犬异体单肺移植的实验研究

目的:通过犬异体单肺移植,掌握供肺的灌注、切取、保存、修剪的方法以及受体单肺移植的手术方法。方法:杂种犬10只,分为供体和受体,进行5次动物实验,其中异体左肺移植4例,异体右肺移植1例。先吻合支气管,后吻合肺动脉,最后心房袖,移植后于不同时点暂阻断对侧肺动脉并检测植入肺的功能参数。结果:所有移植肺通气和换气功能均正常,移植后犬恢复自主呼吸,能站立行走。术后1例存活5d,供体肺冷缺血时间4h;另1例存活3d,供体肺冷缺血时间17h;余3例均在24h内死亡。结论:犬异体单肺移植早期犬死亡的主要原因是移植肺的缺血再灌注损伤。     

自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤模型的建立

目的:建立一种新的移植睾丸缺血再灌注损伤(IRI)的模型,为研究临床睾丸移植奠定实验基础。方法:20只健康成年雄性日本大白兔,采用分别夹闭一侧睾丸动脉上下方腹主动脉后,然后套管针穿刺夹闭间的腹主动脉行一侧睾丸HC-A灌注液灌注,至一侧睾丸变为苍白色后阻断该侧睾丸动脉血流。然后将该睾丸原位低温保存4 h后开放睾丸动脉,成功地建立兔自体原位移植睾丸的缺血再灌注的模型。结果:灌注前睾丸颜色为正常鲜红色,灌注后灌注侧睾丸变为苍白色。开放睾丸动脉血流后可见睾丸变为鲜红色。模型成功率为90%,睾丸热缺血时间为(5.0±1.5)min,冷缺血时间为240.0 min,腹主动脉阻断时间(12.5±2.5)min。结论:建立了稳定、可行的自体原位移植睾丸缺血再灌注损伤的模型,为研究睾丸移植的缺血再灌注损伤提供了可靠的研究平台。     

犬肺移植热缺血再灌注后TNF-α和IL-8的早期水平观察

目的　观察分析无心跳供体犬肺移植缺血再灌注后TNF -α和IL - 8的早期水平变化。方法　家犬2 0只 ,先给予静脉注射氯化钾 ,心脏停跳 30min后开始进行冷保护液肺灌洗 ,灌洗时间 5min ,取出供体肺 ,4℃低温保存 1h,然后进行受体右肺移植操作 ,术后连续观察 6hTNF -α和IL - 8水平变化。结果　比较术前及术后6h内TNF -α有先升后降的趋势 ,IL - 8有明显持续性升高的趋势。结论　热缺血 30min犬供体肺移植细胞因子参与肺移植术后早期缺血再灌注损伤 ,其血清水平变化规律对检测早期移植肺损伤有一定的价值。     

丹参对肝脏缺血再灌注后病理变化影响的实验研究

观察丹参对肝脏热缺血和冷缺血再灌注后病理变化的影响。方法 :将家兔 12只制成肝脏热缺血模型 ,电镜下观察热缺血再灌注后丹参对肝脏超微结构变化的影响 ;对 2 0头猪施行辅助性肝移植术 ,光镜下观察移植肝在冷缺血再灌注后丹参对肝脏病理变化的影响。结果 :兔热缺血再灌注后 ,在肝细胞超微结构观察中 ,发现丹参可明显减轻线粒体和粗面内质网肿胀 ;猪冷缺血再灌注后 ,在肝脏光镜观察中 ,发现丹参可明显减轻肝细胞浊肿、脂变和汇管区炎症。结论 :丹参可明显减轻肝脏热缺血和冷缺血再灌注后肝脏病理损害。     

