肿瘤患者自身抗体抗SPAG9在外周血中的表达研究

目的：通过对肿瘤患者血清中抗原9（SPAG9）的自身抗体的检测,了解患者外周血中抗SPAG9自身抗体的表达情况。方法：利用SPAG9重组,确立ELISA检测肿瘤患者血清中抗SPAG9抗体的有效性,从而了解由SPAG9所诱发的患者体液免疫反应。采用的判断标准为：参照组血清中抗SPAG9抗体0D的均值加2倍SI）作为阳性。结果：研究的90例肿瘤患者中,血清SPAG9免疫反应总体阳性率为32．3％,肝癌组阳性率为33．3％,肺癌组阳性率为17．9％,其他肿瘤组阳性率为50％,健康对照组为33．3％。结论：SPAG9自身抗体在不同的肿瘤患者外周血中有着不同程度的表达,此次研究具有一定的医学价值。     

Neprilysin在肾肿瘤细胞系和组织中的表达及其临床意义

目的检测Neprilysin在肾肿瘤细胞系和组织中的表达,并分析其表达水平与临床病理特征如年龄、、临床分期、骨转移、肿瘤分化程度的关系。方法通过实时荧光定量PCR检测Neprilysin基因在肾肿瘤细胞系及39例肾癌和16例肾正常组织中mRNA的表达情况。Western blot检测以上标本Neprilysin蛋白的表达水平。使用统计软件SPSS 13.0采用Spearman相关分析Neprilysin基因的表达水平与临床病理特征的关系。结果 Neprilysin基因在肾肿瘤细胞系中相对于正常组织表达下调,这与基因芯片的结果相类似。相对于正常组织,本实验中100%的肾癌患者组织中NEPRILYSIN mRNA及蛋白表达均显著下调。统计分析表明,Neprilysin的表达水平与cTNM分期及骨转移有关,而与年龄及肿瘤分化程度无显著关系。结论 Neprilysin表达低能够促进肾癌的发生。但需要更进一步的研究去阐明Neprilysin的调控机制以及Neprilysin在细胞生理和肿瘤发生中的作用。     

赖氨酰氧化酶样-4与丝氨酸蛋白酶基因在人宫颈癌细胞中的表达

目的探讨赖氨酰氧化酶样-4(LOXL4)和丝氨酸蛋白酶(Matriptase)在三株人宫颈癌细胞中的表达情况。方法采用qRT-PCR及Western blot方法检测三株体外培养的宫颈癌细胞株Hela、ME180、HCC94中赖氨酰氧化酶样-4和Matriptase mRNA的表达及LOXL4蛋白的翻译水平。结果 LOXL4 mRNA在三株人宫颈癌细胞中存在不同程度的表达,蛋白翻译水平与mRNA基因表达一致,以Hela表达为最高,ME180次之,HCC94表达最低;而ME180和HCC94中MatriptasemRNA相对表达丰度分别是Hela的4.09倍和12.40倍。结论本研究成功建立了LOXL4及Matriptase在体外培养宫颈癌细胞中表达的检测平台,LOXL4、Matriptase的相对表达水平可能与宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力有关。     

前列腺干细胞抗原在人子宫内膜样腺癌组织中的表达及意义

目的探讨前列腺干细胞抗原（PSCA）在人子宫内膜样腺癌内膜组织中的表达及与临床病理学特征的关系。方法采用免疫组化、荧光定量RT—PCR和Western Blot方法检测子宫内膜腺上皮细胞中PSCA的表达。结果PSCA在内膜样腺癌组织主要表达于癌细胞，细胞间质和肌肉组织均无表达。从单纯性、复杂性到不典型增生，PSCA在mRNA、蛋白水平上的表达评分均有逐渐增多趋势，不典型增生与前二者相比，差异均有统计学意义（P〈0．01）。在内膜样腺癌中，随着分化程度的降低、分期的增加和浸润深度的增加，PSCA mRNA、蛋白表达逐渐增加。在增生期和分泌期PSCA的表达差异无统计学意义。PSCA表达水平与临床分期、病理分级和浸润深度均有相关性（P〈0．05）。结论PSCA是一个新的细胞表面抗原，可能参与了癌前病变的发生，其表达水平在一定程度上反映了内膜样腺癌的生物学行为，并介导了内膜样腺癌的发生与发展，可能在内膜样腺癌诊断、免疫治疗等方面具有广阔的应用前景。     

