提高血流切应力对老年大鼠后肢侧支血管生长的作用

目的　利用老年大鼠股动脉结扎加股动静脉吻合和单纯股动脉结扎的侧支血管生长模型探讨提高血流切应力对老年大鼠侧支血管生长的作用。 方法　老年SD大鼠（24月龄）30只,分为假手术组,结扎组和吻合组。结扎组大鼠行股动脉结扎手术,吻合组大鼠行股动脉结扎加股动静脉吻合手术。大鼠术后存活1周,每组5只大鼠取后肢带侧支血管的肌肉做冰冻切片用于免疫荧光组织化学法检测eNOS,Ki67和MMP2的表达;另外5只使用明胶四氧化三铅进行血管造影再用X线拍照观察侧支血管的生长情况。 结果　与假手术组相比,结扎组的大鼠后肢侧支血管数量增多（P<0.01）,Ki67阳性细胞数量增多（P<0.01）,eNOS的表达显著增强（P<0.001）,MMP2的表达也有所增强（P<0.05）。吻合组与结扎组相比,大鼠的后肢侧支血管数量进一步增多（P<0.01）,Ki67阳性细胞数量明显增多（P<0.01）,eNOS的表达显著增强（P<0.001）,MMP2的表达也明显增强（P<0.01）。 结论　提高血流切应力能促进老年大鼠缺血后肢侧支血管生长。     

去神经支配对鼠后肢缺血诱导侧支血管生长方式的调节

目的 通过比较保留和去除神经支配对侧支血管生长的影响,揭示神经调节对侧支血管生长方式的作用.方法 28只健康SD大鼠,左侧行单纯股动脉结扎,右侧行股动脉结扎加坐骨神经和股神经切除,分别存活1周和8周后,采用血管造影、HE染色和免疫荧光,观察单纯结扎和结扎加去神经后侧支血管生长方式的变化,鼠后肢正常血管用作正常对照.结果 在正常大鼠后肢少见早先存在的小动脉;单纯结扎1周和8周后,侧支血管数目明显增多,表现为侧支血管管壁较薄管腔较大的外向性生长方式;股动脉结扎加去神经1周和8周后,侧支血管数目比单纯结扎侧减少,表现为管腔变窄管壁增厚的内向性生长方式,其侧支血管数目和管腔而积差异具有统计学意义(P＜0.001).结论 在缺血诱导的大鼠后肢侧支血管生长模型中,去神经支配后侧支血管的生长受到了损害,表现为一种内向性的生长方式.     

阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响

目的　探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响。 方法　28只成年SD大鼠,给予高脂饮食8周,建立结扎股动脉诱导的高胆固醇血症大鼠侧支血管生长模型。随机将动物分为单纯股动脉结扎组（L组）、高胆固醇血症+股动脉结扎组（HL组）和阿托伐他汀（0.3 mg·kg-1·14 d-1,腹腔注射）+高胆固醇血症+股动脉结扎组（AL组）。存活7 d后,采用血管造影,HE染色和共聚焦免疫荧光术,观察高胆固醇血症情况下,阿托伐他汀应用对侧支血管生长的作用以及重要的促侧支血管生长分子在侧支血管表达模式的变化。 结果　与L组比较,HL组的侧支血管数目减少,侧支血管生长受到损害,表现为血管内膜过度增生,中膜明显增厚,导致血管腔狭窄,且血管壁细胞增殖和外膜炎症细胞减少;AL组应用了阿托伐他汀,侧支血管的生长较HL组明显改善,发育为管腔较大的侧支血管,血管壁细胞的增殖和外膜炎症细胞增多,侧支血管数目增加。其侧支血管数目,血管横截面积和免疫荧光强度差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论　高胆固醇血症损害大鼠后肢侧支血管的生长;阿托伐他汀可促进血管壁细胞的增殖和外膜巨噬细胞的增多,从而改善和恢复侧支血管的生长。     

阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响

目的　探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响。 方法　28只成年SD大鼠,给予高脂饮食8周,建立结扎股动脉诱导的高胆固醇血症大鼠侧支血管生长模型。随机将动物分为单纯股动脉结扎组（L组）、高胆固醇血症+股动脉结扎组（HL组）和阿托伐他汀（0.3 mg·kg-1·14 d-1,腹腔注射）+高胆固醇血症+股动脉结扎组（AL组）。存活7 d后,采用血管造影,HE染色和共聚焦免疫荧光术,观察高胆固醇血症情况下,阿托伐他汀应用对侧支血管生长的作用以及重要的促侧支血管生长分子在侧支血管表达模式的变化。 结果　与L组比较,HL组的侧支血管数目减少,侧支血管生长受到损害,表现为血管内膜过度增生,中膜明显增厚,导致血管腔狭窄,且血管壁细胞增殖和外膜炎症细胞减少;AL组应用了阿托伐他汀,侧支血管的生长较HL组明显改善,发育为管腔较大的侧支血管,血管壁细胞的增殖和外膜炎症细胞增多,侧支血管数目增加。其侧支血管数目,血管横截面积和免疫荧光强度差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论　高胆固醇血症损害大鼠后肢侧支血管的生长;阿托伐他汀可促进血管壁细胞的增殖和外膜巨噬细胞的增多,从而改善和恢复侧支血管的生长。     

血管生成素对糖尿病大鼠股骨头血管新生及渗漏的影响

目的　探讨血管生成素1(angi.Poietin-1,Ang-1)对糖尿病大鼠股骨头微血管新生及渗漏的影响。 方法　建立速发型链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）糖尿病大鼠模型,随机分为正常5周组　(CON1)、10周组(CON2)及15周组(CON3),糖尿病5周组（DM1）、10周组（DM2）及15周组（DM3）,每组　10只。墨汁灌注观测股骨头微血管密度;摘取模型动物股骨头组织,免疫组化分析凝血因子Ⅷ（FⅧ）表达;原位杂交分析血管内皮生长因子（VEGFmRNA）表达强度;RT-PCR分析Ang-1的mRNA表达。 结果　糖尿病大鼠股骨头随病程发展,Ang-1、FⅧ因子表达上升,与正常组相比有显著性差异（P<0.01）。　VEGFmRNA表达量均高于正常组（P<0.01）;微血管密度加大,显示血管增生、渗漏。 结论　糖尿病股骨头　Ang-1与VEGFmRNA相互协同或拮抗分别促进微血管增生、抗血管渗漏。表达于血管内皮细胞的FⅧ及VEGFmRNA与微血管密度（MVD）变化存在正相关。     

去神经支配对大鼠后肢缺血诱导的侧支血管动脉发生标记物的影响

目的:通过观察去除神经支配对侧支血管动脉发生标记物缝隙连接蛋白40(CX40)表达变化,探讨神经调节与动脉发生的相互作用。方法:健康SD大鼠,右侧行股动脉结扎加坐骨神经和股神经切除术,左侧作为正常对照,存活8周后,结合共聚焦免疫荧光分别观察对照侧血管和股动脉结扎加去神经诱导的侧支血管CX40的表达变化。结果:正常动脉血管内皮细胞表达CX40;去神经侧较大侧支血管仍表达高水平的CX40,但在缺血部位新生的微小血管CX40的表达很低甚至缺如。其荧光强度的比较差异有统计学意义。结论:在股动脉结扎诱导的大鼠后肢侧支血管生长模型中,神经对动脉发生非常重要。     

血管紧张素-(1-7)对心肌肥厚的影响及其与细胞外信号调节激酶的关系

目的：探讨血管紧张素-(1-7)［Ang-(1-7)］对压力负荷性心肌肥厚的影响及其与细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的关系。 方法： 采用腹主动脉缩窄术复制心脏压力负荷增高大鼠模型。75只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、Ang-(1-7)治疗组。在腹主动脉缩窄术后1 d开始，Ang-(1-7)治疗组大鼠，经置入式微量泵持续颈静脉给予Ang-(1-7) (25 μg·kg-1·h-1)；假手术组及模型对照组经微量泵只给予同量的生理盐水。各组分别于术后1周、术后4周处死部分大鼠，检测左心室重量/体重比、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ浓度，并采用免疫印迹方法检测大鼠心肌中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平。 结果： 术后1周和4周，腹主动脉缩窄均导致心肌血管紧张素Ⅱ浓度升高、左心室重量/体重比增加，也导致了心肌中p-ERK1/2表达增高；血管紧张素-(1-7)治疗未改变腹主动脉缩窄对心肌血管紧张素Ⅱ浓度的影响，但能明显减轻腹主动脉缩窄所诱导增高的左心室重量/体重比和心肌中p-ERK1/2表达水平。 结论： 外源性Ang-(1-7)可减轻压力负荷增高所致的心肌肥厚，这一作用可能与它抑制心肌p-ERK1/2表达有关。     

