三氧化二砷诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的实验研究

 MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As₂O₃对人肝癌细胞林SMMC-7721的作用.结果发现:As₂O₃可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物作用后,AO/EB染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见亚G_l峰;凋亡呈剂量,时间依赖性特点;As₂O₃使细胞周期阻止于G₂/M期.以上表明:As₂O₃可诱导人肝癌细胞株凋亡,可望为临床应用砷剂治疗肝癌提供实验依据.     

三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的初步研究

目的：研究三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对肝癌细胞株Ｂｅｌ－７４０２的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法：采用ＭＴＴ法检测药物对细胞的抑制作用、相差显微镜和电镜观察细胞形态变化、琼脂糖凝胶电泳测定ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ、流式细胞术检测细胞周期变化。结果：各浓度Ａｓ２Ｏ３组（０．２５～１６μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ抑制率最大,９６ｈ时达８３．８９％,２μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３以抑制肝癌细胞的增殖为主,但在形态及生化方面未见凋亡改变;１０μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３作用１０ｈ可见形态学变化,４８ｈ可见ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ出现。流式细胞检查     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞株凋亡的初步研究

细胞凋亡在肿瘤治疗学上的意义日益得到人们的重视.我们观察了中药砒霜的主要成分——三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌细胞株的诱导凋亡作用,以探索药物治疗肝癌的新途径.1.材料与方法:(1)药物:0.1%As_2O_3溶液(癌灵Ⅰ号),哈尔滨医科大学第一附属医院药剂科惠赠.(2)细胞株:人肝癌细胞株SMMC-7721.(3)方法:MTT法观察细胞的增殖率,AO/EB荧光染色观察细胞的形态学改变,流式细胞仪检测凋亡率及细胞周期变化.2.结果:As_2O_3对SMMC-7721肝癌细胞株的生长有显著抑制作用,抑制作用强度随浓度提高、作用时间延长而增加.经2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml As_2O_3作用24h,SMMC-7721细胞株在荧光染色时,显微镜下均呈现典型的凋亡形态学改变,如核染色体凝结、固缩成块状,或染色体沿核膜成新月体形排列,或细胞核崩解碎裂,可见部分细胞呈出芽的表现.流式细胞促检测各实验组均见有亚G_1峰.细胞经1μg/     

三氧化二砷对人肝癌细胞增殖和超微结构的影响

 目的　明确三氧化二砷 (As2O3 )对人肝癌细胞生长和超微结构的影响。方法　采用活细胞观察法、台盘兰拒染法、MTT法和透射与扫描电镜观察了As2 O3 对体外培养的人肝癌细胞株QGY 770 1和QGY 770 3的生长活力和超微结构的影响。结果　As2 O3 能显著地抑制人肝癌细胞QGY 770 1和QGY 770 3的生长 ,用药后诱导其出现了典型的细胞凋亡超微结构改变。结论　As2 O3 对人肝癌细胞的生长有显著抑制作用 ,该抑制作用与诱导细胞凋亡密切相关。     

三氧化二砷对人肾癌RCC-WCS细胞的作用及其机制研究

目的 :观察三氧化二砷 (Arsenictrioxide ,As2 O3 )对人肾癌细胞系RCC WCS细胞生长的抑制作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 :采用MTT法检测As2 O3 对肾癌细胞生长的抑制作用 ,用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡 ,用RT PCR法检测c myc和bc1 2mRNA表达的变化。结果 :As2 O3 以浓度依赖方式抑制RCC WCS细胞的体外生长 ,在浓度为 0 5、1 0、2 0和 4 0 μmol/L作用 96h时 ,As2 O3 对RCC WCS细胞的抑制率分别为 2 7 6 0 %、30 0 9%、4 1 0 3%和 5 0 77% ;与未经As2 O3 处理的RCC WCS细胞相比 ,均有显著性差异 (P <0 0 1)。As2 O3 作用后的RCC WCS细胞 ,G2 /M期细胞从 7 3%上升到 16 6 % ,同时出现 13 7%的凋亡峰。As2 O3 可以诱导c mycmRNA表达水平的下降 ,但bc1 2的表达无明显变化。结论 :As2 O3 在相当于临床应用的浓度可抑制RCC WCS细胞生长 ,使细胞阻滞在G2 /M期 ,并诱导细胞凋亡。这种抑制作用机制之一可能是诱导c myc基因表达水平的下降。     

三氧化二砷对结肠癌细胞抑制作用的实验研究

砷剂是治疗恶性肿瘤的化疗药物,１９世纪Ｆｏｗｌｅｒ′ｓ液曾被应用于白血病的治疗［１］。中国传统医学也有砒石（主要成分为Ａｓ２Ｏ３）治疗乳腺癌等肿瘤。以前对砷剂的研究主要局限于致癌、致畸、致突变上。近年来由于Ａｓ２Ｏ３在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）治疗的临床和基础研究上取得很大进展［２,３］。但关于Ａｓ２Ｏ３对实体肿瘤作用的研究报道很少。作者采用结肠癌ＬＯＶＯ细胞株作为对象,来研究Ａｓ２Ｏ３对结肠癌的抑制效应,探讨应用于大肠癌临床治疗的可能性。材料与方法１“癌灵一号”,成分０１％Ａｓ２Ｏ３,…     

