circ_0001821靶向miR-203调控皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖、凋 亡、迁移和侵袭

目的：探讨circ_0001821通过靶向miR-203调控皮肤鳞状细胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC）A431细胞 增殖、凋亡、迁移及侵袭的分子机制。方法：选取2018年2月至2019年8月海南医学院第二附属医院收治的39例CSCC患者的癌 及配对癌旁组织,以及人CSCC细胞系A431,用qPCR法检测CSCC癌和癌旁组织中circ_0001821的表达水平。利用脂质体转染技 术,分别将si-circ_0001821、si-NC、miR-203 mimic、miR-NC、si-circ_0001821与anti-miR-NC、si-circ_0001821与anti-miR-203转染至 A431细胞,用qPCR法检测转染细胞中circ_0001821和miR-203的表达水平,MTT法、流式细胞术和Transwell实验分别检测A431 细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭能力,WB法检测细胞中增殖、凋亡、迁移及侵袭相关蛋白的表达水平。通过Circinteractome数据库 预测circ_0001821与miR-203存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证circ_0001821与miR-203的靶向关系。结果：CSCC组 织中circ_0001821的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。转染 si-circ_0001821 可显著降低细胞中circ_0001821的表达水平（P<0.01）,降低细胞增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.01）,提高细胞凋亡率（P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实,circ_0001821可 靶向结合miR-203。转染miR-203 mimic可显著降低A431细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.01）,提高细胞凋亡率（P<0.01）。共转染si-circ_0001821与anti-miR-203 可明显逆转下调circ_0001821 表达对 A431 细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的调控作用。结论： circ_0001821通过靶向miR-203调控CSCC细胞A431的增殖、迁移、侵袭能力及细胞凋亡。     

鞣花酸抗肿瘤作用的分子机制

鞣花酸是一种存在于多种植物中的天然多酚组分,近年来,越来越多的实验证实鞣花酸通过调节细胞转运因子和激活多信号途径方式抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡。由于其安全性和有效性,可作为肿瘤的化学预防剂,联合化学药物治疗肿瘤。     

鞣花酸抗肿瘤作用的分子机制

鞣花酸是一种存在于多种植物中的天然多酚组分,近年来,越来越多的实验证实鞣花酸通过调节细胞转运因子和激活多信号途径方式抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡。由于其安全性和有效性,可作为肿瘤的化学预防剂,联合化学药物治疗肿瘤。     

干扰CIP2A表达对前列腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨干扰蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)表达对前列腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 应用siRNA干扰前列腺癌DU-145细胞的CIP2A表达后,检测细胞的增殖及凋亡水平.采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CIP2A的表达水平;采用MTT实验检测细胞增殖水平;采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;采用TranswellTM实验检测细胞侵袭水平.结果 siRNA干扰前列腺癌DU-145细胞的CIP2A表达,干扰效率为80%.培养120 h后,CIP2A siRNA组前列腺癌DU-145细胞的增殖率为(94.02±4.21)%,低于对照组的(135.21±4.13)%(P﹤0.05).CIP2A siRNA组G1期细胞所占比例为(58.07±2.10)%,高于对照组的(50.73±2.30)%(P﹤0.05).CIP2A siRNA组前列腺癌DU-145细胞的穿膜细胞数为(93.00±4.80)个,少于对照组的(143.00±15.80)个(P﹤0.05).结论 CIP2A在前列腺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭中起着及其重要的作用,并有可能成为前列腺癌的治疗新靶点.     

牛蒡子苷元调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的：探究牛蒡子苷元（ARC）通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌（OSCC）HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法：使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HSC-3细胞分为对照组、ARC-L组（10 mg/L ARC）、ARC-M组（20 mg/L ARC）、ARC-H组（40 mg/L ARC）和ARC-H+Jagged1/FC组（40 mg/L ARC+1.2μg/mL Jagged1/FC）。采用EdU法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的迁移、侵袭能力及细胞周期和细胞凋亡率,WB法检测增殖（c-Myc、cyclin D1）、凋亡（BAX、Bcl-2、survivin）、EMT(E-cadherin、vimentin、Snail)及Notch/Hes-1通路（Notch 1、Hes-1、NICD）相关蛋白的表达水平。结果：与0 mg/L相比,10～80 mg/L的ARC均能显著降低HSC-3细胞增殖活力（均P<0.05）。与...     

