棕榈酸在体外通过促进凋亡作用抑制宫颈癌Hela细胞增殖的研究

目的 探讨体外棕榈酸(Palmitic acid,PA)抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡作用及其部分机制。方法 体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为对照组(不加药)、PA处理组(分别加入PA 25、50、100μg/mL处理),CCK-8法检测各组HeLa细胞增殖情况,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测不同浓度PA处理后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Cleaved-caspase-3的表达,PA处理后的HaLa细胞用膜联蛋白V/碘化丙啶双标,随后用流式细胞仪检测其凋亡情况。结果 与对照组比较,PA处理HeLa细胞后增殖抑制率逐渐增高(P＜0.05);PA处理后,HaLa细胞的迁移与侵袭能力显著下降(P＜0.05);同时,PA处理HeLa细胞后,随着PA浓度增高,Bcl-2基因表达逐渐降低,而Bax和Cleaved-caspase-3基因表达逐渐增强与流式细胞仪检测结果相符合,HeLa细胞的凋亡率随着PA浓度增高逐渐增高(P＜0.05)。结论 PA体外可抑制HeLa细胞增殖,减少其迁移与侵袭水平,并诱导其凋亡,其机制可能与调节HeLa细胞Bcl-2家族有关。     

lncRNA NONHSAT070341在宫颈癌中的差异表达及其对宫颈癌细胞生物学特性的影响

目的:探究长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）NONHSAT070341在宫颈癌组织及细胞系SiHa和Caski中的表达及其对宫颈癌细胞生物学功能如增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期分布的影响。方法:收集2021年06月至2022年06月于山西医科大学第二临床医学院妇产科行手术切除的处于不同宫颈病变阶段的患者90例,以30例同期因子宫肌瘤行子宫全切术的正常宫颈组织作为对照,通过实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测宫颈癌组织及细胞系中lncRNA NONHSAT070341的表达情况;在SiHa及Caski细胞中瞬时转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰片段来靶向敲低lncRNA NONHSAT070341,并采用qRT-PCR验证转染效率;通过CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,细胞周期实验检测对宫颈癌细胞周期分布的影响,划痕愈合实验评估细胞横向迁移能力,Transwell实验检测细胞纵向迁移及侵袭能力,流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果:lncRNA NONHSAT070341在宫颈癌组织和细胞中高表达;NONHSAT070341 siRNA可降低SiHa和Caski细胞中NONHSAT070341的表达;敲低NONHSAT070341后,宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显降低,细胞停滞在G1期,影响了宫颈癌细胞周期的分布,但却增加了SiHa 和 Caski 细胞的凋亡率。结论:NONHSAT070341可促进宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭,改变了宫颈癌的生物学行为并有望成为诊断宫颈癌的一个新兴生物标志物。     

塞来昔布对宫颈癌细胞的化疗增敏作用

目的探讨特异性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对顺铂诱导宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）,测定塞来昔布对顺铂诱导Hela细胞增殖活性的作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测Hela细胞中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果 5、10μmol/L的塞来昔布分别与顺铂联合应用,可增强顺铂对Hela细胞增殖抑制作用。塞来昔布（5μmol/L）能促进顺铂诱导Hela细胞的凋亡。塞来昔布作用于Hela细胞后,Bcl-2蛋白表达水平下调、Bax蛋白表达水平上调呈浓度依赖关系。结论塞来昔布能促进顺铂对Hela细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,起化疗增敏作用,可能与其下调Bcl-2蛋白表达水平、上调Bax蛋白表达水平有关。     

DHA is a more potent inhibitor of breast cancer metastasis to bone and related osteolysis than EPA

