替米沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的血管内皮细胞氧化/还原失衡的保护作用

目的：探讨AngⅡ对血管内皮细胞氧化/还原平衡的影响及替米沙坦的保护作用。方法：人大动脉血管内皮细胞株接种于35mm玻璃底细胞培养皿中,随机分成空白对照组、血管紧张素Ⅱ模型组及三个浓度替米沙坦试验组（60μg/L、300μg/L、1000μg/L）5组,每组42例样本。测定不同取样时间点血管内皮细胞SOD活性和MDA含量。结果：血管内皮细胞受AngⅡ刺激后,细胞MDA含量瞬时激增,SOD活性受到抑制,替米沙坦预处理过的血管内皮细胞能有效抵御AngⅡ诱发的氧化应激反应,提高SOD活性和抑制MDA含量的升高,并呈现替米沙坦剂量依赖性关系。结论：替米沙坦抑制AngⅡ诱导的细胞氧化应激反应,从多方面保护动脉血管。     

血管紧张素Ⅱ和缬沙坦对血管内皮细胞AT1/AT2及eNOS表达的调节作用

目的：研究缬沙坦在血管内皮细胞中对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体Ⅰ型(AT1)和Ⅱ型(AT2)、一氧化氮合酶(eNOS)的表达和一氧化氮(NO)生成的影响。方法：使用人脐静脉内皮细胞系ECV-304(HUVECs)，分为对照组、AngⅡ组、缬沙坦组和AngⅡ加缬沙坦组，作用不同时间，检测AT1／AT2的mRNA和蛋白表达、eNOS的蛋白表达和NO的生成。结果：在HUVECs细胞中未检测到AT2的蛋白表达，AngⅡ、缬沙坦均显著抑制细胞中AT1的mRNA和蛋白表达，且缬沙坦呈明显的剂量依赖效应，AngⅡ作用36h显著抑制NO的生成而合用缬沙坦可明显逆转该效应。结论：在HUVECs中缬沙坦可通过自身的结合下调AT1，并能逆转AngⅡ长时间作用对NO生成的抑制作用，提示缬沙坦可改善血管内皮细胞的功能。     

压力超负荷大鼠肾脏结构改变与替米沙坦的干预作用

目的 探讨腹主动脉缩窄法模拟压力超负荷大鼠模型的肾脏超微结构改变以及替米沙坦的干预作用.方法 将36只大鼠随机均分成假手术组、腹主动脉缩窄组和替米沙坦+腹主动脉缩窄组,后两组大鼠采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷模型,分别给予不同药物后,通过光镜和电镜观察肾脏组织病理变化.结果 腹主动脉缩窄组和替米沙坦+腹主动脉缩窄组的肾脏超微结构均较假手术组改变明显,但替米沙坦干预大鼠较单纯腹主动脉缩窄大鼠改变轻微.结论 腹主动脉缩窄法模拟压力超负荷大鼠的肾脏超微结构损伤明显,而替米沙坦对损伤肾脏有保护作用.     

葛根素对高血压大鼠内皮功能障碍的影响

目的 研究葛根素对血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ诱导的高血压大鼠的影响,并探讨其改善内皮功能的机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、Ang Ⅱ组和葛根素组。Ang Ⅱ组连续5 d泵入Ang Ⅱ(0.7 mg·kg^-1·d^-1),葛根素组在泵入Ang Ⅱ前10 d采用葛根素注射液腹腔注射(100 mg·kg^-1·d^-1)进行干预。采用尾动脉法测量收缩压,用血管张力测量灌流系统测量内皮依赖性舒张功能(endothelium-dependent relaxation,EDR)。Western blot测量血管内相关蛋白的表达。结果 葛根素能明显降低Ang Ⅱ诱导的大鼠高血压水平(P<0.05),减轻Ang Ⅱ引起的动脉内膜增厚和心肌细胞的肥大。和对照组相比,Ang Ⅱ组能削弱动脉血管的EDR,同时降低p-eNOs(Ser 1177)的表达,增强gp91 phox(85%),p22 phox(113%)的表达,而葛根素能改善EDR,并逆转Ang Ⅱ引起的蛋白量的变化。结论 在Ang Ⅱ诱导的高血压大鼠中,葛根素能降低血压,保护内皮功能及靶器官免受损伤。葛根素具有心血管保护作用,机制可能和自身抗氧化及上调p-eNOs的作用有关。     