安体舒通对糖尿病大鼠血管生成素1和血管生成素2表达的影响

目的观察安体舒通对1型糖尿病大鼠肾皮质血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)及肾脏血管重建的影响,并初步探讨其机制。方法建立1型糖尿病大鼠模型,用安体舒通干预8周后观察大鼠肾脏血管重建改变,用放射免疫法测定大鼠血浆及肾组织醛固酮水平,用RT-PCR检测各组肾皮质Ang-1和Ang-2mRNA表达。观察安体舒通对上述指标的影响。结果与糖尿病组相比,安体舒通组大鼠肾血管重建改善,血浆及肾组织醛固酮水平更高,Ang-1和Ang-2mRNA表达减少。结论安体舒通通过拮抗醛固酮的作用,减少Ang-1和Ang-2mRNA表达,改善糖尿病肾血管重建从而发挥肾脏保护作用。     

门静脉高压征模型大鼠构建及门静脉侧支血管和内脏血管的形成

背景：Apelin/APJ系统在心血管调节中具有降低血压、加强心脏收缩及Apelin刺激血管生成等作用已为人们所证实。 目的：确认apelin和APJ在内脏组织中的表达,及检验apelin在门脉高压征大鼠的内脏新生血管发育、内脏充血及门静脉侧支化中的关联作用。 方法：36只大白鼠随机分为模型组18只和假手术组18只,模型组采用局部门静脉结扎构建门脉高压征大鼠模型,腹腔注射生理盐水或特定Apelin受体拮抗剂F13A。假手术组除不行结扎外,其余同模型组。 结果与结论：Apelin及其受体APJ在门静脉高压征的大鼠内脏血管系统过度表达。F13A在门静脉高压征的大鼠中能有效减少内脏血管再生和减少血管内皮生长因子、血小板衍生生长因子和血管生成素2的表达,也能减少门静脉侧支血管的形成。     

丹参提取物促大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用

目的:观察丹参提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用并分析其可能的机制。方法:采用经典的冠状动脉左前降支结扎造模方法成功复制大鼠心肌梗死模型后,随机将大鼠分为模型组以及丹参提取物低(10 mg·kg-1·d-1)、中(20 mg·kg-1·d-1)、高(40 mg·kg-1·d-1)剂量治疗组,另设假手术组大鼠为对照组,各组大鼠数量均为8只。丹参提取物各治疗组给予上述对应的各药物剂量灌胃给药,模型组及对照组大鼠给予等量的生理盐水灌胃,连续饲养4周后应用HE染色、Masson染色和电镜法观察大鼠左心室心肌组织和血管结构病理成分变化,免疫组化染色分析心肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)及CD34蛋白的表达变化。结果:组织病理学分析表明,与假手术组相比,模型组大鼠心肌组织形态较为紊乱,部分心肌细胞轮廓消失,坏死心肌组织呈现明显的纤维化,血管不完整,血管超微结构模糊或者消失;丹参提取物治疗之后,新生的血管数量明显增多,且超微结构分析表明,内皮细胞形态相对完整。心肌组织中VEGF及CD34蛋白表达结果证实,模型组较假手术组大鼠表达略有增加,但没有统计学差异;和模型组比较,丹参提取物各治疗组VEGF及CD34蛋白表达明显增多(P0.01)。结论:丹参提取物可明显促进大鼠心肌梗死后心肌组织的血管新生。     

大鼠肢体缺血-再灌注后脑HO-1表达的变化及意义

目的:观察肢体缺血-再灌注(I-R)后脑组织内诱导型血红素氧合酶(HO-1)表达的变化及意义。方法:夹闭大鼠双侧股动脉根部4h、开放2-24h复制肢体I-R模型。反转录多聚酶链反应检测脑内HO-1mRNA表达的变化;免疫组化染色法标记HO-1蛋白的组织分布;用锌原卟啉抑制HO-1活性后,光镜观察脑组织的病理学变化。结果:肢体I-R后脑组织HO-1mRNA表达水平明显高于各对照组,再灌12h表达至峰值,再灌至24h仍显著高于各对照组(P＜0.01)。肢体I-R组大脑皮质、海马等区出现大量弥散分布的HO-1免疫阳性胶质细胞,皮质及海马部分锥体细胞呈HO-1免疫阳性;抑制HO-1活性,I-R组脑组织损伤加重。结论:肢体I-R后,脑组织内胶质细胞及神经元HO-1基因表达上调,所诱生的HO-1对神经元具有保护效应。     