三氧化二砷抗肝癌作用的研究进展

 临床已证实三氧化二砷（As2O3）能有效治疗急性早幼粒细胞性白血病，在此基础上，有关As2O3抗肝癌作用的研究报告也越来越多，该文就As2O3抗肝癌作用的实验研究和临床应用作一综述。     

三氧化二砷对人肝癌细胞生长增殖的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人BEL7402肝癌细胞株的作用及其机制。方法采用MTF法检测As2O3对BEL7402细胞的生长抑制率;流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后的BEL7402细胞周期及增殖细胞核抗原（PCNA）变化,同时Annexin V—FITC／PI双染法检测细胞凋亡。结果三氧化二砷可显著抑制BEL7402细胞生长,且剂量-效应关系显著（r=0．9650,P〈0．01）,半数抑制浓度（IC50）为4．93μmol／L;BEL7402经As2O3处理后可发生凋亡。As2O3能显著下调PCNA蛋白表达（P〈0．01）,并使细胞周期阻滞在G2／M期。结论三氧化二砷可有效抑制人肝癌BEL7402细胞生长增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调PCNA表达及阻滞细胞周期有关。     

三氧化二砷联合羟基喜树碱抗肝癌作用的实验研究

目的：通过对三氧化二砷（As2O3）与羟基喜树碱（HCPT）联合作用抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长的实验研究,探讨两药合用的效果。方法：一定浓度梯度As2O3和HCPT分别及联合与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育后,采用MTT法检测细胞生长变化,并采用两药相互作用系数（CDI）来评价两药相互作用性质。结果：0.5μg/mlAs2O3与0.5μg/mlHCPT联合应用对肝癌细胞的生长抑制作用明显高于各自的单药应用（P〈0.01）,且具有协同效应。结论：As2O3与HCPT联用可以增强互补,减少各自用药剂量,达到减毒增效的目的。     

三氧化二砷与顺铂合用抗人肝癌细胞株QGY-7701的实验研究

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)与顺铂 (PDD)联合抗人肝癌细胞株QGY 770 1作用性质及其作用机制。方法　应用MTT法、流式细胞术分析和端粒酶活性检测等实验方法。结果　As2 O3与PDD联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡和抑制其端粒酶活性等方面均较各自单药的作用明显增强。结论　As2 O3与PDD联合应用具有明显的协同抗肝癌作用 ,其主要机制可能在于增强了抑制端粒酶活性。     

三氧化二砷对涎腺导管癌抑制作用的初步观察

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人涎腺导管癌（Salivaryductcarcinoma）细胞的抑制作用,探索治疗人涎腺导管细胞癌的新途径。方法建立人涎腺导管癌细胞系,应用不同浓度As2O3在不同时间点作用人涎腺导管癌细胞株,以MTT和形态学分析法观察细胞的变化。结果不同浓度三氧化二砷在不同时间点对人涎腺导管癌细胞均有明娃抑制作用,并呈时间剂量依赖关系,癌细胞异形性逐渐消失,细胞凋亡现象明显,可见凋亡小体。结论As2O3对人涎腺导管癌细胞株具有显著的抑制增殖、诱导分化和促进凋亡作用。     

三氧化二砷与顺铂合用抗人肝癌细胞株QGY-7701的实验研究

 目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)与顺铂 (PDD)联合抗人肝癌细胞株QGY 770 1作用性质及其作用机制。方法　应用MTT法、流式细胞术分析和端粒酶活性检测等实验方法。结果　As2 O3与PDD联合应用在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡和抑制其端粒酶活性等方面均较各自单药的作用明显增强。结论　As2 O3与PDD联合应用具有明显的协同抗肝癌作用 ,其主要机制可能在于增强了抑制端粒酶活性。     

三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞增殖的影响

目的：观察三氧化二砷体外对神经母细胞瘤细胞增殖的影响及其作用机制的探讨。方法：（１）ＭＴＴ法观察三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞生长的影响;（２）化学染色观察实验和对照组细胞形态学改变;（３）ＰＩ染色后流式细胞仪检测实验和对照组细胞凋亡峰;（４）凝胶电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ的“梯型”条带,结果：（１）三氧化二砷明显抑制神经母细胞瘤细胞株ＳＪ－Ｎ－ＳＨ细胞增殖,抑制作用呈剂量和作用时间依赖性,（２）通过细     

三氧化二砷作用机制研究进展

砷化合物在我国作为药物应用已有2400多年的历史了。自从20世纪90年代,我国学者应用三氧化二砷（As2O3）治疗急性早幼粒细胞性白血病并获得成功以来,人们对砷化合物进行了深入的研究,发现As2O3不仅对各型白血病有效,对其他多种恶性肿瘤也有良好的治疗效果。As2O3主要是通过抑制肿瘤细胞生长和肿瘤新生血管形成、诱导肿瘤细胞部分分化和凋亡等发挥抗肿瘤作用的。本文不仅对上述问题进行总结,还展望了新发展起来的基因表达谱分析技术--基因芯片技术在研究As2O3作用机制方面的应用前景。     

