VAD1 mRNA表达对新型隐球菌性脑膜炎患者脑脊液Th1/Th2免疫平衡的影响

VAD1 (virulence-associated DEAD-box RNA helicase)基因是新发现的新型隐球菌诸多毒力路径的重要调节因子.研究表明,VAD1调节着几个新的毒力所涉及的不同性状,如应激条件下生长、耐盐性和毒力表达[1].DEAD-box蛋白对于介导宿主-病原体之间的信号转导路径是至关重要的.例如,副黏病毒可结合在DEAD-box解旋酶-黑素分化相关基因5上,阻止其活化IFN-β启动子,从而抑制了抗病毒的IFN应答[2].提示VAD1这一DEAD-box解旋酶基因在新型隐球菌菌体致病与宿主防御中的重要作用.     

DExD/H-box家族蛋白在肿瘤中的研究进展

人类DExD/H-box家族蛋白是一种重要的RNA解旋酶,在RNA的加工过程中发挥重要的作用,其生物学特点与功能有待深入研究.随着对RNA在生命进程中作用的研究,发现DExD/H-box家族蛋白作为一种重要的RNA解旋酶几乎涉及RNA生命进程(包括pre-mRNA剪接、核糖体生物合成、基因转录等)中的所有环节.近年来该家族在恶性肿瘤中的作用备受关注,研究发现其在肿瘤的发生发展中起重要作用.本文将对该家族蛋白在恶性肿瘤中的研究进展进行概述.     

天然免疫受体RIG-Ⅰ的翻译后修饰及其功能调控

<正>RIG-Ⅰ样受体(RIG-Ⅰ-like receptors,RLRs)属于DEx D/H box RNA解旋酶家族,在胞浆中感知RNA病毒相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),介导下游信号转导和转录因子的活化,启动机体抗病毒天然免疫应答。维甲酸诱导基因蛋白I(Retinoid acid inducible gene I,RIG-     

登革2型病毒NS3蛋白NTPase/RNA解旋酶结构域的原核表达及活性研究

目的 表达登革病毒非结构蛋白NS3 NTPase／RNA解旋酶结构域（dNS3），纯化表达产物并对其活性作初步研究。方法提取感染登革2型病毒的BHK-21细胞总RNA，RT-PCR扩增目的基因，经NcoⅠ、HindⅢ双酶切后连入表达载体pET28a，转化宿主菌BL21（DE3），优化诱导表达条件，SDS-PAGE和免疫印迹鉴定表达蛋白。表达产物经亲和层析纯化，超滤浓缩脱盐，孔雀绿钼酸铵法检测NTPase活性。结果成功构建重组表达载体pET28a-dNS3并在大肠杆菌中获得可溶性表达，纯化产物经测定具有良好的NTease活性及抗原性。体外条件下证实登革2型病毒非结构蛋白NS5（RDRP）对dNS3的ATPase活性有促进作用，提示在病毒复制时NS3与NS5间的相互作用对NS3的生物活性及对病毒复制过程可能具有调控作用。结论本研究为基于抑制NS3 NTPase／RNA解旋酶活性的抗病毒药物的筛选提供了实验依据。     

宿主因子Mov10蛋白的研究进展

Mov10蛋白是RNA解旋酶超家族-1成员,也是RNA诱导沉默复合体(RISC)的组份.近来研究证实,Mov10蛋白在RNA干扰路径中有积极的作用并且能在多阶段抑制HIV-1复制,包括病毒产生、Gag蛋白水解程序、逆转录过程.Mov10蛋白也可降低其它逆转录病毒如猿类免疫缺陷病毒、鼠白血病病毒和马传染性贫血病毒的感染性.因此,Mov10蛋白具有广泛和有效的抗逆转录病毒活性.     

