ATIR拮抗剂对膀胱癌细胞株生物学行为的影响及其机制研究

探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（ATlR）拮抗剂坎地沙坦对膀胱癌BIU-87细胞株的生物学行为的影响。方法：采用免疫组织化学SABC法检测膀胱癌BIU-87细胞株ATIR的表达,用MMT法检测用坎地沙坦处理后的BIU-87细胞株的生长情况,同时检测BIU-87细胞株的侵袭能力和黏附能力,用ELISA法检测血管内皮细胞生长因子和白细胞介素-8的表达水平。结果：ATIR拮抗剂坎地沙坦不影响BIU-87细胞株的生长,但能降低其侵袭能力和黏附能力,也能抑制血管内皮细胞生长因子和白细胞介素-8的表达。结论：ATIR拮抗剂通过降低肿瘤细胞的侵袭黏附能力和抑制血管生成而达到抗癌作用,ATlR拮抗剂将来可能会成为一种抗癌治疗的新方法。     

三氧化二砷对膀胱癌细胞株BIU-87影响的研究

三氧化二砷 (As2 O3 )用于白血病的治疗疗效确定 ,目前亦有诱导实体肿瘤细胞凋亡的报道[1] 。我们采用免疫组化和流式细胞术观察As2 O3 对人膀胱癌细胞系BIU 87的诱导凋亡作用。现报告如下。材料与方法　膀胱癌细胞株BIU 87由北京大学泌尿外科研究所提供 ,As2 O3 由伊达药业有限公司提供。Bcl 2、Bax、p5 3抗体及免疫组化试剂盒购自迈新公司。将指数生长期BIU 87细胞随机分4组 ,A组为对照组 ,B组含 2 0 μg/ml丝裂霉素 (MMC) ,C组含 18.8μg/mlAs2 O3 ,D组含 37.6 μg/mlAs2 O3 。 2h后换 10 %培养液 3次。去除药物后第1、2、3…     

PTEN基因转染对人膀胱癌细胞系BIU-87增殖和侵袭力的影响

PTEN是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，它通过发挥磷酸酶作用，阻断信号传导通路。抑制细胞的生长、黏附、铺展和迁移，诱导凋亡，从而对肿瘤的生长和侵袭产生负性调节作用。研究发现，在人类多种肿瘤中均有PTEN的丢失或突变，其表达与肿瘤的发生、发展及预后有一定的相关性。本实验将外源性PTEN转染入人膀胱癌细胞系BIU-87中。观察其对肿瘤细胞增殖力和侵袭性的影响，以探索膀胱癌基因治疗的新靶点。     

瑞格列奈联合坎地沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激的影响

目的：观察瑞格列奈联合坎地沙坦对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）患者氧化应激的影响。方法：选取2010年1O月-2012年6月河北联合大学附属医院收治的80例2型DN患者,采用随机、对照研究,分为瑞格列奈组40例,瑞格列奈联合坎地沙坦组40例,瑞格列奈组患者均给予糖尿病健康教育、优质低蛋白饮食、适量运动,合并高血压者给予钙拮抗剂降压治疗,瑞格列奈的初始用药剂量为lmg,每天3次,餐前10min口服。瑞格列奈联合坎地沙坦组系在瑞格列奈组治疗基础上加用坎地沙坦8mg,每天1次,疗程为12周,采用全自动生化仪检测血脂、血糖、血肌酐（Scr）,尿微量白蛋白（mAlb）,按试剂说明书进行血清超氧化物岐化酶（SOD）及丙二醛（MDA）测定。结果：两组患者年龄、性别构成比、糖尿病病程、血压、血脂、Scr及入选时空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPBG）及糖化血红蛋白等一般资料差异无统计学意义,具有可比性。经过治疗12周后,两组治疗后UAER、HbAlc、SOD及MDA水平分别与治疗前比较均明显下降,差异有统计学意义（P＜0．05）;联合治疗组治疗后与瑞格列奈组比较,其UAER下降、而SOD上升明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：瑞格列奈联合坎地沙坦可能通过调节DN的氧化应激,减少尿蛋白,从而起到一定的肾脏保护作用。     

卡介苗与细胞因子或化疗药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU-87抑制作用

目的 探讨卡介苗（BCG）与细胞因子或化疗药物联合应用对人膀胱癌细胞株BIU-87的抑制作用。方法 在离体条件下，采用MTT染色法，研究BCG与肿瘤坏死因子、白细胞介素案I、干扰素等细胞因子及丝裂霉素C、阿霉素、噻替派和羟基喜树碱等化疗药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU-87的抑制怍用。结果 细胞因子或化疗药物与BCG联合应用能明显增加BCG对BIU-87细胞的毒性作用（P＜0.05）。结论 BCG与细胞因子或化疗药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU-87有协同细胞毒作用。     

坎地沙坦的临床应用

目的:探讨坎地沙坦在临床的应用情况.方法:到临床了解及参考近年来期刊文献.结果:总结出坎地沙坦在临床几种病症中的应用.结论:坎地沙坦等血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂在临床应用中正受到更广泛地关注.     