犬单肺移植的实验研究

目的通过犬单肺移植的实验研究,探索如何缩短热缺血时间和提高肺移植的吻合技术,预防手术并发症。方法12只犬,选体重接近者配对作为供受体进行单肺原位移植,对供体犬观察两种方法的热缺血时间;对受体犬进行血气分析,观察移植肺气体交换功能;死后进行解剖,观察各个吻合口的情况。结果6只犬肺移植手术顺利,无手术死亡,存活时间为48~168h,1例死于张力性气胸;只游离并阻断主肺动脉根部较常规方法热缺血时间缩短最少1min;移植肺气体交换功能正常。结论游离并阻断主肺动脉根部,可缩短热缺血时间;后壁折叠、前壁外翻的连续缝合法保证了肺动脉和左房袖吻合口光滑严密,无血栓和狭窄;在支气管两个软骨环间切断时,尽量多保留无软骨的气管壁,是防止支气管吻合口瘘和狭窄最有效的方法。     

新辅助性原位部分肝移植动物模型的建立

目的 建立一种新的猪辅助性部分原位肝移植模型。方法 将供肝左叶在体外修肝时切除,右叶供肝作为移植肝。切除受肝左外叶,右叶供肝肝上下腔静脉与受肝肝上下腔静脉行端侧吻合,供肝门静脉与受肝门静脉行端侧吻合,受体脾动脉在结肠后与供体肝动脉端端吻合,胆总管置管外引流。结果 共进行移植模型5例,成功4例,成功率达80％,模型血流动力学稳定。结论 本移植术式在体外转流下行全肝血流阻断,门静脉淤血明显减轻,阻断时间缩短,可以有效防止受体肝的缺血再灌注损伤。血管处理简单,吻合质量高。术后出血少。成功率高,值得推广。     

热缺血时间对无心跳供体肺移植再灌注后Ⅱ型细胞凋亡的影响

目的研究热缺血时间对无心跳供体肺移植后Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法将经历不同热缺血时间(30min、60min、120min)间隔Wister大鼠的左肺移植到同系Wister大鼠受体。再灌注2h后,提存肺泡Ⅱ型上皮细胞并进行分析。结果流式细胞计数结果:对照组(心跳组)移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.093 1±0.007 7);热缺血-30min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.166 5±0.014 8);热缺血-60min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.227 5±0.020 1);热缺血-120min组移植再灌注2h后凋亡细胞率(0.436 5±0.033 7)。各组之间比较P均<0.05。且随着热缺血时间的延长,凋亡率成上升趋势。结论无心跳供体肺移植后原发性移植物失功能的发生率高的一个可能原因是随着热缺血时间的延长造成了移植后II型细胞凋亡比例增高使得移植肺处于失功能状态。     

小型猪胰腺移植缺血/再灌注损伤早期腺泡细胞凋亡的发生及意义

目的探讨小型猪单纯胰腺移植缺血/再灌注损伤早期腺泡细胞凋亡的发生及意义.方法共建立20例小型猪单纯胰腺移植模型,于移植手术不同时段分别取胰腺组织行光镜组织病理学、透射电镜超微结构检查,Bcl-2、Bax免疫组化,TUNEL法原位凋亡检测.于再灌注0、30min、1h取外周血测血清淀粉酶和脂肪酶.结果移植胰腺组织离体后、冷缺血2h及再灌注1h与原位灌注前比,凋亡指数明显增加(P< 0.01),组织病理学评分明显升高(P< 0.01),Bcl-2表达明显减低(P< 0.01),Bax表达明显增强(P< 0.01);再灌注30min、1h血清淀粉酶和脂肪酶比再灌注0min明显升高(P< 0.01).结论细胞凋亡是移植胰腺缺血/再灌注损伤早期的主要表现,抗凋亡治疗在防治移植胰腺缺血/再灌注损伤中应该得到重视.     

