB组大鼠体重和饮食量较术前无明显改变,T2DM-DJB组与T2DM-C组比较血糖和胰岛素水平明显下降,胰岛素抵抗得到改善;术后HE染色示胰岛形态恢复良好;免疫荧光示胰岛β细胞所占胰岛比例较T2DM-C组升高;电镜示胰岛β细胞超微结构得到改善。结论:DJB手术改善T2DM大鼠葡萄糖代谢和胰岛素抵抗,缓解胰岛β细胞凋亡,改善胰岛β细胞功能。     

腺病毒介导鼠胰岛素样生长因子1基因对胰岛β细胞的保护作用

背景:研究表明自身高表达胰岛素样生长因子1的小鼠对药物诱导糖尿病有一定的预防作用.目的:观察腺病毒介导鼠胰岛素样生长因子1基因对胰岛β细胞损伤的保护作用.方法:①体外实验:以Ad-rIGF-1、Ad-eGFP直接感染鼠胰岛β细胞标准细胞株-R1Nm5F细胞,然后两组再分别加入0,1.5 mmol/L链脲佐菌素.②体内预防实验:将60只昆明小鼠随机分为空白对照组(不做任何处理)、糖尿病对照组(制作糖尿病模型)、空载体对照组(仅腹腔注射Ad-eGFP重组腺病毒液)、Ad-rIGF-1组(于糖尿病模型制作前2周腹腔注射Ad-rIGF-1重组腺病毒液).③体内治疗实验:将75只昆明小鼠随机分组:空白对照组(不做任何处理)、糖尿病对照组、胰岛素组、Ad-rIGF-1组、Ad-rIGF-1联合胰岛素组.后3组制作糖尿病模型后给予相应干预.结果与结论:①鼠胰岛素样生长因子1在胰岛β细胞有效表达,并具有抑制链脲佐菌素诱导胰岛β细胞凋亡的作用.②Ad-rIGF-1组糖尿病发病率低,平均血糖水平低,胰腺炎症浸润程度轻.③与糖尿病对照组、胰岛素组相比,Ad-rIGF-1组和Ad-rIGF-1联合胰岛素组胰腺炎症浸润程度轻,鼠胰岛素样生长因子1在胰岛局部高表达;胰岛素组、Ad-rIGF-1组、Ad-rIGF-1联合胰岛素组血清C-肽水平低,组间比较无明显差别(P > 0.05).表明胰岛β细胞局部表达鼠胰岛素样生长因子1能够保护胰岛β细胞功能,提高细胞存活率,预防和减轻链脲佐菌素诱导的昆明小鼠1型糖尿病.但鼠胰岛素样生长因子1基因转导与胰岛素皮下注射联合应用对糖尿病早期残存胰岛细胞功能的保护效果不明显.     

Betatrophin对1型糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用研究

目的探究胰岛再生激素(betatrophin)对1型糖尿病(T1DM)小鼠胰岛β细胞功能的保护作用。方法选取135只小鼠,随机数字表法分为对照组、模型组、干预组各45只。模型组、干预组持续5 d腹腔注射链脲佐菌素溶液制备T1DM小鼠模型,对照组不做任何处理,干预组建模成功即刻经尾静脉注射betatrophin过表达腺病毒。分析各组胰岛β细胞免疫组化染色情况,并比较三组小鼠betatrophin蛋白水平、胰岛素释放试验结果及糖代谢指标、脂代谢指标。结果干预组betatrophin蛋白水平明显高于模型组、对照组(P 0. 05);干预组PAS染色可见胞浆内紫红色,而模型组无紫红色染色;干预组、模型组T1DM建模成功后胰岛β细胞体积、产物数量较对照组明显小,干预组干预后胰岛β细胞染色强度明显小于模型组,但产物数量较模型组多;干预组、对照组注射胰岛素后0 min、30 min、60 min、90 min、120min血糖水平明显低于模型组(P 0. 05),即干预组血糖对胰岛素敏感性大于模型组;与模型组比较,干预组、对照组空腹血糖、空腹胰岛素、2 h血糖、2 h胰岛素、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)明显降低,高密度脂蛋白(HDL-C)明显升高,差异有显著性(P 0. 05)。结论 Betatrophin可有效保护T1DM小鼠胰岛β细胞功能并促进胰岛素分泌,在提高小鼠对胰岛素敏感性及调节糖脂代谢方面有积极作用,或可为T1DM新型治疗策略提供参考。     

