大鼠心肺复苏后脑水通道蛋白-4表达变化与脑水肿的关系

目的 探讨大鼠心肺复苏后脑水通道蛋白-4(AQP4)表达与脑水肿动态变化的关系.方法 将42只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(n=6)、假手术组(n=6)、心搏骤停模型组[(SCA模型组,n=30;按自主循环恢复(ROSC)后1、6、12、24 、72 h各时点分5个亚组,每个亚组6只].分别检测脑组织水含量及AQP4表达水平.结果 SCA模型组大鼠ROSC后脑组织含水量呈上升趋势,24 h达高峰,各时点均高于对照组、假手术组(均P<0.01).AQP4表达水平与脑组织水含量呈同样趋势改变.积分光密度(iOD)、显色面积比(△S)与脑组织含水量均呈正相关(r=0.858,r=0.870,均P<0.001).结论 大鼠心肺复苏后脑AQP4表达上调,与脑水肿变化呈正相关,AQP4可能参与心肺复苏后脑水肿形成.     

重型脑损伤后AQP4表达与脑水肿的关系

目的观察重型脑损伤后水通道蛋白-4（AQP4）表达变化，及其与脑损伤后脑水肿之间的关系。方法健康成年Wistar大鼠，随机分成创伤性脑损伤（TBI）组和各假手术（SO）组。自由落体硬膜外撞击方法致重度脑创伤模型。于伤后4h、8h、12h、1d、3d、5d、7d取出大鼠脑组织，免疫组化（IHC）和原位杂交（ISH）检测AQP4的表达变化，干湿重法计算脑组织含水量。结果IHC和ISH显示，脑损伤后AQP4在脑组织中的表达上调，1d达高峰，持续至3d后下降，7d接近SO组水平。与SO组相比，除7d亚组外，TBI其余各亚组中AQP4表达水平均明显增高（P〈0、05）。脑损伤后4h脑组织含水量即比SO组增加（P〈0、05），随时间延长，脑组织含水量亦逐渐增加，伤后1-3d达高峰。AQP4表达和脑组织含水量呈正相关，r=0．978，P〈0，01。结论脑损伤后，随着脑水肿加重，AQP4表达上调。提示脑损伤后AQP4的表达变化与脑水肿的形成密切相关，AQP4在损伤后脑水肿的形成中发挥着重要作用。     

亚低温技术对心肺复苏后脑功能影响的研究

目的：探讨亚低温技术对心肺复苏过程中对脑损伤的保护作用。方法将心脏停搏患者48例随机分为亚低温组和常温组,常温组给予常规心脏停搏急救处理。亚低温组在常规处理的基础上给予4℃林格氏液诱导降温联合头颈部体表物理降温,控制肛温在33℃～35℃。对比两组患者复苏成功后24 h、48 h、72 h动脉血乳酸水平、格拉斯哥（ GCS）评分,随访3～6个月,观察脑功能恢复情况。结果亚低温组复苏成功后24 h、48 h、72 h动脉血乳酸浓度显著低于常温组（P＜0．05）,GCS评分显著高于常温组（P＜0．05）。随访期间,亚低温组患者疗效显著优于常温组（P＜0．05）。结论心肺复苏早期使用亚低温处理,可以有效减轻缺血缺氧对脑组织的损害,改善神经功能预后。     

轻中度亚低温对大鼠心肺复苏后脑细胞caspase-3、Bcl-2 和Bax蛋白表达的影响

目的研究不同程度亚低温对大鼠心肺复苏（CPR）后脑组织凋亡的影响。方法利用窒息法制作心肺复苏模型,SD大鼠
15只,随机分为对照组（正常体温）、34 ℃低温组、32 ℃低温组,每组各5只。对照组在CPR后置于室温25 ℃下常规治疗;34 ℃低
温组（34+/-0.2 ℃）和32 ℃低温组（32+/-0.2 ℃）在CPR 0.5 h后分别给予亚低温治疗。各组大鼠均于CPR后12 h取脑组织,免疫
组化法测定大脑皮层caspase-3蛋白表达,Western blotting测定Bcl-2、Bax表达,同时观察各组脑组织病理变化。结果与常温
组相比,低温组神经元caspase-3 表达均明显减弱（P<0.05）,其中32 ℃低温组caspase-3 表达减弱更加明显（P<0.05）;低温组
Bcl-2表达明显增强（P<0.05）,32 ℃低温组的Bcl-2蛋白表达比34 ℃低温组表达更强;3组大鼠神经元凋亡蛋白bax的表达无明
显差异。结论亚低温可能通过降低caspase-3蛋白的表达、增强Bcl-2的表达,从而抑制脑细胞凋亡减轻脑损伤,32 ℃亚低温治
疗比34 ℃更能起到脑保护的作用。
     

