检测伤寒杆菌蛋白抗原的酶联免疫吸附试验

地区性伤寒的诊断主要靠血培养分离伤寒杆菌,但要几天才能得出结果.一些患者在采取标本前已用抗生素治疗,出现假阴性结果.检测抗伤寒杆菌抗体的各种免疫试验广泛地使用肥达氏试验,但由于常出现假阳性和假阴性,其实用价值受到限制.作者建立了一个检测能引起患者抗体反应和动物保护性免疫的伤寒杆菌蛋白抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA),用以诊断地区性伤寒.现将方法简介如下:     

快速酶联免疫吸附试验检测HBsAg

我们对常规检测HBsAg 的ELISA法加以鞣化载体、应用聚乙二醇(PEG)、提高酶浓度等措施,建立了一种快速法,全程仅45分钟,与常观法作多项对比实验效果较好。     

用酶联免疫吸附试验检测腺病毒

从临床标本分离腺病毒,最早用的一种方法是组织培养,虽此法敏感,但从接种标本到出现细胞病变(CPE)的时间较长,而且不恒定。一般认为CPE出现的速度与感染的病毒量或腺病毒的型别有关。标本中病毒量少时,CPE将长达28天才出现,最后还须用补体结合试验或免疫荧光方法鉴定。这两种方法均可检测病毒复制过程中过量合成的六邻体亚单位抗原。如在CPE出现前能检测少量腺病毒抗原,则可加速诊断。本文介绍了用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染细胞提取液中的腺病毒抗原。其方法是用纯化腺病毒5型六邻体抗原免疫的豚鼠抗体,提取球蛋白后吸附于聚苯乙烯板,置37℃     

酶联免疫吸附试验检测影响因素探讨

酶联免疫吸附试验（ELISA）是目前临床免疫学检验领域的主流检测技术之一,而且其反应中各组分的成本较为低廉,特别是对肝炎病毒的监测,最基层的医院也在开展。因其操作简单,灵敏度高,特异性好,达ng水平,经济安全,不需要特殊设备等特点而在临床上广泛应用。但是由于其操作步骤复杂,     

酶联免疫吸附试验检测A群链球菌

A链的诊断主要靠细菌分离培养和生化反应,此法费时,培养条件要求高,给及时确诊带来一定困难.我们建立了ELISA 法来诊断A 链感染.一、材料和方法     

利用单克隆抗体酶联免疫吸附试验检测vWF

血管性假性血友病（vWD）是一种较为常见的遗传性出血性疾病，据统计，其发病率不亚于血友病A。本病的确诊及分型有赖于SDS—琼脂糖凝胶电泳分析[1]，检测血浆中vWF的含量可以初步诊断。以往国内多用火箭电泳法（Lawrell’s）检测血浆中vWF的含量[2]，该方法欠灵敏、耗时且较复杂。本文利用抗vWF的单克隆抗体ELISA检测vWF，并与火箭电泳法加以比较，结果如下。1材料与方法1．1双抗体夹心法固相酶免疫试验定量测定人血浆vWF该药企由苏州医学院止血与血栓研究室提供．操作方法①抗体包被：取冻干的抗VWF单克隆抗体SZ－29一支，加0…     

应用酶联免疫吸附试验检测Sm抗体

应用酶联免疫吸附试验检测Ｓｍ抗体，阳性率为９７．４％，与对流免疫电泳比较，具有良好的灵敏性及特异性，且简单、快速，适于ＳＬＥ早期诊断和鉴别诊断。     

细胞酶联免疫吸附试验

免疫细胞表面表达有多种抗原或受体 ,如各种ＣＤ系列分子等 ,有的可作为临床实验室检定Ｔ、Ｂ细胞和ＣＤ细胞等参与免疫应答反应细胞的特异性标志 ,或用以研究细胞分子和粘附分子及其相应受体的变化 ,或用以探讨诸多表面分子参与免疫应答的机制 ,等等。现有一些检测上述分子的方法 ,如免疫细胞化学法 ,荧光免疫染色法等。以流式细胞仪检测法 (ＦＡＣＳ)最为简便可靠 ,且能定量 ,缺点是需要贵重的仪器和成套的试剂 ,费用高。从方法学角度分析 ,还有几个问题限制了ＦＡＣＳ的广泛应用 ,如受检细胞为粘附性细胞时需要胰酶处理 ,因而可能破坏某…     

