RNA激活技术介导的E-cadherin基因上调表达抑制5637膀胱癌细胞侵袭与迁移

目的 探讨通过RNA激活(RNA activation,RNAa)技术上调E-cadherin基因的表达而影响人膀胱癌5637细胞的侵袭、迁移能力.方法 将与E-cadherin基因启动子DNA序列互补的双链RNA分子(dsEcad)转染人5637细胞中,采用RT-PCR法及Western blot检测E-cadherin的表达;用Transwell小室法及划痕法检测RNAa后细胞侵袭、迁移能力的改变;用细胞免疫荧光法及Western blot检测β-catenin蛋自在细胞内的重新分布结果.结果 dsEcad转染5637细胞72 h后E-cadherin表达显著上调,RNAa有效;5637细胞对细胞外基质的侵袭能力及迁移能力也明显下降.β-catenin在胞核及细胞质的水平明显下降并重新再分布至细胞膜上.结论 RNAa技术激活E-cadherin基因表达并抑制细胞侵袭、转移等恶性行为,可作为膀胱癌或其他恶性肿瘤基因治疗的一种有效手段.     

前列腺癌肿瘤组织中E-cadherin和N-cadherin的表达及意义

目的:探讨上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin和N-cadherin在中低危前列腺癌和高危前列腺癌中的表达差异,以及E-cadherin和N-cadherin的表达与患者年龄、血清PSA水平、肿瘤组织Gleason评分的关系。方法:回顾性分析42例前列腺癌患者临床资料,将前列腺癌分为高危组27例和中低危组15例。免疫组化法检测两组E-cadherin和N-cadherin的表达,并比较两组有无差异;同时分析E-cadherin和N-cadherin的表达阳性率与血清PSA值、肿瘤Gleason评分及患者年龄的关系。结果:E-cadherin在中低危组的表达水平高于高危组(6.1±0.51 vs 4.2±0.37,P0.01),并且在中低危组中表达阳性率显著高于高危组(73.3%vs 25.9%,P0.01),E-cadherin在PSA20μg/L的患者中表达阳性率高于PSA≥20μg/L的患者(66.7%vs 29.6%,P0.05),在Gleason评分5~7分的患者中,其表达阳性率明显高于Gleason评分8~10分的患者(60.9%vs 21.1%,P0.05)。N-cadherin在中低危组的表达水平低于高危组(3.7±0.32 vs 7.5±0.58,P0.01),并且在中低危组中的表达阳性率低于高危组中(13.3%vs 59.3%,P0.05),在Gleason评分5~7分的患者中,其表达阳性率明显低于Gleason评分8~10分的患者(26.1%vs 63.2%,P0.05),N-cadherin在PSA20μg/L和PSA≥20μg/L的患者中表达阳性率没有差异(P0.05)。E-cadherin和N-cadherin在年龄≥70岁和70岁的患者中表达阳性率均没有明显差异(P0.05)。结论:E-cadherin和N-cadherin在高危前列腺癌和中低危前列腺癌表达阳性率及表达水平存在差异,即两者与前列腺癌的侵袭转移有关,并且E-cadherin和N-cadherin的表达可能与前列腺癌Glesaon评分、血清PSA水平有关。     

中下段直肠癌E-cadherin，MMP-2和VEGF表达与肿瘤侵袭转移的关系

为探讨中下段直肠癌肿瘤组织E-cadherin,MMP-2和VEGF的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。笔者采用免疫组化技术检测56例中下段直肠癌肿瘤组织中E-cadherin,MMP-2和VEGF的表达。结果示，44.6%（25/56）的中下段直肠癌E-cadherin表达阴性;其中T3的阴性率为63.0%，明显高于T2和T1的26.1%和33.3%（P=0.028）。淋巴结转移阳性的直肠癌E-cadherin表达阴性率为62.1%，明显高于淋巴结转移阴性者的25.9%（P=0.007）。MMP-2表达阳性率为75.0%（42/56）;其中T3，T2阳性率分别为88.9%，69.6%，明显高于T1期的33.3%（P=0.013）。浸润型直肠癌MMP-2表达率为91.2%，明显高于膨胀型的40.0%（P=0.001）。淋巴结转移阳性者MMP-2表达率为86.2%，明显高于淋巴结转移阴性的63.0%（P=0.045）。VEGF表达率为57.1%（32/56）;其中T3 VEGF表达率为74.1%，明显高于T2和T1期的43.5%和33.3%（P=0.043）;淋巴结转移阳性者VEGF表达率为72.4%，明显高于淋巴结转移阴性的40.7%（P=0.017）。提示中下段直肠癌E-cadherin表达阴性和MMP-2，VEGF表达阳性与肿瘤侵袭和转移有密切关系。     

