骨髓增生异常综合征患者骨髓细胞的免疫表型分析

目的　了解骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞的分化抗原的表达情况。方法　采用流式细胞术的CD45 -侧向散射光 (SS)设门的方法 ,检测 14例骨髓增生异常综合征患者 ,16例急性髓系白血病 (AML)和 5例骨髓形态学正常的非血液病患者的骨髓和干 /祖系分化抗原。结果　MDS患者原始细胞群所占比例为 (11 2± 7 3 ) % ,明显高于对照组而低于AML组。该群细胞的髓系和干 /祖系分化抗原 ,MDS及AML组均存在较高的阳性表达 ;71 4%的MDS患者低SS表达的粒细胞群明显增加 ;2 8 6%的MDS患者髓系细胞群的部分细胞表达淋系抗原CD7。结论　MDS患者骨髓细胞存在复杂异常的分化抗原表达 ,通过免疫表型分析有助于MDS的诊断。     

骨髓增生异常综合征骨髓组织中类胰酶阳性肥大细胞水平的研究

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓组织中类胰酶阳性的肥大细胞表达水平.方法:用骨髓塑料冷包埋技术结合免疫组织化学的方法检测10例健康供者,8例IDA患者、20例MDS(11例低危组,9例高危组)、17例急性髓性白血病(AML)患者骨髓类胰酶阳性的肥大细胞的数量,并作对比分析.结果:IDA组(63.43±44.29)与健康供者的类胰酶阳性肥大细胞数(61.43±56.19)类似(P值>0.05).MDS组(195.95±117.39)较健康供者类胰酶阳性的肥大细胞数增多(P值<0.05).MDS高危组(229.25±139.68)较低危组(171.73±98.07)高,但无统计学差异(P值>0.05));AML组(608.44±342.58)较MDS组明显增多(P值<0.01).各组类胰酶阳性肥大细胞数与外周血常规、骨髓原始粒细胞数、嗜酸性粒细胞数、嗜碱性粒细胞数无相关性.结论:MDS和AML患者骨髓组织中均存在类胰酶阳性肥大细胞数目异常增多现象,它可能在MDS的病理发生发展中起一定作用.     

含羟基喜树碱的预激方案诱导治疗高危骨髓增生异常综合征及骨髓增生异常综合征转化的急性髓系白血病的疗效观察

目的 观察含羟基喜树碱的低强度化疗CHG(羟基喜树碱、阿糖胞苷和粒细胞集落刺激因子)预激方案诱导治疗高危骨髓增生异常综合征(MDS)及MDS转化的急性髓系白血病(AML)的疗效和毒副作用及其与CAG(阿克拉霉素、阿糖胞苷和粒细胞集落刺激因子)方案的比较.方法 按自愿原则选择32例(CHG组)未接受化疗的高危MDS及MDS转化的AML患者给予CHG方案诱导治疗;29例(CAG组)未接受化疗的高危MDS及MDS转化的AML患者给予CAG方案诱导治疗,观察并比较1个疗程后两组患者的临床疗效及毒副作用.结果 1个疗程结束后,CHG组患者中完全缓解(CR)14例,部分缓解(PR)7例,血液学改善1例,总有效率68.8%;CAG组患者中CR 12例,PR 6例,血液学改善3例,总有效率72.4%.两组的CR率和总有效率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).两组各项毒副作用发生情况比较,差异亦均无统计学意义(P＞0.05).随访发现,CHG组14例CR患者中3例因心律失常仅接受HA(三尖杉酯碱+阿糖胞苷)/EA(足叶乙甙+阿糖胞苷)方案巩固及强化,已全部复发.11例患者交替接受HA/AA(阿克拉霉素+阿糖胞苷)/TA(拓扑替康+阿糖胞苷)/MA(米托蒽醌+阿糖胞苷)/IA(去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷)等方案化疗,1例失访,7例分别在3~16个月复发,3例进展为AML;4例缓解期超过6个月的复发患者中有2例取得CR,很快再次复发.CAG组12例CR患者,2例失访,8例分别在2.6~17个月复发,2例进展为AML.5例复发患者再用CAG方案,未取得CR,3例应用CHG方案,1例取得CR,1例取得PR.结论 CHG方案治疗中高危MDS和MDS转化的AML安全有效,CR后应强化治疗或多种方案交替治疗,避免早期复发.     

