参附注射液对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡和NF-κB表达的影响

目的观察参附注射液对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及NF-κB表达的影响。方法24只SD大鼠随机等分为3组:对照组为假手术组仅进行开胸手术;缺血再灌注组作心肌缺血30 min,再灌注120 min;参附注射组在心肌缺血前静脉输注参附注射液10 mg.kg-1。心肌细胞凋亡和NF-κB表达分别采用TUNEL法和免疫组织化学方法检测。结果参附注射组大鼠心肌细胞凋亡指数及心肌组织中NF-κB表达明显低于缺血再灌注组(P<0.01),但高于对照组(P<0.01)。结论应用参附注射液可明显降低缺血再灌注损伤大鼠的心肌细胞凋亡和NF-κB表达。     

PDCD5在大鼠心肌缺血-再灌注心律失常中的作用机制初探

[目的]初步探讨程序化细胞死亡因子5(programmed cell death5,PDCD5)在大鼠心肌缺血再灌注(Is-chemia reperfusion,I/R)损伤中的作用。[方法]采用冠脉结扎-再松开的方法建立大鼠心肌I/R模型;记录Ⅱ导联心电图,对心律失常进行评分;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;实时荧光定量PCR法检测心肌PDCD5mRNA表达;Western blot法检测PDCD5蛋白表达。[结果]心肌I/R后,心肌细胞凋亡明显增加(P﹤0.01),心肌PDCD5mRNA及蛋白水平显著增高(P﹤0.01)。[结论]PDCD5基因参与了心肌I/R损伤后的心肌细胞凋亡过程,可能是I/R损伤心律失常发生的机制之一。     

丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响研究

[目的]探讨丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。[方法]选取50只Wistar大鼠,随机分为5组:假手术组、缺血再灌注组和丹参酮ⅡA高中低剂量组。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型,在缺血前10min分别向5组大鼠注射生理盐水4ml、生理盐水4ml、丹参酮ⅡA(16mg/kg、8mg/kg、4mg/kg)加入生理盐水共4ml。观察大鼠缺血45min再灌注2h时心电图改变情况;采用免疫组化方法对心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达。[结果]①缺血再灌注组缺血再灌注T波变化幅度与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组缺血再灌注T波变化幅度比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。②缺血再灌注组缺血再灌注2h心律失常发生率与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组缺血再灌注2h时心律失常发生率比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。③缺血再灌注组Bcl-2OD值、Bcl-2/Bax与假手术组相比明显降低(P﹤0.01);不同剂量组Bcl-2OD值、Bcl-2/Bax比缺血再灌注组有不同程度的升高(P﹤0.05)。缺血再灌注组BsxOD值与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组BsxOD值比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。[结论]丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌有显著保护作用,其保护机制可能与上调Bcl-2及下调Bax蛋白表达,从而抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡有关系。     

维生素E对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察糖尿病大鼠心肌缺血再灌注(MIR)时细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和自由基代谢的变化及维生素E对其的影响。方法通过腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型,造模成功后4w进行MIR处理。糖尿病大鼠30只分为假手术对照(sham)组,MIR组和维生素E(VE)治疗组。免疫组织化学法检测心肌ICAM-1蛋白表达。检测血清、心肌组织SOD、GSH-Px活性、MDA含量和活性及心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg++-ATP酶、Ca++-ATP酶活性。结果与sham组相比,MIR组心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg++-ATP酶、Ca++-ATP酶活性明显下降;血清、心肌MDA明显升高,血清、心肌SOD和GSH-Px活性明显降低用,心肌ICAM-1蛋白表达明显升高;用VE4w后与MIR组比,心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg++-ATP酶活性明显升高;血清、心肌MDA降低,血清、心肌SOD和GSH-Px活性升高,心肌ICAM-1蛋白表达降低。结论维生素E可通过减轻脂质过氧化和自由基损伤,下调ICAM-1蛋白表达,拮抗糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

葛根素对大鼠脑缺血/再灌注损伤缺血区细胞粘附分子ICAM-1的影响

目的 探讨葛根素对大鼠脑缺血/再灌注损伤缺血区细胞粘附分子ICAM-1的影响.方法 采用模拟临床上缺血性卒中的大鼠中脑动脉阻塞局灶性脑缺血/再灌注模型,预先给予葛根素腹腔注射7 d后,运用免疫组织化学方法,检测大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织中ICAM-1蛋白的表达.结果 葛根素能明显降低脑组织缺血区血管内皮细胞ICAM-1蛋白的表达,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 葛根素能明显抑制大鼠局灶性脑缺血/再灌注所致炎症反应,对大鼠脑缺血-再灌注造成的脑血管内皮损伤具有明显保护作用.     

