石斛与有瓜石斛的鉴别与临床应用

本文通过对药典正品石斛与广东地区习用品有瓜石斛在来源、原植物、性状、显微鉴别、功效与临床应用等方面进行比较分析,为中药饮片石斛的使用与鉴别提供依据,以达到促进规范用药的目的.     

石斛与有瓜石斛的鉴别与临床应用

本文通过对药典正品石斛与广东地区习用品有瓜石斛在来源、原植物、性状、显微鉴别、功效与临床应用等方面进行比较分析,为中药饮片石斛的使用与鉴别提供依据,以达到促进规范用药的目的 。     

齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别

目的设计出齿瓣石斛的位点特异性鉴别引物,仅通过PCR就能完成对齿瓣石斛真伪进行准确鉴别。方法根据齿瓣石斛及其他枫斗类、黄草类石斛的rDNA ITS序列数据库,设计了齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别引物JB-Chiban-01S和JB-Chiban-01X。然后,对38种石斛属植物模板DNA进行了PCR扩增,阳性者即为齿瓣石斛正品。结果当退火温度设定为58℃时,只有齿瓣石斛的模板DNA能被扩增出来,而其他的37种石斛属植物均为阴性。该鉴别反应重复性好,已在鉴别齿瓣石斛时发挥重要作用。结论运用位点特异性鉴别引物能成功地对齿瓣石斛进行PCR鉴别,与DNA测序鉴别方法相比,位点特异性PCR具有高效、准确、简便、省时等优点。     

曲茎石斛及其近似种鉴别的形态和DNA分子证据

目的　探讨曲茎石斛 (南阳居群 )与同属近似种 :细茎石斛 (南阳居群 )、霍山石斛 (霍山居群 )、铁皮石斛(天台居群 )药材鉴别的形态及DNA分子证据。方法　对曲茎石斛 (南阳居群 )及其近似种的药材进行了外部形态和rDNAITS序列比较。结果　曲茎石斛及其近似种药材的外部形态虽无明显区别 ,但在rDNAITS序列上却存在着显著而稳定的差异。曲茎石斛 (南阳居群 )与铁皮石斛 (天台居群 )的rDNAITS序列的差异最小 ,绝对遗传距离为 7;但与细茎石斛 (南阳居群 )及霍山石斛 (霍山居群 )rDNAITS区的差异较大 ,绝对遗传距离分别为 4 0和 4 2。在rDNAITS区域中 ,作者共挑选了 7个碱基位点用作鉴别曲茎石斛 (南阳居群 )及其近似种的DNA证据。结论　根据药材的形态特征及rDNAITS区碱基序列差异 ,可准确鉴别曲茎石斛及其近似种药材。     

曲茎石斛及其近似种鉴别的形态和DNA分子证据

目的　探讨曲茎石斛(南阳居群)与同属近似种:细茎石斛(南阳居群)、霍山石斛(霍山居群)、铁皮石斛(天台居群)药材鉴别的形态及DNA分子证据。方法　对曲茎石斛(南阳居群)及其近似种的药材进行了外部形态和rDNA ITS序列比较。结果　曲茎石斛及其近似种药材的外部形态虽无明显区别,但在rDNA ITS序列上却存在着显著而稳定的差异。曲茎石斛(南阳居群)与铁皮石斛(天台居群)的rDNA ITS序列的差异最小,绝对遗传距离为7;但与细茎石斛(南阳居群)及霍山石斛(霍山居群)rDNA ITS区的差异较大,绝对遗传距离分别为40和42。在rDNA ITS区域中,作者共挑选了7个碱基位点用作鉴别曲茎石斛(南阳居群)及其近似种的DNA证据。结论　根据药材的形态特征及rDNA ITS区碱基序列差异,可准确鉴别曲茎石斛及其近似种药材。     