Breast cancer patients often develop bone metastasis evidenced by osteolytic lesions, leading to severe pain and bone fracture. Attenuation of breast cancer metastasis to bone and associated osteolysis by fish oil, rich in EPA and DHA, has been demonstrated previously. However, it was not known whether EPA and DHA differentially or similarly affect breast cancer bone metastasis and associated osteolysis. In vitro culture of parental and luciferase gene encoded MDA-MB-231 human breast cancer cell lines treated with EPA and DHA revealed that DHA inhibits proliferation and invasion of breast cancer cells more potently than EPA. Intra-cardiac injection of parental and luciferase gene encoded MDA-MB-231 cells to athymic NCr nu/nu mice demonstrated that DHA-treated mice had significantly less breast cancer cell burden in bone, and also significantly less osteolytic lesions than EPA-treated mice. In vivo cell migration assay as measured by luciferase intensity revealed that DHA attenuated cell migration specifically to the bone. Moreover, the DHA-treated group showed reduced levels of CD44 and TRAP positive area in bone compared to EPA-treated group. Breast cancer cell burden and osteolytic lesions were also examined in intra-tibially breast cancer cell injected mice and found less breast cancer cell growth and associated osteolysis in DHA-treated mice as compared to EPA-treated mice. Finally, doxorubicin-resistant MCF-7 (MCF-7dox) human breast cancer cell line was used to examine if DHA can improve sensitization of MCF-7dox cells to doxorubicin. DHA improved the inhibitory effect of doxorubicin on proliferation and invasion of MCF-7dox cells. Interestingly, drug resistance gene P-gp was also down-regulated in DHA plus doxorubicin-treated cells. In conclusion, DHA attenuates breast cancer bone metastasis and associated osteolysis more potently than EPA, possibly by inhibiting migration of breast cancer cell to the bone as well as by inhibiting osteoclastic bone resorption.     

EFFECTS OF CURCUMIN ON PROLIFERATION AND APOPTOSIS OF HUMAN CERVICAL CARCINOMA HeLa CELLS IN VITRO

Curcumin,adeferuloymethane,isamajoractivecomponentofthefoodflavorturmetric(CurcumalLonga).Becauseofitsstablecolourandlusterandlowtoxicity,curcuminhasbeenwidelyusedasfoodadditiveandstain.Recently,ithasbeenreportedtopossesantiinflammatory,antioxidationandantiviralactivities.Now,attentionhasbeenfocusedonitsantitumoractivity[1].InvitrocurcuminwasfoundtoinduceapoptosisofawidevarietyoftumorcellsincludingmicesarcomaS180cells,humancoloncarcinomaHT-29cells,humanrenalcarcinoma293cells,humanlivercarcin…     

内皮抑素抑制SKOV3细胞生长及其在裸鼠皮下移植瘤中的作用机制

目的:探讨内皮抑素对卵巢癌SKOV3细胞及其荷瘤鼠卵巢癌组织的生长作用及机制。方法:MTT法观测内皮抑素对体外SKOV3细胞的抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡、免疫细胞化学检测SKOV3;细胞中bcl-2和bax蛋白表达;将SKOV3细胞移植至裸鼠皮下,观察内皮抑素对皮下移植瘤生长的影响;TUNEL和电镜法观察肿瘤细胞的凋亡,免疫组织化学和RT-PCR法检测瘤组织中bcl-2和bax的表达。结果:内皮抑素具有体外抑制SKOV3细胞增殖的作用(P<0．01);能诱导SKOV3细胞凋亡,但对bcl-2和bax的表达无明显影响。内皮以抑素能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0．05);其中bcl-2的表达低于对照组,而bax表达无明显改变。结论:内皮抑素具有抑制SKOV3细胞及皮下移植瘤生长的作用,其机制可能与诱发细胞凋亡和调节bcl-2／bax表达相关。     

lncRNA HEIG对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响及其分子机制

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HEIG在宫颈癌组织和细胞中的表达及其生物学功能。方法:采用实时荧光定量PCR检测患者癌组织和癌旁组织、正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela和C33A中lncRNA HEIG的表达;敲低Hela细胞中HEIG表达,MTT法和流式细胞术分别检测Hela细胞的增殖、凋亡情况;Transwell小室法检测Hela细胞的迁移侵袭能力;Western blot检测AKT信号通路的变化。结果:lncRNA HEIG在宫颈癌组织和细胞中高表达;敲低HEIG可显著抑制宫颈癌细胞Hela的细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭能力,同时抑制AKT信号通路的活化。结论:lncRNA HEIG有可能作用于AKT信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移侵袭。     

