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目的:建立优化HLA-A位点PCR-SP分型方法。方法:采用普通扩增仪和Eppendorf管对细胞系DNA和37个健康正常人进行基因分型,血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果:发现引物浓度和浓度比、DNA的纯度及酶的选用,是影响HLA-A位点PCR-SSP分型准确性的重要因素。该方法对37个标本的基因分型结果与血清学结果相符合。结论:PCR-SSP方法具有简便准确的优点,可以作为HLA-A位 相似文献
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用顺序特异引物聚合酶链反应技术对HLA-B基因分型 总被引:6,自引:0,他引:6
目的采用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)建立汉族人群HLA-B基因分型方法。方法肾移植供受者临床样本DNA319份,B基因标准系列DNA62份。设计合成B座位52个特异性引物和1对阳性对照引物,组成41个PCR反应,建立PCR-SSP方法。一步法完成对B座位的基因分型。结果经双盲验证,并与血清学方法比较。结果所有临床样本和标准DNA,PCR-SSP基因分型均获得成功。可准确分辨HLA-B座位等位基因41个,实际检出汉族人群B抗原特异性32个。无假阳性和假阴性,40份样本的重复率100%,总耗时5小时。分型结果经双盲验证完全符合。与血清学分型结果比较显示:78份血清学空白中17例存在第二个基因,26份血清学分型结果错误。总误差率13.5%。结论用PCR-SSP技术行HLA-B基因分型,分辨率高、特异性强、重复性好、相对简捷快速,分型结果较血清学方法更加精确可靠,适合于临床应用。 相似文献
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一种新的HLA—II类基因分型方法——PCR/SSP技术的建立 总被引:23,自引:0,他引:23
PCR/SSP是一种新的基因多态性分析技术,可用于HLA复合体及其他具有多态性特点2的基因分型。我室于1993年建立这种方法,并对正常人、重症肌无力患者、全身性红斑狼疮患者、骨髓移植供/受者进行了HLA-DRB1、-DQB1基因型别分析。与其它HLA基因分型方法相比,PCR/SSP具有简便、快速、准确及重量性好等特点。本文介绍PCR/SSP技术的原理、方法、特点以及常见问题的处理。 相似文献
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广东汉族人类风湿关节炎易感性与HLA—DRB1基因相 … 总被引:2,自引:0,他引:2
探讨HLA-DRB1基因与类风湿关节炎相关性。方法 采用PCR-SSP方法对47例广东汉族人RA患者进行HLA-DRB1基因分型,并与相应人群健康者102例结果比较。结果 HLA-DR1基因在RA组显著增高,DR16在RA组也高于正常;而ER9基因在RA组显著减少。 相似文献
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探讨上海人群中HLAⅡ类基因和抗原处理相关基因与多发性硬化症的相关性。方法,用PCR-RFLP和PCR-SSO技术对21名上海地区无血缘关系的MS患者和89名正常人作HLAⅡ类(HLA-DRB1,-DQA1和-DQB1)和抗原处理相关基因(TAP1,TAP2和LMP2)分型。结果患者组DRB1*0405、T 克*0502(P=0.0025)等位基因DRB1*0405-DQA1*0301-DQB1* 相似文献
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HLA-DQA1等位基因与原发性高血压的相关性研究 总被引:15,自引:2,他引:15
目的对原发性高血压患者进行HLA-DQA1等位基因的分型,分析高血压病患者的遗传易感性。方法用PCR-SSP技术对具有遗传家族史的高血压病患者52例及正常对照86例,进行HLA-DQA1等位基因的基因分型。结果HLA-DQA1*0302在高血压组的基因频率明显高于对照组(17.9573对3.5531,P<0.001)。而HLA-DQA1*0103却表现为正常组的增高。结论HLA-DQA1*0302基因与高血压的遗传易感性相关联,而HLA-DQA1*0103可能是高血压的一个保护基因 相似文献
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用PCR—SSP作HAL—B位点分型及B22亚型分析 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:用DNA分型弥补血清学HLA-B位点分型的欠缺并了解南方汉族B22亚型分布情况。方法;采用标准细胞作参照,建立B位点的PCR-SSP分型方法地血清学B22阳性标本进行B22亚型分析。结果:104株标准细胞PCR-SSP分型结果与已知结果完全一致,17例白血病人及同胞分型与血清学一致,1例不符;B22亚型以3^*5401最多,B^*5601较少,1例分型格局异常,可能为新B22等位基因或错配的 相似文献
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北方汉族HLA-DRB1、DQB1基因多态性的研究 总被引:19,自引:4,他引:15
目的从基因水平了解北方汉族HLA-DRB1、DQB1多态性分布,获得更完整、更准确的遗传学数据。方法应用PCR-SSP方法对107名北方汉族健康人进行了HLA-DRB1、DQB1等位基因分型。结果鉴定了14个DRB1等位基因,9个DQB1等位基因,包括了DR、DQ位点的全部血清学特异性。结论提供了一套比较完整准确的DRB1、DQB1等位基因的基因频率和连锁不平衡参数。对群体遗传和疾病关联的研究具有重要的意义。 相似文献
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PCR/SSP结合PCR/SSCP分析湖南汉族HLA-DQA1等位基因多态性 总被引:2,自引:0,他引:2
为准确阐明湖南汉族群体HLA-DQA1遗传多态性,采用PCR/SSP方法,并联合应用可同时区分HLA-DQA1*0101~0601等位基因的银染PCR/SSCP技术对60例随机选择的湖南汉族健康者作HLA-DQA1等位基因分型。结果表明,湖南汉族存在... 相似文献