乌司他丁对心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶的影响及作用

目的：探讨心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）的变化、大脑皮层病理改变及乌司他丁的干预作用。方法：成年雄性SD大鼠120只,随机分为假手术对照组、复苏组、乌司他丁组（药物组）,每组按气管切开后（对照组）或自主循环恢复（ROSC）后（复苏组、药物组）0.5、3、6、12h和24h分为5个亚组（n=8）。复苏组和药物组采用窒息致大鼠心脏骤停和心肺复苏模型,药物组于ROSC后2min内经颈动脉推注乌司他丁（100000U/kg）。对照组仅行麻醉、气管切开和血管穿刺。各组分别于各时间点取血和组织标本,以ELISA法检测血清NSE浓度,光镜下观察大脑皮层的病理改变。结果：与对照组比较,复苏组和药物组ROSC后各亚组各时间点血清NSE含量明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;与复苏组比较,药物组ROSC后6、12、24h血清NSE含量显著降低（P〈0.05或P〈0.01）。药物组病理损害轻于复苏组。结论：乌司他丁通过降低血清NSE浓度对心肺复苏后脑损伤具有一定的保护作用。     

AQP4在幼年大鼠感染性脑水肿中的作用机制

目的观察内毒素致幼年大鼠感染性脑水肿后水通道蛋白4（AQP4）的表达变化。方法将50只幼鼠随机分为内毒素组（40只）和对照组（10只）。建立内毒素致大鼠感染性脑水肿模型,于术后6h、12h、24h和48h处死动物,分别行脑组织含水量、血脑屏障通透率的测定,以伊文思兰含量判定血脑屏障通透率,并应用免疫组织化和RT--PCR,技术检测脑组织内AQP4蛋白和mRNA的表达水平。结果内毒素组脑组织含水量和伊文思兰含量明显高于对照组。在内毒素注射后6h时,脑组织中AQP4的表达明显增加,12h时达高峰,各时间点与对照组比较均有显著性差异（P〈0．01）。结论感染性脑水肿后脑组织中AQP4的表达增加,且与脑组织含水量和BBB的破坏呈正相关。     

参附注射液对大鼠心肺复苏后脑水肿和S100β蛋白表达的影响

目的探讨参附注射液对大鼠心肺复苏后脑水肿和海马CA1区S100β蛋白表达的影响。方法成年雄性SD大鼠160只,随机分为对照组、复苏组、小剂量参附组（10ml/kg）和大剂量参附组（20ml/kg）,再分别按气管切开后（对照组）或自主循环恢复（ROSC）后（复苏组和大、小剂量参附组）0.5h、3h、6h、12h和24h分为5类,每类8只。建立窒息型大鼠心肺复苏模型,分别于各时间点取样,干湿比重法测定脑组织含水量,应用免疫组化方法观察海马CA1区S100β蛋白表达,HE染色光镜下观察皮层病理改变。结果复苏组ROSC后海马CA1区S100β蛋白的表达随脑水含量升高而逐渐增加,均于ROSC后6h达峰值,12h、24h有所回落,与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0.01）,且两者呈显著正相关（P〈0.05）;大、小剂量参附组脑水含量和S100β蛋白阳性表达分别从复苏后3h、6h起较复苏组显著降低（P〈0.05或P〈0.01）;大、小剂量参附组间相比,脑水含量和S100β蛋白阳性表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。光镜下组织病理改变显示,大、小剂量参附组皮层结构损害程度明显轻于复苏组。结论参附注射液能降低大鼠心肺复苏后海马CA1区星形胶质细胞S100β蛋白表达和脑水肿程度,起到减轻大脑缺血损伤的作用。     