Postnatal development of the vascular pattern in the rat telencephalic pia-arachnoid

Summary The postnatal changes in arrangement of the vascular system of the pia-arachnoid of rats are described based on scanning electron microscopy of microcorrosion casts and transmission electron microscopy. At birth, the distal arteries and veins are embedded in a dense plexiform network of immature capillaries. Arteries and veins are interconnected by many small capillary anastomoses. The trunks are located above the pial plexus. The underlying plexiform vessels provide the matrix for the formation of additional collateral and precortical segments during further development. During the first postnatal week, the distal pial arteries and veins become visible as separate channels and emerge from the subjacent capillary plexus. The pattern of anastomosing arterial rings is now clearly visible. The pial arterial tree can be subdivided into conductive, collateral, and precortical distributive segments, according to Jokelainen et al. (1982). Subsequently, passive expansion of the vascular system takes place during the period of rapid brain growth. In young adults the majority of the formerly closed arterial rings are interrupted, possibly by regression of single collateral arterial segments (Fig. 6). The dense venous capillary plexus of the pia is maintained during the first eight days in spite of marked brain growth. The process of reduction of this capillary plexus starts at the arterial side and proceeds from proximal to distal segments of the veins during the second and third week. The capillary segments, which provide anastomosis between arterial and venous vessels, disappear at the same time as the regression of the dense venous capillary network. Two processes may biodify the architecture of the pial vasculature during development: brain growth and maturation on the one side and cytodifferentiation of vascular walls on other.This work was presented in part at the Third World Congress for Microcirculation, Oxford, 9–14 September 1984, and was published in abstract form (1984, Int J Microcircul Clin Exp 3:308)     

Expression, localization and hormonal control of angiopoietin-1 in the rhesus macaque endometrium: potential role in spiral artery growth

Angiopoietin-1 (Ang-1) is an important angiogenic factor that has not been thoroughly studied in the primate endometrium. We evaluated the endometrial expression of Ang-1 and its receptor, Tie2, during induced menstrual cycles in rhesus macaques. Tie2 expression was confined to the vascular endothelium without marked change during the cycle. However, Ang-1 expression varied considerably during the cycle. In the proliferative phase, Ang-1 was only expressed in the basal zone glands, and this expression was estradiol (E2) dependent. In the early- to mid-secretory phase, Ang-1 expression spread to the upper glands, luminal epithelium and the vascular smooth muscle cells (VSMC) of spiral arteries. In the late secretory phase, the signal disappeared from the glands but remained elevated in the VSMC of spiral arteries. Notably, there was a significant correlation between VSMC proliferation and Ang-1 expression in the VSMC of the spiral arteries. Progesterone (P) withdrawal in the early secretory phase induced a decline in Ang-1 expression in the glands and VSMC of spiral arteries along with a complete suppression of VSMC proliferation. These data suggest, for the first time, that Ang-1 may play a key role in the P-dependent growth of the unique spiral arteries in the primate endometrium.     

创伤性深静脉血栓形成与血液中Hmox-1基因的表达

背景：目前深静脉血栓的诊断主要依赖于影像学和实验室检查,其最致命的不足是血栓已经形成方能明确诊断。因此有必要采用先进的分子技术对其进行研究,探索其发生发展的内在规律。 目的：观察Hmox-1在大鼠创伤性深静脉血栓形成过程中的变化,探讨其作为预测诊断深静脉血栓分子标记物的可行性。 方法：采用钳夹大鼠双侧股静脉和双后肢人字石膏固定的方法建立创伤性深静脉血栓形成模型。依据造模时间和血栓形成状态,将100只实验大鼠随机分为5组：正常对照组、创伤即刻组、血栓形成前期组、血栓形成高峰期血栓形成组、血栓形成高峰期血栓不形成组。Real time-PCR检测血液中Hmox-1基因表达,并切取双侧股静脉血管进行组织学观察血栓形成程度。 结果与结论：建立大鼠创伤性深静脉血栓形成模型后25 h,血栓形成率58%(38/65);血栓形成前期组、血栓形成高峰期血栓形成组Hmox-1表达高于正常对照组(P < 0.05),而血栓形成高峰期血栓不形成组与正常对照组比较差异无显著性意义。Hmox-1在血液中的表达变化趋势与血栓形成生物学过程相符,有可能作为预测大鼠深静脉血栓形成的标志物。     