中药黄草石斛rDNA ITS序列分析

目的　研究黄草石斛ITS片段遗传多样性,分析该片段在黄草药材DNA分子鉴别和石斛属植物系统学研究中的意义。方法　用一对引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后用双脱氧终止法(Sangerdideoxy)测序。结果　获得核糖体DNA中ITS和5 8SrDNA完整序列,14个石斛类群的ITS 1与ITS 2序列的长度分别为228-233bp和242-247 bp。石斛种间ITS 1序列的差异百分率为11.79% - 31.58% ,ITS 2序列的差异百分率为10.29% - 25.30% ,金钗石斛种内ITS 1序列的差异百分率为0.87% ,ITS 2序列无差异。石斛各类群与外类群的差异百分率ITS 1序列为23.56% - 36.89% ,ITS 2序列为26.5.2 % - 33.31%。用NJ法根据ITS 1与ITS 2序列数据重建系统发生树。结论　两段序列在石斛种内保守,在种间有较大的差异,与外类群的差异最大,可作为中药黄草石斛分子鉴定的标记,而石斛属的系统发生关系尚须进一步研究     

石斛属27种药用植物的性状鉴定特征比较

目的 比较中国西南地区产27种石斛属药用植物药材(茎)的性状特征,为石斛药材质量标准的制定提供依据.方法 考察药材来源,并比较性状鉴定.结果 描述了27种石斛属药用植物药材的性状鉴别特征.结论 可为石斛属药用植物药材的准确鉴定提供参考.     

滇金石斛的生药学鉴别

目的 对滇金石斛进行生药学鉴别.方法 采用原植物鉴别、性状鉴别和显微鉴别的方法.结果与结论 滇金石斛的原植物形态、药材性状和不同器官显微组织构造的鉴别特征明显,可为滇金石斛质量标准的制定和开发奠定基础.     

黄草类石斛的薄层色谱鉴别研究

目的：建立黄草类石斛的薄层色谱（TLC）定性鉴别方法。方法：采用薄层色谱法,考察不同基源石斛及商品药材中专属性成分联苄类化合物毛兰素（erianin）、石斛酚（gigantol）、杓唇石斛素（moscatilin）和3,4＇-,5-三羟基．3’-甲氧基联苄（tristin）的薄层色谱行为,对石斛药材进行定性鉴别。结果：通过21种不同基源的石斛及11批商品石斛的薄层色谱鉴别,证明此方法专属性强,操作简单,重复性好,为石斛的鉴别提供了一种准确、有效的新方法。结论：本方法可用于黄草类石斛的鉴别,为中药石斛的质量标准研究提供科学依据。     

铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法

目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试验中鉴别引物可成功扩增铁皮石斛及其近缘种石斛,PCR产物为331 bp,铁皮石斛的PCR产物可被Tru9 Ⅰ限制性内切酶切开,而近缘种石斛不能被切开,可通过琼脂糖凝胶电泳成功鉴别。结论:本试验建立的PCR-RFLP鉴别方法可以鉴别铁皮石斛及其近缘种石斛。     

球花石斛的位点特异性PCR鉴别研究

为建立球花石斛的DNA分子标记鉴别方法，本文根据测定及GenBank上登录的109种共计164个石斛样本的rDNA ITS序列，设计了特异性鉴别引物QH-JB1 和QH-JB2，并对球花石斛进行了位点特异性PCR鉴别研究。结果表明，当复性条件为63.5 ℃，1 min时，只有球花石斛的模板DNA能被扩增出约300 bp的阳性扩增带，而其他种石斛均为阴性。证明用本法鉴别球花石斛简便、省时，也适用于干燥球花石斛药材的鉴别，具有广泛的应用前景。     

紫外光谱法鉴别金钗石斛和黑毛石斛

目的 研究金钗石斛与易混品黑毛石斛的鉴别.方法 将金钗石斛、黑毛石斛原植物加工成粉末,分别用水、乙醇、氯仿、石油醚4种不同极性的溶剂提取,将所得提取液进行紫外光谱扫描,并对谱线求导获得一阶导数光谱.结果 金钗石斛与黑毛石斛的零阶、一阶导数图谱均有差异.结论 紫外光谱法可用于石斛类药材的鉴别.     

