麝香乌龙丸对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的实验研究

目的研究麝香乌龙丸对卵巢切除大鼠股骨干骨折愈合的作用。方法将30只雌性、12周龄Sprague-Dawley大鼠分成3组假手术组(Sham F V)、卵巢切除 骨折 生理盐水对照组(OVX F V)、卵巢切除 骨折 麝香乌龙丸给药组(OVX F M),每组10只大鼠。所有需制造骨折的大鼠均采用右股骨中段横行骨折,髓内针固定;麝香乌龙丸给药组采用大鼠灌胃给药(1.2g.kg-1.d-1),于术后4周杀死,取大鼠右侧股骨标本;分别进行CR摄片、组织形态学染色,并应用双能X线骨密度仪(DEXA)测量右股骨整体骨密度(tBMD)、远段骨密度(dBMD)和中段骨密度(mBMD)以及BMP-2免疫组化观察,并应用病理图像分析仪对BMP-2免疫组化进行光密度测定。结果麝香乌龙丸给药组与OVX F V比较,前者骨痂mBMD和BMP-2的表达显著增高,骨小梁增宽、排列较整齐,板层骨形成,软骨组织可见。结论麝香乌龙丸对OVX大鼠股骨骨折有明显促进骨折愈合的作用,并加快编织骨向板层骨的演变过程,这与BMP-2的表达有明显相关性。     

仙灵骨葆胶囊对骨质疏松性骨折大鼠骨生长因子及骨折愈合的影响

目的 探讨仙灵骨葆胶囊对骨质疏松性骨折大鼠骨生长因子BMP-2、IGF-1表达及骨折愈合的影响。方法 48只雌性SD大鼠随机分为：假手术组、模型组、雌二醇组、仙灵骨葆组，12只/组，采用“双侧卵巢切除术+右侧股骨干骨折髓内固定术”构建骨质疏松性骨折大鼠模型，评估骨折愈合情况，检测股骨骨痂BMD、股骨骨生物力学指标和血清骨代谢相关指标，检测骨痂BMP-2、IGF-1蛋白表达。结果 模型组较假手术组骨折愈合评分、股骨痂BMD、股骨骨生物力学指标（最大载荷、最大应力、最大位移）、骨痂BMP-2和IGF-I阳性表达均显著降低（P<0.05），雌二醇组、仙灵骨葆组较模型组骨折愈合评分、股骨痂BMD、股骨骨生物力学指标、骨痂BMP-2和IGF-I阳性表达均显著升高（P<0.05），均以仙灵骨葆组最高。模型组较假手术组血清骨代谢指标（BGP、PICP、TRACP-5b）均显著升高（P<0.05），雌二醇组、仙灵骨葆组较模型组血清骨代谢指标均显著降低（P<0.05），以仙灵骨葆组最低。结论 仙灵骨葆胶囊可能通过介导提高骨质疏松性骨折大鼠骨生长因子BMP-2和IGF-1表达，改善骨代谢，加速骨痂形成，增加骨密度，提高骨生物力学，促进骨折愈合。     

仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠对骨质疏松骨折大鼠骨痂血管形成的影响

目的探讨仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠对骨质疏松性骨折大鼠骨痂血管形成及VEGF、BMP-2表达的影响。方法50只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SHAM组)、模型组(MODEL组)、仙灵骨葆组(XLGB组)、阿仑膦酸钠组(ALLSN组)、联合药物组(LHYW组),10只/组,构建骨质疏松性骨折大鼠模型,放射性X线观察评估骨折愈合,双能X线检测骨密度,Mirco-CT检测骨结构形态学参数,番红O固绿染色观察骨痂组织形态学,免疫组化检测骨痂VEGF和BMP-2蛋白表达。结果所有实验大鼠均进入结果分析。与SHAM组比较,MODEL组大鼠骨折愈合评分、骨密度、骨组织形态学参数、骨痂VEGF和BMP-2表达均显著降低(P0.05),与MODEL组比较,XLGB组、ALLSN组和LHYY组骨折愈合评分、骨密度、骨组织形态学参数、骨痂VEGF和BMP-2表达均显著升高(P0.05),尤以LHYY组最高。SHAM组骨小梁结构正常,几乎均为骨性骨痂。MODEL组骨小梁明显稀疏、断裂,未见明显骨性骨痂。XLGB组和ALLSN组骨小梁增多,排列稍紊乱,大部分为骨性骨痂。LHYW组骨小梁明显增多,排列密集整齐,大量骨性骨痂。结论仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠可能通过介导提高骨质疏松性骨折大鼠骨生长因子VEGF和BMP-2表达,促进骨痂血管形成,加速骨痂形成,增加骨密度,改善骨结构形态,促进骨折愈合。     