鞣花酸通过下调ERK1/2抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖

目的:探讨鞣花酸在雌激素诱导的乳腺癌细胞增殖中的作用及细胞和分子机制。方法:雌激素培养乳腺癌细胞MCF-7,鞣花酸培养液处理,观察细胞增殖情况。采用Western blot观察细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的表达。结果:雌激素可明显促进MCF-7细胞增殖,与对照组比较有显著性差异,并能激活ERK1/2,使p-ERK1/2表达明显增加,且具有时间依从性。鞣花酸可明显抑制雌激素诱导的MCF-7细胞增殖,并抑制p-ERK1/2的表达,呈剂量依赖性。结论:雌激素通过激活ERK1/2诱导MCF-7细胞增殖,而这一效应可被鞣花酸抑制。     

和厚朴酚对人皮肤鳞癌细胞A431增殖凋亡作用及可能的机制分析

目的:研究和厚朴酚（Honokial,HNK）对人皮肤鳞癌细胞A431增殖凋亡作用及可能的机制分析。方法:采用CCK8实验方法检测和厚朴酚对A431细胞增殖的影响;Western blot定量分析和厚朴酚对Bcl-2和Bad蛋白表达的影响;Western blot定分析和厚朴酚对A431细胞中p53蛋白表达的影响;利用p53过表达腺病毒,并联合应用药物,通过CCK8和Western blot方法分析和厚朴酚对细胞增殖和凋亡的影响。结果:和厚朴酚以浓度和时间依赖性地抑制A431细胞增殖,并诱导其凋亡,上升Bad蛋白水平,下调Bcl-2蛋白水平;和厚朴酚可上调A431细胞中p53蛋白表达水平;加入p53过表达腺病毒可增强和厚朴酚的作用,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。结论:和厚朴酚能够抑制人皮肤鳞癌细胞A431的增殖并诱导凋亡,其机制可能与p53信号通路有关。     

miR-4712-5p在外阴鳞癌A431细胞增殖、侵袭中的作用

目的:筛选外阴鳞状细胞癌差异表达基因,观察其在外阴鳞癌中的作用,探讨其在外阴鳞癌组织、细胞中的作用靶点。方法:采用生物信息学方法筛选差异表达的基因miRNA-4712-5p。其表达在外阴鳞癌临床组织（VS组织）和外阴鳞癌细胞系A431（VS细胞）中通过qRT-PCR方法得到验证。构建过表达模拟物并转染A431细胞后,通过CCK-8实验和Transwell实验判断miRNA-4712-5p在外阴鳞癌细胞中增殖、侵袭和转移的作用,并分析miRNA-4712-5p作用靶点PTEN,Western blot实验和免疫组化实验检测PTEN表达水平。结果:miR-4712-5p在外阴鳞癌组织和细胞中的表达水平显著升高,并可促进外阴鳞癌细胞的增殖和侵袭。生物信息学分析PTEN可能是miR-4712-5p的靶基因。qRT-PCR显示外阴鳞癌组织中PTEN表达显著低于邻近非癌组织。用所构建的miR-4712-5p过表达模拟物转染A431细胞后,PTEN蛋白显著降低。结论:miR-4712-5p在外阴鳞癌组织和细胞中显著增高,可通过降低PTEN蛋白的表达,促进外阴鳞癌细胞的增殖和侵袭。     