少枝胶质细胞肿瘤星形细胞上调基因-1表达及其临床意义

目的 探讨少枝胶质细胞肿瘤AEG-1的表达,及其与肿瘤恶性程度和预后的关系.方法 回顾性复习42例经病理证实的少枝胶质细胞肿瘤患者的病史资料,随访患者的预后,采用免疫组织化学法检测42例肿瘤标本和4例正常脑组织AEG-1表达.结果 AEG-1总阳性率为45.2%(19/42),OG(WHOⅡ)组和AOG(WHOⅢ)组的表达率分别为35.5%(11/31)和72.7%(8/11)(x2=4.55,P<0.05),表达水平与肿瘤的级别呈正相关(r=0.392,P<0.05),4例正常脑组织中均无AEG-1表达.42例患者中,失访率14.3%(6例),AEG-1(-),(+)和(艹)组中位生存期分别为7.6、2.3、1.6年(x2=32.74,P<0.01),表明AEG-1的表达水平与少枝胶质细胞肿瘤患者的生存时间呈负相关(r=-0.876,P<0.01).结论 AEG-1可能是少枝胶质细胞肿瘤恶性程度的分子标志物之一,可作为临床评估预后的潜在指标之一.     

甲状腺癌中E-cadherin的表达及临床意义

目的 研究E-cadherin在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化方法，对19例甲状腺乳头状腺癌，12例甲状腺滤泡伏腺癌和17例甲状腺髓样癌进行了E-cadherin表达的检测。结果 8例（42．1％）甲状腺乳头腺E-cadherin表达阳性，5例（41．7％）甲状腺滤泡状腺癌E-cadherin表达阳性，11例（64．7％）甲关状腺样癌E-cadherin表达阳性。E-cadherin表达在甲状腺癌各病理类型与甲状腺腺瘤之间比较，其阳性率差异有显著性；但在甲癌的三种病理类型之间其阳性率差异无显著性。E-cadherin在甲状腺癌中的表达与年龄有相关性，但与其它各临床病理参数无明显的相关性。结论 在甲状腺上皮细胞表面的E-cadherin具有一定的破坏或功能不正常，但尚不能成为甲状腺癌独立的预后指标。     

前列腺癌组织中E-cadherin表达及与PSA的关系

目的　探讨前列腺癌组织中上皮型钙粘附素 (E cadherin)表达及与PSA的关系。　方法　采用免疫组织化学染色法检测 5 6例前列腺癌组织标本E cadherin的表达 ,分析表达水平与总PSA(T PSA)、游离PSA(F PSA)及F/T值的关系。　结果　E cadherin正常表达 2 4例 ( 43 % ) ,异常表达3 2例 ( 5 7% ) ,E cadherin表达缺失与肿瘤恶性程度及分期呈正相关 (P <0 .0 1) ,与患者T PSA、F PSA无明显相关性 ,而与F/T值呈正相关 (P <0 .0 1)。　结论　E cadherin可作为判断前列腺癌恶性程度及预后的指标之一     

Twist与E-cadherin在结直肠癌中的表达及其意义

目的探讨Twist和E-cadherin蛋白在结直肠癌组织中的表达及其可能的机理、相互作用以及与结直肠癌预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测63例结直肠癌组织以及21例正常结肠黏膜组织中Twist和E-cadherin蛋白的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征和患者预后的关系。结果 Twist蛋白在结直肠癌组织中的表达阳性率为66.7%(42/63),而在正常结直肠黏膜组织中的表达阳性率为14.2%(3/21),前者高于后者(P0.01);E-c adherin蛋白在结直肠癌组织中的表达阳性率为20.6%(13/63),而在正常结直肠黏膜组织中的表达阳性率为81.0%(17/21),前者低于后者(P0.01)。两者的表达与肿瘤的分化程度及T、N和M分期均相关(P0.05)。相关性分析显示,Twist和E-cadherin蛋白的表达呈负相关关系(r=-0.215,P=0.039)。结论 Twist和E-cadherin蛋白的表达可能与结直肠癌的发生发展和侵袭转移相关,并可作为评价结直肠癌生物学行为和预后的重要指标。Twist和E-cadherin蛋白表达呈负相关关系提示,在上皮-间质转化过程中可能是通过抑制E-cadherin蛋白的表达来实现的。     