香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖与迁移的影响

目的:研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与迁移的作用。方法:采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以Ang Ⅱ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用质量浓度为10^-7 mol·L^-1 Ang Ⅱ以及Ang Ⅱ+不同浓度香青兰总黄酮组(25,50,100 mg·L^-1)作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用MTT法检测细胞的增殖;transwell法检测细胞的迁移;免疫组化法检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。结果:与对照组比较,Ang Ⅱ组能显著刺激大鼠VSMC的增殖和迁移,香青兰总黄酮不同剂量组联合Ang Ⅱ可在一定程度上抑制Ang Ⅱ诱导的VSMC增殖,迁移以及细胞内PCNA的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论:香青兰总黄酮具有抑制Ang Ⅱ诱导VSMC增殖与迁移的作用。     

香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞黏附分子及基质金属蛋白酶表达的影响

目的：研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）黏附分子及基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响。方法：采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用10^-7 mol·L^-1AngⅡ以及AngⅡ+不同浓度香青兰总黄酮组（25,50,100 μg·mL^-1）作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用免疫组化法检测细胞中细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管间黏附分子（VCAM-1）的表达水平。RT-PCR方法检测细胞MMP-2、MMP-9的mRNA表达水平。结果：与对照组比较,AngⅡ组能显著刺激大鼠VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,香青兰总黄酮不同剂量组联合AngⅡ可在一定程度上抑制AngⅡ诱导的VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论：香青兰总黄酮具有抑制AngⅡ诱导VSMC黏附分子及基质金属蛋白酶表达的作用。     

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠冠状动脉Rho/ROCK信号通路的影响

目的:观察胰岛素抵抗大鼠和正常大鼠冠状动脉RhoA及ROCK表达水平及替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠冠状动脉组织RhoA及ROCK表达水平的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组,对照组予普通饮食;胰岛素抵抗(IR)组给予高果糖饮食+链脲佐菌素(25mg/kg)造模,替米沙坦干预(Tel)组在胰岛素抵抗基础上给予替米沙坦5mg/(kg·d)干预。干预4周后分离冠状动脉采用RT-PCR和Western Blotting法测定各组大鼠冠状动脉组织中RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平。结果:IR组大鼠较对照组RhoA蛋白表达水平降低,ROCK1 mRNA的表达升高。Tel组大鼠RhoA蛋白表达水平较IR组明显升高。IR组及Tel组ROCK2蛋白表达水平较对照组升高,差异有统计学意义,其余组间RhoA mRNA、ROCK1 mRNA、ROCK1蛋白、ROCK2蛋白表达差异均无统计学意义。结论:替米沙坦可部分逆转胰岛素抵抗大鼠冠状动脉RhoA蛋白水平降低,但对RhoA mRNA、ROCK1、ROCK2mRNA及蛋白的表达水平的调节作用不明显。     

淫羊藿苷对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

探讨淫羊藿苷对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导损伤人脐静脉内皮细胞株（ECV-304）的影响。培养内皮细胞，淫羊藿苷作用24h后，采用AngII诱导制备内皮细胞损伤模型，测定细胞存活率（MTT法）、培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放量、NO值、清除超氧阴离子自由基（O2^-）和羟自由基（·OH）的能力，测定胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、T-NOS、iNOS以及eNOS的含量。与AngⅡ单独处理组相比，淫羊藿苷能明显提高细胞存活率，提高SOD、T-NOS和cNOS活力，提高NO含量，增强清除O2^-和·OH的能力，降低LDH和iNOS的量。结果表明淫羊藿苷对AngⅡ损伤的内皮细胞有一定的保护作用。     

替米沙坦抑制SHR大鼠心肌Smad2、3蛋白表达及减轻心肌纤维化作用的研究

目的：探讨替米沙坦对自发性高血压大鼠（SHR）心肌纤维化的抑制作用,及心肌Smad2、3蛋白表达的影响。方法：将20只雄性SHR大鼠随机分为两组,分别为替米沙坦组和对照组。分别给予替米沙坦10mg/（kg·d）,对照组二甲亚砜1ml/d灌胃,共8周。于实验前、2周、8周,应用尾套法测血压3次。8周后分离血浆检测血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平。心肌石蜡切片通过免疫组化法测定Smad2、3蛋白和Ⅰ型胶原的表达。结果：灌胃8周后,与对照组相比,替米沙坦组AngⅡ水平明显升高（P〈0.05）;Smad2、3蛋白和Ⅰ型胶原的表达明显降低（P均〈0.05）。结论：替米沙坦能抑制心肌纤维化,这一作用可能部分通过抑制Smad2、3蛋白表达来实现。     

