同种异体半月板移植的研究现状

1 研究背景 1.1半月板的解剖与功能 半月板是膝关节内的软骨盘,位于胫骨平台与股骨髁之间,内侧为C型,外侧为近似O型.均分为前角、后角和体部.前后角借助"止点"结构固定于胫骨平台,内侧半月板前角止于胫骨髁间前斜坡处,后角止于内侧髁间棘后侧、后交叉韧带止点之前;外侧半月板前角止于外侧髁间棘前部,部分纤维与前交叉韧带相延续,后角止于外侧髁间棘后缘.     

同种异体肋软骨膜移植半月板再生的实验研究

目的：探究同种异体肋软骨膜游离移植再生半月板的能力及其预防关节退变的意义。材料及方法：选用成年家犬10只，双膝关节内侧半月板切除后随机选取一侧膝关节内侧间隙植入同种异体肋软骨膜（同种异体移植组），对侧膝关节植入自体肋软骨膜（自体移植组），以全部切除的正常半月板及正常膝关节作为对照（对照组）。分别于术后4、8、12周切取标本，进行大体、光镜（HE染色及Alcian-blue,Safranin 0复杂）、透射电镜观察，并对正常半月板及术后12周的移植物进行生物力学测试。结果：12周时所有移植物都衍化再生出接近正常半月板大小及形态的纤维软骨板。在整个实验过程中未见明显的免疫排斥反应。生物力学测试结果显示两移植组再生半月板的抗拉伸性能无显著性差异，均低于正常半月板。结论：同种异体肋软骨膜游离移植于半月板缺失的犬的膝关节中可以存活，并可再生出接近正常形态、结构的半月板，无免疫排斥反应。     

同种异体半月板移植临床研究现状

同种异体半月板移植(MAT)可恢复半月板解剖结构,重建患膝正常生物力学环境,从而避免半月板切除术引起的栽荷传导紊乱,延缓膝关节退变.同种异体半月板具有良好的组织相容性,经新鲜冰冻法或冷藏法保存的半月板移植效果满意.MAT的适应证渐广,对OBⅢ级以上的退变膝关节行脚也取得满意疗效.半月板尺寸测定方法 中MRI较X线摄片精确,对身高、体重、性别等的综合分析有助于提高精度.半月板骨锚固定与软组织固定相比更具初步稳定性.MAT前交叉韧带重建、高位胫骨截骨术等联合可使疗效协同.MAT术后进行适当的功能锻炼对患膝功能恢复有重要意义.MAT中短期疗效较为肯定.远期疗效尚需大量研究证实.     

成型脱钙骨基质移植重建完全半月板缺损的实验研究

[目的]探索成型脱钙骨基质作为完全半月板缺损后替代假体的可行性，并进行移植假体引导自体组织再生效果的评价。[方法]脱钙骨基质按照Urist方法制备，并依据半月板的形状预制成型。48只新西兰大白兔随机分为脱钙骨基质移植组和脱细胞同种异体移植（冻融处理）对照组，并将两组按照三个不同时期分为3个配伍组。将各组动物分作关节功能评价，大体观察，组织学和免疫学观察；并进行统计分析。[结果]脱钙骨基质组回缩较小，细胞组织的增殖活性更高；两组总体和各期在移植体回缩率，免疫组织化学检查均有统计学意义。[结论]成型脱钙骨基质作为半月板假体较脱细胞同种异体半月板具有更好的性能结构和增殖活性。     

同种异体半月板移植治疗盘状半月板撕裂

目的探讨同种异体半月板移植治疗盘状半月板撕裂的临床效果。方法 2005年5月-2009年9月,采用同种异体半月板移植治疗7例盘状半月板撕裂患者。男2例,女5例;年龄18～33岁,平均22.6岁。左膝5例,右膝2例。损伤原因:运动伤4例,撞击伤2例,无明显原因1例。检查:关节间隙压痛阳性7例,浮髌试验阳性2例,McMurray试验阳性7例,蹲行试验阳性6例。膝关节活动度为0～60°。病程3个月～17年,中位病程26个月。结果术中每例患者缝合9～13针,平均11针。手术时间1.5～2.7 h,平均1.7 h。术后发热时间31～57 h,平均46.4 h。术后6例切口Ⅰ期愈合;1例术后3周发生感染,经抗生素盐水灌注冲洗18 d后愈合。术后7例均获随访,随访时间12～53个月,平均21.6个月。术前临床症状均消失,膝关节活动度为0～125°。术后6个月MRI检查显示,骨、半月板及其周围滑膜均愈合良好。术后6个月根据日本骨科协会评分(JOA)标准为(80.71±4.82)分,与术前(41.71±8.07)分比较,差异有统计学意义(t=10.11,P=0.00)。结论同种异体半月板移植是治疗盘状半月板撕裂的较好方法,可以明显缓解膝关节的疼痛,且术后并发症少。     

