血吸虫病特异性免疫核糖核酸的研究 Ⅱ.传递免疫与预防血吸虫病的动物实验观察

从血吸虫病患者的脾脏中提取的血吸虫病特异性免疫核糖核酸(S-iRNA),前文业已初步证明S-iRNA在体外具有传递免疫的功能。iRNA注入机体后,可通过淋巴细胞诱生特异性细胞免疫与体液免疫。Barr等报道疟疾特异性iRNA,具有保护小鼠对柏氏疟原虫致死量的攻击,且使鼠体内疟原虫数显著地低于对照组。恒河猴的实验业已证明,血吸虫病获得性免疫机理是通过细胞免疫与体液免疫的协同作用而发挥效应的。本文试用S-iRNA注入家兔,观察其传递免疫的功能及抵抗血吸     

原位酶联免疫吸附试验测定iRNA体外诱生抗体活性的研究

在研究抗菌免疫核糖核酸(iRNA)传递体液免疫活性中,我们建立了原位酶联免疫吸附试验(in Situ ELISA)。该方法在检测iRNA诱导正常小鼠脾细胞产     

抗鼠疟iRNA体外传递疟原虫抗原特异性白细胞粘附抑制反应

疟疾免疫是一个复杂而重要的问题,其中细胞免疫的作用正受到越来越多的重视。免疫核糖核酸(iRNA)能够传递特异性免疫反应,并己开始用于某些疾病的预防和治疗。故本实验制备了抗约氏疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)iRNA,通过白细胞粘附抑制(LAI)试验,观察其体外传递特异性细胞免疫反应的效应,以期将iRNA用于疟疾免疫机理的探讨和实际应用。     

免疫核糖核酸连续传递肿瘤特异性LAI反应

用S_(180)瘤细胞免疫的豚鼠淋巴组织提取的RNA(iRNA)注射给受体小鼠后,再从小鼠脾脏提取RNA(iRNA_1),它能够传递对S_(180)肿瘤抗原的特异性白细胞粘附抑制反应(LAI),而不能传递对正常组织抗原(NAg)及不相关的H_(22)肿瘤抗原(HAg)的LAI反应;将iRNA注射给第2受体鼠,从其脾脏来源的iRNA(iRNA_2)也具有上述活性。如此重复,iRNA_3也具有特异性免疫活性。在传递过程中,其免疫特异性及免疫反应强弱无改变。上进各种iRNA体内抑瘤实验表明:实验动物肿瘤发生时间稍延迟,发病率略下降,~(125)I标记的iRNA体内追踪实验显示脾脏标记物存留时间延长,大分子标记物比例随时间延长而增高。     

血吸虫病特异性免疫核糖核酸的研究——Ⅰ.提取与体外传递免疫的初步观察

近年来血吸虫病的免疫研究有很大进展,国内外均有报道晚期血吸虫病的细胞免疫功能低下,因之设法提高患者的细胞免疫功能将是有益的,对此已有使用转移因子而收益。iRNA能提高机体的免疫功能,而无转移因子的种间限制,已用于肿瘤与乙型肝炎等的治疗。本文报道从血吸虫病巨脾患者的脾脏中,提取血吸虫病特异性免疫RNA(S-iRNA);用白细胞粘附抑制(LAI)试验,测定其活性并观察其对正常人和晚期血吸虫病患者的白细胞传递免疫现象。材料与方法     

核酸疫苗免疫机制研究新进展

核酸疫苗与传统疫苗相比具有不可比拟的优势,可诱导机体产生细胞免疫和体液免疫,其免疫保护作用主要通过MHCⅠ类分子途径、MHCⅡ类分子途径和B细胞途径等3种途径来实现.通过MHCⅠ类分子途径激活CD8+T细胞,产生特异的CTL效应细胞免疫;通过MHCⅡ类分子途径激活CD4+T细胞,分泌IL-2、INF-γ、TNF-β等细胞因子,辅助机体产生特异性体液免疫;通过B细胞途径刺激并活化B细胞,诱导B细胞增殖分化,产生大量特异性抗体,诱发体液免疫应答.     

抗乙型肝炎免疫核糖核酸液体制剂低温保存期间白细胞粘附抑制试验动态观察

<正> 抗乙型肝炎iRNA具有传递特异性免疫的功能,这已在体外实验中得到证实,並被用于临床。但iRNA易受RNase的破坏,而iRNA必须从完全的分子状态才能有活性。一般认为iRNA贮存于70％乙醇中结构较稳定,但这给临床应用带来了不便。为了观察iRNA水溶液低温保存对其活性的影响,我们采用白细胞粘附抑制试验的方法,(Leukocyte Adherence Inhihition Assay, LAI)对抗乙型肝炎iRNA水溶液制剂低温保存期间的活性进行动态观察。现将结果报告如下。     