不同种黄草石斛的HPLC指纹图谱研究

目的:采用HPLC-DAD-ELSD联用法对五种黄草石斛的指纹图谱进行对比研究。方法:采用DikmaC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.5%冰乙酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1mL.min-1;DAD串联蒸发光散射检测器检测。结果:建立了五种黄草石斛的HPLC指纹图谱,并标定了8个指纹峰。相似度结果表明,各种石斛相似度较低,差别较大。结论:建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重现性好,可直接了解石斛品种与化学成分变化的关系。     

五种石斛药材的导数光谱及薄层鉴别

报道了对金钗石斛等五种石斛类药材的二阶导数光谱及薄层鉴别。导数光谱显示:金钗石斛与环草石斛的二阶导数光谱极为相似,提示两者的化学组成可能存在一致性。其余品种的导数光谱则有较明显差别,可资鉴别。薄层层析显示:五种石斛药材的薄层色谱行为区别明显,可作鉴别依据。     

铁皮石斛与几种常用混淆品的红外光谱鉴别

目的 寻找能够鉴别铁皮石斛与几种常用混淆品的新方法．为进一步探索石斛类药材、饮片快速、有效的鉴别方法。方法 采用药材原粉末加KBr直接压片法测定铁皮石斛与几种常用混淆品的红外光谱．所获得的指纹图谱进行特征峰指认和对比分析。结果 铁皮石斛与几种常用混淆品的红外吸收频率、吸收峰的峰形和相对强度都存在较显著的差异。结论 首次采用红外光谱法鉴别铁皮石斛与几种常用混淆品,结果快速、准确,为控制铁皮石斛商品提供了可靠的依据。     

枫斗类石斛rDNA ITS区的全序列数据库及其序列分析鉴别

目的建立枫斗类石斛的rDNA ITS区碱基全序列数据库,利用该数据库对枫斗类石斛待检种进行准确鉴别。方法对枫斗类石斛的rDNA ITS区进行了PCR扩增、测序,运用CLUSTRAL,MEGA等软件以及枫斗类石斛rDNA ITS区全序列数据库对待检种rDNA ITS区进行序列分析鉴别。结果建立了21种枫斗类石斛的rDNA ITS区全序列数据库, 枫斗类石斛在该区的种间差异显著而稳定,转换和颠换总数为11～122,变异位点数为341,信息位点数为195。与外类群植物云南石仙桃间的差异较大,转换和颠换总数为131～161。枫斗类石斛居群间的差异较小,转换和颠换总数为0～6。结论利用枫斗类石斛的全序列数据库及遗传分析软件,通过对待检种rDNA ITS区进行序列测定,可以成功鉴别属于数据库中枫斗类石斛的待检种。     

药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究

目的建立简易的采用rDNA ITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法 用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用Cla I和Apa LI酶切,流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用Sph I酶切。结果根据预测的PCR-RFLP图谱,可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的25件商品束花石斛、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论rDNA ITS的PCR-RFLP可用于鉴定石斛药材的原植物,具有简便、费用低的优点。     

石斛类叶鞘的显微鉴定研究

商品石斛的植物来源复杂,规格繁多,外形鉴定较困难。为了准确鉴定石斛的品种,对常作为药用的16种石斛属(Dendrobium Sw)植物的叶鞘进行了显微观察,发现其表皮细胞的形状,大小,所含草酸钙结晶的形状、大小、分布等种间区别较明显,可作为鉴别石斛种类的科学依据之一。本文对金钗石斛D.nobile Lindl。等16种石斛的叶鞘表面特征加以描述,并附主要特征图和检索表。     

石斛类叶鞘的显微鉴定研究

商品石斛的植物来源复杂,规格繁多,外形鉴定较困难。为了准确鉴定石斛的品种,对常作为药用的16种石斛属(Dendrobium Sw)植物的叶鞘进行了显微观察,发现其表皮细胞的形状,大小,所含草酸钙结晶的形状、大小、分布等种间区别较明显,可作为鉴别石斛种类的科学依据之一。本文对金钗石斛D.nobile Lindl。等16种石斛的叶鞘表面特征加以描述,并附主要特征图和检索表。     

景洪石斛的生药学鉴别

目的 对景洪石斛进行生药学鉴别.方法 对景洪石斛药材的基源、性状和显微特征进行研究.结果 景洪石斛的原植物形态、药材性状和不同器官的显微组织鉴别特征明显.结论 可为景洪石斛质量标准的制定和开发利用奠定基础.