软骨脱细胞基质生物性的实验研究

目的　研究软骨脱细胞基质植入机体后其局部及重要脏器的反应。方法　将兔耳软骨行脱细胞处理。将 1 2只SD大鼠分四组 ,实验组为脱细胞软骨 ;对照 1组为新鲜软骨 ;对照 2组为Vicryl;对照 3组为硅胶条。将脱细胞处理及未处理的兔耳软骨、Vicryl和硅胶条分别植入鼠背部皮下 ,饲养至术后 7,1 5 ,30天后处死取材 ,每次每组处死 1只。取材的部位包括植入物及其周边组织 ,实验组同时取心、肺、肝、肾。标本以 1 0 %中性甲醛固定 2 4h ,常规HE染色。结果　脱细胞软骨周围有少量嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润 ,可见扩张的毛细血管 ,为炎性反应Ⅲ级。新鲜软骨周围有大量中性粒细胞浸润 ,其中可见不规则的钙化组织 ,为炎性反应Ⅳ级。硅胶和Vicryl均引发异物反应。实验组术后 4周内心、肺、肝、肾四种器官无器质性改变。结论　脱细胞软骨基质具有良好的组织相容性 ,是一种潜在软骨的替代材料及软骨组织工程支架材料     

软骨脱细胞基质生物性的实验研究

目的研究软骨脱细胞基质植入机体后其局部及重要脏器的反应.方法将兔耳软骨行脱细胞处理.将12只SD大鼠分四组,实验组为脱细胞软骨;对照1组为新鲜软骨;对照2组为Vicryl;对照3组为硅胶条.将脱细胞处理及未处理的兔耳软骨、Vicryl和硅胶条分别植入鼠背部皮下,饲养至术后7,15,30天后处死取材,每次每组处死1只.取材的部位包括植入物及其周边组织,实验组同时取心、肺、肝、肾.标本以10%中性甲醛固定24h,常规HE染色.结果脱细胞软骨周围有少量嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润,可见扩张的毛细血管,为炎性反应Ⅲ级.新鲜软骨周围有大量中性粒细胞浸润,其中可见不规则的钙化组织,为炎性反应Ⅳ级.硅胶和Vicryl均引发异物反应.实验组术后4周内心、肺、肝、肾四种器官无器质性改变.结论脱细胞软骨基质具有良好的组织相容性,是一种潜在软骨的替代材料及软骨组织工程支架材料.     

同种异体半月板移植的实验研究及临床应用现状

半月板具有相当重要的功能，全切除以后，膝关节会过早地发生退行性改变，５０％以上的患者发生诸如关节疼痛及韧带松弛而导致膝关节不稳定。为了避免这些弊病，学者们进行了试图保存半月板的许多研究，如关节镜下半月板部分切除及修复已在临床上广泛应用，并取得较好的效...     

关节镜下同种异体半月板移植的护理配合

目的 探讨全关节镜下同种异体半月板移植的手术护理配合.方法 对5例半月板损伤患者行关节镜下同种异体半月板移植术;术前访视,做好仪器、物品及同种异体半月板供体的准备;术中巡回、器械护士与术者密切配合;术后协助术者妥善包扎伤口,并送患者返回病房等.结果 5例患者平均手术时间3.7 h,术程顺利;术后均未出现排斥反应和其他并发症;随访1～5个月,均已完全负重,无疼痛、肿胀等临床症状.结论 关节镜下行同种异体半月板移植术,安全、患者恢复快;积极有效的护理配合是手术成功的重要保障.     

Meniscus allograft transplantation using posterior peripheral suture technique: a preliminary follow-up study

The aim of this study was to describe the indication, planning, technique, rehabilitation, and clinical results after cryopreserved allograft meniscus transplantation. Forty consecutive patients, 33 men and 7 women (mean, 37.3 years of age), were evaluated at 1-year follow-up post surgery. Symptoms, patient satisfaction, ROM (range of motion), surgical time, blood loss, and surgical history were evaluated. Thirty-eight (95%) patients had previous total or partial meniscectomy (mean, 11.4 years ago). Preoperatively, chief complaints were knee joint line pain and swelling. Mean surgical time and blood loss were 123min and 87g, respectively. At 12 months postsurgery, 5% and 10%, respectively, complained of pain and swelling; ROM was 0°–132°. Thirty-eight (95%) patients were satisfied. According to the results, meniscus transplantation can lead to significant pain relief and satisfaction in young symptomatic meniscectomized patients. However, long-term results must be obtained to prove the effectiveness of this technique in prevention of degenerative joint changes.     