细胞酶联免疫吸附试验

免疫细胞表面表达有多种抗原或受体,如各种CD系列分子等,有的可作为临床实验室检定T、B细胞和CD细胞等参与免疫应答反应细胞的特异性标志,或用以研究细胞分子和粘附分子及其相应受体的变化,或用以探讨诸多表面分子参与免疫应答的机制,等等.     

质粒DNA抗原酶联免疫吸附试验检测抗双链DNA抗体的研究

目的 建立以质粒DNA为抗原的检测血清抗双链DNA(ds-DNA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法及探讨其临床应用价值。方法 将原核表达载体质粒pBV220用碱裂解法提取纯化DNA后，按1：150稀释包被在多聚-L-赖氨酸处理的微孔板上，以辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)为酶标记物，建立检测血清抗双链DNA抗体的ELISA方法。并以短膜虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)为参比方法，对6_4例系统性红斑狼疮(SLE)、8例混合性结缔组织病、17例类风湿性关节炎患者的血清抗ds-DNA抗体进行对比检测。结果 紫外分光法于波长260nm测DNA浓度为1．54g/L。ELISA抗ds-DNA法和IIF法检测3组患者阳性率分别为23．4％和17．2％、12．5％和12．5％、11．8％和5．9％，符合率分别为93．8％、100％、94．1％。以经典IIF法为金标准，ELISA检测抗ds-DNA抗体的特异性为93．4％，敏感性为100％。结论 用质粒DNA作抗原建立的检测血清抗ds-DNA抗体具有良好的精密度、敏感性和特异性，检出率高于IIF法，有助于对SLE的诊断和病情活动程度进行监测。     

重组抗原酶联免疫吸附试验检测人疱疹病毒6型抗体的研究

人疱疹病毒6型（HHV-6）与幼儿急疹（ES）、良性和恶性淋巴增生性疾病、慢性疲劳综合征及多发性硬化症等发生有关，在免疫功能低下患者可引起致死性感染。HHV-6与同属B疱疹病毒亚科的人巨细胞病毒（HCMV）及人疱疹病毒7型（HHV-7）存在抗原交叉，选择特异性高的免疫原性蛋白作为抗原，是提高HHV-6特异性抗体检测准确性的关键。本研究选择HHV-6特异性被膜蛋白101K编码基因进行原核表达，     

酶联免疫吸附试验竞争法检测HBeAg的探讨

目的 研究酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标本与辣根过氧化物酶(HRP)标记的乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb-HRP),加入间隔时间对HBeAg检测结果的影响.方法 选择乙型肝炎病毒(HBV)标志物检测结果为阴性的标本分为甲、乙两组,甲组:加样后延长室温放置时间再加入HBeAb-HRP;乙组:加样同时加入HBeAb-HRP,延长室温放置时间.结果 甲组加样方式对HBeAg检测结果影响明显,且加样和加入HBeAb-HRP的间隔时间越长,标本的假阳性越多;乙组加样方式对HBeAg检测结果基本无影响.结论 甲组的不公平竞争在不同时间内可出现程度不等的HBeAg假阳性;乙组加样方式可最大限度地减少HBeAg假阳性,以确保检测结果的准确性.     