米沙坦对轻中度高血压的降压疗效及对血管内皮功能的影响

目的探讨替米沙坦的降压疗效和对血管内皮功能的影响。方法对80例高血压病患者分别应用替米沙坦与非洛地平治疗。记录每日血压和24h动态血压变化。取静脉血测定治疗前后血浆一氧化氮（NO）、前列环素（PGI2）、内皮素（ET）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平。结果替米沙坦的降压疗效明显,但同非洛地平相比较,二者无显著性差异（P〉0.05）;替米沙坦组血浆NO、PGI2、AngⅡ是升高的,ET是降低的。结论替米沙坦是一种安全有效的降压药物,同时可以改善高血压患者血管内皮功能。     

脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠脑主动脉血管平滑肌细胞胞内钙浓度上升的影响

目的研究脑肠肽Ghrelin对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）胞内钙离子浓度上升的作用,并初步探讨其机制。方法采用细胞培养的方法获得大鼠胸主动脉VSMCs,经Fluo-4-AM染色后,采用激光共聚焦显微镜技术分别检测加入AngⅡ后,1×10^-7mol·L^-1和1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin对胞内钙荧光强度（FI）的影响,以及腺苷酸环化酶抑制剂Sq22536对Ghrelin作用的影响。结果①2×10^-8mol·L^-1的AngⅡ可以使得VSMCs胞内钙FI上升到静息状态的（165±76）％;②随后加入1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（117±34）％（P〈0．01vs①）;③加入1×10^-5mol·L^-1的Ghrelin可以使FI下降到（87±22）％（P〈0．01vs①,P〈0．05vs②）;④预先以1×10^-5mol·L^-1的Sq22536孵育,再加入2×10^-8mol·L^-1AngⅡ和1×10^-7mol·L^-1的Ghrelin,胞内FI为原来的（143±24）％（P〈0．01vs②）。结论Ghrelin能够降低AngⅡ引起的大鼠胸主动脉VSMCs胞内钙离子升高作用,其机制可能与激活胞内cAMP／PKA信号通路有关。     

去肾交感神经术对犬心肌梗死后下丘脑血管紧张素II及氧化应激水平的影响

摘要: 目的 探讨去肾交感神经术对心肌梗死(MI)犬下丘脑血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及氧化应激水平的影响。方法 18只犬随机分为MI组、MI+去肾交感神经术组（RDN组）和假手术组。前2组通过明胶海绵栓塞法建立MI模型,假手术组只行冠脉造影检查。MI后1周对RDN组行去肾交感神经术,余2组只行肾动脉造影检查。MI后4周检测AngⅡ、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量及尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91phox蛋白的表达。结果 与假手术组相比,MI组下丘脑AngⅡ、MDA含量增加,gp91phox蛋白表达增加,SOD活性降低 (P<0.01)。MI组AngⅡ与SOD活性呈负相关,与gp91phox蛋白表达量呈正相关(rs 分别为-0.849和0.950, P<0.01)。RDN组较MI组AngⅡ、MDA含量降低,gp91phox蛋白表达降低,SOD活性增加 (P<0.01)。结论 去肾交感神经术可以降低下丘脑AngⅡ含量,抑制NADPH氧化酶表达,降低氧化应激水平,改善MI后心功能。     