坎地沙坦致血管神经性水肿及骶髂关节疼痛

1例63岁女性患者因高血压给予坎地沙坦酯8mg/d,口服3天后,患者出现口腔咽部水肿,腰腿疼痛.停药7天后骶髂关节疼痛加剧后出现抽搐,半坐位后出现呼吸困难,意识丧失,大动脉波动消失,抢救后心跳恢复,无自主呼吸,支持治疗,肝肾功能进行性减弱,支持治疗5天死亡.     

坎地沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及肾脏骨桥蛋白表达的影响

目的 观察坎地沙坦(CAN)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,并观察骨桥蛋白(OPN)与肾间质纤维化的关系及CAN干预对肾脏OPN表达的影响,探讨其在纤维化中的作用机制.方法 (1)36只成年雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:假手术组(Sham)、UUO模型组(UUO)、坎地沙坦治疗组(CAN).UUO模型组和CAN组大鼠行左侧输尿管结扎术,Sham组只游离左侧输尿管但不结扎.CAN组于术前1 d开始用CAN治疗[10 mg/(kg·d)]灌胃.术后第7、14天分别处死大鼠,左侧肾脏组织行Masson染色,免疫组织化学方法检测肾组织中OPN的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测OPN mRNA表达水平.结果 Masson染色结果显示术后7 d和14 d UUO组大鼠肾纤维化阳性面积分别为15.2%和24.8%,CAN组为1O.1%和18.5%.CAN组与UUO组大鼠术后7 d和14 d大鼠肾纤维化阳性面积差异有统计学意义(P＜0.05).UUO模型大鼠OPN蛋白及mRNA水平均较Sham组明显升高(P＜0.01),CAN组OPN蛋白及mRNA水平较UUO组明显降低(P＜0.05),但较Sham组高(P＜0.01).结论 CAN能有效地延缓UUO大鼠肾间质纤维化的进展,其延缓肾间质纤维化作用可能与下调OPN蛋白和mRNA有关.     

干扰素结合化疗药物对膀胱癌细胞株BIU-87的抑制作用

在离体条件下，采用噻唑蓝（MTT）染色法，观察干扰素（IFN）与丝裂霉素C（MMC）、阿霉素（ADM）、噻替哌（TSPA）和羟基喜树碱（HCPT）等化疗药物联合应用对人类膀胱癌细胞株BIU－87的抑制作用。结果在连续联合用药组，浓度为25000u／ml的IFN与上述药物50％抑制率（ID50－1）剂量联合使用的抑制率分别为57．4％、58．6％、55．3％和64．3％；在序贯联合用药组，将MMC、ADM的ID50－2剂量作用于细胞24h后，再使用浓度为25000u／ml的IFN，24h后两者联合使用的抑制率分别为59．4％和54．3％。认为IFN与MMC等化疗药物联合应用能够取得较好的协同作用，为临床治疗浅表性膀胱肿瘤提供了新的思路。     

RNA干扰抑制膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子基因表达对其增殖的影响

目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性.方法通过RT-PCR和Northern blot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况.采用分子克隆手段构建NS基因特异性siRNA表达载体,细胞转染获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体和pcDNA4/C载体的细胞克隆,Northern blot方法检测阳性克隆NS基因表达丰度的变化,并观察其体外增殖能力的变化.结果RT-PCR和Northern印迹杂交结果均显示所检测的BIU-87细胞有较高水平的NS表达,NS在正常人膀胱组织中无表达.Northern blot检测证明获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体的细胞克隆NS的表达丰度明显下调,且其体外增殖速率明显降低(P＜0.05).结论NS表达在BIU-87细胞体外增殖过程中发挥重要作用,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法.     