非编码RNA在人脑胶质瘤中的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是近年发现的一类新型RNA,其共同特点是它们都能经基因组转录产生,但不产生蛋白产物,通过RNA水平调控执行多种生物学功能。哺乳动物基因组序列中绝大多数为ncRNA,其中,长链非编码RNA(long non-coding RNA,ln RNA)在人类脑部大量表达,参与胶质瘤染色质重构、介导修饰、转录调控、选择性剪切等生物过程。微小RNA(microRNA,miRNA)在脑部也被大量发现,在胶质瘤中部分miRNA表达异常升高,调控癌症相关基因的表达或参与调控肿瘤形成机制和调控通路。另外,环状RNA(circular RNA,circRNA)和与PIWI蛋白家族结合的RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)在胶质瘤发生发展中也可能发挥作用。     

DHRS4反义RNA结合蛋白的高通量检测与分析

目的 DHRS4是细胞内NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶家族成员4的编码基因。与人类DHRS4基因以头对头形式存在的反义转录本AS1DHRS4,可以调控DHRS4基因的转录。本研究高通量检测分析DHRS4反义RNA结合的蛋白以探讨DHRS4反义转录本调控正义基因表达的作用机制。方法采用甲醛交联细胞内的核酸-蛋白复合物,然后通过生物素标记的奇数组和偶数组寡核苷酸作为探针pull-down AS1DHRS4结合的蛋白,LCMS/MS鉴定后数据库比对分析DHRS4反义RNA结合的蛋白。结果奇数组和偶数组探针pull-down后分别鉴定得到650种和508种蛋白,两组探针检测的共同蛋白434种。大部分蛋白为结合蛋白并与RNA的加工和修饰相关。结论 DHRS4反义RNA结合的蛋白的检测和分析为今后进一步研究反义RNA功能和机制提供了线索和基础。     

DEAD-box RNA解旋酶5和转录因子12与肌萎缩侧索硬化症的关系

目的通过检测DEAD-box RNA解旋酶5(DDX5)和转录因子12(TCF12)在SOD1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠海马中表达情况及其相互作用关系,揭示DDX5和TCF12表达改变与ALS海马病变的关系。方法将42对SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠和野生型小鼠,按照95 d龄(发病早期)、108 d龄(发病中期)和122 d龄(发病晚期)分为3组,通过RT-PCR、Western blotting和免疫荧光双标记技术,检测DDX5和TCF12在海马中的表达情况,通过免疫共沉淀技术检测DDX5和TCF12蛋白之间是否具有相互作用。结果与同龄野生型小鼠相比,在SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠海马中DDX5和TCF12 m RNA无明显变化,而蛋白在95 d、108 d和122 d表达均上调,差异均有统计学意义。海马齿状回和海马本部均可见DDX5和TCF12阳性细胞,且DDX5和TCF12在海马神经元中表达。SOD1-G93A突变型ALS转基因小鼠海马中DDX5和TCF12免疫阳性反应均较同龄野生型小鼠增强。免疫共沉淀实验检测发现,DDX5和TC...     

14-3-3蛋白与凋亡

14 3 3蛋白是分布十分广泛的真核生物蛋白家族 ,在体内发挥着诸多的生物学功能。 14 3 3蛋白能够在多个通路和环节与一些调节因子相互作用 ,抑制凋亡的发生 ;14 3 3蛋白主要是通过以下几种作用方式参与凋亡的调节 :控制靶蛋白 (如Bad ,Bax ,Fkhrl 1)的亚细胞定位 ,作为接头蛋白 (如A2 0与c Raf 1)促进蛋白质 蛋白质相互作用以及调节关键酶 (如ASK1)的活性 ,但具体作用机制有待进一步研究     

小G蛋白Ran的研究进展

真核细胞中含量最丰富的小G蛋白Ran(Ras relatednuclearprotein) ,具有与其所属的Ras家族其它成员不同的生化特点。其活性主要受到Ran的鸟苷酸交换因子 (RanGEF)RCC1(regulatorofchromosomecondensation 1) ,GTP酶激活蛋白 (GTPase activatingprotein ,GAP)以及Ran结合蛋白 (Ranbindingprotein ,RanBP)的调节。Ran主要参与了物质的核浆转运 ,此外在RNA出核、RNA合成、加工及细胞周期调控中也起到一定作用 ,并且是LPS活化基因的产物。