丁基苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2表达的影响

[目的]探讨丁基苯酞(NBP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后Bcl-2蛋白和mRNA表达的影响。[方法]利用大脑中动脉线栓法将♂SD大鼠建立局灶性缺血再灌注模型,随机分为假手术组(不阻断大脑中动脉)、脑缺血再灌注组(I/R组)和NBP治疗组(NBP组),每组20只大鼠;脑缺血2h后开始再灌注。NBP组每天2次灌胃NBP,每次25mg/kg,I/R组及假手术组灌胃相同剂量食用植物油。再灌注72h后行神经功能缺损评分,然后断头取脑,TTC染色观察脑梗死体积,免疫组织化学(SP)方法检测梗死核心区、梗死周围区、海马区Bcl-2蛋白的表达,原位杂交方法(POD法)检测Bcl-2mRNA的表达。[结果]NBP组较I/R组大鼠脑梗死体积小(P﹤0.05),神经功能缺损改善(P﹤0.05);梗死核心区NBP组和I/R组Bcl-2蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(P﹥0.05),梗死周围区和海马区NBP组Bcl-2蛋白和mRNA表达均高于I/R组和假手术组(P﹤0.05)。[结论]NBP减少脑缺血再灌注后大鼠脑梗死体积,改善神经功能,促进大鼠脑梗死周围区和海马区Bcl-2蛋白和mRNA的表达,可能为NBP抗凋亡和保护缺血脑组织的机制之一。     

胡黄连苷Ⅱ对大鼠缺血再灌注损伤后炎性反应的影响

目的观察胡黄连苷Ⅱ对大鼠肾缺血再灌注损伤后炎症反应的影响。方法建立肾缺血再灌注损伤大鼠模型,实验大鼠随机分为3组:即假手术组(sham)、缺血再灌注组(Ischemia and Reperfusion,I/R)和胡黄连苷Ⅱ组(Picroside Ⅱ),每组10只。检测大鼠血清肌苷(Cr)和尿素氮(BUN),光镜观察病理组织变化,免疫组化及Western blot检测Toll样受体-4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)细胞因子水平。结果与假手术组比较,缺血再灌注组Cr、BUN水平均明显增高;光镜病理组织可见肾小管损伤明显;免疫组化观察见TLR4和NF-κB表达明显增强,Western blot检测TLR4和NF-κB蛋白表达显著增加,QRT-PCR检测示TNF-α、IL-1β和ICAM-1表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。胡黄连苷Ⅱ组与缺血再灌注组相比,肾功能指标明显减低,肾小管上皮细胞损伤减轻,TLR4和NF-κB表达显著减弱,TNF-α、IL-1β和ICAM-1表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ在肾脏缺血再灌注损伤时能有效的保护肾功能,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路表达进而抑制炎症反应有关。     

白藜芦醇对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的 研究白藜芦醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并进一步阐明其机制.方法 建立心肌缺血再灌注损伤模型,持续观察标准Ⅱ导联心电图变化,测定乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,确定心肌损伤程度.心肌细胞凋亡的检测采用逆转录聚合酶链反应检测bcl-2和bax mRNA的表达;Western blot检测bcl-2和bax蛋白表达.结果 白藜芦醇能降低大鼠心肌冠脉结扎后ST段抬高,降低LDH和 MDA水平,升高SOD水平,抑制bax而增强bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡.结论 白藜芦醇对冠脉结扎诱发的大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与上调bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达抑制心肌细胞凋亡有关.     