骨髓增生异常综合征患者骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用

目的本研究通过检测骨髓增生异常综合征-难治性贫血(MDS-RA)及难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)患者骨髓间充质干细胞(MSC)转化生长因子(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)的表达,探讨MSC的免疫抑制作用在MDS发病中的意义。方法分离、培养23例MDS患者(MDS-RA组14例,MDS-RAEB组9例)及对照组12例的骨髓间充质干细胞,比较3组MSC的形态,采用实时定量PCR的方法检测骨髓MSC内转化生长因子(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测骨髓MSC分泌的TGF-β1、HGF的浓度。结果 3组MSC的形态无明显差异,MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF水平明显低于对照组(P均<0.05),MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF无明显差异(P均>0.05)。结论 MDS-RA与MDS-RAEB表达TGF-β1、HGF mRNA的水平及分泌TGF-β1、HGF的浓度水平均较正常减低,导致MSC免疫抑制能力减低,可能与MDS免疫监视低下,出现异常单克隆造血相关。     

骨髓增生异常综合征及进展期端粒和端粒酶变化

目的　探查端粒 (telomere)和端粒酶 (telomerase)在骨髓增生异常综合征 (MDS)患者的MDS期和转化为急性髓性白血病 (AML)期的变化和意义。方法　 8例患者 ,18个不同病期的标本 (外周血 11例 ,骨髓 7例 )被获得。Southern杂交放射性同位素探查端粒长度 ;末端重复放大程序(telomeicrepeatamplificationprotocol,TRAP)和定量PCR测定端粒酶。结果　MDS患者的端粒长度 (6 5 8kb± 2 81kb)较年龄匹配的正常人端粒长度 (9 73kb± 0 79kb)明显缩短 (P <0 0 5 )。与正常对照比较 ,8例患者中仅 1例端粒未缩短 ;其余 7例均缩短 ,其中 2例在MDS期尚正常 ,AML期时明显变短 ;另 5例患者在MDS期和AML期端粒均缩短。全部患者均可测得端粒酶 ,AML期的端粒酶活性(36 91± 2 0 5 2 )较MDS期的端粒酶活性 (2 0 49± 11 0 1)明显增加 (P <0 0 5 )。结论　MDS患者的端粒缩短和端粒酶活性增强的现象可能与病情进展有关 ,提示预后不良     

CAG方案治疗中高危骨髓增生异常综合征和老年急性髓系白血病的临床分析

目的探讨CAG方案[阿糖胞苷(Ara-C),阿克拉霉素(Acla),粒细胞集落刺激因子(G-CSF)]治疗高危骨髓增生异常综合征(MDS)和老年急性髓系白血病(AML)的临床疗效,并观察和分析其安全性。方法选择应用CAG方法治疗的MDS和AML患者27例,为观察组,选取应用标准化甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷(IA)方案治疗的AML患者12例作为对照组。治疗1个疗程后复查骨髓细胞学检查,判断临床疗效,计算有效率(RR)、疾病控制率(DCR);评估患者无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)并观察患者不良反应。结果观察组PFS和OS均高于对照组(均<0.05);观察组RR和DCR均高于对照组(均<0.05)。观察组不良反应平发生频次低于对照组(<0.05)。结论CAG方案治疗中高危MDS和AML具有较好的临床疗效,能够降低患者不良反应,延长患者生存时间。     

骨髓增生异常综合征和急性髓细胞白血病患者血清转化生长因子-β1的检测

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓细胞白血病(AML)患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)水平及意义。方法:采用定量双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MDS 32例、AML 21例及16例正常对照者血清中TGF-β1水平。结果:初诊AML患者与MDS患者血清TGF-β1水平均显著低于正常对照组(均P<0.01)。AML患者达完全缓解时TGF-β1水平恢复正常,未缓解和复发患者TGF-β1水平与初诊患者无显著性差异(P﹥0.05)。MDS低危型患者血清TGF-β1水平与高危型及初治AML患者相比为高,但三者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:检测AML和MDS患者血清TGF-β1水平变化有助于判断病情,评价疗效,估计预后。     