骨髓间充质干细胞移植对去巢骨质疏松大鼠骨代谢及RANKL/OPG/TRAF6信号通路的影响

目的探究骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSC)移植对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响及其作用机制。方法将7周龄40只清洁级SD雌性大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组、模型组、移植组、阳性对照组, 除假手术组外其余组均进行双侧卵巢切除术构建骨质疏松大鼠模型。模型构建2个月后, 移植组大鼠尾静脉注射80 μl/kg含有BMSC的PBS溶液, 假手术组和模型组尾静脉注射等量的PBS溶液, 阳性对照组大鼠每天灌胃给与仙灵骨葆0.5 g/100 g。治疗14 d后收集各组大鼠血清和股骨。苏木精-伊红染色(HE)观察股骨组织病理学变化;Micro-CT法测量骨密度(bone mineral density, BMD)与骨参数;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测骨钙素、骨保护素、碱性磷酸酶、胰岛素样生长因子1表达水平;分光光度计法测定血清钙、磷、镁水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测各组大鼠股骨中核因子κ b配体受体激活剂(receptor activator of nuclear factor κb l...     

仙灵骨葆对兔膝骨性关节炎治疗作用的研究

[目的]研究仙灵骨葆(xianlinggubao, XLGB)对兔骨性关节炎关节软骨及软骨下骨的保护作用.[方法]30只3个月龄雄性日本大耳白兔,随机分为对照组(Sham)、盐水组(ACLT+NS)和仙灵骨葆组(ACLT+XLGB),每组各10只.盐水组和仙灵骨葆组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction, ACLT)造成膝骨性关节炎模型.术后仙灵骨葆组125 mg/(kg*d)灌胃;盐水组则给予等剂量生理盐水.6周后处死动物,取股骨测量骨密度,之后脱钙制片,行HE染色、Mankin评分及BMP-2、MMP-13免疫组化染色;取右膝胫骨近端包埋,制成硬组织切片,用于骨组织形态计量学测量.[结果](1)Mankin评分:仙灵骨葆组显著低于盐水组.(2)股骨远端骨密度及胫骨近端软骨下骨骨量:仙灵骨葆组均显著高于盐水组.(3)免疫组化:仙灵骨葆组MMP-13的表达显著低于盐水组,BMP-2的表达显著高于盐水组.[结论]仙灵骨葆125 mg/(kg*d)灌胃能够部分阻止骨关节炎兔关节软骨的退变,其作用机制可能与下调MMP-13的表达,上调BMP-2的表达,同时增加软骨下骨骨量,改善其微观结构有关.     

雷尼酸锶促进大鼠股骨骨质疏松性骨折愈合的研究

目的 探讨雷尼酸锶(strontium ranelate,SR)对大鼠股骨骨质疏松性骨折愈合的影响。方法 6个月龄Wistar雌性处鼠66只,切除双侧卵巢制作骨质疏松动物模型,模型建立成功后,在大鼠股骨中段横行截骨,制作大鼠股骨骨质疏松性骨折动物模型,术后死亡6只,然后将剩余60只大鼠随机分为实验组(SR干预治疗组）和空白对照组,每组30只。骨折术后第一天起,实验组给予SR 400 mg/(kg d)灌胃,对照组给予同等体积的生理盐水灌胃。通过影像学、组织学和免疫组织化学（骨形态发生蛋白-2,BMP-2)观察,骨组织形态计量学、骨密度（bone mineral density,BMD)和生物力学测量,观察骨折愈合情况。结果 实验组腰4、5椎体BMD、BMP-2阳性表达细胞数、骨小梁面积比、骨小梁平均宽度、最大负荷和最大桡度高于同时期对照组,差异有统计学意义(P <0. 01);骨小梁平均间隔小于同期对照组,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论 SR具有抑制骨吸收和促进骨形成的双重作用,能增加BMD,加快骨痴形成,促进骨质疏松性骨折愈合,改善骨的显微结构,提高骨折愈合后骨的生物力学特性。     

