刺五加叶皂甙对Ⅱ型糖尿病大鼠GLP-1和血糖分泌的影响

目的　研究刺五加叶皂甙 (acanthopanaxsenticosussaponin ,Ass)对实验性Ⅱ型糖尿病 (非胰岛素依赖型糖尿病 ,non insulindependentdiabetesmellitus,NIDDM)大鼠胰高血糖素样肽 1(glucagon likepeptide 1,Glp 1)和血糖的作用。方法　选用雄性Wistar大鼠 5 0只 ,用链尿佐菌素 2 5mg/kg加高脂、高糖、高热量饲养制成Ⅱ型糖尿病大鼠模型。应用放射免疫分析测定给予Ass后其空腹及口服葡萄糖后血浆中Glp 1和血糖变化。 结果　与正常组大鼠比较 ,Ass可使Ⅱ型糖尿病大鼠空腹及口服葡萄糖后Glp 1分泌升高、血糖水平降低。 结论　Ass对Ⅱ型糖尿病大鼠具有一定的治疗作用     

茶多酚对2型糖尿病患者外周血早期内皮祖细胞衰老及氧自由基损伤的影响

目的:通过体外诱导培养2型糖尿病(T2DM)患者外周血早期内皮祖细胞(earlyEPC),观察茶多酚(TP)对其衰老和氧自由基损伤的影响。方法:分别采集20例T2DM患者及15例正常对照人群外周血各20ml,获取单个核细胞后,在包被有纤维连接蛋白(FN)的培养板中加入含有血管内皮生长因子(VEGF)等的M199培养基,诱导earlyEPC分化,于第6天加入不同浓度TP干预24h后,测定earlyEPC衰老情况及丙二醛(MDA)含量。结果:两组样本分别给予TP(1mg/L、10mg/L、100mg/L)干预后,earlyEPC的衰老细胞明显减少(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.05),但TP对实验组earlyEPC的衰老和MDA改善情况不如对照组明显(P<0.05);100mg/L的TP对T2DM患者MDA的改善效果不明显(P>0.05)。结论:适宜浓度TP能够不同程度改善T2DM患者earlyEPC的衰老及氧自由基损伤。     

胰高血糖素样肽1-受体/沉默信息调节因子1通路参与高糖诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞衰老

目的:探讨胰高血糖素样肽1-受体(GLP-1R)/沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路参与高糖诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞系(PC12)细胞衰老的机制。方法:培养PC12细胞用作神经细胞模型,采用β-半乳糖苷酶染色评价PC12细胞衰老情况;免疫印迹检测SIRT1、GLP-1R表达。结果:葡萄糖能剂量依赖性诱导PC12细胞衰老,并抑制SIRT1和GLP-1的表达,且均在葡萄糖(30 mmol/L,48 h)时效果最明显。SIRT1激动剂白藜芦醇(10μmol/L)能抑制高糖促进PC12细胞衰老的作用,而SIRT1的特异性抑制剂splitomicin(10μmol/L)能阻断白藜芦醇的作用。GLP-1R的激动剂GLP-1(10 nmol/L)能逆转高糖对SIRT1表达的抑制作用并缓解PC12细胞的衰老,而GLP-1R特异性拮抗剂exendin(9-39)则阻断了GLP-1的作用。结论:GLP-1R/SIRT1信号通路参与了高糖诱导的神经细胞衰老的作用。     

西格列汀对2型糖尿病大鼠心肌细胞焦亡的影响及其可能机制

目的:研究西格列汀(sitagliptin,SLT)对2型糖尿病大鼠心肌细胞焦亡的影响,并探讨其抑制糖尿病心肌病可能的作用机制。方法:建立2型糖尿病大鼠模型,并给予(3、10和30 mg/kg)和sirtuin(SIRT)家族抑制剂尼克酰胺(nicotinamide,NAM;500 mg/kg)灌胃4周。检测空腹血糖,采用免疫组织化学法和Western blot法检测心肌组织中相关蛋白表达。结果:与正常对照组相比,糖尿病大鼠心肌组织细胞SIRT3表达下调,而NLRP3表达上调(P0.05),糖尿病大鼠心肌组织发生焦亡的细胞明显增多。灌胃SLT能剂量依赖性地抑制糖尿病大鼠心肌细胞焦亡的发生,并上调SIRT3的表达,下调NLRP3蛋白表达(P0.05);SIRT3非特异性抑制剂NAM(500 mg/kg)能逆转SLT的心脏保护作用,与正常对照组相比,单独给予NAM(500 mg/kg)对正常大鼠心肌细胞SIRT3表达无明显作用,但NLRP3表达上调(P0.05),心肌组织发生焦亡的细胞增多。结论:SLT能抑制糖尿病诱导的心肌细胞焦亡,其作用机制可能涉及SIRT3/NLRP3信号途径。     