骨髓活检在骨髓增生异常综合征诊断中的临床意义

目的:探讨骨髓活检与骨髓涂片在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断中的价值,以利于有效诊治。方法:对25例MDS患者骨髓活检采用塑料包埋薄切片苏木素-伊红染色,骨髓涂片采用瑞氏染色。结果:所有患者均存在不同程度的血细胞发育异常的形态学表现。骨髓活检与骨髓涂片增生程度相符者12例(48%),骨髓活检增生程度高于骨髓涂片者11(44%)例,骨髓涂片高于骨髓活检者2例(8%),骨髓涂片与骨髓活检相结合有助于MDS的诊断与分型。结论:骨髓活检对MDS的诊断、治疗及预后有明显的指导意义,可作为MDS的常规检查。     

HAG方案治疗中高危骨髓增生异常综合征及低增生髓系白血病

目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)、阿糖胞苷(Ara-C)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合方案(HAG 方案)治疗中高危骨髓增生异常综合征(MDS)以及低增生髓系白血病(AML)的临床疗效.方法:应用HAG方案治疗MDS 6例和AML 12例,1个疗程诱导治疗失败后继用1个疗程治疗,观察治疗的效果及不良反应.结果:...     

多发性骨髓瘤合并骨髓增生异常综合征转化为急性髓细胞白血病1例并文献复习

目的报告1例多发性骨髓瘤(MM)合并骨髓增生异常综合征(MPS)并转化为急性髓细胞白血病(AML)的病例,提高对这3种疾病相关性的认识。方法回顾性分析1例MM合并MDS转化为AML患者的临床资料,并进行相关文献复习。结果 MM和MDS可能来源一个克隆或是二个克隆,MDS高度转化为AML。结论 MM并发MDS病转化为AML病例报道少见,预后较原发性明显差。治疗相关、患者自身条件和疾病本身等因素可能参与其中,其相关性和治疗方法需要进一步明确。     

Immunophenotype of myeloid cells in myelodysplastic syndromes and its clinical implications.

OBJECTIVE: To explore the immunophenotype of myeloid cells in myelodysplastic syndyomes (MDS) and its clinical implications. METHODS: A panel of monoclonal antibody was used to detect CD13+, CD33+, CD15+ and CD14+ antigens on the membrane surfaces of myeloid cells in the bone marrow from 51 MDS, 21 aplastic anemia (AA), 21 paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH) patients. 10 acute myeloblastic leukemia (AML) patients and 15 normal subjects by immunoenzymatic assay. The morphology and chromosome karyotype of bone marrow cells of MDS patients were also examined. RESULTS: CD14+, CD13+ and CD33+ cells in the bone marrow were more in MDS patients than in normal controls, AA patients and PNH patients. CD15+ cells in the bone marrow were less in MDS patients than in normal controls. CONCLUSIONS: The percentages of CD14+, CD13+ and CD33+ positive cells in the bone marrow of MDS patients were related to the percentage of myeloblasts, the chromosomal aberrations and the response to treatment. It indicated that there is immunophenotypic misexpression of myeloid cells in MDS patients. Immunophenotype analysis of myeloid cells might be useful for the diagnosis and treatment of MDS patients.     

Evi-1 and MDS1-Evi-1 genes in pathogenesis of myelodysplastic syndromes and post-MDS acute myeloid leukemia

Ｔｈｅｅｃｏｔｒｏｐｉｃｖｉｒｕｓｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎｓｉｔｅ1(Ｅｖｉ1)ｇｅｎｅ,ｌｏｃａｔｅｄａｔｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｂａｎｄ3ｑ26,ｗａｓｏｒｉｇｉｎａｌｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓａｇｅｎｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｒｅｔｒｏｖｉｒａｌｌｙｉｎｄｕｃｅｄｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａｉｎｍｉｃｅ1,2　ＭａｎｙｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｔｈｅＥｖｉ1ｇｅｎｅｉｓｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋｅｍｉａｗｉｔｈ3ｑ26,ｉｎｖｏｌｖｉｎｇｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌａｂ…     