siRNA沉默YAP1对宫颈癌Hela细胞增殖和侵袭的影响

目的:用小干扰RNA(siRNA)沉默宫颈癌Hela细胞中YAP1基因的表达,观察YAP1表达降低对细胞增殖和侵袭能力的影响,初步探讨YAP1在宫颈癌中的作用。方法:qRT-PCR和Western blot方法检测宫颈癌Hela细胞及正常宫颈上皮细胞H8中YAP1的表达,siRNA YAP1转染Hela细胞沉默YAP1表达,并以转染control siRNA的细胞作为对照,转染48h后,分别用qRT-PCR和Western blot方法检测沉默效果。用MTT法检测沉默后细胞增殖情况。Transwell 检测细胞侵袭能力。结果:YAP1在宫颈癌细胞中高表达。siRNA能够有效沉默Hela细胞中YAP1的mRNA 及蛋白的表达。沉默YAP1表达能够明显抑制Hela细胞的增殖及侵袭能力。结论:YAP1蛋白在宫颈癌细胞中高表达并具有促进细胞增殖及侵袭的能力。     

siRNA-mediated Inhibition of hTERC Enhances Radiosensitivityof Cervical Cancer

Background: To investigate the influence of telomerase activity, apoptosis, radiosensitivity of cervical cancer after siRNA-mediated knockdown of telomerase RNA and evaluate in vivo growth with gene interference.Methods: We studied siRNA-targeting-telomerase RNA transfection into the Hela cell line. Expression of hTERC mRNA was detected by RT-PCR and telomerase activity was measured by the TRAP assay. Growth inhibition was determined by MTT assay and radiosensitivity of the cervical cancer cells was examined by colony formation assay. In addtion, effects of hTERC inhibition in vivo were studied by injection of siRNA-transfected Hela cells into nude mice. Results: The hTERC siRNA effectively downregulated the expression of hTERC mRNA and alsoreduced the telomerase activity to 30% of the untreated control vlaue. The viability of hTERC siRNA transfected Hela cells was reduced by 44.7% after transfection. After radiation treatment, the radiosensitivity of Hela cells with hTERC knockdown was increased. In vivo, the tumors developing from the hTERC siRNA-transfectedcells were of reduced size, indicating that the hTERT siRNA also depressed the tumorigenic potential of the Hela cells. Conclusions: Our results supported the concept of siRNA-mediated inhibition of telomerase mRNA whichcould inhibit the expression of hTERC and telomerase activity. Furthermore, radiosensitivity was upregulated after knockdown the hTERC in vivo and in vitro.     

YH-16对宫颈癌Hela细胞及其裸鼠皮下移植瘤作用研究

目的：初步探讨YH-16（重组内皮抑素）对宫颈癌Hela细胞及其荷瘤生长抑制作用及作用机制。方法：用MTY法检测YH-16对Hela细胞生长抑制作用；用透射电镜观察YH-16处理Hela细胞后的凋亡情况、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期；将Hela细胞移植至裸鼠皮下成瘤，观察不同浓度YH-16（0mg／kg、0．4mg／kg、0．75mg／kg和1．5mg／kg）对荷瘤鼠皮下移植瘤生长的影响；TUNEL法观察肿瘤细胞的凋亡；免疫组化方法检测裸鼠移植瘤组织中肿瘤微血管密度（MVD）。结果：YH-16具有体外抑制Hela细胞增殖的作用（P〈0．01）；能诱导Hela细胞凋亡；YH-16能有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.05）；YH-1615mg／kg组的肿瘤MVD计数较对照组和其它治疗组明显降低（P〈0．05）。结论：YH-16具有抑制宫颈癌Hela细胞及其皮下移植瘤生长的作用。     