胰高血糖素样肽-1及其类似物对心血管系统的影响

心血管病变是糖尿病常见的并发症,胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)作为一种肠促胰素,不仅具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用、促进胰腺β细胞增生和修复、改善胰岛素抵抗,而且还可减轻体质量、调节脂质代谢、改善心血管危险因素。研究表明GLP-1可直接作用于血管内皮细胞和心肌细胞,对心血管系统可能具有保护效应。     

敲减ATR基因对大鼠骨髓内皮祖细胞衰老及其功能的影响

背景:内皮祖细胞在血管内皮更新及修复中发挥重要作用,利用体外扩增的自体内皮祖细胞移植促进缺血部位血管新生,现已成为防治缺血性心血管疾病的新策略,但取自老年机体的内皮祖细胞在体外扩增中会出现细胞衰老迹象,难以发挥修复能力,研究表明DNA损伤与细胞衰老关系密切,DNA损伤检测点是调控DNA损伤的重要关卡。目的:通过慢病毒RNA干扰技术敲减大鼠骨髓内皮祖细胞中的ATR基因,探讨其在内皮祖细胞衰老进程中的作用。方法:将大鼠骨髓源内皮祖细胞进行分离、培养并鉴定,将分离出的内皮祖细胞继续培养至第3代,随机分为3组:未转染组(空白组)、阴性对照组、基因敲减组(ATR-RNAi组)。未转染组正常培养,阴性对照组、基因敲减组分别予以慢病毒RNAi及慢病毒ATR-RNAi稳定转染至第3,6天,通过qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中ATR mRNA和蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞的衰老情况,MTT比色法检测各组细胞的增殖能力,Transwell实验和体外血管生成试剂盒分别检测各组细胞迁移能力及成血管功能,流式细胞术检测各组细胞周期变化。结果与结论:(1)与未转染组比较,AT...     

胰高血糖素样肽-1对胰岛β细胞的影响

胰高血糖素样肽-1,作为一种"肠促胰素",对胰岛β细胞具有多方面积极的影响.它可刺激胰岛β细胞分泌胰岛素,促进它的增殖分化再生并抑制其凋亡,在糖尿病的治疗中有很好的应用前景.     

消渴汤方剂对Ⅱ型糖尿病大鼠GLP-1分泌的影响

目的　探讨消渴汤方剂对Ⅱ型糖尿病大鼠类胰高血糖素肽 1(GLP 1)水平和血糖分泌的影响, 为Ⅱ型糖尿病的治疗提供新的思路。方法　应用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定正常组、Ⅱ型糖尿病模型组 和口服消渴汤大鼠组血浆GLP 1和血糖水平。结果　Ⅱ型糖尿病大鼠血糖水平明显高于正常大鼠,口服消渴 汤大鼠GLP 1水平明显高于Ⅱ型糖尿病大鼠、血糖水平低于Ⅱ型糖尿病大鼠,对正常组大鼠无影响。结论　 消渴汤使Ⅱ型糖尿病大鼠GLP 1水平升高、血糖水平降低。     

胰高血糖素样肽-1及类似物对心血管系统作用的研究进展

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)因其有效的降糖作用,为临床治疗2型糖尿病带来了新的契机.心血管病变是糖尿病的常见并发症,研究发现GLP-1及类似物可以通过改善内皮功能,抑制炎性反应,减少心梗面积及缺血/再灌注损伤,抑制心肌细胞凋亡和改善心肌能量代谢等作用来降低心血管疾病风险,这将为临床治疗心血管疾病提供新的途径和方法.     

犬骨髓内皮祖细胞生物学特性及诱导分化

目的:探讨犬骨髓内皮祖细胞(EPCs)随培养时间延长其生物学特性变化及向内皮细胞(ECs)分化能力。方法:免疫微珠分选方法纯化犬骨髓CD14 细胞,EGM-MV2条件培养基培养,于不同时间检测EPCs的生物学特性;将存活至8周的EPCs以分化培养基(M199 20%胎牛血清 VEGF)诱导培养,检测ECs表面标志的表达。结果:早期EPCs为分选后8代之前的EPC,体积略小,类圆形,60%融合时呈串珠样排列,表达CD133、CD14;晚期EPCs由表达VE-cadherin、KDR、CD14的早期EPCs分化而来,形态为多边形,分泌活动明显加强,表达CD133、VE-cadherin、CD14和KDR;诱导分化细胞呈鹅卵石样外观,表达Ⅷ因子、CD31。结论:犬骨髓EPCs随培养时间呈现不同生物学特性,早期EPCs不稳定,晚期EPCs显示出更稳定的生物学特性,能够分化为ECs,是血管组织工程学研究良好的种子细胞。     