复方替米沙坦胶囊在中国健康志愿者体内的药代动力学

目的：研究中国健康受试者单次和多次口服复方替米沙坦胶囊的药代动力学特点。方法：20名健康受试者随机分为2组,分别单次口服低、高剂量复方替米沙坦胶囊（每粒合替米沙坦40mg,氢氯噻嗪12．5mg）;8名健康受试者口服复方替米沙坦胶囊1粒,连续服用7d,采用LC—MS／MS方法测定血浆药物浓度,并计算药代动力学参数。结果：受试者单次口服复方替米沙坦胶囊1粒或2粒后替米沙坦的主要药代动力学参数：Cmax分别为（130．65±125．97）、（876．22±588．52）μg·L^-1,tmax分别为（1．72±0．96）、（1．03±0．48）h,AUC0-t分别为（1745．22±1634．54）、（4776．26±3703．07）μg·h·L^-1,AUC0-∞。分另1为（1882．11±1704．30）、（5060．78±3955．61）μg·h·L^-1;单次口服复方替米沙坦胶囊1粒或2粒后氢氯噻嗪的主要药代动力学参数：Cmax分别为（70．62±23．05）、（120．42±51．41）μg·L^-1,tmax分别为（1．95±1．01）、（2．30±1．14）h,AUC0-t分别为（498．99±162．45）、（888．83±384．29）μg·h·L^-1,AUC0-∞分别为（511．32±161．02）、（910．67±390．77）μg·h·L^-1.连续7d口服复方替米沙坦胶囊1粒后替米沙坦和氢氯噻嗪的主要药代动力学参数：Cmax分别为（199．27±133．79）、（53．52±11.54）μg·L^-1,tmax分别为（1．33±1．14）、（2．38±1．03）h,AUC∞分别为（1211．13±774．94）、（405．80±142．41）μg·h·L^-1,Cav分别为（50．46±32．29）、（16．91±5．93）μg·L^-1,DF分别为（3．61±1．61）、（3．18±0．59）。结论：单次口服复方替米沙坦胶囊后,替米沙坦在40,80mg时的AUC和C一的增加比例显著高于剂量增加比例,呈非线性药代动力学特征;氢氯噻嗪在12．5,25mg时的AUC和Cmax的增加与剂量增加成正比,呈线性药代动力学特征。连续给药与单次给药相比,其药代动力学特征未发生显著变化。     

氯沙坦抑制AngⅡ诱导的内皮单核细胞黏附涉及下调CXCR2受体表达

目的探讨氯沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮单核细胞黏附的影响及可能分子机制。方法 AngⅡ(10-6mol.L-1)培养人脐静脉内皮细胞4 h或24 h,并加入不同浓度的氯沙坦(1、3、10μmol.L-1)预处理1 h。检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、内皮单核细胞黏附、上清液中白介素-8(interleukin-8,IL-8)水平、IL-8受体CXCR2 mRNA表达以及核转录因子(nuclear factor kappaB,NF-κB)活性。结果 AngⅡ(10-6mol.L-1)培养内皮细胞后显著增加细胞内ROS水平,上清液中IL-8水平,激活NF-κB,增加内皮单核细胞间黏附,上调IL-8受体CXCR2mRNA表达。氯沙坦呈剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的ROS水平的增加,抑制NF-κB的激活,减少IL-8的释放,下调CXCR2 mRNA表达,从而抑制内皮单核细胞黏附。结论氯沙坦可能通过抑制氧化应激-NF-κB-IL-8/CXCR2通路抑制AngⅡ诱导的内皮单核细胞黏附。     

淫羊藿总黄酮对LPC诱导内皮细胞损伤的保护作用

目的观察淫羊藿总黄酮对溶血性磷脂酰胆碱（LPC）诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将血管内皮细胞分为正常对照组,LPC损伤对照组,LPC损伤加淫羊藿总黄酮低、中、高浓度（50、100、200nag·L^-1）组,检测细胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量和细胞内活性氧（ROS）水平。结果淫羊藿总黄酮剂量依赖性地降低LPC诱导的内皮细胞上清液中MDA、LDH含量增加并抑制细胞内ROS活性,且剂量依赖性地增加细胞上清液中NO含量。结论淫羊藿总黄酮对LPC诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞内ROS活性有关。     