Second generation of meniscus transplantation: in-vivo study with tissue engineered meniscus replacement

Introduction: The options available after meniscus loss offer only limited chances for a long-term success. In the following experimental study, we investigated the effect of meniscus tissue engineering on properties of the collagen meniscus implant (CMI). Methods: Autologous fibrochondrocytes, obtained per biopsy from adult Merino sheep (n=25), were released from the matrix, cultured in-vitro and seeded into CMI scaffolds (n=10, group 1). Following a 3-week in-vitro culture, the tissue engineered menisci were used for autologous transplantation. Macroscopical and histological evaluation were performed in comparison with non-seeded CMI controls (n=10, group 2) and with meniscus-resected controls (n=5, group 3) after 3 weeks (each 1 animal group 1 and 2) and 3 months. Results: The lameness score did not show any difference between the groups. Meniscus tissue was found in seven knee joints (group 1), in five knee joints (group 2) and in two knee joints (group 3). The size of the transplants reduced from 25.9±4.5 to 20.1±10.8 mm (group 1) and from 25.9±1.5 to 14.4±12.5 mm (group 2). Histologically, enhanced vascularisation, accelerated scaffold re-modelling, higher content of extra-cellular matrix and lower cell number were noted in the pre-seeded menisci in comparison with non-seeded controls. Dense high-cellular fibrous scar tissue was found in two of five cases in the resection control group. Conclusion: Tissue engineering of meniscus with autologous fibrochondrocytes demonstrates a macroscopic and histological improvement of the transplants. However, further development of the methods, especially of the scaffold and of the cell-seeding procedure must prove the feasibility of this procedure for human applications.V. Martinek and P. Ueblacker contributed equally to this work.     

兔自体耳软骨膜复合游离移植形成工程化软骨的实验研究

目的：探求用软骨腹复合移植的方法形成自体软骨的可行性。方法：将兔自体耳软骨膜包裹异体耳软骨脱细胞基质材料复合游离移植于兔背部皮下（I组），并在移植物附近皮下游离移植双层耳软骨膜（Ⅱa组）及单纯脱细胞的异体耳软骨基质（Ⅱb组）作为对照。在术后3周、6周分别取标本进行研究。结果：在3周、6周时，I组与Ⅱa组成软骨细胞的增殖变化情况差异有显性（P＜0．05），I组比Ⅱa组成软骨细胞的增殖明显旺盛，有的已经向软骨细胞转化，并有少量细胞外基质分泌，基质内软骨囊出现。Ⅱb组无成软骨细胞及软骨囊出现。结论：自体耳软骨膜与异体耳软骨脱细胞后的基质材料复合移植促进自体软骨生成。提示该基质材料有促进软骨膜细胞分化和生长的作用。     

异种(猪)脱细胞真皮基质移植后炎症免疫反应的实验研究

目的：研究异种（猪）脱细腻真皮基质与薄自体皮复合移植后炎症反应的变化规律及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法：将异种（猪）脱细胞真皮基质与薄自体皮复合移植于大鼠，分别于移植后1，2，3，4，8，12，16周取标本，采用组织学观察及RT-PCR技术动态检测异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植后炎症反应及Th1/Th2细胞因子的变化，同时以单纯薄自体皮移植作对照。结果：异种（猪）脱细胞真皮与薄自体皮复合移植后早期存在炎症反应，并随着创面愈合的进行而逐渐消失，Th2细胞因子的表达明显高于对照组。结论：异种（猪）脱细胞真皮基质仍具有一定的免疫原性，Th2细胞因子的高表达说明机体对异种（猪）脱细胞真皮基质的免疫反应主要以体液免疫为主，也可能是异种（猪）脱细胞真皮基质移植后未被排斥的原因之一。     

化学去细胞异体神经修复神经缺损长度的实验研究

[目的]研究神经长度是否影响化学去细胞神经的质量及化学去细胞异体神经修复犬神经缺损的适当长度范围。[方法]切取犬的坐骨神经全长，截取直径近似段长度12cm，去除神经外膜的脂肪组织及血管，在5．0％Triton X-100和5．0％脱氧胆酸钠中重复消化得到化学去细胞神经；部分神经用于组织学评价，将12cm神经按顺序切割为6段，石蜡包埋制备切片，厚度5μm。HE染色和Fastblue染色，观察去细胞程度、神经细胞外基质结构完整性、髓鞘染色强度，观察每段神经的差异。在体内实验中，用化学去细胞异体神经桥接犬的坐骨神经缺损，缺损长度分别为8、10cm组，每组各有6条成年犬，随访时间12个月。观察动物肢体功能恢复、肌电图变化及再生神经组织学表现，包括HE染色、S-100免疫组织化学染色、乙酰胆碱酯酶染色。[结果]去细胞神经全长各段在去细胞程度、结构完整性及残余髓鞘染色综合评价中无差异。体内移植实验结果显示8cm去细胞异体神经移植组的犬在术后12个月踝关节可直立行走，而10cm去细胞异体神经移植组犬12个月时踝关节不能直立行走。肌电图检查结果显示，两组动物的手术肢体均可记录到诱发的运动和感觉电位。肌电图波幅、时限及运动神经传导速度结果显示，8cm移植组明显高于10cm移植组（P〈0．05）。组织学检查显示8cm移植组再生的神经轴突通过移植段神经到达远侧的神经中，并与所支配的肌肉建立新的运动终板联系，坐骨神经支配的小腿三头肌中有大量新生的运动终板形成。在10cm移植组有部分再生的神经纤维通过移植段神经进入远端的神经，小腿三头肌中新生的运动终板数量和大小明显低于8cm移植组（P〈0．05）。[结论]在化学去细胞神经的制备中，神经的长度对去细胞的质量无影响；化学去细胞异体神经修复神经缺损的长度若不超过8cm可取得较满意的功能康复结果。     

烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究

目的 探讨烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)作为真皮替代物用于创面修复的可行性. 方法 (1)取12只Wistar大鼠,其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)创面,分别于伤后1、2、3d(每时相点3只)取创面全厚皮肤,用2.5 g/L胰蛋白酶-体积分数0.5％ Triton X-100行脱细胞处理制成DADM,相应称为DADM-1 d、DADM-2 d、DADM-3 d;余下3只大鼠不致伤,同法制备ADM作为对照.对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测(极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系).(2)另取64只Wistar大鼠,按随机数字表法分为ADM组、DADM-1d组、DADM-2 d组、DADM-3d组,每组16只.于各大鼠背部制作一2.0 cm×1.8 cm大小皮瓣,将前述ADM和DADM-1 d、DADM-2d、DADM-3 d切制成1.8cm×1.5 cm大小后分别埋植于皮瓣下.术后1、3、5、9周,每组每时相点取4只大鼠,肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化,并对埋植物行组织学观察.对数据行单因素方差分析及t检验. 结果 (1)新鲜制备的各DADM呈乳白色,质地柔软有弹性,韧性较ADM弱.光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在,DADM胶原纤维增粗程度不均匀,排列紊乱,嗜伊红性增强.各DADM微生物学检测结果均为阴性.DADM-1d、DADM-2 d、DADM-3 d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较,差异均无统计学意义(F值为0.088～3.591,P值均大于0.05);其中DADM-3d此4项指标值最高,分别为(13.0±2.4) MPa、(61 ±4)N、(173±7)％、(45 7±2.0)％.ADM此4项指标各为(19.0±2.6) MPa、(95±4)N、(201±5)％、(62.5±2.2)％,与3种DADM两两比较均偏高(t值为6.424 ～17.125,P值均小于0.01).(2)埋植术后1周,各组大鼠创面无渗出或红肿,埋植物未收缩或卷曲;创面有炎性细胞浸润并有Fb及毛细血管长入.术后3周时,DADM-1d、DADM-2 d、ADM组埋植区毛发生长正常,DADM-3 d组埋植区毛发较稀疏;各组炎性细胞减少,Fb增多,有新生小血管长入,DADM-3 d组炎性细胞减退稍延迟.术后第5周,各组埋植区毛发恢复正常,埋植物收缩、变薄,表面纤维膜包裹紧密,有较大血管束长入;各组真皮基质与周围正常组织融合.术后第9周,ADM和DADM均为薄、软白色组织片,与皮瓣内面连接紧密;各组无炎性细胞浸润,胶原纤维排列规则、致密,与正常胶原组织融合. 结论 烧伤DADM无明显免疫原性,生物相容性好,经离体改造有望成为创面修复治疗中的真皮替代物.     

自体网状皮片与异种(猪)脱细胞真皮基质复合移植的临床应用

目的：探讨1：3自体网状皮片与异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植的可行性。方法：选择9例烧伤及瘢痕患者，在Ⅲ度烧伤创面行切痂术或瘢痕切除术后的创面上移植异种（猪）脱细胞真皮基质，摊平固定后，在支架上再植1：3网状自体刃厚皮片，表面再覆盖辐照猪皮。结果：9例复合移植皮肤全部成活，临床效果满意。结论：1：3自体网状刃厚片可以与异种（猪）脱细胞真皮基质复合移植，同时将自体皮扩增3倍，成活后的复合网状皮片有相当于中厚皮片或者全厚皮片移植的效果。     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的　研究同种异体大鼠外耳郭移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况。方法　将动物分为自体、异体移植组。自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体 ,进行自体移植 ;异体移植组以SD大鼠为供体 ,WISTAR大鼠为受体 (SD→WISTAR) ,然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化。结果　异体外耳郭移植后可能存在快速排斥反应 ,组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润。结论　血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异 ,进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础。