异种iRNA体外诱导AFP抗体生成细胞的研究

经抗AFP iRNA预处理的小鼠脾细胞,在体外培养的第一天即出现AFP特异性抗体生成细胞,iRNA在125～250μg/ml间活性最高,此活性能被RNase破坏而不受DNase和pronase影响。免疫荧光试验表明,抗AFP iRNA能诱导小鼠脾细胞表达膜AFP抗体或受体。     

吸烟致小鼠慢性支气管炎模型的免疫功能变化

目的观察吸烟在免疫系统受损的发生、发展过程中的作用。方法复制被动吸烟小鼠慢性支气管炎模型,全程20d。分别观察非特异性免疫功能和特异性体液免疫、细胞免疫功能变化。结果成功复制慢性支气管炎动物小鼠模型。碳粒廓清实验提示慢性支气管炎模型小鼠非特异性免疫功能有所下降;血清溶血素试验模型小鼠的体液免疫功能有所下降;二硝基氯苯诱导小鼠迟发型变态反应的细胞免疫功能亦有下降,但都无显著性差异(P>0.05)。结论吸烟可造成小鼠慢性支气管炎模型。但不适合用于复制免疫功能低下的模型。     

肿瘤免疫监视机制研究新进展

机体抗肿瘤的免疫监视 (ｉｍｍｕｎｏｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ)机制十分复杂 ,涉及多种免疫成分 ,主要包括细胞免疫和体液免疫机制 ,这两方面机制不是孤立存在和单独发挥作用的 ,一般认为细胞免疫是免疫监视的主力 ,体液免疫通常仅在某些情况下起协同作用。对于大多数免疫原性强的肿瘤 ,特异性免疫应答是主要的 ,而对于免疫原性弱的肿瘤 ,非特异性免疫应答可能具有更重要的意义。最近该方面研究取得显著进展 ,主要包括ＮＫ细胞、γδＴ细胞等免疫效应细胞以及ＴＲＡＩＬ、ＩＦＮγ等效应分子的研究。1　ＮＫ细胞自然杀伤细胞 (ｎａｔｕｒａ…     

多表位HBV重组DNA疫苗的构建与免疫效果评价

目的探讨多表位乙型肝炎DNA疫苗诱导特异性细胞免疫应答及其治疗慢性乙型肝炎的潜能。方法筛选一组HBV的表位,并进行优化组合,辅以一定的旁侧序列,并合成目的基因片段HS。将它插入可人用的真核表达载体pVAX1中,构建出重组质粒PVAX-HS。通过重组质粒免疫小鼠,观察免疫动物体内CTL。结果酶切结果显示成功构建了PVAX-HSDNA疫苗,ELISPOT测定证实其可以在小鼠体内诱导产生特异性T细胞,51Cr释放实验证实,所诱导的T细胞中具有很强的CTL活性。结论PVAX-HSDNA疫苗免疫可诱导特异性细胞免疫应答,具有慢性病毒性乙型肝炎治疗性疫苗的潜能。     

特异性免疫核糖核酸对内毒素诱导的实验性葡萄膜炎的抑制作用

目的：探讨特异性免疫核糖核酸（iRNA）对内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎（EIU）是否有抑制作用。方法：用大肠杆菌（E．Coli)免疫家兔后,提取特异性iRNA,将其用于大肠杆菌内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎模型,通过生化检测、细胞计数评价其对实验性葡萄膜炎的影响。结果：在内毒素注射后30min及3h,分别经腹腔注射iRNA,可以使EIU的发生推迟3h,炎症的严惩程度明显下降,尤其表现为炎症高峰期,前房内白细胞 出量下降27．62％,蛋白渗出量减少58．34％。结论：特异性iRNA对内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎有明显的抑制作用。     

第三讲 免疫应答

免疫系统的T、B细胞识别抗原.自身被活化、增殖、分化以及产生免疫效应的过程,称免疫应答。免疫应答包括:B细胞介导的免疫应答——体液免疫;T细胞介导的免疫应答——细胞免疫;T、B细胞对抗原的特异性不反应——免疫耐受。免疫应答的基本过程可分为三个阶段:识别抗原阶段,这一阶段中,巨噬细胞参与处理抗原、呈递抗原信息,在免疫细胞间的协作下,T、B细胞与抗原发生特异性结合。     

特异性iRNA治疗婴幼儿病毒性肺炎患儿IL-2活性的研究及临床疗效观察

应用特异性抗病毒免疫核糖核酸治疗病毒性肺炎,检测了治疗前、后患儿外周血白细胞介素-2活性。结果麦明:特异性iRNA可以使患儿外周血IL-2活性升高,与对照组相比有显著差异。同时对iRNA的临床疗效进行初步观察,观察组患儿主要临床症状和体征消失的时间均明显短于对照组,说明特异性抗病毒iRNA临床有效。     