奈比洛尔对自发性高血压大鼠循环和主动脉肾素-血管紧张素系统的影响

目的：探讨奈比洛尔（Nebivolol）对自发性高血压大鼠循环和主动脉肾素-血管紧张素系统（RAS）的影响。方法：18只自发性高血压大鼠（SHR）和6只同源正常血压大鼠Wistar-Kyoto（WKY）随机分为：（1）奈比洛尔组（n=6）：SHR给予奈比洛尔5mg·kg-1·d-1;（2）卡托普利组（n=6）：SHR给予卡托普利15mg·kg-1·d-1;（3）SHR对照组（n=6）;（4）WKY对照组（n=6）。奈比洛尔、卡托普利溶于蒸馏水中灌胃,对照组给予等体积蒸馏水灌胃。给药8周后测定血浆肾素活性（PRA）,血浆和主动脉血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、一氧化氮（NO）浓度,NO/AngⅡ和血管紧张素转化酶（ACE）活性。结果：与WKY比较,SHR血浆和主动脉NO含量降低,AngⅡ水平显著增加,NO/AngⅡ降低;主动脉ACE活性明显增加,而血浆ACE活性则降低;但PRA在两组间无显著性差异。奈比洛尔治疗对SHR血浆AngⅡ含量和ACE活性无影响,但可降低主动脉AngⅡ水平,抑制主动脉ACE活性,从而增加血浆及主动脉NO含量和NO/AngⅡ。结论：奈比洛尔抑制肾素-血管紧张素系统,可能是其降低血压的机制之一。     

坎地沙坦对盐负荷高血压大鼠主动脉氧化应激-低密度脂蛋白受体-1通路的抑制

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂坎地沙坦对盐负荷易卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)主动脉氧化应激-低密度脂蛋白受体-1通路的影响。方法12wk龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和SHRSP予8%高盐饮食。高盐WKY大鼠(WKY,n=6)作为对照组,高盐SHRSP随机分为3组:①坎地沙坦组(Can,n=6),予坎地沙坦1·0mg·kg-1·d-1灌胃;②三氯噻嗪组(TCM,n=6),予TCM1·6mg·kg-1·d-1;③SHRSP组(SHRSP,n=6),予等量溶媒。用尾部袖套测量法每周检测1次血压。大鼠给药2wk后摘取胸主动脉,留取24h尿量。采用实时定量PCR检测胸主动脉NAD(P)H氧化酶亚单位p22 phox、p47 phox和gp91 phox mRNA表达,RT-PCR方法检测氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)和Ⅳ型胶原mRNA表达,免疫组化检测血管gp91 phox和LOX-1蛋白表达,ELISA方法检测尿白蛋白排泄。结果实验2wk末,SHRSP组收缩压高于WKY组,坎地沙坦和TCM均降低了高盐SHRSP收缩压(P<0·01),但二者降压幅度无差别(P>0·05)。p47 phox、gp91 phox和LOX-1 mRNA在主动脉中的表达,SHRSP组高于WKY组,坎地沙坦下调了高盐SHRSP p22 phox、gp91 phox和LOX-1 mRNA的表达(P<0·01),抑制了主动脉Ⅳ型胶原mRNA的表达(P<0·01),降低了尿微量白蛋白水平。主动脉免疫组化,WKY组几乎不表达gp91 phox和LOX-1,SHRSP组表达明显增强,坎地沙坦下调了高盐SHRSP主动脉gp91 phox和LOX-1的表达。等效降压剂量的TCM对高盐SHRSP主动脉NAD(P)H氧化酶亚单位、LOX-1、Ⅳ型胶原的表达和尿微量白蛋白水平无明显影响。结论坎地沙坦减轻了盐负荷SHRSP血管损伤,其机制可能与抑制氧化应激LOX-1通路有关,而不一定依赖其降压作用。     

CD147siRNA对恶性黑色素瘤细胞VEGF及血管内皮细胞体外迁移活性的影响

目的研究CD147siRNA对恶性黑色素瘤细胞株A375中VEGF表达水平和血管内皮细胞体外迁移活性的影响。方法采用半定量RT-PCR法检测转染后A375细胞中VEGF mRNA表达的变化。采用ELISA法检测A375细胞与成纤维细胞共同培养后VEGF表达水平的变化。采用细胞迁移实验检测转染CD147siRNA前后的A375细胞对脐静脉内皮细胞株ECV-304在体外迁移活性的影响。结果转染CD147siRNA后,A375细胞中VEGF的mRNA和蛋白表达水平显著降低,其下调率分别为10.77%（P〈0.05）和38.5%（P〈0.01）。转染CD147siRNA前后的A375细胞与成纤维细胞共同培养后VEGF的表达水平均较单独培养时显著升高,其升高率分别为98.5%（P〈0.01）和159.9%（P〈0.01）。转染CD147siRNA后的A375细胞使ECV-304细胞的体外迁移活性下降44.77%（P〈0.01）。结论 CD147siRNA能有效抑制恶性黑色素瘤细胞株A375中VEGF的表达水平和脐静脉内皮细胞株ECV-304在体外的迁移活性。