甲状旁腺激素联合阿仑膦酸钠对大鼠骨质疏松性骨折骨痂血管形成的影响

目的探讨甲状旁腺激素联合阿仑膦酸钠对大鼠骨质疏松性骨折骨痂血管形成及骨折愈合的影响。方法 75只雌性SD大鼠随机分为5组:假手术组、去势组、甲状旁腺素组、阿仑膦酸钠组、联合用药组,每组15只,首先行双侧卵巢切除术,术后4周行右侧股骨干骨折髓内固定术,以构建大鼠骨质疏松性骨折动物模型。观察并评估骨折愈合,检测骨痂生物力学和骨密度(bone mineral density,BMD),检测血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和骨形成发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)浓度,观察骨痂形态结构,检测骨痂VEGF表达。结果去势组较假手术组骨折愈合评分、骨痂生物力学强度、骨痂BMD、血清BMP-2和VEGF浓度、骨痂VEGF蛋白表达、骨痂微血管数均显著降低(P0.05),甲状旁腺素组、阿仑膦酸钠组、联合用药组较去势组上述指标均升高,其中以联合用药组升高最显著(P0.05)。结论甲状旁腺激素联合阿仑膦酸钠通过介导VEGF,上调BMP-2表达,促进骨质疏松性骨折大鼠骨痂血管形成,增加骨密度,改善生物力学强度及骨组织形态学,加快骨折愈合。     

重组人BMP-2/壳聚糖/硫酸葡聚糖复合微球诱导异位成骨的micro-CT评价

目的采用micro-CT评价重组人BMP-2/壳聚糖/硫酸葡聚糖(recombinant human BMP-2/chitosan/dextran sulfate,rh BMP-2/CS/DS)复合微球诱导异位成骨情况。方法采用离子交联法制作rh BMP-2/CS/DS复合微球,扫描电镜观察其形态,ELISA法检测微球体外缓释效应。取6~8周龄雄性SD大鼠48只,随机分为4组(n=12);制备股四头肌肌袋模型后,分别将相同体积明胶海绵(A组)、CS/DS微球(B组)、rh BMP-2(C组)及rh BMP-2/CS/DS复合微球(D组)植入肌袋肌间隙中。术后观察大鼠一般情况;于4、8、12、16周处死动物,取异位骨化组织块行micro-CT扫描及三维重建,检测组织骨密度(tissue mineral density,TMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BVF)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)、皮质骨骨密度(bone mineral density,BMD)及组织矿含量(tissue mineral content,TMC)。结果扫描电镜观察示,制备的rh BMP-2/CS/DS复合微球球形较规整,分散较均匀,无团聚,微球表面较光滑;微球体外释放rh BMP-2于2 h后出现1个突释放期,2 d时达峰值,释放周期约20 d。各组大鼠均存活至实验完成,术后各时间点,A、B组CT扫描均未见放射性显影,三维重建未发现成骨;而C、D组放射性显影强度及三维重建骨组织逐渐增加,且D组强于C组。各时间点A、B组TMD、BVF、Tb.Th、Tb.N、BMD及TMC均为0。随时间延长,C、D组除Tb.N外,其余骨组织参数均呈总体增加趋势,各时间点与A、B组比较差异均有统计学意义(P0.05);C、D组间4周时比较差异无统计学意义(P0.05),8~16周时D组显著高于C组,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 rh BMP-2/CS/DS复合微球异位诱导成骨能力显著强于单独rh BMP-2。     

降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的影响

目的观察降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用，为临床上治疗骨质疏松性骨折提供实验依据。方法50只雌性、14周龄SD大鼠共分成5组，每组10只。分成假手术组（Sham，G1），双侧卵巢切除术组（OVX，G2），假手术＋骨折组（Sham＋F，G3），卵巢切除术＋骨折组（OVX＋F，G4），卵巢切除＋骨折＋降钙素药物组（OVX＋F＋CT，G5），骨折组大鼠均采用右股骨中段横行骨折，髓内针固定；降钙素采用皮下给药，隔日1次（16IU·kg^-1）。所有大鼠于术后4周杀死，取右侧股骨标本。然后，分别进行CR摄片、组织形态学观察，并应用双能X线骨密度仪（DEXA）测量右股骨整体、远段和中段骨密度以及BMP-2免疫组化观察，并应用病理图像分析仪对BMP-2免疫组化进行光密度测量。结果（1）OVX组与Sham组比较，BMD显著下降。（2）OVX＋F＋CT组与OVX＋F组比较：骨痂mBMD显著增高；BMP-2的表达无显著性差异。结论降钙素对OVX大鼠股骨骨折具有明显促进骨折愈合的作用，加速编织骨向板层骨的演变过程。