重组质粒载体pCMV-LRIG2转染BIU-87细胞株的效应研究

目的研究携带有LRIG2基因的重组质粒载体pCMV-LRIG2对膀胱癌细胞株BIU-87生物学行为的影响。方法用脂质体介导的基因转染技术，将携带有LRIG2基因的重组质粒载体pCMV-LRIG2转染至膀胱癌细胞株BIU-87，用G418筛选出抗性克隆后，Western blot检测转染前后LRIG2和EGFR蛋白表达水平变化，MTT法绘制转染前后细胞生长曲线，Transwell法检测转染前后细胞侵袭力，同质黏附实验观察转染前后细胞黏附能力。结果转染pCMV-LRIG2组LRIG2蛋白表达水平显著高于末转染组和空载体转染组；转染pCMV-LRIG2组细胞生长速度较未转染组和空载体转染组明显减慢，侵袭力显著低于未转染组和空载体转染组，而黏附能力显著高于未转染组和空载体转染组。结论LRIG2有类似于抑癌基因的作用，通过对EFG-EGFR信号转导途径发挥负反馈抑制作用，从而抑制BIU87细胞的生长、侵袭和转移。     

藤黄酸对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用

目的 探讨GA(藤黄酸)对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用及其机制.方法 分别以倒置相差显微镜、噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术观察GA对BIU-87的形态学改变作用、生长抑制效应、凋亡诱导以及周期阻滞作用.结果 倒置相差显微镜观察发现,GA作用后BIU-87细胞变圆、脱壁,部分死亡、漂浮;MTY法显示,GA对BIU-87具有明显的生长抑制作用,并随着药物浓度的增加(0～3 μmol/L)而逐渐增强,IC50为1.7μmol/L;流式细胞术检测发现,GA浓度为1.5、3.0μmol/L时凋亡率分别为(34.6±5.2)%和(58.6±6.9)%,显著高于对照组的(2.2±0.8)%;GA浓度为0、1.5、3.0 μmol/L,作用48 h后,G_0～G_1期细胞数分别是(35.0±1.2)%、(35.0±1.5)%、(46.0±3.1)%;而S期细胞比例分别为(33.5±0.7)%、(34.1±0.6)%、(15.6±3.3)%,并呈剂量依赖性阻滞BIU-87细胞周期于G_0/G_1期.结论 GA对BIU-87细胞有明显生长抑制作用,这可能与诱导BIU-87凋亡、阻滞其细胞周期进程有关.     

粉防己碱联合阿霉素对人膀胱癌BIU-87／ADM细胞裸鼠移植瘤抑瘤率影响的研究

目的观察粉防己碱（tetrandrine,Tet）联合阿霉素（adriamycin,ADM）对人膀胱癌BIU87／ADM细胞裸鼠移植瘤抑制率的影响。方法30只裸鼠腋部皮下接种BIU87／ADM移植瘤细胞,第22天扪及一小结节,随机分为对照组（生理盐水;6只）、ADM组（1．0mg／kgADM;6只）、Tet低剂量联合ADM组（1．0μg／mlTet＋1．0mg／kgADM;6只）、Tet中剂量联合ADM组（3．0ptg／m{Tet＋1．0mg／kgADM;6只）和Tet高剂量联合ADM组（5．0~g／mlTet＋1．0mg／kgADM;6只）,每4天于肿瘤局部注射生理盐水、ADM以及不同剂量的Tet＋1．0mg／kgADM,每4天测量肿瘤大小,并绘制肿瘤生长曲线;药物处理结束后取瘤并称取重量,依据公式计算抑瘤率。结果Tet各剂量联合ADM组肿瘤的体积、瘤重与对照组比较,差异有统计学意义（P％0．05）;Tet中、高剂量联合ADM组肿瘤体积、瘤重与ADM组比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。结论Tet联合ADM能够明显增加ADM对膀胱癌细胞B1U一87／ADM移植瘤杀伤的敏感性,Tet剂量越高,抑制作用越明显。     

PTEN基因对人膀胱癌细胞系BIU-87化疗敏感性的影响

目的 研究抑癌基因PTEN转染对人膀胱癌细胞系BIU-87化疗敏感性的影响.方法 将携有PTEN基因的重组真核表达质粒pBp-PTEN转化大肠杆菌DH5α并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定;pBp-PTEN体外转染BIU-87细胞(pBp-PTEN-BIU87),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pBp的BIU-87细胞(pBp-BIU87)和正常BIU-87细胞为对照,用RT-PCR检测PTEN的表达情况,应用MTT法分别研究转染前、后膀胱癌细胞对不同浓度抗癌药物丝裂霉素(MMC)、羟基喜树碱和吡柔比星的敏感性变化. 结果 RT-PCR证实PTEN在转染的BIU-87细胞中能稳定表达.PTEN转染后,BIU-87细胞对MMC的药物敏感性明显提高.对吡柔比星和羟基喜树碱的药物敏感性无明显变化. 结论 PTEN基因转染能提高人膀胱癌细胞系BIU-87对抗癌药物MMC的敏感性.     

