产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

目的 了解我院临床分离大肠埃希茼产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况.方法 确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR.RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型.结果 确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性.PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因.测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型.结论 大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主.     

下呼吸道肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌耐药特点及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率、基因型特点.方法收集下呼吸道标本中分离出的肺炎克雷伯菌,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并使用对CTX-M型ESBLs基因特异的引物,pCR扩增产酶菌的ESBLs基因.结果下呼吸道产ESBLs肺炎克雷伯菌占25%.ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌.35株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,16株携带CTX-M型基因.结论该院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率、耐药性高,CTX-M型基因的出现应引起临床医生的足够重视.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌CTX-M基因型和耐药性分析

目的 研究哈尔滨市肺炎克雷伯菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行组别和细菌耐药性特征.方法 收集哈尔滨市4所医院非重复的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用CTX-M1、2、8、9组特异性PCR引物检测菌株质粒上相应4组CTX-M基因的存在情况,并用K-B纸片扩散法测定菌株对临床相关的广谱β-内酰胺类抗菌药物的耐药性.结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌中25.7%的菌株CTX-M1组PCR扩增阳性,39.2%为CTX-M9组阳性,未检测到CTX-M2组和CTX-M8组的存在.CTX-M阳性株对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药率与CTX-M阴性株相比,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 本地区产ESBLs肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs以CTX-M1组和CTX-M9组为主,有同时携带两组CTX-M基因菌株的检出;本地区CTX-M型ESBLs在产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶的耐药特征中不起主要作用.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

124株肺炎克雷伯菌耐药性分析和产ESBLs株耐药基因分型研究

目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药性以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行状况.方法 用K-B法检测肺炎克雷伯菌对24种常用抗生素的耐药情况;用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBLs各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌除对碳青霉烯类药物敏感外,对其他抗生素耐药严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出50株,检出率40.32％.ESBLs基因分型结果显示,多株同时携带2种或2种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在.结论 常用抗菌药物耐药严重、呈多重耐药.ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型以CTX-M为主.     

临床大肠埃希氏菌耐药性检测及超广谱β-内酰胺酶流行病学调查

目的了解广州地区临床大肠埃希氏菌耐药及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况。方法对临床分离鉴定的57株大肠埃希氏菌进行5大类15种抗菌药物的耐药性检测。通过表型确认试验筛选出产ESBLs菌株,采用PCR法检测15种临床重要且常见的耐药基因。结果 57株大肠埃希氏菌对15种抗菌药物产生了不同程度的耐药性。其中有23株产ESBLs,ESBLs产生率为40.4%;24株产TEM,13株产CTX-M(其中,8株产CTX-M-55、4株产CTX-M-14、1株产CTX-M-27),2株产OXA-1。结论广州地区大肠埃希氏菌耐药情况依然严峻。同时,ESBLs流行趋势发生了变化:以前以流行CTX-M-9型为主,现在以CTX-M-1型和CTX-M-9型同时流行为主要特征。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的基因型分型及耐药分析

[目的]了解大连市中心医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药基因型及耐药情况。[方法]收集该院2005年11月-2006年2月连续不重复产ESBLs大肠埃希菌40株,采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的表型确认方法进行筛选。在此基础上,分别用针对TEM、SHV、CTX-M-Ⅰ、CTX-M-Ⅱ、CTX-M-Ⅲ、CTX-M-Ⅳ型β-内酰胺酶基因的六对特异性引物对每株细菌进行聚合酶链反应（PCR）,毛细管电泳方法检测所有产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因。应用K-B纸片扩散法检测产ESBLs大肠埃希菌对临床常用抗生素的耐药性。[结果]毛细管电泳结果显示,40株产ESBLs大肠埃希菌中,仅携带一种基因型的分别为SHV型1株（2.50%）,CTX-M-Ⅰ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅱ型7株（17.50%）,CTX-M-Ⅲ型2株（5.00%）,CTX-M-Ⅳ型4株（10.00%）。有18株（46.15%）同时携带两种或两种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在;药物敏感试验结果显示,产ESBLs大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素均表现出较高的耐药性,对碳青霉烯类药物（亚胺培南和美洛培南）的耐药率最低。[结论]该院产ESBLs大肠埃希菌近期流行的主要基因型别为CTX-M型,而且多基因携带情况常见;碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的药物。     