E-cadherin在胆管癌中的表达及其与浸润转移的关系

胆管癌的生长以浸润性生长为特征 ,其浸润和转移导致手术切除范围不能达到根治的目的 ,是术后复发的主要原因。我们运用免疫组化法对 5 6例胆管癌石蜡切片进行研究 ,探讨Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ (Ｅ ｃａｄ)与胆管癌浸润和转移的关系。材料和方法1.对象 :1990～ 1998年间经手术切除的胆管癌石蜡存档标本 5 6例 ,均经病理证实。年龄 40～ 75岁 ,男 34例 ,女 2 2例 ,组织分化程度参照Ｋｏｚｕｋａ[1] 分类方法 ,分为高、中、低 3级。收集组织类型、ＴＮＭ分期、浸润和淋巴结转移等指标 ,同时取 7例正常胆管组织作对照。根据胆管癌是否浸润突破肌…     

E-cadherin在前列腺癌细胞中的表达及与预后的关系

目的　探讨上皮细胞粘附因子Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 在前列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌预后的关系。　方法　采用免疫组织化学染色法检测４２ 例前列腺癌标本Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 的表达。　结果　４０ ．５ ％ 表达阳性，４２ ．８ ％ 表达不同程度下降，１６．７ ％ 表达阴性。肿瘤恶性程度越高，其表达异常所占比率越高。确诊时即已发现肿瘤转移和随访中相继出现转移的患者Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 表达下降比率均高于全组，分别为８３ ．３ ％ 和７７ ．７％ 。　结论　Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 在前列腺癌组织中表达异常的比率随着肿瘤分级的升高而增加，Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ 的表达状况对前列腺癌的预后有一定参考价值     

Snail在胰腺癌中的表达及与E-cadherin的相关性分析

胰腺癌是一种高度恶性的消化系统肿瘤，由于其高侵袭性和高转移性，大部分病人都无法获得根治性治疗。深入阐明胰腺癌侵袭和转移的分子机制，对于寻找胰腺癌诊治的新靶点，提高其疗效具有重要的临床意义。E-cadhein是一种介导细胞间黏附作用的关键分子，在大多数侵袭性的肿瘤中都存在其表达的缺失。Snail是新近发现的一种抑制型转录因子，它可以通过抑制细胞之间黏附分子的表达从而增强肿瘤细胞的侵袭性。     

CD44和E-cadherin表达与肾癌细胞增殖潜能的研究

目的 探讨ＣＤ４４和Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ分子表达与肾癌细胞增殖潜能的关系。方法 建立人肾癌ＧＲＣ－１和ＲＬＣ－３１０细胞的克隆性亚细胞株,检测其克隆形成率,应用免疫组织化学法检测ＣＤ４４和Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ分子表达,同时用流式细胞术分析ＣＤ４４分子表达。结果 ＲＬＣ－３１０细胞的三个亚株ＲＬＣ－３１０Ａ,ＲＬＣ－３１０Ｂ和ＲＬＣ－３１０Ｃ在软琼脂虎的集落形成率分别为４８％,５０％,３０％,ＣＤ４     

E-cadherin、β-catenin表达与结肠癌术后转移关系

目的 探讨结肠癌患者肿瘤组织中β-catenin、E-cadherin表达情况及其对远处转移的预测作用.方法 采用免疫组化方法检测其β-catenin、E-cadherin表达情况.结果 在35例转移组中23例(65.71％)患者出现β-catenin阳性表达,25例(71.42％)E-cadherin阳性表达,均高于非转移组.结肠癌β-catenin、E-cadherin的表达与原发灶分化程度、T分期和N分期均没有明显联系.肿瘤组织中β-catenin、E-cadherin表达明显高于癌旁组织.二者均为阳性表达,其转移率明显高于均为阴性表达转移率,生存分析显示不同表达状态其远处转移出现时间差异有统计学意义(P =0.0369).结论 肿瘤组织中β-catenin、E-cadherin表达同结肠癌术后转移发生相关,两者联合检测有助于评估肿瘤转移程度.     