中药干漆对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

对心肌缺血再灌注损伤(I/R)的保护是现代心血管研究的焦点,中药干漆是漆树科植物漆树分泌的生漆经过干燥加工而成的中药。本实验研究的是中药干漆在大鼠心急I/R中的潜在影响和内在机制。用干漆喂养大鼠,采用结扎大鼠心脏冠状动脉左前降支30 min,然后再灌注大鼠3 h,模拟最常见的缺血再灌注临床表现(即AMI再灌注治疗),来确定干漆对大鼠心肌缺血再灌注的潜在影响和机制。干漆在大鼠心肌对抗I/R损伤可能是通过抑制RHO/rock信号通路来抑制心肌细胞炎症反应,从而发挥明显的心肌保护作用。     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase-3表达的影响

目的：观察8-阿片受体激动剂DADLE（[D—Ala2,D—Leu5]enkephali）对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase一3表达的影响。方法：将50只sD大鼠随机分为5组：假手术组（Sham）、模型组（I／R）、DADLE处理组（根据不同剂量可分为2mg／kg[A]、3mg／kg[B]、5mg／kg[C]o采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。于缺血15min后经颈外静脉注射DADLE并于再灌注120min后处死。开颅取其新鲜海马组织,采用western blot检测海马组织Caspase-3的表达,以及采用免疫组织化学法检测非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P—ERK）的表达状况。结果：Sham组ERK和P—ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P〈0．05）,DADLE处理组与I／R组相比,其ERK和P—ERK蛋白的表达量明显上调（P〈0．05）。海马组织Caspase-3蛋白表达I／R组较Sham组表达明显上调（P〈O．05）,而DADLE处理组与IR组比较,海马组织Caspase-3蛋白表达明显下降（P〈0．05）。结论：DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元有保护作用,说明DADLE可通过上调ERK信号通路以及抑制Caspase-3的表达而起到保护脑组织的作用。     

混苯作业女工尿液发育毒性的体外监测

采用小鼠腹水型肉瘤细胞会抑制试验监测混苯作业女工缩尿液的体外发育毒性，分别收集接触组和对照组６例女工班未尿液１００ｍｌ，用ＸＡＤ－２树脂进行浓缩。另以乙醇和甘氨酸为阳性和阴性对照进行方法学验证。     

牛乳骨桥蛋白对大鼠成骨细胞的影响

目的观察乳中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对体外培养大鼠成骨细胞的影响。方法采用二次酶消化法体外培养成骨细胞,MTT比色法测定骨桥蛋白对成骨细胞的增殖影响,ALP检测试剂盒测定细胞的ALP活性,RT-PCR法检测细胞中OPG/RANKL mRNA的表达。结果在细胞增殖实验中,OPN2.5μg/ml与对照组比较,成骨细胞的增殖不显著(P>0.05),5.0μg/ml组和10.0μg/ml组增殖显著(P<0.05),20μg/ml组和40μg/ml组增殖作用极显著差异(P<0.01);在成骨细胞ALP活性检测中,OPN10μg/ml组和20μg/ml组在第3、5、7和9d可提高ALP的活性(P<0.05),40μg/ml组在各个时期均能提高ALP的活性(P<0.01),2.5μg/ml组和5.0μg/ml组提高ALP的活性不显著;OPN能提高OPG/RANKL mRNA的表达。结论骨桥蛋白能够促进成骨细胞增殖、ALP活性和OPG/RANKL mRNA的表达。     

同型半胱氨酸和B型尿钠肽在诊断ACS中的临床应用

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和B型尿钠肽(BNP)分析在诊断急性冠状动脉综合征(ACS)中的临床意义,为ACS的诊断和治疗提供新的理论依据。方法应用循环酶法分析97例急性冠状动脉综合征和38例正常对照组血清中Hcy和BNP水平。结果 97例急性冠状动脉综合征患者较之38例正常对照组血清中Hcy和BNP显著增高(p<0.05;p<0.01)。结论血清Hcy和BNP与急性冠状动脉综合征密切相关,并具有诊断和治疗随访的临床价值。     