高糖对糖尿病患者内皮祖细胞增殖凋亡的影响及其机制探讨

目的：了解葡萄糖对糖尿病患者内皮祖细胞（EPCs）增殖及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：以不同浓度葡萄糖分别作用于25例正常人(对照组)和25例2型糖尿病患者(糖尿病组)EPCs，MTT法检测其增殖，Annexin-V/PI法检测其凋亡。RT-PCR法检测bcl-2和bax的表达水平。结果：33 mmol/L葡萄糖使糖尿病组和对照组EPCs增殖率均减低，凋亡率增高；且能使糖尿病组和对照组EPCs表达bax增强，bcl-2表达无明显改变。而5 mmol/L葡萄糖作用下糖尿病组和对照组EPCs增殖率、凋亡率及bax和bcl-2表达无明显改变。结论：高糖使EPCs增殖功能减弱，凋亡增加，bax表达增加可能是其机制之一。     

Association of toll‐like receptor 4 polymorphisms with type 2 diabetes mellitus

Toll‐like receptor 4 (TLR4) plays important roles in modulating innate immunity. Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a chronic and complex disease that is characterized by impaired insulin resistance and dysregulated immune response. In the current study, we investigated whether TLR4 polymorphisms were correlated with susceptibility to T2DM in the Chinese population. Four TLR4 polymorphisms (?2431T/C, Asp299Gly, Thr399Il3, and +3725G/C) were genotyped in 936 T2DM patients and 978 healthy controls. Results showed that the prevalence of TLR4 +3725GC and CC genotypes was significantly decreased in T2DM cases than those in controls [odds ratio (OR) = 0.68, 95% confidence interval (CI) = 0.55–0.84, p = 0.0003, and OR=0.46, 95% CI = 0.32–0.67, p = 3.71 × 10^?5, respectively). Also, the frequency of TLR4 +3725C allele was significantly lower in T2DM patients (p = 2.50 × 10^?8). The ?2431T/C did not reveal any significant differences between cases and controls. We did not detect Asp299Gly and Thr399Il3 polymorphisms in our study group. Stratification analysis of the clinical features in the patients demonstrated that frequency of +3725CC genotype was lower in patients older than 50 years old (p = 0.047). In conclusion, these results indicate that TLR4 +3725G/C polymorphism may be a novel protective factor against T2DM in the Chinese population.     

2型糖尿病骨质疏松大鼠骨重建研究

目的通过建立2型糖尿病骨质疏松大鼠模型,探讨其骨重建特点。方法 雌性Wistar大鼠分为假手术组(NS组);去卵巢组(NOVX组);2型糖尿病假手术组(DS组)和2型糖尿病去卵巢组(DOVX组)。糖尿病组大鼠造模成功后行双侧卵巢切除术,0、4、8和12周测血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、雌激素(E2)及血清骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP5b),同期测定骨密度(BMD)并行成骨和破骨细胞培养。结果 0周时DOVX组的血糖(13.1±4.9)mmol/L明显高于NS组的(4.4±0.6)mmol/L(P<0.05)。4周时DOVX组的BMD为(0.073±0.012)g/cm2明显低于NS组的(0.098±0.016)g/cm2(P<0.05)。4、8和12周时DOVX组的B-ALP与NS组均无差异,而4和8周时DOVX组的TRACP5b明显高于NS组(P<0.05)。4、8和12周时DOVX组的成骨细胞活力与NS组均无差异,而DOVX组的破骨细胞计数明显高于NS组(P<0.05)。结论 2型糖尿病骨质疏松大鼠骨重建特点为骨吸收活跃而骨形成相对减慢。     

Characterization of monocyte-derived dendritic cells in recent-onset diabetes mellitus type 1

Dendritic cells (DC) may play an important role in the immunopathogenesis of type 1 diabetes mellitus (DM-1). In this study, we have analyzed phenotypical changes during cytokine-driven maturation from CD14+ monocytes to mature DC and DC-dependent T-cell stimulation in recent-onset pediatric DM-1 patients and healthy controls. DC maturation was monitored by flow cytometric analyses for the expression of surface markers (HLA-DR, CD1a, CD40, CD80, CD86, CD83, CD14, CD32, mannose-receptor, and CD11c). Flow cytometric analysis of isolated peripheral blood monocytes did not reveal apparent differences between patients and controls. During DC maturation no obvious differences in the expression patterns of surface markers over time or evidence for maturation impairments in DM-1 patients could be appreciated. Solely, a marginal, but significant, transient down-regulation of CD1a on Day 3 (mean MDFI 3.82 vs 7.25; P = 0.021), which was accompanied by an increase of IL-6, could be observed. The comparison of mature DCs (Day 10) between patients and controls indicated no significant differences, except for CD83 (mean MDFI 1.7 vs 1.5; P = 0.042) and CD80 (mean MDFI 15.92 vs 12.73; P = 0.042). Moreover, no difference in T-cell stimulatory capacity was seen. In conclusion, our analysis of a cohort of recent-onset DM-1 patients and controls does not support a role for disease-related alterations in cytokine-driven maturation of monocyte-derived DC.     