PBK/TOPK表达对膀胱癌BIU-87细胞株增殖及迁移的影响

目的 探讨PBK/TOPK在膀胱癌中的表达及其表达对BIU-87细胞株增殖及迁移的影响。方法 采用QRT-PCR及Western blot检测3例配对膀胱癌及癌旁正常组织中PBK/TOPK的表达。随后,对膀胱癌BIU-87细胞株中PBK/TOPK的表达分别干扰及过表达,通过CCK-8实验检测细胞的增殖,Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果 结果一致表明PBK/TOPK在膀胱癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。干扰PBK/TOPK表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力下降(P<0.05) ;而PBK/TOPK过表达后,BIU-87细胞的增殖及迁移能力增强(P<0.05) 。结论 PBK/TOPK高表达于膀胱癌,有助于膀胱癌细胞的增殖及迁移。     

5'-FITC标记的PCNA反义寡核苷酸在人膀胱癌细胞BIU-87中的分布及稳定性分析

目的观察硫代修饰型及天然型PCNA反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞BIU-87后在细胞内的分布及其稳定性。方法将异疏氰酸荧光素（5＇－FITC）标记的18mer硫代磷酸化修饰型及未修饰型PCNA反义寡核苷酸在脂质体介导下或直接转染人膀胱癌细胞BIU－87，应用荧光显微镜观察转染细胞从细胞内的时相分布。结果修饰型反义核酸直接转染细胞后30分钟，少数细胞胞浆荧光呈离散型、点状分布，4小时后有少数细胞胞核有强荧光聚积。在脂质体介导下，荧光细胞数目明显增加，4小时后绝大多数细胞迅速积聚于细胞核，4～8小时后，细胞核内荧光强度进一步增强，12小时后细胞荧光减弱甚至消失。而非修饰型反义核酸在直接转染或脂质体介导下均发现荧光在3小时后消失。结论脂质体增加PCNA修饰型反义寡核苷酸与膀胱癌细胞BIU－87结合的数量，同时使其在细胞核内分布聚积明显；PCNA反义寡核苷酸硫代修饰具有更好的稳定性。     

国人阴茎血管神经的解剖及临床意义

目的:了解国人阴茎血管神经的分布,为临床诊治阳萎提供理论依据.方法:对9具成年男性尸体阴茎血管神经进行解剖.结果:背浅静脉主要回流到左侧大隐静脉,背深静脉和海绵体静脉都回流到髂内静脉,三者之间有许多交通支.海绵体静脉和脚静脉位置较深,周围有动脉和神经伴行.海绵体神经肉眼可见,沿前列腺后外侧和直肠壁之间上行入盆腔.     

蟾酥脂质体对人膀胱移行细胞癌BIU－87作用的体外实验研究

不同剂量的蟾酥脂质体对体外培养的人膀胱移行细胞癌ＢＩＵ－８７细胞生长有明显抑制作用，且存在药物剂量依赖性。应用图象分析仪（ＩＡＳ）对癌细胞核ＤＮＡ原位定量测定，结果随药物剂量的增加，癌细胞核ＤＮＡ原位含量逐渐减低，ＤＮＡ指数（ＤＩ）由对照组的４．０９降为２．５５，从ＤＮＡ的倍体分布直方图上可见癌细胞由高异倍体向低异倍体转化，经统计学分析有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。光镜下发现：癌细胞有明显的空泡样变性及核裸露。认为蟾酥脂质体的抗肿瘤作用与其抑制癌细胞ＤＮＡ合成及减低肿瘤恶性度有关。     

PTEN基因转染对人膀胱癌细胞BIU-87中PI3K-Akt信号通路的影响

目的 研究抑癌基因PTEN转染对人膀胱癌细胞BIU-87中PI3K-Akt信号通路的作用.方法 将携有PTEN基因的重组真核表达质粒pBp-PTEN转化大肠杆菌DH5α并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定,pBp-PTEN体外转染BIU-87细胞(pBp-PTEN-BIU87),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pBp的BIU-87细胞(pBp-BIU87)和正常BIU-87细胞为对照,用RT-PCR检测PTEN的表达情况.将PTEN基因的真核表达质粒转染膀胱癌细胞BIU-87(pBp-PTEN-BIU87),以BIU87细胞和pBp-BIU87细胞为对照,应用Wester blot方法 检测三组细胞P110(PI3K的催化亚单位)、磷酸化P110、Akt和磷酸化Akt表达的情况.结果 3种细胞P110和Akt蛋白总水平没有变化,但磷酸化P110和磷酸化Akt在PTEN转染细胞中的表达明显弱于对照组.结论 PTEN是通过对PI3K-Akt信号传导途径的负调控而抑制肿瘤的形成.PTEN-PI3K-Akt途径可能是PTEN抑癌作用的重要机制.