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新疆维族人群HLA—DR—DQ单倍型研究 总被引:3,自引:1,他引:3
为了解HLA第2类基因(HLA-DR-DQ,-DP位点)在中国人群中的分布情况,应用PCR/SSO方法对新疆的主要民族维吾尔族人92例进行了HLA-DRB1、DRB3、DRB5和DQA1、DQB1五位点等位基因进行了分析,计算了它们在该人群中的分布频率,推导了DR-DQ五位点单倍型的结构及分布。通过与世界各主要人种和中国北方汉族的比较,证明维族在中华民族有共同基因背景的基础上,还表现出与西方人种有一定程度的血缘交流。为研究古丝绸之路人口迁移对中国维族遗传特征的影响提供了资料。 相似文献
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HLA—A,B血清学分型与DNA分型的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:比较136例样本HLA-A,B血清学分型与DNA分型结果。方法:应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCRSSP)技术,设计38对引物,检测常见的HLA-A,B基因。结果:136例样本中有60例血清学分型与DNA分型结构不符合(44.1%);HLA-A特异性血清学分型错误率在纯合子中分别占23.3%与9.4%(共11.2%),在HLA-B中分别占47.4%与18.4%(共20.6%);HLA-A特异性血清学分型假阴性6.6%,假阳性2.5%,错误指认特异性2.1%,HLA-B错异性则分别为6.7%,3.6%,10.3%。结论:ILA-A纯合子血清学分型错误率明显高于杂合子(P〈0.05);HLA-B纯合子血清学分型错误率也明显高于杂合子(P〈0.005);HLA-B特异性血清学分型错误率显著高于HLA-A特 相似文献
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北方汉族过敏性紫癜与HLA相关性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
为了研究过敏性紫癜(AP)的发病机理中是否有免疫遗传因素参与,采用国际通用的NIH标准微量淋巴细胞毒试验方法检测40例AP患者的HLA-Ⅰ类抗原,并与100例北方汉族正常人HLA-Ⅰ类抗原频率进行比较。利用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对其中30例AP患者进行HLA-Ⅱ类基因分型,并与104例北方汉族正常人的HLA-Ⅱ类基因频率进行了比较。发现AP患者HLA-A30+31、B13、B35、B40抗原频率较对照组明显增高(A30+31:Pc<0.01,RR=7.97;B13∶PC<0.01,RR=6.00,B35∶Pc<10-5,RR=10.40;B40∶Pc<0.05,RR=3.85)。HLA-DR10基因频率在AP患者较正常对照组明显增高(DR10∶Pc<10-5,RR=21.88),而HLA-DQ3、DQ6基因频率较正常对照组明显降低(DQ3∶Pc<10-5,RR=0.13;DQ6∶Pc<0.05,RR=0.23)。提示AP与HLA-A30+31、B13、B35、B40、DR10正相关,与HLA-DQ3DQ6负相关。 相似文献
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广东汉族人类风湿关节炎易感性与HLA-DRB1基因相关性研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的探讨HLA-DRB1基因与类风湿关节炎(RA)相关性。方法采用PCR-SSP方法对47例广东汉族人RA患者进行HLA-DRB1基因分型,并与相应人群健康者102例结果比较。结果HLA-DR4基因在RA组显著增高(35.1%,RR=3.55,P<0.005,EF=0.252),DR16在RA组也高于正常(RR=2.57,P<0.05);而DR9基因在RA组显著减少(P<0.005)。31例DR4+患者患病年龄较早,病情较重(类风湿因子阳性率和Ⅱ期RA骨关节X线改变者显著高于DR4-患者,P值分别<0.05和0.025)。结论广东汉族人RA易感性与宿主DR4基因密切相关,HLA-DR4可能是一个对判断病情和预后有价值的实验指标。 相似文献
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PCR-SSP用于上海地区汉族人群HLA-DRB1基因分型的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过建立顺序特异引物聚合酶链反应方法(PCR-SSP),对102名上海地区汉族人,112例肾移植供受者和14份标准DNA进行HLA-DR基因分型。每份样本同时20管PCR反应,扩增条件为94℃30秒,60℃50秒,72℃40秒,共34个循环。即可对DRB1各等位基因作出准确分型,总耗时5小时。分型结果经限制性内切酶分析和特异性探针杂交等予以确证,无一例假阳性和假阴性。显示该方法快速、精确,适合于临床应用 相似文献
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中国广东汉族群体HLAⅡ类基因多态性的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
为探讨中国广东汉族群体HLAⅡ类基因多态性,采用PCR/SSO方法,随机选择102名广东籍汉族人进行了HLAⅡ类基因的DNA分型。测定了包括HLA-DRB1,DRB3,DRB5,DQA1,DQB1和DPB1等6个基因座位的等位基因。结果:共检出23种DRB1,3种DRB3,4种DRB5,8种DQA1,12种DQB1和12种DPB1基因。该人群的HLAⅡ类等位基因多态性的典型性表现在HLA-DRB*1202的不寻常优势和DRB1*02单倍型的结构的高度复杂性。还发现了很高频率的一个近年才被正式命名的DP新型:HLA-DPB1*2101,并且此型具有极不寻常的DRB1*1202-DPB1*2101的连锁不平衡。为分子流行病学研究提供了资料。 相似文献