嗅鞘细胞移植脊髓全横断损伤大鼠大脑皮质运动区转化生长因子β表达的影响

背景：多项研究已证实嗅鞘细胞能促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复,但其分子机制还不清楚。 目的：观察嗅鞘细胞移植对脊髓全横断大鼠大脑皮质运动区转化生长因子β mRNA表达的影响。 方法：采用酶消化法培养GFP转基因小鼠嗅鞘细胞,制成细胞悬液。建立SD大鼠T9脊髓全横断模型,造模后分为假手术组、模型组和嗅鞘细胞移植组。应用RT-PCR方法检测各组大鼠大脑皮质运动区转化生长因子β mRNA的表达变化,用β-actin作内参。 结果与结论：模型组大鼠造模后3 d大脑皮质运动区转化生长因子β mRNA的表达量高于假手术组(P < 0.05),造模后7,14,21和28 d回到假手术组水平。嗅鞘细胞移植后21 d,嗅鞘细胞移植组转化生长因子β mRNA的表达量低于模型组(P < 0.05)。提示全横断脊髓损伤致大脑皮质运动区转化生长因子β mRNA早期表达上调,随后与假手术组相比无差别;嗅鞘细胞移植后期可逆转转化生长因子β mRNA的表达变化,有助于脊髓损伤的恢复。     

纤维连接蛋白在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达

背景：纤维连接蛋白表达增加在肾间质纤维化疾病进展过程中发挥着的重要作用。 目的：观察纤维连接蛋白在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达。 方法：72只大鼠随机等分为对照组、假手术组和模型组。模型组建立单侧输尿管梗阻模型;假手术组仅开腹游离左侧输尿管;对照组不做任何处理。 结果与结论：与对照组及假手术组比较,模型组大鼠梗阻时间越长,肾小管间质损害程度越重,纤维化越明显,肾组织中纤维连接蛋白、基质金属蛋白酶9和转化生长因子β1表达即明显增多,且随着梗阻时间延长,肾组织中纤维连接蛋白、基质金属蛋白酶9和转化生长因子β1表达呈持续增加趋势,至造模后第14天达到高峰,与同期对照组、假手术组相比差异有显著性意义(P < 0.01),说明在大鼠肾纤维化形成过程中,纤维连接蛋白的蛋白表达在肾损伤早期即显著增加,并随肾间质纤维化程度加重而逐步升高,从而促进肾纤维化的发生。而基质金属蛋白酶9的高表达可能是加重肾间质损害的因素之一。     

A study of neovascularization in the rat ischemic hindlimb using Araldite casting and Spalteholtz tissue clearing

INTRODUCTION: Understanding neovascularization is an important prerequisite for therapeutic advances aimed at the salvation of ischemic tissues. We explored an alternative strategy to corrosion casting for visualizing neovascularization in a rat hindlimb ischemia model. METHODS: Rats were subjected to hindlimb ischemia by femoral artery ligation. Directly after femoral artery occlusion and at 7, 14, 21 and 28 days postsurgery, rats were sacrificed, and neovascularization was evaluated by vascular casting with Araldite plastic and subsequent Spalteholtz tissue clearing. RESULTS: Semitransparent preparations were obtained, in which the casted arteries could be directly and three-dimensionally visualized in detail and in relation to the surrounding tissue. In the vascular casts, collateral formation and recanalization of previously thrombosed arteries were demonstrated. CONCLUSIONS: We describe an alternative approach to study neovascularization in animal models. This method, which combines Araldite plastic vascular casting with Spalteholtz tissue clearing, preserves all vasculature as well as the surrounding tissue. In a small time series in rat ischemic hindlimbs, we show that restoration of blood flow after ischemia not only involves newly formed collaterals, but also recanalization of previously thrombosed arterial segments.