Transformation of myelodysplastic syndromes into acute myeloid leukemias

Background Myelodysplastic syndromes (MDSs), also called preleukemias, are a group of myeloid hematopoietic malignant disorders. We studied the transformation of MDS into acute myeloid leukemia (AML).Methods Leukemic transformation in 151 patients with MDS was dynamically followed up. The clinical manifestation, peripheral blood and bone marrow condition, karyotypes, immunophenotypes, response to treatment, and prognosis of AML evolution from MDS (MDS-AML) were also observed.Results During the course of this study, over the past eight years and seven months, 21 (13.91%) of 151 MDS patients progressed to overt leukemia, with a median interval of 5 (1-23) months. There were no significant differences between rates of leukemic transformation in comparison with the refractory anemia (RA), RA with excess of blasts (RAEB), and RAEB in transformation (RAEB-t) patient groups. Transformation occurred either gradually or rapidly. There were five parameters positively correlated to leukemic transformation: under 40 years of age, pancytopenia of 3 lineages, more than 15% blasts in the bone marrow, at least two abnormal karyotypes, and treatment with combined chemotherapy. All of the 21 patients with leukemia suffered from MDS-AML, and most of them were M2, M4, or M5. Two (9.52%) MDS-AML patients developed extramedullary infiltration. Leukopenia was found in 47.62% of these patients. Two thirds of these patients, whose bone marrows were generally hypercellular, suffered from neutropenia. After developing AML, 8 (47.06%) patients developed abnormal karyotypes. High expression of immature myeloid antigens, including CD33 ［(49.83±24.50)%］, CD13 ［(36.38±33.84)%］, monocytic antigen CD14 ［(38.50±24.60)%］, and stem cell marker CD34 ［(34.67±30.59)%］, were found on bone marrow mononuclear cells from MDS-AML patients after leukemic transformation. In some cases, lymphoid antigens, such as CD5, CD7, CD9, and CD19, coexisted with myeloid antigens. A low complete remission rate (31.25%) and a short survival time, with median survival of 6 (1-28) months, were found in patients with MDS-AML treated by induction chemotherapy.Conclusions MDS has a high risk of developing into AML, either gradually or rapidly. Patients with MDS-AML have specific biological characteristics and a worse prognosis.     

不同来源的人间质干细胞分离与基本生物学特性研究

目的：分离并比较人胚胎骨髓、成人骨髓和新生儿脐血来源间质干细胞（MSC）的生物学特性,为组织工程选取种子细胞提供实验依据.方法： 用贴壁方法分离三种来源的间质干细胞,观察其形态与生长曲线,并用流式细胞仪测定其表面标志.结果： 骨髓标本均可成功分离出MSC,但是人胚胎骨髓MSC增殖能力要明显强于成人骨髓MSC,而脐血分离MSC没有得到成功.结论： 人胚胎骨髓MSC是很好的组织工程种子细胞,成人骨髓MSC的增殖能力相对较弱,应用受到一定的限制.脐血MSC分离与扩增有待进一步研究.     

CAG方案治疗AML和高危MDS患者的疗效及生存分析

目的 评价CAG方案对初治、难治、复发性急性髓系白血病（AML）和高危骨髓增生异常综合征（MDS）患者的临床疗效和不良反应,分析影响患者长期生存的相关因素。方法 对61例AML患者（其中初治27例,复发16例,难治18例）和9例高危MDS患者实施CAG方案诱导缓解治疗。治疗前后进行心电图,肝、肾功能和骨髓检查,观察CAG方案的不良反应。根据患者的临床表现、外周血和骨髓细胞学检查结果评价近期疗效;随访分析患者总体生存期（OS）和无病生存期（DFS）,评判CAG方案的长期疗效。运用生存曲线的Log-rank检验分析影响患者长期生存的因素。结果 CAG方案治疗一个疗程的总有效率为71%,其中34例（49%）达到完全缓解。本组中位随访时间45个月,中位OS为28个月,中位DFS为23个月。年龄、初发时乳酸脱氢酶（LDH）水平、CAG方案治疗一个疗程是否达缓解或是否采用HD-Ara-C作为巩固治疗方案均是患者OS和DFS的影响因素。临床不良反应主要为骨髓抑制,其中粒细胞缺乏（中性粒细胞<0.5×109/L）的中位持续时间为13 d,血小板减少（血小板<20×109/L）中位持续时间9 d。结论 采用CAG方案治疗初治、难治、复发AML和高危MDS患者,不良反应轻,远期疗效较好。发病年龄、发病时LDH水平、是否一个疗程缓解及是否予以HD-Ara-C作为巩固治疗方案是影响患者生存期的主要因素。     