叶酸对子宫颈癌细胞甲基-CpG-结合蛋白质2表达及细胞增殖抑制的作用

目的 探讨叶酸对子宫颈癌细胞甲基-CpG-结合蛋白质2(MeCP2)表达及细胞增殖抑制的影响.方法 选择子宫颈癌细胞Caski(HPV16阳性)和C33A(HPV阴性)进行不同浓度叶酸干预后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,分别用Western blot和实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测MeCP2蛋白和mRNA的表达水平.结果 叶酸随着浓度的增加,对两种细胞的生长抑制作用加强,各浓度叶酸实验组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).C33A与Caski细胞的凋亡率随叶酸浓度的增加呈上升趋势(C33A:r=0.965,P＜0.001;Caski:r=0.973,P＜ 0.001).MeCP2蛋白的表达量则呈下降趋势,其与叶酸浓度呈负相关(C33A:r=-0.952,P＜ 0.001;Caski:r=-0.947,P＜ 0.001);Caski与C33A细胞各浓度组间mRNA表达水平差异有统计学意义(C33A:F=77.041,P＜0.001;Caski:F=59.885,P＜ 0.001);同一质量浓度下,500 μg/ml组Caski细胞MeCP2蛋白表达及mRNA水平均较C33A细胞高,且差异有统计学意义(P＜0.05).MeCP2蛋白表达量与细胞凋亡率呈负相关(C33A:r=-0.970,P＜0.001;Caski:r=-0.932,P＜ 0.001).结论 叶酸可以抑制子宫颈癌细胞的生长,促进细胞凋亡,降低MeCP2在子宫颈癌细胞中的表达.MeCP2的异常高表达对子宫颈癌细胞C33A和Caski的凋亡有抑制作用.     

CPC/CMC-CD55sp 纳米微球对宫颈癌Caski 细胞的靶向杀伤作用

目的:制备一种新型C-藻蓝蛋白（C-phycocyanin,CPC）/羧甲基壳聚糖-CD55 配体肽（carboxymethyl chitosan-CD55-specific ligand peptide, CMC-CD55sp）(CPC/CMC-CD55sp)纳米微球,并探究其对宫颈癌Caski 细胞的靶向治疗作用。方法：采用离子交联法制备新型CPC/CMC-CD55sp 纳米微球,通过透射电镜（DLS）和红外光谱仪（FTIR）观察纳米微球的表征,Western blotting和流式细胞术检测CD55 在Caski 细胞和成纤维（L-929）细胞表面的表达情况,CCK-8 法检测纳米微球对Caski 细胞增殖的影响,流式细胞术和荧光显微镜检测纳米微球被细胞摄取情况,Western blotting 和流式细胞术检测纳米微球对Caski 细胞凋亡相关信号蛋白和凋亡率的影响,溶血试验测定药物的生物安全性。结果：成功制备新型CPC/CMC-CD55sp 纳米微球,其形态良好、直径分布均匀,CD55 在宫颈癌细胞Caski 表面高表达而在小鼠L-929 细胞表面低表达（P<0.01）。纳米微球能靶向、高效地到达Caski细胞并被摄入细胞;其在人外周血中溶血作用微弱,且在安全范围;其对Caski 细胞的增殖具有明显的抑制作用并且能够诱导Caski 细胞凋亡（P<0.05 或P<0.01）。结论：新型CPC/CMC-CD55sp 纳米微球能够靶向抑制宫颈癌Caski 细胞的增殖并诱导其凋亡,具有较好的安全性,为海洋抗肿瘤药物的研发提供了新思路。     

lncRNA FOXD2-AS1通过靶向miR-506-5p调控宫颈癌细胞增殖与凋亡

[摘要] 目的: 探讨长链非编码RNA（lncRNA）FOXD2-AS1 是否通过靶向miR-506-5p 调控宫颈癌细胞增殖和凋亡。方法:体外培养人宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski 与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7,用qPCR检测细胞中FOXD2-AS1 和miR-506-5p 的表达水平。用脂质体转染技术分别构建抑制FOXD2-AS1 表达和过表达miR-506-5p 的宫颈癌细胞,用MTT实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况,WB实验检测细胞中增殖相关蛋白CyclinD1、p21 和p27 及凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX和cleaved-capase-3的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证FOXD2-AS1 是否靶向miR-506-5p,并分析同时抑制FOXD2-AS1 和miR-506-5p 表达对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响。结果：与Ect1/E6E7 细胞比较,宫颈癌HeLa、Siha 和Caski 细胞中FOXD2-AS1 表达水平显著升高,miR-506-5p 表达水平降低（均P<0.01）。抑制FOXD2-AS1 表达可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1 蛋白和Bcl-2 蛋白表达,并促进p21、p27 和BAX、cleaved-capase-3 蛋白的表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡（均P<0.01）。过表达miR-506-5p 可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1 和Bcl-2 蛋白表达,促进p21 和BAX蛋白表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实宫颈癌细胞中FOXD2-AS1 靶向负调控miR-506-5p 的表达（P<0.01）。抑制miR-506-5p 表达逆转了抑制FOXD2-AS1 表达对宫颈癌细胞增殖和凋亡的作用（P<0.01）。结论: FOXD2-AS1 通过靶向miR-506-5p 的表达调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡。     

