EDTA在HE染色中的应用

正苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色是病理技术中最基本的染色方法,染色理想状态是在镜下见细胞核与细胞质蓝红相映,对比明显;核膜及核染色质颗粒清晰可见。实际工作中因组织干涸、固定脱水不足、脱钙等原因会造成切片染色困难,细胞核染色淡或出现局部灰染,给临床病理诊断带来困扰。经过大量实验,本科室对处理不好的组织切片染色前用EDTA抗原修复液进行高压修复,使染色质量得     

病理组织漂烘仪在快速冷冻切片染色中的应用

正快速冷冻切片技术对手术中的快速病理诊断有很重要的意义,在病理科的日常工作中具有非常重要的地位,快速冷冻切片染色质量的优劣直接影响病理诊断的准确率~([1])。作者在日常工作中,将病理组织漂烘仪应用到快速冷冻切片染色技术中,收到了较好的效果,现介绍如下。1材料与方法1.1材料徕卡CM1900冷冻切片机,常州华利病理组织漂烘仪,苏木精(百博生物公司),1%盐酸水溶液,0.5%氨     

Van Gieson染色液的配制及染色体会

VanGieson染色简称VG染色,是一种成熟的结缔组织染色方法,用于区别胶原纤维和肌纤维。其操作简单,结果可靠,是实验室常规特染方法之一。VG染色液配制的关键主要是酸性品红和苦味酸饱和液的比例。一些文献资料记载差异比较大,我们拟通过实验找出其最佳配制比例。1材料与方法取外科手术子宫平滑肌、皮肤组织、小肠肠壁新鲜组织;用10%福尔马林固定,常规石蜡切片,厚5μm,备用。从文献资料提供VG染液配制的多种比例中,选出6种进行染色对比(表1)。表16种比例配方染色比较分组1%酸性品红苦味酸饱和液结果1200100平滑肌胶原纤维呈深红-紫色21001…     

大鼠脑组织高尔基染色三种制备方法的比较

<正>1873年意大利著名的神经解剖学家卡米洛·高尔基发明硝酸银染色法,从此可以定性定量地观察神经元的形态~([1])。随后Cox等~([2-4])对高尔基染色法的固定液和染色液进行改良,提高结果的可视性,但初学者选择合适的染色方法仍较为困难。本实验采用相同的固定、染色和显色液,采用不同的制作方法(冷冻切片、石蜡切片、振动切片)进行大鼠脑组织高尔基染色,比较三种制作方法各自的优缺点,为科研实验和制作典型的教学示教切片提供可选方法 。     

冷冻切片锇酸染色法在脂肪染色中的应用

正在病理诊断和科研工作中,HE切片常出现大小不等的空泡,常需用脂肪染色来鉴别空泡性质;在某些疾病的诊断及鉴别诊断方面,脂肪染色也具有一定的价值。脂肪染色时常用冷冻切片作苏丹类染色,效果很好~([1])。但因其在染色过程中不能接触有机溶剂,封片时采用水溶性封固剂,切片染色后不能长久保存。为解决这些问题,作者实验中用冷冻切片进行锇酸染色,取得了较为满意的效果,现总结介绍如下。1材料与方法1.1材料收集2010~2011年广州军区广州总医院病理     

Tween-40软化剂在组织切片技术上的应用

在制备临床和科研组织标本时 ,我们常会遇到一种既韧又硬的组织 ,如病变的指甲和眼球中的晶状体。以前对该类组织没有相适宜的技术方法制备组织切片 ,病甲的切片只有放弃 ;全眼切片只能把晶状体从眼球中挑出后进行 ,破坏了眼球的完整结构。这对于该类组织的结构和病变的研究十分不利。笔者参考有关文献[1] ,配制了 10 %～ 2 0 %的Ｔｗｅｅｎ 4 0软化剂 ,可以很好的软化该类组织并制备石蜡组织切片 ,然后进行ＨＥ染色和免疫组织化学染色 ,效果十分满意。一、材料和方法1 指甲 :把病人剪下的指甲 (如灰指甲 )投入 4 %甲醛液中固定 2～ 3ｄ ,置…     