酶联免疫吸附试验检测HBsAg的应用体会

目的总结酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HBsAg的经验,提高乙肝检测水平。方法利用酶标记物作为指示物,以抗原-抗体的特异性结合反应为基础,在酶标记物同抗原-抗体结合后,由于酶的催化放大作用,使得ELISA既保持抗原抗体反应的特异性又体现酶催化放大的敏感性。针对检测过程,总结应用体会。结果仪器设备、试剂、标本、操作过程、环境、质量控制等方面都会影响检测结果,操作时一定要严格控制。结论控制影响检测结果的因素,可为临床提供准确可靠的检测结果。     

酶联免疫吸附试验检测HBsAg多聚白蛋白受体

一、材料和方法1.人血白蛋白(上海生研所,批号:858102)。PHSA 由人白蛋白经戊二醛聚合而成。2.HRP-抗HBs:本室制备。3.e 系统试剂(上海传染病院、武汉中心血站)(批号86)。     

酶联免疫吸附试验检测假阳性结果分析

ELISA法对IgG IgM都有很好的检测能力，因其灵敏度高、价格低廉、操作方便、结果客观，在国内广泛应用。但在工作中遇到的最大问题是出现假阳性的问题，而大多数是由弱阳性反应引起的，这给医疗工作带来麻烦，甚至引起医疗纠纷。为避免假阳性结果的出现现将产生假阳性的原因分析如下。     

酶联免疫吸附试验应用体会

乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测已被确认为乙型肝炎(HBV)感染的实用指标之一。对抗 HBc(乙型肝炎核心抗体)的检测是更为灵敏的乙型肝炎病寿复制的重要指标。我们采用酶联免疫吸附试验(ELiSA)检测抗 HBc 提高了乙型肝炎的诊断率。特别是对 HBsAg 阴性检测抗 HBc 意义更大。材料及实验结果     

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎e抗原的初步研究

我们于1980年初开始e系统提纯并用自己纯化的e抗体免疫球蛋白G(抗-eIgG),以改良过碘酸钠氧化法制备抗-eIgG酶结合物,用ELISA检测e系统获得较满意的结果。现报道如下。     

酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg的分析体会

乙型肝炎表面抗原的检测是诊断乙型肝炎的主要指标。随着检测技术的不断发展，ELISA一步法检测HBsAg的试剂、方法均已成熟，因其方法简便、灵敏度高、特异性强、实验要求条件不高而被各级医疗机构广泛采用。但其方法的缺点是干扰因素特别多，在实际操作中每一步控制不好都可能影响检测结果的质量，现针对操作中可能出现的问题进行分析，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。     

间接酶联免疫吸附试验检测血清抗凝血酶原抗体

目的 建立人抗凝血酶原抗体IgG、IgM的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法.方法 纯化人凝血酶原浓度10 μg/ml包被于高吸附活性的聚氯乙烯微孔中,用山羊血清封闭,血清在Tirs盐酸缓冲生理盐水并含有1%牛血清清蛋白的溶液中按1∶100稀释,第2抗体为辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG或IgM,稀释度为1∶10 000,以四甲基联苯胺为底物,1 mmol/L HCl为终止液建立的ELISA反应体系检测血清中的抗凝血酶原抗体(aPT)-IgG与IgM.结果 本实验建立检测血清中aPT-IgG、IgM的ELISA法,稳定性、特异性及重复性佳,与国外商品试剂盒有很好的相关性,有较好的准确度及精密度.结论 本实验应用的间接ELISA半定量检测aPT,适合于实验研究及临床应用.     

酶联免疫吸附试验检测肺螨病螨虫抗体

目的建立一种特异、敏感的诊断肺螨病的新方法。方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清中尘螨性抗体。结果在５８例已确诊的肺螨病患者中，若以吸光度０．３作为阈值，肺螨病患者的阳性符合率为８３％，非肺螨病呼吸系统疾病患者的阴性符合率为９０％，正常人的阴性符合率为９５％。结论ＥＬＩＳＡ检测肺螨病患者血清抗体具有敏感性高、特异性强的优点，可用于肺螨病的诊断和重点人群的流行病学调查