Drosha在子宫内膜癌组织中的差异表达及临床意义

目的 探讨Drosha在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法 应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测正常子宫内膜组织(25例)、不典型增生子宫内膜组织(20例)及子宫内膜癌组织(40例)中Drosha的表达,分析Drosha在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理因素之间的关系。结果 子宫内膜癌组Drosham RNA及蛋白表达水平均低于不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组(均P<0.05),不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。不同年龄、组织分级、病理分型、淋巴结转移、肌层浸润深度和FIGO分期的子宫内膜癌患者的Drosha m RNA表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 Drosha在子宫内膜癌组织中表达下调,可能与子宫内膜癌的发生发展有关。     

CIP2A在骨肉瘤和癌旁组织中的表达及临床意义

目的:通过检测骨肉瘤和骨软骨瘤组织中CIP2A的表达,探讨在骨肉瘤中CIP2A表达的水平及与骨肉瘤组织病理特征的关系.并对骨肉瘤患者的生存、复发情况进行跟踪随访,进一步分析CIP2A的表达对患者预后的影响.方法:应用免疫组化法检测48例骨肉瘤和40例骨软骨瘤中CIP2A的表达.结果被用来分析临床病理及随访资料的相关性.应用实时荧光定量PCR方法检测20例骨肉瘤和20例骨软骨瘤样本中的CIP2A表达情况.应用Western-blot检测方法检测的4例骨肉瘤和4例骨软骨瘤新鲜标本的CIP2A表达情况.应用Cox多因素分析骨肉瘤的临床病理特征及评估CIP2A在骨肉瘤组织表达对其预后影响,结果:18例(67.5％)骨软骨瘤和27例(27.5％)骨肉瘤CIP2A的表达呈阳性,两者具有显著差异(P＜0.05).通过Western-blot方法检测两组组织中CIP2A表达均呈显著差异(P＜0.05).实时荧光定量PCR检测显示,骨肉瘤组织中CIP2A表达比骨软骨瘤的表达高(P＜0.05).根据Enneking临床分期,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期骨肉瘤组织中CIP2A阳性表达率分别为69.24％(10/14),46.15％(4/16)和45.32％(3/18).结论:CIP2A在骨肉瘤中的表达水平高于骨软骨瘤组织中的表达水平;CIP2A在骨肉瘤中的表达水平与Enneking外科分期和组织学分级相关;CIP2A可作为骨肉瘤预后的独立危险因素,也可成为评估骨肉瘤预后标记性分子.     

PCNA和MMP-9在食管鳞癌中的表达及其意义

目的分析PCNA,MMP-9在食管鳞癌中的表达,探讨其在食管鳞癌发生发展中的意义。方法应用免疫组化方法检测PCNA,MMP-9在52例食管鳞癌和30例癌旁组织中的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果PCNA,MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中的表达率高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。PCNA的表达与食管鳞癌的分化程度,淋巴结转移有关;MMP-9的表达与食管鳞癌分化程度,肿瘤浸润程度,淋巴结转移及临床分期相关;PCNA和MMP-9表达呈正相关(P<0.05)。结论食管鳞癌组织中PCNA,MMP-9的高表达参与了肿瘤的发生发展,联合检测有助于食管鳞癌恶性生物学行为的判断和病程的评估。     

MMP-9在骨肉瘤中的表达及意义

目的检测骨肉瘤中MMP-9的表达，探讨其在骨肉瘤发生、发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学技术检测46例骨肉瘤标本中MMP-9的表达。结果MMP-9在骨肉瘤组织中的表达量明显高于良性骨肿瘤组织，在有无软组织浸润及不同Ennecking分期的骨肉瘤之间比较，MMP-9表达差异有统计学意义（P〈0.05）。结论骨肉瘤组织中MMP-9高表达，MMP-9在骨肉瘤发展中起重要作用。     