三种固定液对Feulgen反应显示DNA的比较

<正>本实验用10%福尔马林(10%FA),FAA液(甲醛、95%酒精、冰醋酸按10:85:4体积比)及Carnoy氏液作为固定液,对一个月SD大鼠睾丸组织(约3mm~2/块)进行固定.制得5μm的切片后,分别用Felugen反应显示DNA和H—E染色法染切片,并对Feulgen染色切片中的糖原细胞用图象分析仪进行DNA定量测定.结果发现:(1)选择60个左右大小、染色深浅均相近的精原细胞进行图象分析,用平均光密度值进行比较.发现Carnoy固定的切片,其均值最大而变异系数(CV)最小;10%FAA固定的居中,FAA固定的切片均值最小而CV最大.在镜下观察中,发现10%FA及FAA液固定后的切片染色均匀而Carnoy所染切片中曲细精管着色深浅不一.所以我们认为,(1)用10%FA作固定液对DNA的定量分析较适合.(2)对细胞核及细胞质的形态而言,经FAA液和Carnoy氏液固定的组织,其染色效果较由10%FA固定的组织好.经 FAA液和Carnoy氏液固定的切片,低倍镜下可见曲精小管管腔内初级精母细胞的丝状染色体及其他细胞的颗粒状染色质,高倍镜下核的结构更加清晰.而经10%FA固定的组织切片,低倍镜下管腔内的各级生精细胞的胞核呈现均匀成片的紫红色,观察不到丝状染色体,高倍镜下仔细分辨,才可隐约见到.但因Carnoy氏液固定的组织块脆性大,不易切片,所以FAA液固定最适于形态观察.     

全自动染色机在制备涂胶载玻片中的改良应用

正在日常免疫组化染色中防止组织切片在染色过程中脱落,是免疫组化的重要环节~([1])。因此,操作前必须将载玻片用3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-Aminopropyitriethoxyssicane,APES)进行预处理。本科室利用全自动染色机制作涂胶载玻片,效果良好,现介绍如下。1材料与方法1.1材料(1)载玻片规格:25.4 mm×76.2 mm×(1~     

高压抗原修复方法在免疫组化染色的应用比较

目的:优化免疫组化高压抗原修复法染色效果。方法:同一组织分别采用高压抗原修复直接法或间接法,用柠檬酸缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,检测10种常用抗体的免疫组化染色效果。结果:抗原修复间接法与直接法染色强度有明显差异,直接法优于间接法;两种抗原修复液间也存在差异,EDTA抗原修复液效果优于柠檬酸缓冲液。结论:高压抗原修复直接法并用EDTA抗原修复液对组织切片进行抗原修复效果更好。     

改良神经髓鞘的依来铬氰R染色法

为研究周围神经髓鞘被覆状态 ,我们经常要进行髓鞘染色 ,在实践中 ,我们摸索了一种便捷、有效、经济的染色方法 ,介绍如下。一、材料和方法1.取材、固定、切片 :取大鼠正常坐骨神经组织 ,4%甲醛生理盐水固定。石蜡切片 6～ 10 μｍ厚 ,6 0℃左右烘箱烘 3～4ｄ。2 .试剂配制 :(1)依来铬氰Ｒ液 :依来铬氰Ｒ 0 .2ｇ ,蒸馏水 96ｍｌ,10 %铁明矾液 4ｍｌ,浓硫酸 0 .5ｍｌ。 (2 )苦味酸丽春红Ｓ液 :1%丽春红Ｓ水溶液 10ｍｌ,苦味酸饱和水溶液 86ｍｌ,1%醋酸水 4ｍｌ。3.染色程序 :(1)石蜡切片 ,常规脱蜡水洗 ,吸干或烘干切片。 (2 )依来铬氰Ｒ液染…