缺血预处理对严重缺血/再灌注损伤的大鼠移植肾脏功能恢复的影响

目的:利用大鼠肾移植模型观察缺血预处理对长时间冷缺血造成严重缺血再灌注损伤的移植肾脏功能恢复的影响.方法:将Wistar大鼠分为两组,实验组(n=20)接受缺血预处理(15 min的热缺血/10 min的再灌注),对照组(n=20)不接受上述处理.然后将移植肾脏用UW液低温保存42 h后行肾移植术.对受体成活率、早期移植肾功能及血浆中NO进行检测.结果:两组的受体成活率没有明显的统计学差异[60%(IPC) vs 40%(non-IPC);P＞0.05].实验组移植肾功能恢复更快,术后第3,6日血肌酐水平均低于对照组(P<0.01),术后第1日血NO水平均高于对照组(P<0.05)、术后第3,6日血NO水平均高于对照组(P<0.01).结论:一次缺血预处理(15 min/10 min)提高了内源性NO的水平,可以加快严重缺血再灌注损伤移植肾脏的恢复,此种缺血预处理方法可以提高长时间冷缺血移植肾的预后.     

缺血后处理对犬肺移植术后早期炎症反应的影响

【目的】 观察供体犬肺再灌注后早期炎症因子及脂质过氧化反应的变化情况,了解缺血后处理对供体犬肺植入后功能的影响。【方法】 12对比格犬,随机分成两组,对照组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,不予缺血后处理的干预,按常规方式进行;缺血后处理组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,常规方式获取的供体犬肺植入后,再灌注早期实施3个周期的10 s再灌和10 s再阻断,总时程1 min的缺血后处理?于供体犬肺再灌注后1 h和2 h时间点采集供肺标本,采用考马斯亮兰法检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性?丙二醛(MDA)的含量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测供体犬肺植入后1、2 h时间点受体左房混合静脉血IL-8水平的变化;关于光镜下观察供体犬肺植入后1、2 h时间点肺组织的病理变化?采用重复测量资料的方差分析进行检验。【结果】 手术无1例失败,均存活。供体肺脏植入时间平均(35.9 ± 1.7) min。缺血后处理组在1 h、2 h时间点的供体肺组织SOD活性水平较对照组升高(P < 0.001);而供体肺组织MDA含量较对照组减低(P < 0.001)。缺血后处理组的左房混合静脉血的血浆IL-8水平在1、2 h时间点均较对照组的明显减少(P < 0.05)。缺血后处理组肺组织光镜下观察在各时间点的炎症反应均较对照组的变化轻微。【结论】 缺血后处理可能通过减少供体肺组织再灌注后细胞因子IL-8的分泌,从而减轻缺血再灌注后的炎症反应性损伤,达到改善供体犬肺的植入后的功能。     

α-tocopherol和辅酶Q10对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察在供体切除前联合应用α-tocopherol和辅酶Q10对大鼠移植胰热缺血再灌注损伤的保护作用.方法用streptozocin(65mg/kg)诱导Wistar大鼠制成糖尿病模型作为受体.18只SD大鼠分成3组(每组6只),1组作为空白对照组;2组用α-tocopherol(20mg·kg-1·d-1)行腹腔注射4d,辅酶Q10(10mg/kg)腹腔注射1h后切取供胰,3组在腹腔注射生理盐水1h后切取供胰,均在热缺血60min后作同种异位移植.结果接受移植两组的血及胰组织中LPO含量均有升高,但2组的含量要低于3组,差异有非常显著意义(P＜0.05).结论联合应用α-tocopherol和辅酶Q10具有抗缺血再灌注损伤的作用.     

