马尾松树皮提取物对人体外癌细胞的广谱作用研究

目的：研究马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract，PMBE)对体外培养人癌细胞株的作用及其广谱性；方法：用四甲基偶氮唑蓝比色法(measurement of trititaed thymidine incorporation,MTT)，经四氮唑蓝染色测定PMBE处理前、后体外培养人癌细胞吸光度值的变化，评估其对不同癌细胞株的体外作用；结果：马尾松树皮提取物对体外培养的人癌细胞有广谱抑制作用，但不同癌细胞对其有不同程度的浓度或剂量依赖性；结论：马尾松树皮提取物可用于抗癌药物的筛选和研发。     

小剂量人参多糖对人肝癌BEL-7402细胞生长抑制与诱导分化作用初探

目的：探讨小剂量人参多糖（ginseng polysaccharides,GPS）对人肝癌BEL-7402细胞分化的诱导作用。方法：体外培养人肝癌BEL-7402细胞,GPS组加入10 mg·L^-1人参多糖孵育,同时设对照组,采用CCK8实验检测人肝癌BEL-7402细胞增殖情况;显微镜、透射电镜观察细胞形态及亚细胞结构的变化;放射免疫法检测甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）的分泌量;流式细胞术检测细胞周期。结果：人参多糖能抑制人肝癌BEL-7402细胞的增殖（P<0.05）;人参多糖处理人肝癌BEL-7402细胞后细胞形态及亚细胞结构趋于成熟分化;甲胎蛋白（AFP）分泌量明显下降,白蛋白（ALB）的分泌量明显升高,与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.05）;GPS组G1期细胞比例显著高于对照组（P<0.05）,细胞被阻滞G0/G1期。结论：小剂量人参多糖对人肝癌BEL-7402细胞生长有抑制作用,可能与诱导分化有关。     

板蓝根高级不饱和脂肪组酸的体外抗人肝癌BEL-7402细胞活性

目的 :研究板蓝根高级不饱和脂肪组酸体外抗人肝癌BEL 74 0 2细胞的活性。方法 :MTT法测定细胞毒作用 ,集落形成实验观察药物对肝癌细胞增殖的抑制作用 ,PCR ELISA试剂盒测定细胞的端粒酶活性。结果 :板蓝根高级不饱和脂肪组酸能抑制BEL 74 0 2细胞的增殖 ,其IC50 为 0 6mg·mL-1,有促使肿瘤细胞向正常细胞逆转的趋势 ,可降低端粒酶活性的表达。结论 :板蓝根高级不饱和脂肪组酸具有体外抗肿瘤活性     

红霉素逆转人肝癌细胞BEL-7402多药耐药性的研究

目的　研究红霉素 (ERY)对BEL 740 2细胞 (人肝癌细胞 )多药耐药性的逆转作用。方法　将BEL 740 2细胞连续培养在含阿霉素 (ADM )的培养液中诱导耐药细胞株BEL 740 2 /ADM ,用cell ELASA法检测细胞膜表面P gp的表达 ,细胞毒试验采用MTT法 ,用荧光分光光度法测定细胞内ADM浓度。结果　BEL 740 2 /ADM细胞表面P gp高度表达 ,除对ADM耐药外 ,对长春新碱 (VCR)和丝裂霉素(MMC)也有不同程度的交叉耐药 ;ERY可增强ADM、VCR、MMC对BEL 740 2 /ADM细胞的增殖抑制作用 ,可增加BEL 740 2 /ADM细胞内ADM的浓度而对细胞膜表面P gp的表达没有影响。结论　ERY通过竞争性地饱和BEL 740 2 /ADM细胞表面P gp通道 ,使细胞内药物外排减少、浓度增加 ,从而发挥对BEL 740 2 /ADM细胞多药耐药性的逆转作用     

美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402作用机制的研究

目的探讨美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402的作用机制。方法 MTT比色法观察美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染色法研究美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402凋亡的影响,流式细胞术检测线粒体膜电位,DNA Ladder实验检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达。结果美洲大蠊提取物可抑制人肝癌细胞Bel-7402增殖,IC50为28.2μg.mL 1,并可诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡,降低线粒体膜电位。DNA Ladder实验可见明显的梯形电泳图谱,蛋白印迹法显示Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,Caspase-8蛋白表达无明显变化。结论美洲大蠊提取物可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡。     

红霉素逆转人肝癌细胞BEL-7402多药耐药性的研究

目的研究红霉素(ERY)对BEL-7402细胞(人肝癌细胞)多药耐药性的逆转作用.方法将BEL-7402细胞连续培养在含阿霉素(ADM)的培养液中诱导耐药细胞株BEL-7402/ADM,用cell-ELASA法检测细胞膜表面P-gp的表达,细胞毒试验采用MTT法,用荧光分光光度法测定细胞内ADM浓度.结果 BEL- 7402/ADM细胞表面P-gp高度表达,除对ADM耐药外,对长春新碱(VCR)和丝裂霉素(MMC)也有不同程度的交叉耐药;ERY可增强ADM、VCR、MMC对BEL-7402/ADM细胞的增殖抑制作用, 可增加BEL-7402/ADM细胞内ADM的浓度而对细胞膜表面P-gp的表达没有影响.结论 ERY通过竞争性地饱和BEL-7402/ADM细胞表面P-gp通道,使细胞内药物外排减少、浓度增加,从而发挥对BEL-7402/ADM细胞多药耐药性的逆转作用.     

姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α表达的影响

目的探讨姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中H IF-1α表达的影响以及蛋白酶体在其中的作用。方法以0、2.5、5、10、15、20μmol.L-1的姜黄素处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,W ST-8法和台盼蓝染色法分析细胞增殖和活力,采用RT-PCR和W estern B lot方法检测肝癌细胞中H IF-1α的表达;以0、10μmol.L-1姜黄素、10μmol.L-1MG-132、10μmol.L-1姜黄素+10μmol.L-1MG-132处理人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6 h,采用W esternB lot方法检测肝癌细胞中H IF-1α的蛋白表达。结果①不同剂量的姜黄素对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组相比差异无显著性;②随着姜黄素浓度的增加,H IF-1α蛋白表达逐渐降低;③不同剂量的姜黄素对H IF-1αmRNA表达的影响与对照组相比差异无显著性;④MG-132能够逆转姜黄素对H IF-1α蛋白的减少。结论姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中H IF-1α蛋白表达是通过转录后机制和蛋白酶体途径。     

月腺大戟与狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖的影响对比研究

目的:对比研究月腺大戟与狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖的影响。方法:灌胃月腺大戟(0.097、0.485、0.2425g.kg-1)、狼毒大戟(0.05、0.025、0.0125g.kg-1)混悬液,每天1次,连续3d,末次给药后自大鼠腹主动脉采血,以分离的血清加培养液体外培养人肝癌细胞BEL-7402;MTT比色法测定生长抑制率;通过集落形成试验测定克隆形成率。结果:狼毒大戟对BEL-7402细胞增殖和克隆形成率有明显的抑制或降低作用,且与给药剂量呈正相关;月腺大戟对BEL-7402细胞增殖和克隆形成率无明显影响。结论:狼毒大戟对人肝癌细胞BEL-7402体外增殖抑制作用明显强于月腺大戟。     

掌叶半夏有效提取物单独对体外培养肝癌HepG2细胞的作用

目的观察中药掌叶半夏有效提取物半夏蛋白对体外培养肝癌HepG2细胞的作用。期待在临床上找到有效抑制肝癌的药物。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,分别用半夏蛋白及DDP（顺铂）处理细胞;用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,并应用MTT法检测细胞活性。结果半夏蛋白及DDP对肝癌HepG2细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量半夏蛋白可表现出对两种肿瘤细胞的抑制作用,同时,HepG2更加敏感。结论半夏蛋白对肝癌HepG2细胞有明显的抑制生长作用,同时,对各种肝癌细胞作用的程度有一定差别。     

力达霉素增强顺铂诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制研究力达霉素增强顺铂诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡作用及机制研究

目的 研究抗肿瘤抗生素力达霉素与顺铂的体外协同抗肿瘤作用及其机制。方法 采用克隆形成法、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33342和PI双荧光染色法、Western blot等方法。结果 力达霉素与顺铂联合对人肝癌BEL-7402细胞有很强的协同杀伤作用;可以使BEL-7402细胞的DNA 出现明显的梯状断裂；可以使阻滞于S期的BEL-7402细胞减少而使凋亡细胞比例明显增多；联合用药后BEL-7402细胞核出现明显的凋亡形态变化；使BEL-7402细胞内Bcl-2的表达显著降低。结论 力达霉素可以增强顺铂的抗肿瘤作用，提示力达霉素与顺铂联合有望应用于肿瘤联合化疗。     

经动脉介入联合射频消融加体外热疗治疗肝脏恶性肿瘤的临床疗效

目的探讨经动脉介入联合射频消融加体外热疗治疗原发性肝癌及转移性肝癌的临床疗效,进行评价。方法选取医院于2008年10月至2012年12月收治的100例原发性性肝癌、肝转移癌患者,随机分为联合治疗组（50例）和对照组（50例）二组,对照组患者应用肝动脉化疗栓塞术（TACE）进行治疗,联合治疗组为在TACE后1周复查可见有实体肿瘤的患者,对其应用射频消融及体外高频热疗治疗;对比二组患者转移率、生存率、缓解率和生存期,以及患者肿瘤标记物（AFP）情况,运用统计学方法进行评价。结果联合治疗组AFP值下降情况优于对照组,治疗有效率较高,转移率低。结论联合治疗较单纯TACE术能更好地改善患者血清AFP水平;加大肿瘤坏死效果、减小肿瘤体积;降低肿瘤的转移率、复发率,延长患者生存期。     