兔骨髓间充质干细胞的提取与体外培养

目的：评价兔自体骨髓间充质干细胞作为半月板组织工程理建中种子细胞的可能性。方法;采用体外细胞培养技术将兔骨髓间充质干细胞自骨髓血中分离、纯化和和培养,并研究其增殖及生长特征。结果：原代培养及传代培养显示,兔自体骨髓间充质干细胞具有活跃的增殖增能力。结论：兔自体骨髓间充质干细胞生物年龄较为年轻,用作半月板组织工程 种子细胞具有较强的可行性。     

白血病患者外周血Flt3基因表达

目的 检测白血病患者外周血Flt3在不同类型白血病中的表达及分布情况．阐明Flt3的表达与疾病发生和发展的关系,与骨髓标本Flt3的表达作对照,确定检测外周血Flt3对白血病基因诊治的临床意义。方法 采用RT—PCR方法分析34例白血病患者外周血及部分骨髓标本Flt3的表达。结果 19例急性髓系白血病患者中16例阳性（84．2％）,其中6例强阳性,1例化疗后完全缓解的M3患者Flt3表达阳性;6例急性淋巴细胞白血病中3例阳性（50％）;5例慢性淋巴细胞白血病中2例（1例慢性期,1例急变期）阳性;2例骨髓异常综合征中1例阳性;2例急性混合细胞白血病均阳性。7例骨髓与外周血配对标本中阳性率差别无统计学意义。10例正常人表达均阴性。结论 外周血可以替代骨髓作为检测Flt3表达;急非淋患者Flt3表达强弱与外周血白细胞数相关（P〈0．05）;Flt3表达可作为白血病基因诊断及微小残留病灶的检测标志。     

伴有三系骨髓病态造血表现的初发急性髓样白血病(附8例报告)

目的 探讨伴有三系病态造血的初发急性髓样白血病的临床特点,治疗反应及与骨髓增生异常综合征的关系。方法 对８８例初发急性髓样白血病治疗前后的骨髓涂片按ＦＡＢ标准判定是否存在三系病造血,结合临床检验,化疗反应及与骨髓增生异常综合征的关系进行分析。结果８例（９．１％）伴有三系病态造血,见于除急性早幼粒细胞性白血病（Ｍ３）以外的所有ＦＡＢ亚型。这类患者年龄相对较轻,发病时血小板计数正常或明显增高,治疗反应     

AA、MDS和AML患者CD4~+T细胞亚群的变化及其临床意义

目的探讨CD4+T细胞亚群(Th1、Th2、Th17及Treg细胞)在再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性髓系白血病(AML)患者免疫发病机制中的作用,为临床治疗提供实验依据。方法采用流式细胞术检测AA组25例,MDS组48例[其中难治性贫血(MDS-RA)22例,难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)26例],AML组12例和正常对照组8例的外周血单个核细胞Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例并对比分析,评价各组的细胞免疫状态。结果与正常对照组相比,AA组Th1、Th17细胞及Th1/Th2升高,而Th2和Treg细胞比例减低(P<0.05);MDS组Th1、Th2细胞、Th1/Th2与正常对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),而Th17和Treg细胞比例升高(P<0.05);MDS-RA组Th1、Th17细胞比例和Th1/Th2均升高(P<0.05),Th2细胞比例减低(P<0.05),而Treg细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);MDS-RAEB组和AML组Th1、Th17细胞比例和Th1/Th2减低(P<0.05),Th2和Treg细胞比例升高(P<0.05)。结论 AA、MDS不同阶段与AML患者的细胞免疫状态不同,在AA和MDS早期阶段,免疫因素介导的凋亡过度是骨髓衰竭的主要原因;而在MDS晚期和AML阶段,异常克隆细胞的大量积聚可能是其主要原因。