鞣花酸对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及SDF1α/CXCR4信号通路的影响

目的 探讨鞣花酸对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖侵袭转移的作用.方法 采用0（对照）、6、12 μg/ml鞣花酸培养液分别处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别于培养后24、48、72 h计数MDA-MB-231细胞数.细胞趋化实验观察鞣花酸对MDA-MB-231细胞趋化运动的影响,Western Blot 观察鞣花酸对乳腺癌细胞MDA-MB-231中SDF-1α信号通路激活的抑制作用.数据分析采用重复测量的方差分析,两两比较采用SNK-q分析方法.结果 与对照组比较,6、12 μg/ml鞣花酸处理组在24、48、72 h的细胞计数显著降低.重复测量的方差分析结果提示分组比较（F=4875.56,P=0.00）及三个时间点间比较（F=670.73,P=0.00）差异有统计学意义,而分组与时间有交互作用（F=122.92,P=0.00）,表明鞣花酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖有显著抑制作用.乳腺癌细胞趋化运动实验提示各组乳腺癌细胞的趋化数分别为（14.00±1.00）＆#215;105/ml、（7.70±0.58）＆#215;105/ml、（3.00±1.00）＆#215;105/ml,差异有统计学意义（F=117.57,P=0.00）.Western Blot结果显示鞣花酸明显抑制CXCR4表达及SDF1α/CXCR4对乳腺癌细胞AKT信号通路的激活.结论 鞣花酸可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,SDF1α/CXCR4介导的细胞趋化运动及其SDF1α/CXCR4信号通路激活,在预防乳腺癌复发及转移中可能有潜在价值.     

TPX2 shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响

目的:研究Xklp2靶蛋白（TPX2）shRNA对乳腺癌细胞生长、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法:乳腺癌细胞MCF-7感染靶向TPX2基因shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒,设置为TPX2 shRNA组、shRNA-NC组,把不做慢病毒感染的细胞设为对照组（Control组）。Real time PCR和Western blot测定沉默效果,MTT测定细胞增殖活性,克隆形成实验测定细胞克隆形成能力,流式细胞术测定细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定细胞中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、活化型Caspase-3（Cleaved Caspase-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、活化型Caspase-9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平。结果:TPX2 shRNA组TPX2 mRNA和蛋白水平均低于shRNA-NC组和Control组（P<0.05）。TPX2 shRNA组细胞增殖活性和细胞克隆形成能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移能力降低,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平降低,Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平升高,与shRNA-NC组和Control组比,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:下调TPX2明显抑制乳腺癌细胞生长、侵袭和迁移能力,并诱导乳腺癌细胞凋亡。     

红景天苷通过JAK2/STAT3 通路影响宫颈鳞癌C33A细胞的增殖、侵袭和凋亡

目的：观察红景天苷对宫颈鳞癌C33A细胞增殖、侵袭及凋亡的影响并初步探讨其可能的机制。方法：将C33A细胞分为4 组：对照组、低剂量组（红景天苷50 μg/ml）、高剂量组（红景天苷150 μg/ml）、抑制剂AG490 组（JAK2/STAT3 信号通路抑制剂AG490 50 μmol/L）,采用MTT 法、EdU 标记实验、Transwell 实验、Rh123 染色和流式细胞术分别检测红景天苷和AG490 对C33A 细胞增殖、侵袭和凋亡的影响,Western blotting 检测红景天苷和AG490 对C33A 细胞中JAK2/STAT3 通路相关蛋白（p-JAK2、p-STAT3）和凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2、caspase-3）表达的影响。结果：与对照组相比,低剂量组C33A细胞的增殖和DNA的合成明显受到抑制（均P<0.05）、侵袭能力明显降低（均P<0.05）、Rh123 荧光强度明显减弱（均P<0.05）、线粒体膜结构受到破坏、细胞凋亡率明显增加（均P<0.05）;p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2 水平显著下降（均P<0.05）、Bax、caspase-3 的表达水平显著升高（P<0.05）;与低剂量组相比,高剂量组、抑制剂组对C33A细胞增殖、侵袭、凋亡及相关蛋白表达的影响更为显著（P<0.05）;而高剂量组、抑制剂组间无显著差异。结论：红景天苷可以抑制C33A细胞的增殖和侵袭、促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3 信号通路有关。     

CAAP1抑制肝癌HepG2细胞凋亡而促进其增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CAAP1对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:构建CAAP1过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体pSilencer 2.l-U6 neo/shR-CAAPl,转染肝癌HepG2细胞后,qPCR和WB实验分别检测CAAP1mRNA和蛋白的表达水平.实验分为过表达对照组(p...     