N-cadherin在胆管癌组织表达及意义

目的探讨N-钙黏蛋白(N-cadherin)在胆管癌组织中的表达及意义。方法选取2012年1月至2019年6年在西安医学院第二附属医院和第四军医大学西京医院治疗并经病理科确诊进行手术切除的80例胆管癌患者,提取癌组织及≥2 cm的癌旁组织的总RNA,用实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测胆管癌组织及癌旁组织N-cadherin的mRNA,分析胆管癌组织/癌旁组织中N-cadherin的mRNA比值与临床病理参数间的联系,并根据N-cadherin mRNA在胆管癌组织和癌旁组织的表达差异绘制做出ROC曲线,分析N-cadherin mRNA对胆管癌的诊断价值。结果与癌旁组织比较,胆管癌组织中N-cadherin mRNA升高;N-cadherin mRNA在胆管癌患者性别、不同年龄间的表达无统计学差异(P>0.05),与胆管癌患者的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及神经浸润有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线结果显示:胆管癌组织/癌旁组织的N-cadherin mRNA的AUC面积为0.88,诊断敏感性为83.75%,特异性为77.50%。结论胆管癌组...     

组织蛋白酶-D和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达意义

目的检测组织蛋白酶-D（Cath-D）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在非小细胞肺癌中的表达,探讨Cath-D和MMP-9在非小细胞肺癌发生发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测96例非小细胞肺癌组织及60例正常肺组织中Cath-D和MMP-9的表达情况,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析。结果 Cath-D和MMP-9的表达主要定位于细胞质,Cath-D和MMP-9在非小细胞肺癌中表达的阳性率明显高于正常肺组织。非小细胞肺癌中Cath-D和MMP-9蛋白的表达与有无胸膜侵犯和淋巴结转移情况密切相关。结论 Cath-D和MMP-9在非小细胞肺癌中表达上调,联合检测Cath-D和MMP-9可能对判断肿瘤的预后有重要价值。     

从肺癌组织提取高纯度总RNA方法的优化及应用

目的 通过对传统TRIzol提取组织中RNA的方法进行优化,建立一种较为简便、高效、经济的提取方法,并用优化后的方法检测非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的mRNA表达水平。方法 非小细胞肺癌的组织标本(包括肿瘤组织和正常组织)36例,采用传统和优化后的方法提取肺癌组织及正常组织中RNA,以SYBR Green荧光实时定量PCR分析各组织中ERCC1、RRM1、BRCA1以及管家基因GAPDH的mRNA表达水平。结果 传统方法的RNA浓度和纯度分别为(0.76±0.07)mg·mL^-1和1.87±0.04,优化方法的RNA浓度和纯度分别为(1.12±0.07)mg·mL^-1和1.95±0.03;琼脂糖凝胶电泳表明RNA没有降解,各个引物的熔解曲线均呈单峰,特异性良好。实时荧光定量显示,肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的相对mRNA表达高于正常组织;ERCC1和BRCA1在不同病理类型(腺癌、鳞癌)的肿瘤组织中表达无显著性差异,RRM1在肺鳞癌中的表达显著高于腺癌(P<0.05);不同性别中的基因表达均无显著性差异。结论 相比传统方法,利用优化后的方法提取样本的总RNA浓度、纯度和完整性均显著提高,能满足各种基因表达和定量检测实验的需要。非小细胞肺癌中ERCC1、RRM1和BRCA1的表达水平与肿瘤增殖活性密切相关,与临床肿瘤的病理类型也有一定的相关性。     

基质金属蛋白酶-9在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)在非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)的表达,探讨其与NSCLC侵袭转移的关系。方法用免疫组化法检测42例NSCLC患者肺癌组织与30例癌旁正常肺组织MMP-9蛋白的表达水平。结果 MMP-9蛋白在肺癌组织的表达高于正常肺组织(P<0.05),MMP-9在有淋巴结转移肺癌组织的表达高于无淋巴结转移肺癌组织的表达(P<0.05),且其表达与NSCLC患者临床分期相关(P<0.05)。MMP-9的表达与NSCLC患者的性别、年龄、组织学类型均无明显相关性(P>0.05)。结论 MMP-9的表达与NSCLC的侵袭转移有关,可成为评价NSCLC恶性程度和预后的辅助指标。     