2型糖尿病与炎症及抗炎治疗进展

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的发病机制主要是胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和胰岛β细胞功能障碍。近年来越来越多的研究显示,慢性、亚临床性、非特异性的炎症状态与T2DM的发生发展有密切关系。控制炎症将成为一种新的治疗糖尿病的途径。     

诺和锐联合二甲双胍治疗初发2型糖尿病的疗效观察

近年来有关研究显示,胰岛β细胞功能缺陷及胰岛素抵抗是2型糖尿病(T2DM)发病的基本环节.持续高血糖是诱发和加重胰岛细胞功能衰竭的重要因素,并进一步加重胰岛素抵抗.第一时相胰岛素分泌缺失是T2DM的重要特征.笔者以诺和锐联合二甲双胍对初发T2DM进行治疗观察,现报告如下.     

胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病胰岛素抵抗和胰岛细胞功能的影响

糖尿病是以慢性高血糖为特征的代谢性疾病,其中2型糖尿病（T2DM）约占95％。胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能缺陷是T2DM发生发展的基础。改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞功能是T2DM治疗的靶点。在糖尿病早期,     

miRNA:2型糖尿病潜在的新型生物标志物

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是一种渐进性的多因素代谢紊乱性疾病,微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类小分子非编码RNA,可通过在转录后水平对其靶信使RNA翻译抑制和/或降低其稳定性来调节基因表达,miRNA具有大量的生物学和生理学功能,在T2DM的发生发展、胰岛素的生成与分泌、胰岛素抵抗和糖尿病并发症等方面起重要作用。该综述通过对T2DM相关miRNA的研究,以阐明miRNA在T2DM预防、早期预警和治疗方面具有的潜在应用前景。     

细胞凋亡与糖尿病

细胞凋亡是受基因调控的细胞主动死亡过程。糖尿病(DM)的发生与胰岛β细胞过度凋亡和 T、B 淋巴细胞的凋亡受阻有密切关系。T、B 淋巴细胞 CD5表达缺陷、bcl-2降调节以及 IL-1β、TNF-α、IFN-γ等细胞因子通过 NO 或非 NO 途径,氧化损伤所诱导的细胞凋亡,参与了 DM 的发生、发展。细胞凋亡的调节可从基因水平探讨 DM 的防治。     

胰腺十二指肠同源基因1的结构、表达调控与功能

胰腺十二指肠同源基因1（PDX-1）是编码调节与胰腺发育和β细胞特异基因表达有关的一种特异性转录因子,是胰腺干细胞分化、成熟过程中的第一个分子标记。PDX-1基因的活化可促进胰岛素的释放及β细胞重要基因的表达,也是胰腺干细胞分化为胰岛β细胞的必要条件之一。细胞因子、胰高糖素样肽1（GLP-1）等多种信号转导物质协同调节PDX-1基因的表达。探讨PDX-1的基因表达及生理功能,有助于理解胰腺干细胞向胰岛β细胞诱导分化过程,进一步评估其在糖尿病发生中的可能作用。     

胰岛素联合瑞格列奈对2型糖尿病患者的临床疗效观察

2型糖尿病（T2DM）是遗传因素与环境因素共同作用的结果,其中胰岛β细胞功能缺陷和胰岛素抵抗（IR）是T2DM发生的两个主要机制。因此,恢复早相胰岛素分泌,保护胰岛β细胞功能,改善IR是T2DM治疗的主要策略之一。格列奈类药物是一类非磺酰脲类促胰岛素分泌剂,作用于胰岛β细胞上三磷酸腺苷（ATP）依赖的钾离子通道受体,刺激胰岛素分泌。本研究观察了胰岛素联合瑞格列奈对75例磺脲类降糖药治疗失败的T2DM患者,取得了较好的疗效,报道如下。     

T2DM患者糖化血红蛋白检测与胰岛素释放试验的价值研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者糖化血红蛋白(HbA1c)检测、胰岛素释放试验的意义。方法选取2014年1月至2015年1月收治的89例T2DM患者作为观察对象,分为T2DM A组51例(空腹胰岛素水平低正常)和T2DM B组38例(空腹胰岛素高于正常值或正常),选取同期健康体检者40例作为对照组。分别测定三组对象胰岛素释放试验下不同时间的胰岛素水平及HbA1c、计算胰岛β细胞功能(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)进行比较分析。结果 T2DM A和B组患者的空腹血糖、HbA1c值、HOMA-IR均显著高于对照组(P0.05),HOMA-β值均显著低于对照组(P0.05),其中T2DM B组患者HbA1c低于T2DM A组(P0.05),T2DM B组患者HOMA-β值显著的高于T2DM A组(P0.05);T2DM A和B组患者在胰岛素释放试验第60 min和第120 min胰岛素水平达到最高水平,后逐渐降低。结论通过对T2DM患者的HbA1c进行检测及胰岛素释放试验,可进一步分析患者的胰岛β细胞功能变化,对指导T2DM患者临床治疗具有一定的价值。     