E-cadherin重组慢病毒载体的构建及表达

[目的]构建E-cadherin过表达和RNAi慢病毒载体,转染A549肿瘤细胞,观察E-cadherin的表达。[方法]根据Gene Bank E-cadherin的序列,选择设计两条序列和一条无关RNAi序列作为对照,通过Mlu I和Nde I两个酶切位点,将设计好的siRNA片段插入包装质粒PHR-SIN-CSGW-H1a(PHR)构建E-Cadherin RNAi慢病毒载体PHR-EA、PHR-EB。PCR扩增E-cadherin基因与pc DNA3.1质粒使用Bam HI、Xho I双酶切,连接鉴定后,亚克隆至慢病毒载体PHR,构建-E-cadherin过表达慢病毒载体PHR-E-cadherin。慢病毒包装后,感染A549肿瘤细胞,观察表达。[结果]成功构建E-cadherin过表达和RNAi慢病毒载体,并分别经PCR和质粒酶切鉴定。RTPCR检测E-cadherin的干扰和过表达情况,两个E-cadherin的RNAi病毒感染细胞后,都能使目的基因表达下调,而E-cadherin过表达慢病毒转染后细胞的E-cadherin表达明显提高了。Western Blot检测证实E-cadherin的表达确实被慢病毒所上调和干扰。[结论]成功构建出E-cadherin基因过表达和RNAi慢病毒载体,并在A549肿瘤细胞中成功表达,为进一步转染神经干细胞观察其生物学影响及对脊髓损伤修复的效果奠定基础。     

5-氟尿嘧啶上调大肠癌Fas受体表达

抗癌化疗药物可通过介导细胞凋亡杀伤肿瘤细胞。Ｆａｓ系统在抗癌药物介导的细胞凋亡中发挥重要作用[1] 。 5 氟尿嘧啶治疗大肠癌的机理同Ｆａｓ系统介导细胞凋亡的关系尚不清楚。为探讨 5 氟尿嘧啶对大肠癌细胞Ｆａｓ受体表达水平的调控作用 ,我们用流式细胞仪检测 5 氟尿嘧啶处理后大肠癌细胞Ｆａｓ受体表达水平的变化。一、材料和方法1.细胞和药物 :ＲＰＭＩ 4788、ＨＣＴ 116、ＤＬＤ 1、ＬｏＶｏ和ＷｉＤｒ均是美国组织培养库 (ＡＴＣＣ)收录的人大肠癌细胞株 ;Ｆｌｏｗ 40 0 0是人纤维母细胞 (日本冈山大学第一外科田中纪章教授惠…     

EphA2和E-cadherin在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨EphA2与E-cadherin在胃癌组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测EphA2与E-cadherin蛋白在胃癌组织、癌旁组织和远癌胃组织中的表达情况，分析它们与胃癌临床病理特征之间的关系及两种蛋白间的相关性。结果:EphA2在胃癌组织中呈高表达(P＜0.01)，其高表达与胃癌的浸润深度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移有关(P＜0.05);E-cadherin在胃癌组织中呈低表达(P＜0.01)，其低表达与胃癌的浸润深度、肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期以及淋巴结转移有关(P＜0.05);胃癌组织中EphA2和E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.602，P＜0.001)。结论:EphA2的高表达和E-cadherin的低表达与胃癌的发展和转移密切相关，EphA2可望作为胃癌治疗的新靶点。     

E-cadherin在结直肠癌中的表达及临床病理意义

目的：探讨E-cadherin在结直肠癌中的表达及临床病理意义。方法：采用EliVisionTM plus免疫组织化学和原位杂交方法检测E-cadherin蛋白和mRNA在结直肠癌、结直肠腺瘤和结直肠癌旁正常黏膜组织中的表达。结果：E-cadherin蛋白和mRNA在结直肠癌中的阳性率显著低于结直肠腺瘤和结直肠癌旁正常黏膜组织;E-cadherin的异常表达与结直肠癌组织的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关,而与年龄、性别及肿瘤大小无关。结论：E-cadherin表达缺失在结直肠癌的发生、发展及转移过程中发挥重要作用;免疫组织化学和原位杂交2种方法在检测E-cadherin在结直肠癌中的表达上具有较高的一致性。     