肝缺血再灌注损伤早期对其他脏器的影响

目的 了解肝缺血再灌注损伤对其他重要脏器功能的影响。方法 雄性SD大鼠25只,按阻断血流前后不同时间点均分为5组,即肝血流阻断前、阻断30 min末、再灌注后30 min、再灌注后2 h及再灌注后6 h。各组分别活杀5只大鼠取血检测血生化指标,同时取心肌组织测ATPase活性;在缺血前及再灌注后6 h取肾、肺、心、胰组织匀浆测丙二醛、超氧化物歧化酶。结果 再灌注后早期血浆丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血尿素氮、淀粉酶、心肌型肌酸激酶同功酶及血浆丙二醛呈上升趋势,血浆超氧化物歧化酶及组织ATP酶活性在再灌注后呈下降趋势。再灌注后6 h,各组织丙二醛含量较缺血前明显升高,而组织超氧化物歧化酶较缺血前明显下降。结论 肝缺血再灌注早期可引起机体其他多脏器的损伤。     

公民逝世后器官捐献供者质量控制

公民逝世后器官捐献促进了我国公民器官移植事业健康发展,但供体短缺仍是全球移植界面临的重要瓶颈和挑战.因此越来越多的扩大标准供体应用于临床,由于这些供体更易遭受热缺血、冷缺血、冷保存和再灌注损伤,移植术后移植物功能延迟恢复、移植物缺血性损伤、移植物无功能以及排斥反应等并发症发生率明显升高.因此亟需制定移植供体器官质量控制...     

缺血后适应对脑缺血再灌注损伤保护作用的研究进展

后适应是在缺血后再灌注早期机械地阻断血流从而减轻器官缺血/再灌注损伤的一种现象.本文对后适应对脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制作一综述.     

热休克蛋白70在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

<正>在较为复杂的肝肿瘤切除、严重的肝创伤手术过程中,通常需要暂时阻断肝脏血流,这一过程可引起不同程度的肝脏缺血—再灌注损伤。肝脏的缺血—再灌注损伤与多种因素有关,包括氧自由基的释放、钙超载、Kuffer细胞的激活、细胞因子的释放等。为了减轻肝门血流阻断引起的缺血—再灌注损伤,人们进行了很多尝试,包括短暂缺血、药物、热应激等的预处理,     

肝缺血再灌注损伤早期对其他脏器的影响

目的 了解肝缺血再灌注损伤对其他重要脏器功能的影响。方法 雄性SD大鼠25只，按阻断血流前后不同时问点均分为5组，即肝血流阻断前、阻断30min末、再灌注后30min、再灌注后2h及再灌注后6h。各组分别活杀5只大鼠取血检测血生化指标，同时取心肌组织测ATPase活性；在缺血前及再灌注后6h取肾、肺、心、胰组织匀浆测丙二醛、超氧化物歧化酶。结果 再灌注后早期血浆丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血尿素氮、淀粉酶、心肌型肌酸激酶同功酶及血浆丙二醛呈上升趋势，血浆超氧化物歧化酶及组织ATP酶活性在再灌注后呈下降趋势。再灌注后6h，各组织丙二醛含量较缺血前明显升高，而组织超氧化物歧化酶较缺血前明显下降。结论 肝缺血再灌注早期可引起机体其他多脏器的损伤。     

缺血后处理对供体犬肺组织细胞凋亡基因表达的影响

【目的】观察供体犬肺再灌注后早期供体肺组织脂质过氧化反应的变化,了解缺血后处理对供体犬肺植入后细胞凋亡基因表达的变化情况。【方法】随机选取12对比咯犬,组成供受体,进行异体左侧单肺移植术。随机分成两组,对照组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,不予缺血后处理的干预,按常规方式进行。缺血后处理组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,常规方式获取的供体犬肺植入后,再灌注早期实施3个周期的10 s再灌～10 s再阻断,总时程1 min的缺血后处理。于供体犬肺再灌注后1、2 h时间点采集供肺标本检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的含量;采用RT-PCR技术检测供体肺脏再灌注后1、2 h时间点细胞凋亡基因Bcl-2、Bax的表达;光镜下观察供体犬肺植入后1、2 h时间点肺组织的病理变化,应用SPSS 13.0统计软件处理,以P<0.05为统计学上有显著差别。【结果】供体肺脏植入时间平均(35.9±1.7)min。缺血后处理组在1、2 h时间点的供体肺组织SOD活性水平较对照组升高、MDA含量较对照组减低,有统计学差异(P<0.05);对照组与实验组相比较,肺组织再灌注后1、2 h时间点,Bc12蛋白表达上调(P<0.05),而Bax蛋白表达下调(P<0.05);缺血后处理组肺组织光镜下观察在各时间点的炎症反应均较对照组的变化轻微。【结论】缺血后处理可以抑制再灌注时氧化自由基的堆积,从而减少供体肺的缺血再灌注损伤;缺血后处理能够通过抑制促凋亡Bax蛋白的表达,及促进抗凋亡Bc12蛋白表达,从而影响内源性细胞凋亡途径。     