2型糖尿病患者血清松弛素-2与胰岛β细胞功能的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清松弛素-2(RLX-2)的变化及其与胰岛β细胞功能的相关性,以及RLX-2作为评价胰岛β细胞功能的价值。方法前瞻性研究连续入选2015年1~9月因"胸痛"就诊于首都医科大学附属北京友谊医院的患者,按既往病史及入院葡萄糖粉糖耐量实验(OGTT)分为三组:A组(血糖正常组,指既往无糖尿病史且OGTT正常)71例,B组(糖尿病前期组,包括OGTT糖耐量受损和/或空腹血糖受损)68例,C组(2型糖尿病组,包括既往病史和入院OGTT证实的T2DM)133例。经更新稳态模型评估(HOMA2)计算β细胞功能、胰岛素敏感性和胰岛素抵抗指数。比较三组患者RLX-2及胰岛β细胞功能、实验室指标等参数的差异,并分析B组和C组患者中RLX-2与β细胞功能的相关性。结果三组患者比较,随着糖代谢异常程度增加,患者甘油三酯及hs-CRP水平逐渐升高,LVEF水平逐渐降低(P0.05)。随着糖代谢异常程度加重,空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数显著升高,而胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性均显著降低(P0.05)。三组患者RLX-2比较,B组患者RLX-2较A组及C组显著增加,差异具有统计学意义(P0.05);随着糖代谢异常进展,胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性逐步下降,而胰岛素抵抗指数逐渐增加。多元逐步回归分析显示,T2DM患者血RLX-2水平与胰岛β细胞功能呈独立正相关,相关系数为0.439(P0.001)。结论血清RLX-2可能是糖代谢异常的一种早期血清标志物,它可能反映了胰岛β细胞的代偿功能。     

短期胰岛素泵强化联合格列齐特治疗老年2型糖尿病患者的临床疗效

目的探讨短期胰岛素泵强化联合格列齐特在老年2型糖尿病(T2DM)治疗中的效果。方法选取我院2017年9月～2019年6月我院收治的84例T2DM患者,根据掷硬币法分为观察组和对照组各42例。对照组服用二甲双胍联合格列齐特治疗,观察组在对照组基础上加用短期胰岛素泵强化治疗。观察两组治疗前及治疗3个后血糖水平[空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2h PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]、胰岛β细胞功能[空腹胰岛素(FINS)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)]。结果治疗3个月后,观察组FBG、2h PBG、Hb A1c水平显著低于对照组(P0.05)。治疗3个月后,两组FINS水平、HOMA-β指数均升高,且观察组高于对照组(P0.05)。结论短期胰岛素泵强化联合格列齐特可有效改善老年T2DM患者血糖水平,提高胰岛β细胞功能,降低胰岛素抵抗。     

肝源性糖尿病患者胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗及临床意义

目的探讨肝源性糖尿病患者胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗的特征。方法对肝源性糖尿病(HD)26例,2型糖尿病(T2DM)30例,正常对照(NC)22例,行口服葡萄糖耐量试验,测定0 min、30 min、60 min、120 min、180 min血糖及胰岛素水平。计算稳态模式评估法的胰岛β细胞基础分泌指数(HOMA-β)、早相胰岛素分泌指数(△I30/△G30)、晚相胰岛素分泌指数(AUCI30-120/AUCG30-120),评估胰岛β细胞功能;计算空腹血糖与空腹胰岛素比值(PFG/FINS)、稳态模式评估法的胰岛抵抗指数(HOMA-IR)、肝脏胰岛素抵抗指数(HIR)及Matsuda指数(MSI),评估胰岛素抵抗。结果 HD组的HOMA-β和AUCI30-120/AUCG30-120高于T2DM组(P<0.05),与NC组无差异(P>0.05);HD组和T2DM组的△I30/△G30低于NC组(P<0.05),HD组和T2DM组无差异(P>0.05);HD组和NC组的PFG/FINS低于T2DM组(P<0.05),HD组和NC组的PFG/FINS和HOMA-IR无差异(P>0.05);HD组和T2DM组的HIR高于NC组(P<0.05),HD组和T2DM组无差异(P>0.05);HD组和T2DM组的MSI低于NC组(P<0.05),HD组和T2DM组无差异(P>0.05)。结论 HD患者基础胰岛素分泌接近正常人,以早相胰岛素分泌损害及餐后胰岛素抵抗为主。     