杭州市产超广谱β-内酰胺酶菌株耐药性和基因型分布研究

目的了解杭州市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ES-BLs基因型分布.方法采用浓度梯度法(Etest)测定分离自杭州市五家医院的51株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),通过聚合酶链反应(PCR)法及克隆测序分析其所产生的ESBLs基因型.结果 51株菌株对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮舒巴坦、头孢他啶和哌拉西林/三唑巴坦的敏感率为60.00%～80.00%,而对其它抗菌药物敏感率较低,对头孢噻肟的敏感率仅为5.88%.51株菌株有47株产CTX-M型ESBLs,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-3、CTX-M-24、CTX-M-22.结论杭州市产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性严重,ESBLs基因型以CTX-M型为主.     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

目的阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布。方法用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC。产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTXM-14)。PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低。结论广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主。     

深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型

目的分析深圳市大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法对50株产ESBLs大肠埃希菌分别用TEM、SHV、CTX-M和OXA-1群基因引物进行PCR扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果 92%菌株检出CTX-M型ESBLs,测序结果显示,以CTX-M-14型ESBLs为主,其次为CTX-M-55型。结论 CTX-M-14型和CTX-M-55型是深圳地区大肠埃希菌ESBLs的主要基因型。     

儿童福氏志贺菌超广谱β内酰胺酶CTX-M基因型的研究

目的 了解唐山地区产CTX-M型超广谱B内酰胺酶（EsBk）福氏志贺菌的流行基因型,为有效预防和控制该类感染提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs的福氏志贺菌43株,采用CLSI推荐的表型筛选和确证试验检测ESBLs,采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX-M基因型。结果43株产ESBLs的福氏志贺菌中,产CTX-M基因型的有19株（44．2％）,经PCR扩增及测序,19株具有ESBLs表型的福氏志贺菌中有17株表达CTX-M-14,1株表达CTX-M-57,1株表达CTX-M-3。结论唐山地区存在着CTX-M基因的流行,应加强唐山地区产CTX-M型ESBLs菌株的检测。     

外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的:了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases,ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型.方法:琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值,分别用TEM、SHV和CTX-M的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因.接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chin reaction,PCR),产物测序,确定基因类型.结果:93.5%的菌株含CTX-M基因,38.7%的菌株含SHV基因,87.1%的菌株含TEM基因.测序明确了TEM-1,CTX-M-1,3,14,22等基因类型.结论:外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以CTX-M为主.     

深圳市观澜地区产超广谱β-内酰胺酶菌株基因分型及耐药性分析

目的:了解深圳观澜地区产超广谱β-内酰胺酶菌株基因型分布情况,并分析其耐药性。方法:利用PCR技术扩增产ESBLs菌株质粒DNA的基因,统计分析各基因型阳性率。应用琼脂稀释法检测所有菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果:81株基因分型,SHV型检出率为34.6%,TEM型检出率为9.9%,CTX-M-1型检出率为11.1%,CTX-M-9型检出率为44.4%。药敏试验结果显示亚胺培南MIC90为0.25μg/ml,敏感率为100%。阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,MIC90分别为8μg/ml和16μg/ml,敏感率为86.1%和90.1%。结论:深圳观澜地区流行产ESBLs菌株主要为CTX-M型,其次为SHV型。亚胺培南对ESBLs菌株抗菌活性最强,其次为阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,氨苄西林/舒巴坦抗菌活性差。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药表型及基因型研究

目的研究大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酸ESBLs耐药表型及基因型特性。方法2006年1月至2006年12月我院临床分离的大肠埃希菌125株。先后用标准纸片法筛选试验和确认试验、Etest条分别检测ES-BLs。聚合酶链反应(PCR)以及基因测序分析测定ESBLs基因的类型。结果125株大肠埃希菌中检出71株产ESBLs(56.8%)菌株。PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M-14型为主;TEM基因型均为TEM-1型,SHV基因型均为SHV-1型。产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南,亚胺培南敏感性好。结论本地区大肠埃希菌ESBLs携带率较高,其基因以CTX-M-14型为主,其次CTX-M-3型ESBL,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。     

产CTX型超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌基因分析及耐药特征

目的 探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌blaCTX-M基因分型及相应耐药特征。方法 采用双纸片法检测ESBLs, PCR检测blaCTX-M及blaCTX-M-1、-2、-8、-9、25组基因,肉汤稀释法检测抗菌药物MIC值。结果 83株大肠埃希菌中,45株ESBLs表型确证实验阳性,PCR扩增结果显示44株blaCTX-M扩增阳性,其中12株单独检测出blaCTX-M-1组,29株单独检测出blaCTX-M-9组,3株同时具有blaCTX-M-1组和blaCTX-M-9组,未检测出blaCTX-M-2、-8、-25组。所有菌株对亚胺培南皆敏感,对头孢唑林、头孢噻肟、头孢曲松皆耐药。CTX-M-1组菌株对头孢他啶、头孢吡肟的耐药率皆为91.6%(11/12),氨曲南耐药率为100%,左旋氧氟沙星、庆大霉素耐药率分别为100%和83.3%(10/12)。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟耐药率分别为44.8%(13/29)、41.4%(12/29),氨曲南耐药率为55.2%(16/29),左旋氧氟沙星耐药率为89.7%(26/29)、庆大霉素耐药率为58.6%(17/29)。CTX-M-1、-9两组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 产ESBLs大肠埃希菌基因型以blaCTX-M为主, blaCTX-M-9组在blaCTX-M基因中占优势。CTX-M-9组菌株对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南敏感性高于CTX-M-1组。     