从分子生物学角度讨论中西医免疫治疗原理

核酸与免疫机能免疫系统可分为特异性免疫和非特异性免疫系统,特异性免疫包括细胞免疫和体液免疫。淋巴细胞分为B细胞和T细胞,B细胞是不依赖于胸腺细胞,T细胞是依赖于胸腺细胞。人们所熟悉的抗体是体液免疫系统,在抗体形成过程中,核酸起重要作用。例如:B淋巴细胞接受病原物刺激后,首先引起淋巴细胞脱氧核糖核酸(DNA)复制,然后把信息通过信使核糖核酸mRNA传给抗体生成细胞、浆细胞,在生成抗体的浆细胞中有许多RNA和核糖体,通     

生殖器疱疹的免疫学研究进展

HSV感染人体后可引起机体非特异性免疫和特异性免疫,本文对非特异性免疫中朗格汉斯细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、多形核白细胞、角质形成细胞、补体及特异性免疫中体液免疫、细胞免疫、细胞因子在抗HSV中所起的免疫学作用作一综述。     

免疫核糖核酸体外介导白细胞粘附抑制反应中转录和翻译的意义

以[~3H]Leu-LAI为指标,观察放线菌素D和嘌呤霉素对小鼠S_(180)腹水瘤细胞特异性iRNA体外转移细胞免疫活性的影响。结果表明,正常小鼠脾淋巴细胞经iRNA致敏后,用放线菌素D阻断其转录,或用嘌呤霉素阻断其翻译,并不能使该淋巴细胞失去对相应抗原产生LAI反应的能力;若先将淋巴细胞分别与放线菌素D或嘌呤霉素温育,使转录或翻译被阻断后再用iRNA作用时,见对相应抗原无LAI反应。这些结果说明iRNA体外介导LAI反应的过程,必须有受体细胞的转录或翻译功能参与;同时也提示临床使用iRNA治疗恶性肿瘤时,先行治疗方法若能抑制淋巴细胞的转录或翻译,则有可能降低iRNA的疗效,     

SAG1和ROP1混合基因真核表达质粒接种小鼠诱导产生拮抗致死性弓形虫感染的保护性免疫

目的检测混合SAG1和ROP1编码基因真核表达质粒疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法将SAG1和ROP1编码基因片段克隆入pEGFP-N3表达载体,构建重组质粒;RT-PCR体外验证重组质粒在NIH3T3细胞中的表达;通过检测抗体、抗体分型及细胞因子来评价体液免疫和细胞免疫;流式细胞仪测定脾脏淋巴细胞亚群;腹腔内注射毒性株弓性虫速殖子攻击免疫小鼠.结果 RT-PCR结果显示重组质粒能在哺乳动物细胞内表达;SAG1和ROP1混合重组质粒疫苗诱导小鼠产生很强体液免疫和细胞免疫,对于毒性株弓形虫感染攻击具有免疫保护作用.结论不同候选抗原编码基因混合重组质粒能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,提示含有多种成份的混合DNA疫苗的研制可作为核酸免疫研究的策略之一.     

SAGl和R0P1混合基因真核表达质粒接种小鼠诱导产生拮抗致死性弓形虫感染的保护性免疫

目的 检测混合SAGl和ROP1编码基因真核表达质粒疫苗诱导小鼠的免疫应答，评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果。方法 将SAGl和ROP1编码基因片段克隆入pEGEP—N3表达载体，构建重组质粒；RT—PCR体外验证重组质粒在N1H3T3细胞中的表达；通过检测抗体、抗体分型及细胞因子来评价体液免疫和细胞免疫；流式细胞仪测定脾脏淋巴细胞亚群；腹腔内注射毒性株弓性虫速殖子攻击免疫小鼠。结果 RT-PCR结果显示重组质粒能在哺乳动物细胞内表达；SAGl和ROP1混合重组质粒疫苗诱导小鼠产生很强体液免疫和细胞免疫，对于毒性株弓形虫感染攻击具有免疫保护作用。结论 不同候选抗原编码基因混合重组质粒能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫，提示含有多种成份的混合DNA疫苗的研制可作为核酸免疫研究的策略之一。     

中国汉坦病毒H8205株G1-G2-人源IL-2融合基因DNA免疫的实验研究

目的评价融合基因 pcDNA3.1/HisB- IL- 2- G1- G2的 DNA免疫效果. 方法肌注免疫小鼠,分次采血,用酶联免疫法( ELISA)直接免疫酶斑减少中和试验检测小鼠体液免疫;淋巴细胞增殖试验( MTT法)检测其细胞免疫应答.免疫后第六周感染病毒.间接免疫荧光试验( IFIA)观察免疫小鼠抗病毒感染能力. 结果 pcDNA3.1/HisB- IL- 2- G1- G2可诱导小鼠产生特异性抗汉坦病毒抗体和中和抗体,其效价均高于其他对照组,差异显著( P< 0.05). MTT实验表明, pcDNA3.1/HisB- IL- 2- G1- G2诱导小鼠脾细胞对病毒抗原的增殖指数明显高于其他对照组. IFIA结果显示免疫小鼠对病毒攻击有保护性. 结论 pcDNA3.1/HisB- IL- 2- G1- G2可诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答,为新一代汉坦病毒( HTV) DNA疫苗开发提供了实验依据.