七氟醚与大鼠缺血性脑水肿脑组织内水通道蛋白4表达的影响

目的探讨七氟醚对大鼠缺血性脑水肿脑组织中水通道蛋白4（AQP4）表达的影响。方法选择健康SD大鼠90只,随机分为三组：假手术组、大脑中动脉栓塞（MACO）组、七氟醚预处理组,每组各30只;各组分别按术后6、24、48 h 3个时间点分为3个亚组,每个亚组各10只。分别在术后6、24、48 h检测脑组织含水量,采用RT-PCR检测脑组织中AQP4 mRNA基因表达。结果①MACO组及七氟醚预处理组术后6、24、48 h的AQP4mRNA光密度积分均高于假手术组,差异有统计学意义（P〈0.05）;七氟醚预处理组术后6、24、48 h的AQP4mRNA光密度积分[（1.2743±0.0460）、（1.3454±0.0450）、（1.4443±0.0740）分]均高于MACO组[（1.4385±0.0540）、（1.5370±0.0580）、（1.6489±0.0940）分],差异有统计学意义（P〈0.05）。②MACO组及七氟醚预处理组术后6、24、48 h的脑组织含水量均高于假手术组,差异有统计学意义（P〈0.05）;七氟醚预处理组术后6、24、48 h的脑组织含水量[（75.8±6.8）%、（77.6±8.9）%、（76.3±6.4）%]均低于MACO组[（78.4±6.5）%、（80.1±7.6）%、（83.4±7.2）%],差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论脑水肿形成与AQP4的表达有密切关系,七氟醚对脑组织内AQP4的基因表达有抑制作用,进而抑制脑水肿的发展。     

亚低温治疗对大鼠缺血性脑损伤后热休克蛋白表达的影响

目的：探讨亚低温对大鼠急性局灶性脑缺血后脑组织内热休克蛋白70（Hsp70）表达的影响及意义。方法：将48只SD大鼠随机分为亚低温组及对照组,各组再分为3个亚组,每亚组8只,参照改良的Longa栓线法构建大鼠局灶性脑缺血模型,亚低温组大鼠给予亚低温治疗2小时,而对照组不作亚低温处理。分别于缺血后12小时、24小时、48小时将大鼠处死,用免疫细胞化学技术检测半暗带Hsp70蛋白表达,进行半定量分析。结果：热休克蛋白表达计数同一亚组比较亚低温组明显少于常温组,在24小时亚组和48小时亚组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：亚低温减少了缺血半暗带,使大鼠急性局灶性脑缺血后脑组织内Hsp70表达减少,具有脑保护作用。     

川芎嗪对心脏骤停鼠脑复苏的作用

目的研究川芎嗪对心脏骤停复苏后脑组织的保护作用及其机制，探讨脑复苏治疗的有效方法。方法16只大鼠随机分为川芎嗪组（n=8）和对照组（n=8）．大鼠窒息导致心跳骤停模型复制成功后，川芎嗪组和对照组于复苏即刻分别静脉注射川芎嗪、生理盐水，比较两组大鼠自主循环恢复（ROSC）时间、动脉血与脑匀浆丙二醛（MDA）、脑干湿重比、神经功能缺损评分（NDS）及脑海马组织病理改变。结果川芎嗪组较对照组明显改善自主循环恢复时间（P〈O．01）．降低1h动脉血MDA（P〈0．01）及24h脑匀浆MDA（P〈0．01），改善24h、48hNDS（P〈0．05），减轻大脑湿重（P〈0．01）及减轻脑组织病理损伤。结论静脉注射川芎嗪能减轻大鼠心脏骤停复苏后脑组织损伤，改善脑功能。     

亚低温对脑梗死后AQP4表达及血脑屏障通透性的影响

目的 观察脑梗死后亚低温干预对大鼠水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达及血脑屏障(blood brain-barrier,BBB)通透性的影响,探讨亚低温对缺血性脑水肿的作用机制.方法 线栓法制造大鼠局灶性脑缺血模型,同时给予亚低温治疗.用免疫组织化学方法检测AQP4和IgG的表达.用干湿重法检测脑水含量.结果 再灌注损伤后脑内AQP4蛋白水平迅速降低,至再灌注后12h达最低水平,至再灌注7d时接近正常水平.亚低温组AQP4、IgG表达及脑水含量均明显低于常温组.结论 ①脑梗死后,AQP4表达水平迅速下降,可能是机体的一种保护性反应;②亚低温能有效抑制脑梗死后AQP4的表达和血脑屏障通透性的增加.     