Effects of curcumin on proliferation and apoptosis of human cervical carcinoma HeLa cells <Emphasis Type="Italic">in vitro</Emphasis>

Objective: To investigate the regulatory effect of curcumin on profiferation and apoptosis in human cervical carcinoma ceil fine HeLa in vitro. Methods: Human cervical carcinoma cell line Hela was cultured in vitro. HeLa cells were treated with 10-50μmol/L cureumin for 24-72 h and the growth inhibition rates of HeLa ceils were measured by MTT method. Cell apoptosis was inspected by electron microscopy. In addition, the expression of bcl-2, bcl-x1 and caspase-3 protein in HeLa cell were observed by SP immunohistochemistry. Results: Curcumin inhibited the proliferation of HeLa cells on a dose-depending manner.Peak of subG1 appeared on DNA histogram in FCM. A portion of the cells presented the characteristic morphological changes of apoptosis under the electron microscope. The bcl-2, bcl-x1 expression was decreased while Caspase-3 expression was increased. Conclusion:Curcumin could significantly inhibit the growth of HeLa cells; inducing apoptosis through up-regulating Caspase-3 and down-regulating expression of bcl-2 and bcl-x1 was probably one of its molecular mechanisms.     

COX-2反义寡核苷酸抑制宫颈癌Hela细胞的研究

目的：通过研究环氧合酶-2（COX-2）反义寡核苷酸（AS-ODNs）对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及对其抑制原理进行分析,探讨COX-2 AS-ODNs对宫颈癌的治疗意义.方法：Hela细胞分6组培养：对照组（A）、正义寡核苷酸（SODNS）组（B）、脂质体组（C）及反义寡核苷酸组 （D）设3个亚组.MTT实验检测细胞的增殖情况;在转染后48 h,RT-PCR法检测COX-2 mRNA的表达水平,Western blot检测COX-2蛋白的表达,流式细胞仪测定细胞周期的变化.结果：与其他组比较,AS-ODNs转染的细胞增殖缓慢,且随着AS-ODNs的浓度增加细胞增殖指数有下降的趋势,COX-2 mRNA及蛋白表达明显下调,表达量随AS-ODNs转染浓度的增加而减少,细胞周期S期细胞比例明显减少,G2/M及G0/G1期细胞所占比例增多,P ＜0.05.结论：COX-2反义寡核苷酸对Hela细胞的增殖有抑制作用;其抑制机制可能与抑制COX-2转录与翻译及细胞周期再分布有关.     

LINC00958 通过上调VEGF-C 表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为及小鼠模型的淋巴结转移

目的：探讨LINC00958/血管内皮生长因子 C（VEGF-C）信号通路在宫颈癌的淋巴管生成和淋巴转移中的作用。方法：从2020 年9月至2022 年9月期间在河南省人民医院接受手术的患者中收集了42 例宫颈癌组织标本,通过qPCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞（Hela、C33A、SiHa、Caski）中LINC00958 的表达情况。将LINC00958 过表达载体（LINC00958 组）或对照载体（CMV 组）转染Caski 细胞,敲减LINC00958（shLINC00958 组）、VEGF-C（shVEGF-C 组）的shRNA 序列或阴性对照shRNA （shNC 组）转染SiHa 细胞。分别通过CCK-8法、Transwell 实验检测过表达或敲减LINC00958 对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察转染后细胞的培养上清液对人淋巴管内皮细胞（HLEC）淋巴管形成能力的影响。建立小鼠腘淋巴结转移模型,观察过表达LINC00958 或同时敲减VEGF-C对宫颈癌淋巴结转移的影响。结果：LINC00958 在宫颈癌组织中呈高表达（P<0.001）,高水平的LINC00958 与大肿瘤、晚期肿瘤分级、浸润深度和淋巴转移有关联（P<0.05 或P<0.01）。与正常人宫颈上皮细胞ende1617相比,宫颈癌细胞中LINC00958 水平均显著升高（P<0.01 或P<0.001）。shLINC00958 组SiHa 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力均显著低于shNC 组（P<0.05、P<0.01 或P<0.001）,LINC00958 组Caski 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力显著高于CMV组（P<0.05、P<0.01或P<0.001）。通过RNA下拉、RNA免疫沉淀实验发现宫颈癌细胞中LINC00958 能够特异性结合VEGF-C。LINC00958+shVEGF-C 组Caski 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促淋巴管形成能力显著低于LINC00958 组（P<0.01 或P<0.001）;在小鼠腘淋巴结转移模型中,LINC00958+ shVEGF-C 组中小鼠腘窝淋巴结的体积和VEGF-C 蛋白、N-cadherin 蛋白以及LYVE-1的阳性细胞比例均显著低于LINC00958 组（均P<0.001）。结论：LINC00958通过直接与VEGF-C蛋白相互作用增强宫颈癌细胞的增殖、侵袭、淋巴管生成能力,促进小鼠腘淋巴结转移模型的淋巴结转移。     