川芎嗪通过抗炎作用减轻2型糖尿病大鼠心肌病变

目的:观察川芎嗪对抗糖尿病引起的大鼠心肌细胞损伤的作用。方法:雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养4周后空腹自尾静脉注射STZ制造2型糖尿病模型,观察不同给药剂量川芎嗪对糖尿病大鼠体重、血糖、心脏组织形态以及心肌组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IKKβ和NF-κB蛋白水平的影响。结果:高剂量川芎嗪可缓解糖尿病大鼠的体重减轻和血糖升高,并且可以减少促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,降低IKKβ和NF-κB的蛋白水平。结论:川芎嗪通过拮抗炎症通路能减轻糖尿病引起的大鼠心肌细胞损伤。     

SDF-1/CXCR4生物轴活化诱导对鼠骨髓源性内皮祖细胞生物学性能的影响

目的 观察基质细胞衍生因子-1( SDF-1)及其特异性受体CXCR4生物轴对体外培养的鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)生物学性能的影响.方法 以密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞,由Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双染鉴定后确认为EPCs.传代培养后,加入不同浓度SDF-1溶液,培养48 h,然后分别...     

高血压病和2型糖尿病患者血清损伤ECV-304细胞的比较研究

目的:以高血压病和2型糖尿病为例进行血瘀证血管内皮细胞损伤模型的比较研究,为中医学"异病同证"理论提供实验依据。方法:取对数生长期ECV-304细胞,分组如下:空白对照组(无血清的DMEM组)、糖尿病血瘀证组(糖尿病血瘀证患者血清)和高血压病血瘀证组(高血压病血瘀证患者血清)。采用噻唑蓝比色法(MTT法)观察细胞活性;在倒置相差显微镜、扫描电镜和透射电镜下观察细胞形态的变化;应用放免法测定内皮素(ET)含量;硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量;利用双抗夹心酶联免疫法(ELISA)检测各组细胞培养上清液中内皮细胞蛋白C受体(EPCR)、血管内假性血友病因子(vWF)和血栓调节蛋白(sTM)的含量;应用激光扫描共聚焦显微镜,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂观察细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度的变化;并采用荧光探针标记的鬼笔环肽染色法观察细胞肌动蛋白微丝分布的差异。结果:(1)MTT结果显示,10%血清作用下,高血压病血瘀证组的细胞活力低于对照组(P0.05),糖尿病血瘀证组的细胞活力也低于对照组(P0.05),但高血压病血瘀证组的细胞活力与糖尿病血瘀证组差异无显著(P0.05);(2)高血压病血瘀证组的ET水平高于对照组(P0.05),糖尿病血瘀证组也高于对照组(P0.05),且高血压病血瘀证组的ET水平低于糖尿病血瘀证组(P0.05);高血压病血瘀证组的NO水平低于对照组(P0.05),糖尿病血瘀证组也低于对照组(P0.05),且高血压病血瘀证组的NO水平高于糖尿病血瘀证组(P0.05);(3)高血压病血瘀证组的EPCR、vWF和sTM含量高于对照组(P0.05),糖尿病血瘀证组也高于对照组(P0.05),且高血压病血瘀证组的EPCR水平低于糖尿病血瘀证组(P0.05);而高血压病血瘀证组的vWF和sTM含量与糖尿病血瘀证组之间差异无显著(P0.05);(4)高血压病血瘀证组[Ca2+]i高于对照组(P0.05),糖尿病血瘀证组[Ca2+]i高于对照组(P0.05),高血压病血瘀证组胞浆内荧光分布不均匀,[Ca2+]i高于糖尿病血瘀证组(P0.05);(5)高血压病血瘀证组可见细胞骨架微丝减少但排列较为规则,糖尿病血瘀证组的微丝断裂且排列紊乱,二者微丝分布差异显著。结论:高血压病患者血清和糖尿病患者血清对ECV-304细胞骨架、[Ca2+]i及ET、NO和EPCR表达的影响不同,但均能造成ECV-304细胞损伤,这可能是中医学"异病同证"的病理学基础。