脑外科医院获得性肺炎产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的研究脑外科医院获得性肺炎(HAP)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型。方法回顾性分析41例脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌患者的临床资料,采用酶抑制剂增强法作ESBLs表型确证试验,纸片扩散法作药敏试验,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs基因。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的阳性率为85.42%;仅对亚胺培南、美罗培南敏感;几乎所有病例均存在不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受侵袭性操作等;SHV、CTX-M和TEM基因的检出率分别为73.17%(30/41)、63.26%(26/41)和14.63%(6/41);46.34%(19/41)的菌株同时携带多个基因。结论脑外科HAP产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率高、耐药情况严重,治疗应首选碳青霉烯类抗生素;不规范使用抗生素、应用糖皮质激素、接受各种侵袭性操作可能是其危险因素;最常见的ES-BLs基因型是SHV,其次为CTX-M。     

苏州地区临床产超广谱 β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因分型

目的分析苏州地区临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药特征和耐药基因型分布情况。方法收集苏州地区5家医院2006年至2009年间自临床标本中分离的肺炎克雷伯菌512株,按CLSI规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs,以K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验,用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行TEM、SHV和CTX-M基因型检测。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为35.7%（183株）,其中62.8%（115株）携带TEM型基因,36.1%（66株）携带SHV型基因,78.7%（144株）携带CTX-M基因。另外,有41.5%（76株）同时携带两种以上的基因。产酶株的耐药率均明显高于非产酶株（均P〈0.05）。产酶株除对第4代头孢菌素和对加克拉维酸或他唑巴坦等第3代头孢菌素耐药率相对较低外,对其他抗生素均有相当高的耐药率。但无论是产酶株还是非产酶株对亚胺培南的耐药率均为0。结论苏州地区临床产ESBLs肺炎克雷伯菌已达到了较高的比例,并具有多重耐药的特点,其中CTX-M型是最主要的流行基因型。临床上严格控制和合理使用第3代头孢菌素已刻不容缓。     

Antimicrobial resistance, genotypic characterization and pulsed-field gel electrophoresis typing of extended spectrum β-lactamases-producing clinical Escherichia coli strains in Macao, China

Background  The rise of the production of CTX-M class extended spectrum β-lactamases (ESBLs) has been well documented in traveling countries but no data are found for Macao, an international travel city. The objectives of this study were to identify the antimicrobial resistance pattern, and determine the prevalence, genotype and clonal relationship of ESBLs in 209 clinical Escherichia coli strains from Macao, China.

Methods  Antimicrobial susceptibility test was performed to determine the resistance patterns of the isolates using the disk diffusion method with 17 antimicrobial agents. Phenotypic detection was screened and confirmed according to the Clinical and Laboratory Standards Institute. Genotypic characterization was detected by isoelectric focusing analysis, polymerase chain reaction and sequencing. The clonal relationship between the different ESBL isolates was studied by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE).

Results  Imipenem and meropenem exhibited 100% susceptible among 209 strains. Overall, 82.3%, 67.3%, 52.9%, 51.2% and 51.0% of the isolates displayed resistance to ampicillin, tetracylcline, ciprofloxacin, sulfamethoxazole trimethoprin and gentamycin. The prevalence rate of ESBLs was 30.1%. Antibiotic resistances were found to be significantly higher among the ESBL producing group compared to non-ESBL producing group. We detected CTX-M-14 to be the major genotypic characterization of ESBLs (76.2%). Two strains showed indistinguishable patterns by PFGE.

Conclusions  The prevalence of antimicrobial resistance is alarming high in Macao. Antimicrobial resistance is significantly higher among the ESBL producing group. This study documented CTX-M-14 as the predominant ESBL type. Although indistinguishable pattern was found between two strains, it was too small to decide whether any of the investigated strains was epidemic. Our findings may be also pertinent for other geographic areas undergoing similar travel characteristics to understand the corresponding effects on bacterial populations.