TOP2A在非小细胞肺癌中的高表达促进肿瘤细胞的增殖和侵袭能力

目的:探讨编码拓扑异构酶Ⅱα的基因TOP2A在非小细胞肺癌组织中的表达情况及其生物学功能。方法:采用荧光定量PCR方法检测102例非小细胞肺癌及其癌旁组织中TOP2A的mRNA表达水平,Western blot检测其中5对组织中TOP2A蛋白表达水平,分析TOP2A 表达与非小细胞肺癌主要临床病理特征的相关性。干扰非小细胞肺癌细胞株A549和HCC827中TOP2A的表达,MTT法检测其表达对肿瘤细胞增殖的影响,Transwell法检测TOP2A表达下调对肿瘤细胞侵袭能力的影响。应用流式细胞术检测TOP2A敲降后细胞的凋亡率和细胞周期。结果:TOP2A在非小细胞肺癌组织中的表达水平相较癌旁组织明显上升（P<0.05）,干扰TOP2A的表达会抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。流式细胞凋亡率实验结果显示转染siTOP2A后的非小细胞肺癌细胞早期凋亡率增加;流式周期分析显示siTOP2A转染后的细胞S期发生阻滞抑制细胞增殖。同时,TOP2A表达水平与非小细胞肺癌的肿瘤分期、淋巴结转移密切相关（P<0.05）。结论:TOP2A在非小细胞肺癌中表达上调,与肿瘤增殖和侵袭等生物学行为密切相关。     

川芎嗪对人肺腺癌 A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用与机制

目的：探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）对人肺腺癌 A549细胞增殖及侵袭的影响。方法：川芎嗪治疗组分别用0.1μg/ ml、1μg/ ml、10μg/ ml、100μg/ ml、250μg/ ml 浓度的川芎嗪干预 A549细胞,同时设无药的阴性对照组及加顺铂的阳性对照组。24、48、72、96小时后,MTT 法检测川芎嗪对 A549细胞株增殖的抑制作用,划痕实验和 Transwell 法观测川芎嗪对 A549细胞株迁移侵袭能力的影响,采用细胞流式术检测川芎嗪对 A549细胞周期和凋亡的干预作用。结果：川芎嗪显著抑制 A549细胞的增殖,抑制 A549的迁移和侵袭,流式细胞术显示川芎嗪诱导 A549细胞发生 G1期阻滞和早期凋亡（P <0.05）。结论：川芎嗪对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用可能是通过诱导 G1期细胞阻滞和早期凋亡引起的。     

BRD4抑制剂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法 0、0.1、1、10、100 μmol／L GSK525762A 处理鼻咽癌CNE-2细胞 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin V-FITC／PI双染法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞凋亡情况,Transwell法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞侵袭能力,实时定量PCR检测不同浓度GSK525762A 处理48、96 h后凋亡相关基因的表达情况。结果 GSK525762A对CNE-2细胞增殖有抑制作用,增殖抑制率呈时间和浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A处理后的细胞早期、晚期及总凋亡率升高,均高于0 μmol／L,凋亡率随浓度升高而增加;穿膜细胞数均少于0 μmol／L,且随浓度升高而降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;与0 μmol／L比较,其余各浓度的Bcl-2 mRNA水平降低,Bax mRNA、Bak mRNA水平均升高,且各浓度间差异均有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A各浓度处理96 h的凋亡率、穿膜细胞数及凋亡相关基因mRNA均优于48 h（P＜0.05）。结论 BRD4抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖有毒性作用,可诱导CNE-2细胞凋亡,恢复凋亡相关基因的表达,并降低细胞的侵袭能力。