甘露寡糖对小鼠肝脏中自由基的清除及抗氧化酶活性的影响

目的:研究微波合成的甘露寡糖(MOS)在体外清除羟自由基(·OH)及小鼠肝脏清除自由基和抗氧化酶活性。方法:以甘露糖为原料合成甘露寡糖。体外:测定其对于羟自由基(·OH)的清除率。体内:昆明种雄性小鼠(体重:20±2g)36只,按体重随机分为6组,每组6只,每日灌胃一次,分别为正常对照组(2g/kg生理盐水)、葡萄糖组(2g/kg葡萄糖)、甘露糖组(2g/kg甘露糖),MOS加葡萄糖组(MOS1g+葡萄糖)1g/kg,低浓度MOS组(MOS2g/kg),高浓度MOS组(MOS5g/kg),灌胃14d后,无菌取肝脏组织待测。结果:补充1～2g/kg的MOS可提高小鼠肝脏组织SOD、CAT、GSH-Px活性,提高GSH水平,提高肝脏组织总抗氧化能力及对·OH的清除率,降低MDA含量及ROS水平。结论:MOS体外可有效清除羟自由基(·OH);小鼠适量添加MOS有益于提高肝脏组织的抗氧化能力,保护肝脏免受各种氧化应激和损伤。     

海洋胶原肽对糖尿病大鼠脂代谢和抗氧化水平的影响

[目的]观察海洋胶原肽对四氧嘧啶诱导糖尿病大鼠血清脂质和抗氧化水平的影响。[方法]通过对SD大鼠腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,随机分为海洋胶原肽低、中、高剂量组和高糖模型对照组,分别灌胃给予海洋胶原肽0.225g/kg.BW、0.450g/kg.BW、1.35g/kg.BW和同体积蒸馏水;另设定正常高剂量组和正常空白对照组,灌胃给予1.35g/kg.BW海洋胶原肽和同体积蒸馏水,连续8周。取大鼠尾血,测量血清脂质(TG、TC、LDL-C、HDL-C)和抗氧化指标(MDA、SOD)。[结果]试验开始时(0周)海洋胶原肽各剂量组大鼠TC、TG、MDA水平明显高于正常空白对照组,HDL-C、SOD水平则明显较低(P﹤0.05);与高糖模型对照组相比差异无统计学意义。干预8周后海洋胶原肽各剂量组血清TC水平仍高于正常空白对照组(P﹤0.05);而TG水平与正常对照组差异无统计学意义(P﹥0.05);4周末时低、高剂量组HDL-C明显上升,甚至高于正常空白对照组(P﹤0.05);LDL-C试验前后组间均无明显差异;各剂量组SOD活力仍明显低于正常空白对照组(P﹤0.05);MDA水平高于正常对照组,但低于高糖对照组(P﹤0.05)。[结论]海洋胶原肽可有效改善四氧嘧啶诱导糖尿病大鼠的脂代谢紊乱,并有一定的抗氧化损伤功能;由于糖尿病大鼠受损较严重,以上结论有待进一步研究证实。     

奶粉中二恶英含量分析

目的：建立高分辨气相色谱／高分辨双聚焦磁式质谱联用（HRGC／HRMS）定量检测奶粉中二恶英的检测方法，并采用该方法对市售奶粉进行实际检测。方法：采用索式抽提和FMS专用净化装置对样品进行纯化和富集，以HRGC／HRMS－多离子检测方式对样品中的PCDDs/Fs进行定性和分析，用同位素稀释技术定量（精确到pg/g即ppt水平）。结果：该方法的检测限TCDF和TCDD分别为0.02pg/μL和0.01pg/μL。参考化合物（CRM）对方法的验证结果均在国际认可的范围内，三次检测数据的相对标准偏差＜10％。该奶粉样品奶粉中PCDDs和PCDFs的总浓度是0.79pg/g（全重计），以WHO TEF为依据计算所得的样品全重总TEQ值是0.137pg TEQ/g，脂肪的总TEQ值是0.526pg TEQ/g。结论：该奶粉样品被二恶英污染，目前我国未制定各类食物样品中二恶英污染的限量标准，因此无法对该样品的污染程度进行评价。该方法定性、定量准确，为目前国际上权威认可的二恶英定量检测方法。     