沉默NDRG1基因与三氧化二砷对宫颈癌抑制作用的研究

目的 观察沉默细胞分化相关基因NDRG1在三氧化二砷（As2O3）抑制宫颈癌HeLa细胞生长过程中的作用,探讨As2O3对宫颈癌的抑制作用与NDRG1基因的相关性。方法 构建NDRG1基因的miRNA干扰载体,稳定转染人宫颈癌HeLa细胞,半定量RT-PCR检测转染后HeLa细胞中NDRG1 mRNA的表达;不同浓度As2O3分别作用于转染及未转染HeLa细胞,MTT比色法检测细胞的生长和凋亡情况。结果 半定量RT PCR检测表明,构建NDRG1基因的miRNA干扰载体成功地转染HeLa细胞,并能够有效抑制NDRG1 mRNA表达。As2O3能够抑制转染及未转染HeLa细胞的生长,其抑制作用均呈浓度依赖性（P＜0.05）,且随时间延长,抑制作用亦增强。12.0μmol／L As2O3 作用HeLa细胞72h的细胞抑制率最大,未转染HeLa细胞组为（49.9±0.6）％,转染HeLa细胞组为（43.1±0.8）％;任一浓度As2O3对转染HeLa细胞的抑制作用较未转染HeLa细胞明显减弱（P＜0.05）。结论 沉默NDRG1基因后,As2O3对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用减弱,表明As2O3对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用与NDRG1基因相关。     

三氧化二砷对纤维肉瘤细胞放射增敏作用的研究

目的 研究和探讨三氧化二砷（As2O3）是否对纤维肉瘤细胞有放射增敏作用。方法以人纤维肉瘤细胞HTl080为实验对象，首先检测As2O3的单药毒性，确定IC10、IC50和IC90。放射增敏作用的实验分为空白对照组、单纯给药组、单纯照射组（包括1、2、4、6、8、10Gy剂量）、照射前加药组（于照射前24h加入设定浓度的As2O3，药物作用24h后进行照射）和照射后加药组（于照射后即刻加入设定浓度的As2O3，药物作用24h）。所有实验均重复3次。采用克隆形成分析法观察单纯照射和照射联合As2O3对细胞的杀伤作用。计算细胞的存活分数，用多靶单击模型进行拟合并做图。结果 HT1080细胞的IC10、IC50和IC90剂量分别为0．57、3．67和12．0μmol／L。无毒剂量的As2O3照射前给药增敏比（SER）为0．86（Do值比）、0．98（SF2值比），照射后给药SER为0．99（Do值比）、1．09（SF2值比）。IC50剂量的As2O3照射前给药SER为0．90（Do值比）、0．87（SF2值比），照射后给药SER为1．14（Do值比）、1．08（SF2值比）。IC90剂量的As2O3照射前给药和照射后给药的SER均为1．14（Do值比）、3．20（SF2值比），As2O3对低剂量照射的放射增敏作用好于高剂量照射（SERSF2〉SERDo）。结论 As2O3对HT1080纤维肉瘤细胞具有一定的放射增敏作用，为临床放疗和As2O3联合应用提供了实验依据。     

三氧化二砷对肝癌细胞survivin基因和端粒酶活性的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导肝癌细胞凋亡时survivin基因表达和端粒酶活性的变化。方法:采用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞亚二倍体百分率,逆转录-多聚酶链式反应检测细胞survivin mRNA表达,免疫组织化学染色检测细胞survivin蛋白的表达,端粒酶检测试剂盒检测端粒酶活性。结果:0.25~2.00μmol/L As2O3明显抑制肝癌Bel-7402细胞生长,诱导细胞凋亡,survivin mRNA和蛋白表达上调,端粒酶活性下降,呈时间、剂量依赖关系。结论:As2O3抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能与其降低端粒酶活性有关;而survivin基因表达上调,可能是抵抗As2O3诱导凋亡的途径之一。     

三氧化二砷对人肾癌细胞A-704的抑制作用研究

目的研究三氧化二砷（Arsenic trioxide，As2O3）对人肾癌细胞系A-704细胞生长的抑制作用。方法采用体外培养A-704细胞株与不同浓度的As2O3进行作用，应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、MTT法检测观察As2O3对细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。结果As2O3能够抑制A-704细胞的增殖，出现凋亡的形态学改变和DNA片段化，且呈时间剂量依赖性，在浓度为0．5、1．0、2．0、4．0μmol／L作用96小时，As2O3对A-704细胞的抑制率分别40．01％、43，72％、47．54％、53．61％与未经As2O3处理的细胞相比，均有显著差异（P〈0．05）。结论As2O3对A-704细胞具有显著的增殖抑制作用，并具有浓度和时间依赖性特点。