检测高尔基体蛋白73及其基因表达对原发性肝癌的诊断价值

探讨高尔基体蛋白73（GP73）血清及其基因表达在原发性肝癌（PHC）中的诊断价值,分析GP73在PHC诊断及高危人群普查的临床意义。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和电化学发光免疫技术定量检测85例PHC、46例肝硬变患者和102名健康人的血清GP73、AFP水平,计算GP73的敏感度、特异度和受试者工作特征曲线（ROC曲线）下面积,采用实时荧光定量（RT-PCR）法检测各组外周血单个核细胞GP73 mRNA的相对表达量,以Ct值比较法计算GP73 mRNA相对表达水平,同时检测12份正常肝组织和12份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平。PHC组和肝硬变组患者的GP73中位血清质量分数分别为295.6 μg/L、213.9 μg/L,PHC组GP73中位血清质量分数较肝硬变组明显升高,有显著性差异(P＜0.05)。PHC组和肝硬变组患者的AFP中位血清质量分数分别为9.6 μg/L、7.0 μg/L,无显著性差异（P＞0.05）。GP73诊断肝癌的敏感度（72.7%）高于AFP（49.8%）,有显著性差异（P＜0.05）,GP73特异度（70.8%）低于AFP（95.9%）,有显著性差异（P＜0.05）。GP73和AFP联合检测肝癌的敏感度为79.6%,特异度为80.3%,ROC曲线下面积为0.840（95% CI为0.770～0.919）;全血GP73 mRNA含量3组间无显著性差异（P＞0.05）,肝癌组织GP73 mRNA表达量（12.87）明显高于正常肝组织（1.08）,有显著性差异（P＜0.05）。GP73诊断PHC具有较好的敏感度,GP73与AFP联合检测可进一步提高诊断早期肝癌的敏感度。全血标本GP73 mRNA检测不能作为诊断原发性肝癌的肿瘤标志,肝组织标本GP73 mRNA可为诊断原发性肝癌的肿瘤标志,但存在创伤大、风险大等弊端。血清GP73联合AFP检测可显著提高PHC诊断,二者联合可用于PHC高危人群的普查及筛选。     

Involvement of an Orphan Transporter,SLC22A18, in Cell Growth and Drug Resistance of Human Breast Cancer MCF7 Cells

The SLC22A18 gene, which encodes an orphan transporter, is located at the 11p15.5 imprinted region, an important tumor suppressor gene region. However, the role of SLC22A18 in tumor suppression remains unclear. Here, we investigated the involvement of SLC22A18 in cell growth, invasion, and drug resistance of MCF7 human breast cancer cell line. Western blot analysis indicated that SLC22A18 is predominantly expressed at intracellular organelle membranes. Quantitative proteomics showed that knockdown of SLC22A18 significantly altered the expression of 578 (31.0%) of 1867 proteins identified, including proteins related to malignancy and poor prognosis of breast cancer. SLC22A18 knockdown (1) increased MCF7 cell growth concomitantly with a >7-fold increase of annexin A8 (involved in cell growth and migration; a predictor of poor prognosis), (2) induced spherical morphology of MCF7 cells concomitantly with a nearly 3-fold increase of CD44 (involved in regulation of malignant phenotypes), and (3) increased chemosensitivity to vinca alkaloids concomitantly with a >80% reduction of doublecortin-like kinase 1 (involved in regulation of microtubule polymerization). Our results suggest that SLC22A18 may act as a tumor suppressor by regulating the expression levels of cell growth–related proteins, and vinca alkaloids might show therapeutic efficacy against low-SLC22A18–expressing breast cancer.     

红景天多糖对体外正常人T淋巴细胞活性和体外人胃癌细胞增殖的影响(英文)

目的研究红景天多糖对体外正常人T淋巴细胞活性和对体外人胃癌细胞增殖的影响。方法采用MTT比色法和体外细胞培养计数法。结果红景天多糖对体外PHA诱导的正常人外周血T淋巴细胞的增殖有显著性促进作用(P<0.05);红景天多糖对体外人胃癌细胞增殖有显著性抑制作用(P<0.05),且红景天多糖作用强于香菇多糖(P<0.05)。结论红景天多糖可能是一种免疫增强剂,对胃癌可能有一定防治作用。     

Enforced expression of the tumor suppressor p53 renders human leukemia cells (U937) more sensitive to 1-[beta-D-arabinofuranosyl]cytosine (ara-C)-induced apoptosis