局部亚低温对大鼠脑出血后水通道蛋白4表达的影响

目的观察局部亚低温对大鼠自体血注入法脑出血模型水通道蛋白4(AQP-4)mRNA及蛋白质表达的影响,探讨局部亚低温减轻脑出血后水肿的可能机制。方法雄性W istar大鼠240只,随机分为脑出血(ICH)组和脑出血加局部亚低温(ICH+H)组。每组分为对照、脑出血后6、24、72 h,5、7 d共6个亚组,ICH+H组于注血后给予4 h的局部亚低温治疗,各亚组分别进行血脑屏障(BBB)通透性、脑水含量的检测以及应用逆转录(RT)-PCR及W estern印迹对AQP-4进行测定。结果ICH组大鼠脑组织水含量、BBB通透性以及AQP-4 mRNA表达的增加始于脑出血后6 h,AQP-4蛋白质表达的增加始于脑出血后24 h,均至72 h达高峰(P<0.01)。AQP-4 mRNA及蛋白质表达的变化与BBB通透性的变化呈正相关(r=0.78和r=0.76)。ICH+H组的脑组织水含量和BBB通透性在各时间点与ICH组相比明显下降,而AQP-4 mRNA吸光度值(A)在脑出血后48 h与ICH组相比开始较低,在72 h,由ICH组的1.25±0.03降至1.04±0.02(P<0.01),AQP-4蛋白质A值在各时间点与ICH组相比明显下降,在72 h,由ICH组的0.77±0.08下降至0.25±0.04(P<0.01)。结论脑出血后BBB完整性的破坏可以导致AQP-4表达的上升。局部亚低温可以抑制脑出血后AQP-4 mRNA和蛋白质表达的增加。局部亚低温可能既通过减轻BBB完整性的破坏在转录水平抑制AQP-4 mRNA表达的增加,也可以在翻译水平直接抑制AQP-4蛋白质的表达,来减轻脑出血后的脑水肿形成。     

全身低温对缺氧缺血性新生猪血气和血液动力学的影响

目的观察全身低温脑保护治疗是否对缺氧缺血性损伤新生猪的血气和血液动力学存在不良影响。方法将雄性新生猪分为3组：假手术（S）组,脑损伤常温（NT）组,脑损伤低温（HT）组,采用窒息性心跳骤停后心肺复苏（CPR）的方法制备缺氧缺血性脑损伤模型,各组存活10只。HT组于心肺复苏后4h给予全身系统性低温治疗,维持直肠温度在（34±0.2）℃,持续20h。NT组直肠温度维持在38.5-39℃。实验期间监测血糖、血气、心率、平均动脉压的变化。结果低温前、低温治疗以及复温后,三组血糖、pH值、PaO2和PCO2比较无统计学意义（P〉0.05）。低温后HT组心率、平均动脉压和NT组相比显著下降（P〈0.05）;复温后,HT组心率和血压逐渐恢复,与NT组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论全身低温治疗不会加重缺氧缺血性新生猪血气和血液动力学异常。     

亚低温对缺血再灌注鼠脑LN与MMP-9表达的影响及意义

目的 研究亚低温与常温条件下层粘连蛋白(Laminin, LN)与明胶酶-B(MMP-9)表达的差异性,为进一步探讨亚低温的脑保护机制提供实验依据.方法 制备大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组和亚低温条件下缺血再灌注组;缺血2h后依照再灌注时间点的不同分为3h、6h、12h、24h、72h与7d 6组,共14组.免疫组织化学法观察脑组织LN与MMP-9的表达变化.结果 LN在微血管的表达于再灌注12h明显减少,24h达最低,72h开始回升;在同一时相(72h, 7d除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.LN在神经元的表达于再灌注3h明显增多,6h明显减少,12h和24h呈阴性,72h开始回升,7d开始下降.在同一时相(72h除外),与常温组比,亚低温组LN的表达显著增多.MMP-9的表达于再灌注6h开始增加,12h开始减少,72h达最低,呈阴性,7d又回升.与常温组比,3h、6h组,亚低温组MMP-9的表达显著减少;12h、24h、72h组, 亚低温组MMP-9的表达显著增多;7d组,亚低温组MMP-9的表达显著减少.结论 LN与MMP-9可能参与了缺血再灌注血管源性脑水肿的形成与发展.再灌注早期亚低温通过增加LN的表达,减少MMP-9的表达而对缺血再灌注脑有保护作用.     