应用细胞工程和转基因技术治疗糖尿病:"胰岛代理细胞"的构建研究

背景由于胰岛细胞分离技术难度较大,目前糖尿病细胞移植治疗尚缺乏理想的细胞来源.目的构建具有生理性胰岛素分泌能力胰岛代理细胞系,为糖尿病基因治疗提供有效手段.设计随机对照的实验研究.地点、材料和干预本研究在第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行.以携葡萄糖激酶(glucokinase,GK)基因的逆转录病毒及携人胰岛素原基因突变体(mutant proinsulin gene,MPIN)的逆转录病毒共同感染人肝癌细胞系HepG2细胞,G418筛选,放免法、Western-blotting及RT-PCR鉴定;挑选联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞进行葡萄糖反应性胰岛素分泌反应的检测,以单独表达成熟胰岛素的HepG2细胞作对照.主要观察指标不同葡萄糖浓度条件下,联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞培养上清中的胰岛素浓度.结果G418筛选3周获阳性细胞克隆,放免法、Western-blotting挑选出两个目的基因表达均较强的HepG2细胞1株,命名为细胞克隆"β";RT-PGR证实细胞"β"中已有两个目的基因的转录;在细胞"β"中获得葡萄糖反应性胰岛素分泌,葡萄糖浓度约1.75～2.00mmol/L时出现胰岛素分泌高峰;而在单独表达成熟胰岛素的HepG2细胞中,各种葡萄糖浓度引起的胰岛素分泌差异无显著性意义(P＞0.05).结论成功构建了具有生理性胰岛素分泌能力的"胰岛代理细胞"系.     

应用细胞工程和转基因技术治疗糖尿病：“胰岛代理细胞”的构建研究

背景：由于胰岛细胞分离技术难度较大，目前糖尿病细胞移植治疗尚缺乏理想的细胞来源。目的：构建具有生理性胰岛素分泌能力胰岛代理细胞系，为糖尿病基因治疗提供有效手段。设计：随机对照的实验研究。地点、材料和干预：本研究在第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。以携葡萄糖激酶(glucokinase，GK)基因的逆转录病毒及携人胰岛素原基因突变体(mutant proinsulin gene，MPIN)的逆转录病毒共同感染人肝癌细胞系HepG2细胞，G418筛选，放免法、Western—blotting及RT-PCR鉴定；挑选联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞进行葡萄糖反应性胰岛素分泌反应的检测，以单独表达成熟胰岛素的HepG2细胞作对照。主要观察指标：不同葡萄糖浓度条件下，联合表达GK及成熟胰岛素的HepG2细胞培养上清中的胰岛素浓度。结果：G418筛选3周获阳性细胞克隆，放免法、Western—blotting挑选出两个目的基因表达均较强的HepG2细胞1株，命名为细胞克隆“β”；RT—PCR证实细胞“β”中已有两个目的基因的转录；在细胞“β”中获得葡萄糖反应性胰岛素分泌，葡萄糖浓度约1．75-2．00mmol／L时出现胰岛素分泌高峰；而在单独表达成熟胰岛素的HepG2细胞中，各种葡萄糖浓度引起的胰岛素分泌差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：成功构建了具有生理性胰岛素分泌能力的“胰岛代理细胞”系。     

研究胰岛素联合二甲双胍与磺脲类药物联合二甲双胍治疗2型糖尿病患者的临床疗效

目的比较胰岛素联合二甲双胍与磺脲类药物联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)患者的临床疗效。方法将100例T2DM患者随机分为两组各50例,研究组予以胰岛素联合二甲双胍治疗,对照组予以磺脲类药物联合二甲双胍治疗。比较两组治疗前后的空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。结果两组治疗后FBG、2hBG、HbA1c均明显降低(P<0.05),但组间比较无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后HOMA-IR、HOMA-β均明显改善(P<0.05),且研究组HOMA-β改善明显优于对照组(P<0.05)。经治疗,两组患者的生活质量均得到了合理提升,且研究组高于对照组,数据差异有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素联合二甲双胍与磺脲类药物联合二甲双胍治疗T2DM,均可有效控制血糖,改善胰岛素抵抗与胰岛β细胞功能,且胰岛素联合二甲双胍在改善胰岛β细胞功能方面的效果更显著。