The effects of enforced expression of p53 on the sensitivity of p53(-/-) human monocytic leukemia cells (U937) to apoptosis following exposure to the S-phase-specific antimetabolite 1-[beta-D-arabinofuranosyl]cytosine (ara-C) were examined. Cells were stably transfected with a plasmid containing a chimeric DNA construct encoding a temperature-sensitive p53 variant (135(ala-->val)), which transactivates at 32 degrees but is non-functional at 37 degrees. A significant reduction in the S-phase population was observed in ptsp53 mutants incubated at 32 degrees. Nevertheless, while vector controls did not exhibit differential sensitivity to ara-C at 32 degrees versus 37 degrees, temperature-sensitive p53 mutants displayed a significant increase in apoptosis at the permissive temperature. This was not accompanied by increased ara-CTP formation, DNA incorporation of [3H]ara-C, or altered expression of Bcl-2 or Bax. Enhanced sensitivity was associated with increased mitochondrial injury (e.g. cytochrome c release), caspase activation, and loss of clonogenic survival. Significantly, ptsp53 cells synchronized in S phase were markedly more sensitive to ara-C-mediated mitochondrial injury and apoptosis at 32 degrees, indicating that wild-type p53 specifically enhances the susceptibility of this subpopulation to ara-C lethality. Consistent with these results, transient transfection of human wild-type p53 cDNA rendered parental U937 cells more sensitive to ara-C-mediated cell death. Collectively, these findings indicate that p53 expression renders S-phase U937 cells more susceptible to ara-C-mediated mitochondrial dysfunction, cytochrome c release, apoptosis, and loss of clonogenic survival without enhancing ara-C metabolism. Such findings raise the possibility that loss of functional p53 activity allows leukemia cells to circumvent ara-C lethality.     

Binding Study of the Fluorescence Probe l-Anilino-8-naphthalenesulfonate to Human Plasma and Human and Bovine Serum Albumin Using Potentiometric Titration

The binding of l-anilino-8-naphthalenesulfonate (ANS) to bovine serum albumin (BSA), human serum albumin (HSA), and human plasma has been studied by potentiometric titration utilizing a laboratory constructed ion selective electrode (ISE) of ANS. Three classes of ANS binding sites were found on BSA, HSA, and plasma at 25 and 37°C. Computer analysis of the data resulted in estimates for the association constants, number of binding sites (HSA, BSA), and binding capacity of each class. The association constants for the first class of binding sites at 25°C were found to be 7.53 (±0.59) × 10⁵, 2.70 (±0.20) × 10⁵, and 2.64 (±0.26) × 10⁵ M ^–l for BSA, HSA, and plasma, respectively. Lower values for the association constants of all binding classes were estimated at the higher temperature (37°C). The binding capacity for ANS decreased in the order BSA, plasma, HSA.     

EGFR-TKIs治疗晚期非小细胞肺癌效果的Meta分析

目的：根据临床研究文献,采用 Meta 分析法综合评价EGFR-TKIs类药物治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床疗效。方法：检索 CNKI、维普、万方、SCI、Pubmed、Science Direct等数据库中2005年至2013 年期间发表的有关EGFR-TKIs对比治疗晚期NSCLC的临床研究资料,采用 RevMan5.0和ITC软件,对入选的国内外10篇有关EGFR-TKIs对比治疗晚期NSCLC的研究文献进行综合定量分析。结果：Meta 分析结果显示,埃克替尼与吉非替尼治疗晚期NSCLC有效率和疾病控制率的RR值分别为1.07(P＝0.69)、1.01(P＝0.89);吉非替尼与厄洛替尼治疗晚期NSCLC有效率和疾病控制率的RR值分别为1.23(P＝0.10)、1.04(P＝0.46);埃克替尼与厄洛替尼治疗晚期NSCLC有效率和疾病控制率的RR值分别为1.32(P＝0.79)、1.05(P＝0.95)。结论：埃克替尼、吉非替尼和厄洛替尼治疗晚期NSCLC的效果无显著性差异,但三者的临床有效性尚需要更多高质量的临床随机对照研究来证实。     

国产长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的观察国产长春瑞滨(盖诺,NVB)联合顺铂(DDP)治疗晚期非小细胞肺癌(N SCLC)化疗方案的疗效。方法有明确的病理和/或细胞学诊断的34例晚期N SCLC患者,运用NVB 25m g/m2,静滴d1,d8;DDP 25m g/m2,静滴d1,d2,d3,每21天为1周期。结果CR 0例,PR 14例(41.2%),SD 16例(47.1%),PD 4例(11.8%),有效率为41.2%(14/34)。不良反应主要为骨髓抑制和消化道反应。结论国产长春瑞滨和顺铂联合方案治疗晚期N SCLC,疗效较高且毒副反应可以耐受。