Twist和E-cadherin在子宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨Twist和E-cadherin在子宫颈鳞癌中的表达情况及与子宫颈鳞癌发生发展的关系。方法取宫颈组织100例,应用免疫组织化学方法(SP法)检测人慢性宫颈炎组织(50例)和子宫颈鳞癌组织(50例)中Twist和E-cadherin表达情况。结果 Twist蛋白在子宫颈鳞癌组织中表达明显强于慢性宫颈炎组织;E-cadherin蛋白在子宫颈鳞癌组织中表达明显弱于慢性宫颈炎组织。Twist蛋白表达与E-cadherin在子宫颈鳞癌中之间存在负相关性。结论 Twist和E-cadhern蛋白可能与子宫颈鳞癌的发生发展相关。Twist可能参与子宫颈鳞癌的侵袭转移阶段。     

E-cadherin和Slug在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨胃癌患者肿瘤组织中E-cadherin及Slug的表达与肿瘤病理特征及预后的关系。方法：免疫组化检测82例胃癌患者瘤组织E-cadherin及Slug的表达,并分析它们与患者的病理特征及生存时间的关系。结果：E-cadherin保留表达率为47.6%,Slug阳性表达率为39.0%。E-cadherin的表达率差异与患者的N分期有关,Slug的阳性表达率差异与患者的性别、T分期及N分期有关（均P<0.05）;在E-cadherin表达保留组,Slug的表达与N分期、M分期、静脉侵袭、血行性转移和腹膜复发有关,而在E-cadherin表达降低组,Slug的表达与T分期有关（均P<0.05）;E-cadherin表达保留患者5年生存率高于E-cadherin表达降低患者（79.5% vs. 60.5%）,Slug阳性患者的5年生存率低于Slug阴性患者（59.4% vs. 74.0%）（均P<0.05）;E-cadherin表达保留组中,Slug阳性患者5年生存率低于阴性患者分别为（48.4% vs. 87.5%）（P<0.05）,而E-cadherin表达降低组中,Slug阳性及阴性患者生存率无统计学差异（58.3% vs. 68.4%）（P>0.05）。结论：E-cadherin及Slug的表达主要与胃癌TNM分期有关;E-cadherin表达保留的患者中Slug的阳性表达对不良预后有预测意义。

     

肿瘤干细胞学说与肿瘤治疗

目的 分析近年来肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)领域的主要研究成果,为肿瘤治疗和CSC的研究提供思路.方法 广泛查阅近年来有关CSC与肿瘤治疗的相关文献,并进行总结和分析.结果 CSC的概念于2001年提出,至今已在多种组织中得到证实.CSC研究包括各种实体CSC分离鉴定、CSC起源、微环境、生长机制以及肿瘤治疗等方面.根据CSC学说,传统的肿瘤治疗方法存在缺陷,CSC新治疗思路可能彻底治疗肿瘤.结论 CSC学说目前还存在一些争议,但为肿瘤的治疗提出了革命性思路和方向.     

VEGF和E-cadherin在结直肠癌中的表达及其意义

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)和上皮型钙粘蛋白 (E cadherin)在结直肠癌原发灶及转移淋巴结中的表达 ,探索评估结直肠癌病人临床预后的指标。方法　通过免疫组织化学方法回顾性分析我院 32例结直肠癌标本中VEGF和E cadherin在原发灶及转移淋巴结中的表达 ,并分析其与肿瘤临床病理特征间的关系。结果　VEGF和E cadherin在结肠癌原发灶中的阳性染色主要定位于细胞膜 ,阳性表达率分别为 5 0 .0 %和 34.4 %。VEGF的阳性百分率肿瘤与局部浸润程度和淋巴结转移有关。结论　VEGF的过度表达和E cadherin的低表达与肿瘤局部浸润程度和淋巴结转移有关 ,可以作为判断结直肠癌预后的辅助指标