CIK细胞体内外抗宫颈癌HeLa细胞活性的研究

目的：探讨细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞的体内外抗宫颈癌HeLa细胞活性。方法：收集8名健康献血者和8名宫颈癌患者的新鲜外周血,分别通过常规方法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）,应用相应细胞因子体外诱导分化出CIK细胞,动态观察CIK细胞的体外增殖活性、细胞表型和对HeLa细胞的杀伤活性;在BALB/c裸鼠皮下接种效应细胞,观察宫颈癌患者CIK细胞对接种HeLa细胞的荷瘤鼠的抑瘤作用,同时设淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokine activated killer cells,LAK）和PBMC细胞作为对照。结果：源于健康人和宫颈癌患者的CIK细胞间的增殖活性无明显区别（P〉0.05）。表型分析结果表明,两种来源的CIK细胞中CD3~＋CD56~＋双阳性细胞均得到了大量扩增,宫颈癌患者CIK细胞中CD3~＋CD56~＋双阳性细胞在实验开始前约占0.13%,到实验后第28天上升到25.8%。体外实验表明,宫颈癌患者的CIK细胞杀伤宫颈癌HeLa细胞的细胞毒活性明显高于PBMC细胞。裸鼠体内实验表明,宫颈癌患者CIK细胞能够显著抑制肿瘤的生长,其抑瘤率可达80.6%,高于LAK细胞的59.1%和PBMC细胞的38.3%（P〈0.01）。CIK治疗后肿瘤体积明显比空白对照组缩小（P〈0.05）。结论：宫颈癌患者CIK细胞具有较强的体内外抗宫颈癌细胞活性,有可能用于临床上宫颈癌的过继性免疫治疗。     

miR-532抑制Sema4C逆转宫颈癌细胞上皮间质转化及增加对顺铂化疗的敏感性

目的:探讨miR-532抑制Sema4C逆转宫颈癌细胞上皮间质转化及增加对顺铂化疗敏感性的作用。方法:检测宫颈癌细胞Caski经过沉默Sema4C表达后EMT标志物表达水平;利用Transwell迁移与侵袭实验检测沉默Sema4C表达所引起的宫颈癌细胞Caski迁移与侵袭能力变化;预测Sema4C是miR-532直接的靶基因并用双荧光素酶实验检测荧光素酶活性;Western blotting及qRT-PCR检测表达miR-532后EMT标志物E-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白表达水平及mRNA表达水平;利用Transwell迁移与侵袭实验检测Caski细胞经过转染miR-532 mimic后迁移、侵袭能力的变化;CCK8检测过表达 miR-532及沉默 Sema4C对宫颈癌细胞顺铂化疗敏感性的影响。结果:Sema4C参与调节宫颈癌细胞Caski上皮间质转化,下调Sema4C可逆转这一过程;Sema4C是miR-532直接的靶基因;miR-532可逆转宫颈癌细胞的EMT;过表达miR-532及沉默Sema4C能显著提高宫颈癌细胞对顺铂敏感性。结论:miR-532通过抑制靶基因Sema4C的表达水平在宫颈癌中扮演抑癌基因的角色,逆转了宫颈癌细胞Caski的上皮间质转化及增加对顺铂化疗的敏感性。