程序性细胞死亡因子5在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的：探讨程序性细胞死亡因子5（PDCD5）的表达与子宫内膜癌发生的相关性。方法收集行手术治疗的60例子宫内膜癌组织、40例正常增生期子宫内膜组织及28例子宫内膜不典型增生组织,实时荧光定量PCR检测PDCD5 mRNA的表达,免疫组织化学法检测蛋白的表达。结果在正常增生期子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌组织中,PDCD5 mRNA的相对定量依次降低[（1．21±0．16）、（0．83±0.07）、（0．42±0．02）,F＝5．637,P＜0．05];PDCD5蛋白的阳性表达率依次降低（82．5％、64．3％、45．0％,χ2＝27．663,P＜0．05）;PDCD5的表达水平与子宫内膜癌患者的临床分期、组织学分级、肌层浸润以及淋巴结转移有关（χ2＝20．875、11．915、9．409、11．148,均P＜0．05）,而与年龄无关（χ2＝0．287,P＞0．05）。结论PDCD5的表达下调与子宫内膜癌的发生、发展有关,有可能成为一种潜在的早期预测子宫内膜癌的标志物。     

SPAG9在膀胱癌细胞表达及其对膀胱癌细胞增殖凋亡的影响

目的:探讨研究精子相关抗原9(SPAG9)在膀胱癌细胞表达量及与细胞增殖凋亡关系.方法:选取2018-06～ 2019-12本院接诊治疗的126例膀胱癌患者为研究对象,采集患者RT4、J28、T24膀胱癌细胞系和膀胱上皮细胞SV-HUC-1,采用定量即时聚合酶链锁反应检测SPAG9 mRNA表达,采用Western b...     

PARP-1及其相关因子在适应性反应中的表达改变

目的探讨PARP-1在适应性反应中的作用。方法低剂量甲醛预处理人胚肺成纤维细胞(MRC-5)后,观察细胞对高剂量甲醛攻击的适应性反应。在MTT法检测细胞存活率的基础上,荧光定量PCR技术测定不同组细胞中PARP-1及其相关因子表达的变化。结果用低剂量甲醛预刺激可提高细胞对继后大剂量甲醛攻击的抵抗力;低剂量甲醛能引起PARP-1及其相关因子表达增加,产生适应性反应时这种增加尤为突出,其中PARP-1的表达量是对照组的147倍。结论低剂量的甲醛可使PARP-1活化,进而调节其相关因子DNA-PK、P53、NF-κB的表达,促使细胞免疫功能增强,启动适应性反应的产生。     

金属蛋白酶-9在大鼠局灶脑缺血再灌注损伤中基因的表达变化

目的探讨大鼠短暂大脑中动脉闭塞诱导的局灶脑缺血后金属蛋白酶-9（MMP-9）基因在不同时间的表达。方法制备大脑中动脉短暂缺血90min再灌注12h,24h,48h和7d的模型,用Western blotting和荧光定量PCR来检测MMP-9的蛋白和mRNA在不同时间的表达变化。结果 MMP-9蛋白和mRNA表达在缺血再灌注12h,24h,48h和7d均显著增加,其中48h为高峰期,7d开始下降。结论 MMP-9基因表达上调,提示MMP-9在局灶脑缺血再灌注损伤中起重要的作用。     

基质金属蛋白酶-9在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在甲状腺肿瘤组织的表达情况。方法采用免疫组织化学SP法检测20例瘤旁甲状腺组织、20例甲状腺腺瘤和53例甲状腺癌的石蜡标本MMP-9表达水平。结果 MMP-9在甲状腺腺癌的表达率显著高于甲状腺腺瘤(96.41%vs 55%,P<0.01),瘤旁甲状腺组织未见表达。结论甲状腺肿瘤存在MMP-9的过表达。     

RRM1、β-tubulinⅢ mRNA在非小细胞肺癌者组织和外周血中的表达及相关性研究

目的：研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织、外周血和正常肺组织中核糖核苷酸还原酶M1肽(RRM1)和Ⅲ型β微管蛋白(β-tubulinⅢ)mRNA的表达差异及其相关性。方法收集42例NSCLC患者手术切除肿瘤组织及10例良性肺病患者组织,同时术前留取外周血4 ml,应用实时荧光定量PCR方法检测RRM1、β-tubulinⅢ mRNA在不同来源标本中的表达水平,并分析其相关性。结果RRM1、β-tubulinⅢ mRNA在肿瘤组织、外周血中的表达与在正常肺组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05),在外周血中的表达与在肿瘤组织中的表达不具有相关性。结论 RRM1、β-tubulinⅢ mRNA在肺癌组织和外周血中的检测可以为晚期NSCLC个体化化疗提供参考依据;应用实时荧光定量PCR在外周血中的检测还不能替代肺癌组织标本的检测。