大鼠肝肠缺血再灌注对远隔器官损伤作用的实验研究

目的 通过动物实验观察肝肠缺血再灌注对远隔器官的损伤作用。方法 健康雄性Wistar大鼠75只,分全肝缺血、肠缺血及肝肠联合缺血3组,分阻断前、阻断末(45 min)、再灌注后0.5、2、6 h共5个时间点,分别活杀5只大鼠取材,测定血浆及组织匀浆中丙二醛和超氧化物歧化酶水平,并观察血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶等指标的变化。结果 肝肠缺血再灌注后,各组血浆及肺、心、肾、胰组织中丙二醛及超氧化物歧化酶水平均发生显著变化,血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶混合性同工酶水平均呈上升趋势。结论 肝肠联合缺血再灌注早期可引起机体其他脏器严重损伤;在相同热缺血时间内,肠缺血可能比肝脏缺血引起更大的其他重要脏器损伤。     

大鼠肝肠缺血再灌注对远隔器官损伤作用的实验研究

目的 通过动物实验观察肝肠缺血再灌注对远隔器官的损伤作用。方法 健康雄性Wistar大鼠75只，分全肝缺血、肠缺血及肝肠联合缺血3组，分阻断前、阻断末(45min)、再灌注后0．5、2、6h共5个时间点，分别活杀5只大鼠取材，测定血浆及组织匀浆中丙二醛和超氧化物歧化酶水平，并观察血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶等指标的变化。结果 肝肠缺血再灌注后，各组血浆及肺、心、肾、胰组织中丙二醛及超氧化物歧化酶水平均发生显著变化，血尿素氮、血淀粉酶及肌酸激酶混合性同工酶水平均呈上升趋势。结论 肝肠联合缺血再灌注早期可引起机体其他脏器严重损伤；在相同热缺血时间内，肠缺血可能比肝脏缺血引起更大的其他重要脏器损伤。     

广西巴马小型猪用于心脏移植的研究

目的：探讨广西巴马小型猪游离心脏保存与心脏移植的意义和价值。方法：广西巴马小型猪24头（25~30 kg）,按随机方法分为供体组（n=12）和受体组（n=12）。两组麻醉后行胸部前正中切口。供体组先行前腔静脉放血,阻断升主动脉灌注心脏停跳液（4℃改良Thomas液）,切取的心脏置入4℃生理盐水,用UW液冲洗至清亮,低温保存8 h。受体组常规建立体外循环,全身降温至30℃。心肺机的灌注量为70 mL/kg。阻断升主动脉。切除受体组的心脏,保留左心房后部。供体心脏按原位放入受体心包内,连续外翻缝合左心房全部—右心房大部分,肺动脉半周和主动脉的全部;开放主动脉阻断钳、心脏复跳后继续完成肺动脉、右心房其余部分的吻合。心肺复苏,并行循环2 h。进行血流动力学测定。结果：实验中未见呼吸抑制而死亡。12头巴马小型猪供体心脏植入受体后,心脏均可复跳,未发生漏血现象并可以脱离体外循环。结论：广西巴马小型猪用于心脏移植的研究是较理想的动物之一。