水通道蛋白-4在大鼠创伤性脑水肿中的表达及其意义

目的探讨水通道蛋白-4(AQP4)在大鼠创伤性脑水肿形成过程中的表达变化及其意义。方法选择健康成年Wistar大鼠随机分为实验组(n=60)和对照组(n=15),实验组采用改进的Feeney氏法,造成大鼠右侧大脑半球局部脑损伤;对照组仅切开头皮,不造成大鼠脑损伤。分别进行脑组织形态学观察、脑含水量检测、免疫组织化学方法检测各组AQP4的表达水平。结果实验组72h病灶区域脑组织含水量百分率[(80.18±0.55)%较对照组(78.10±0.52)%]高(P<0.05)。实验组1、3h AQP4平均吸光度值(0.210 0±0.029 4、0.186 0±0.016 5)较对照组(0.143 3±0.053 8)高(P<0.05)。结论在脑创伤早期,AQP4强烈表达,可能与脑创伤后的应激反应有关。在脑创伤后期,由于AQP4表达呈下调趋势,其活性降低,出现混合性脑水肿。     

选择性亚低温对脑外伤大鼠脑组织Fas-L基因表达的影响

目的研究选择性亚低温治疗大鼠脑外伤时对脑组织Fas—L基因表达的影响。方法72只大鼠随机分为假手术组、亚低温组和常温对照组。采用改进的Feeney自由落体法制作重型外伤性颅脑损伤模型,局部降温法在伤后30min内达到亚低温目标并保持6h,RT．PCR检测3组大鼠伤后不同时间点脑组织Fas—L基因表达。结果亚低温组大鼠在损伤后不同时间点（6h,24h,48h和72h）脑组织的Fas—LmRNA的相对含量分别为0．54±O．07、0．47±0．06、0．41±0．06、0．67±0．08,常温对照组分别为1．53±0．21、0．914-0．11、1．33±0．15、1．56±0．171．53,相同时间点两组间比较均有显著性差异（P〈0．05）。结论亚低温对大鼠外伤性颅脑损伤急性期具有降低Fas-LmRNA的作用。     

补阳还五汤对窒息型大鼠心肺复苏后脑损伤的影响

目的：探讨补阳还五汤（BHD）对心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation,CPR）后脑水肿和脑损伤指标的影响。方法：成年雄性SD大鼠24只,随机分为假手术对照组、复苏组、BHD组。建立窒息型大鼠CPR模型,于复苏后24 h取样,采用干湿重法计算脑组织含水量,应用双抗体夹心酶标免疫分析法检测血清和脑组织匀浆的S100B蛋白和神经特异性烯醇化酶（NSE）含量。结果：与假手术对照组比较,复苏组在自主循环恢复（restoration of spontaneous circulation,ROSC）后24 h脑水含量增加,复苏组大鼠血清和脑组织S100B、NSE含量显著升高;与复苏组比较,BHD组脑水肿减轻,大鼠血清和脑组织匀浆S100B、NSE含量显著降低。结论：BHD能够降低脑水肿,降低脑损伤指标,可能在CPR中具有脑保护作用。     

Effect of different resuscitation strategies on post-resuscitation brain damage in a porcine model of prolonged cardiac arrest

Background The choice of a defibrillation or a cardiopulmonary resuscitation （CPR）-first strategy in the treatment of prolonged cardiac arrest （CA） is still controversial. The purpose of this study was to compare the effects of defibrillation or CPR administered first on neurological prognostic markers in a porcine model of prolonged CA. Methods After 8 minutes of untreated ventricular fibrillation （VF）, 24 inbred Chinese Wuzhishan minipigs were randomized to receive either defibrillation first （ID group, n=12） or chest compression first （IC group, n=12）. In the ID group, a shock was delivered immediately. If defibrillation failed to attain restoration of spontaneous circulation （ROSC）, manual chest compressions were rapidly initiated at a rate of 100 compressions/min and a compression-to-ventilation ratio of 30：2. If VF persisted after five cycles of CPR, a second defibrillation attempt was made. In the IC group, chest compressions were delivered first, followed by a shock. After successful ROSC, hemodynamic status and blood samples were obtained at 0.5, 1, 2, 4, 6, and 24 hours after ROSC. Porcine-specific neuron-specific enolase （NSE） and S100B were measured from sera using enzyme-linked immunosorbent assays. Porcine cerebral performance category scores were used to evaluate preliminary neurological function following 24 hours recovery. Surviving pigs were sacrificed at 24 hours after ROSC and brains were removed for electron microscopy analysis. Results The number of shocks, total defibrillation energy, and time to ROSC were significantly lower in the ID group compared with the IC group. Compared with the IC group, S100B expression was decreased at 2 and 4 hours after ROSC, and NSE expression decreased at 6 and 24 hours after ROSC in the ID group. Brain tissue analysis showed that injury was attenuated in the ID group compared with the IC group. There were no significant differences between 6 and 24 hours survival rates. Conclusion Defibrillation first may result in a shorter tim