HCMV与急性冠脉综合症患者血清CRP及LPA的相关性研究

[目的]拟从流行病学的角度观察人类巨细胞病毒(HCMV)感染、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、溶血磷脂酸(LPA)等在急性冠状动脉综合征(ACS)发生过程中的变化。探讨HCMV感染、hs-CRP及LPA在ACS发生过程中的作用。[方法]随机选取43例ACS患者、20例SA患者及正常对照者23例,采用金标免疫层析法测定HCMV-IgG、HCMV-IgM抗体,胶乳增强免疫比浊散射法检测各组的hs-CRP、比色法测定LPA的浓度。应用SPSSversion13.0统计分析软件包进行资料统计学分析。[结果]ACS组HCMVIgG、HCMVIgM阳性率显著高于SA及正常对照组,HCMV-IgG阳性率分别为88.37、85、60.87,HCMV-IgM阳性率分别为37.21、25、8.69,ACS组与SA、正常对照组比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);ACS组hs-CRP、LPA均显著高于其他各组(均P﹤0.05);ACS组中HCMVIgM(+)与同组HCMVIgM(-)组比较hs-CRP、LPA均升高,差异有统计学意义(P﹤0.05);ACS组hs-CRP水平与LPA正相关。[结论]急性HCMV感染或HCMV潜伏感染的活化与ACS的发生有关,可能作为冠心病的独立危险因素,HCMV感染可能通过激发和加重冠状动脉炎症反应,导致ACS的发生。     

慢性肾功能不全患者的SOD与TSGF水平分析

目的分析老年慢性肾功能不全患者血清学指标SOD(超氧化物歧化酶)与肿瘤特异性生长因子(Tumor Specific Growth Factors,TSGF)的变化及其临床意义。方法通过检测老年肾功能不全组、对照组的TSGF和SOD水平,对各组均值、阳性率进行比较。结果慢性肾功能不全组SOD值为132.60±19.29 u/ml,对照组为155.35±13.10 u/ml,老年慢性肾功能不全组SOD值低于对照组(p<0.001),低SOD值比例高于对照组(p<0.001)。慢性肾功能不全组值为59.22±9.61 u/ml,对照组为51.66±10.37 u/ml,老年慢性肾功能不全组TSGF值高于对照组(p<0.001),TSGF阳性率高于对照组(p<0.001)。结论老年肾功能不全患者血清中SOD降低,自由基水平升高;TSGF值升高,须做好与肿瘤的鉴别诊断。     

循证护理在糖尿病胰岛素泵强化治疗中的应用

目的探索循证护理在糖尿病胰岛素泵强化治疗中的有效护理干预措施,减轻患者的心理负担、提高疗效、减少应用过程中不良反应。方法选择住院糖尿病患者200例为观察组,将循证护理应用于糖尿病胰岛素泵强化治疗的护理中,确定胰岛素泵强化治疗中的护理问题,制定护理措施;选择按传统护理糖尿病胰岛素泵强化治疗患者200例为对照组,比较两组间患者满意度、血糖控制理想例数、低血糖反应发生率、皮肤感染及过敏发生率是否有统计学差异。结果观察组患者满意度高、血糖控制理想例数多,低血糖反应发生率、皮肤感染及过敏发生率低,两组比较有统计学差异。结论循证护理应用于糖尿病胰岛素泵强化治疗的护理可以减轻患者心理负担、提高疗效、减少应用过程中不良反应。     

维生素E对实验性大鼠矽肺组织中几种磷脂含量的影响

本文报告了维生素E对大鼠矽肺组织中几种磷脂含量的影响。实验分为正常对照组、矽肺组及维生素E治疗组,疗程270天。结果表明治疗组肺组织总磷脂、二棕榈酰卵磷脂(简称DPPC)磷脂酰甘油三脂(简称PG)、磷脂酰乙醇胺(简称PE)含量均高于同期对照组,且早期增高明显,但又都低于同期矽肺组,治疗组脂质过氧化物也都高于对照组,但均低于同期矽肺组。本文还对实验结果做了讨论。