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用套式RT—PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型 总被引:1,自引:0,他引:1
检测人肝细胞癌(HCC)组织中丙型肝炎病毒(HCV)基因型。方法 用RT-PCR法常规检测HCC组织和部分患者因清HCV,再以巢工地HCV阳性标本中5种HCV基因型进行鉴别。地多数标本中HBsAg和HBVDNA也进行了免疫互助 化和原位杂交检测。结果 HCV组织中HCV阳性率为50%,与HBV者,差异无显著性意义,两者重叠感染率34%。在10例血清HCV一HCC患者中,3例HCC冰冻组织检出HCV 相似文献
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用聚合酶链反应技术对35例乙型肝炎免疫指标全阴性的原发性肝细胞癌患者血清,外周血单核细胞及肝活检标本进行了乙型肝炎病毒DNA检测。结果:血清,外周血单核细胞及肝活检标本事乙型肝炎病毒DNA的阳性率分别为34.29%,60.00%,68.57%。提示:乙型肝炎病毒DNA在乙型肝炎免疫指标全阴的原发性肝细胞癌患者体内仍有相当高的分布;乙型肝炎病毒对原发性肝细胞癌有高致病性。 相似文献
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介绍用肝细胞癌组织直接进行聚合酶链反应检测HBV DNA的方法。本法特异性强、灵敏度高,为肝细胞癌的病因学研究提供了新的实验手段。 相似文献
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用多聚酶链反应(PCR)技术检测了16例肝细胞性肝癌(HCC)患者癌灶和癌旁双份组织石蜡包埋标本中的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)。以C基因引物扩增HBV-DNA,32份标本中检出率71.87%。以新鲜冷冻肝标本作对照检出率81.25%,二者相比无显著性差别(X~=0.57,P>0.05)。以质粒提取HBV-DNA作灵敏度测定,PCR-EB可达10fg,PCR-SBH可达lag。应用非放射性的地高辛素标记探针作杂交灵敏度达~32P标记探针的水平。 相似文献
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目的:为进一步研究HBV感染与原发性肝细胞癌的关系.方法:ELISA法检测血清中HBsAg,HBeAg,抗-HBe,抗-HBc和抗-HBs;PCR检测血清HBVDNA.结果:37例晚期原发性肝癌患者血清HB-sAg,HBeAg,抗-HBe和抗-HBc阳性者分别为17例(45.95%),4例(10.81%),16例(43.24%)和9例(24.32%),而抗-HBs全部阴性.聚合酶链式反应检测HBVDNA,18例(48.69%)阳性,非常显著地高于HBeAg检出率(P<0.01).抗-HBe阳性中有7例PCR-HBVDNA阳性.HBV总感染率89.19%.结论:提示原发性肝癌发生与HBV感染有关. 相似文献
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Nested PCR检测HBV DNA技术的建立与应用 总被引:2,自引:1,他引:1
本研究建立一种Nested PCR技术检测HBV DNA,即采用内外两对引物分别进行连续两次扩增,使检测极限由一次PCR的10~(-2)Pg提高到10~(-5)Pg;经~(32)P标记寡核苷酸探针作Southern转移杂交以及BgIⅡ作酶切分析证实两次扩增均为特异性扩增。通过抗-HBe阳性、单项抗一HBc阳性和单项抗-HBs阳性三种血清的HBV DNA的检测,表明该方法确能检出标准PCR所不能检出的极低水平的HBV感染,对提高乙型肝炎的诊断水平及更准确地评价药物疗效有重要意义。 相似文献
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我们开发了一种敏感又快速的方法,以检测低水平乙型肝炎病毒(HBV)感染。通过聚合酶链反应(PCR)检测了12例慢性肝炎和52例肝癌病人血清中的HBV DNA。将PCR分析结果与常规血清标志物相比较,并评价检测血清中HBV DNA的临床意义。 相似文献
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为观察乙型肝炎后肝硬化患者体内HBV的复制状况,为抗病毒治疗提供依据,以减少盲目用药。应用多聚酶链反应,对26例乙型肝炎后肝硬化患者检测了血清HBV-DNA存在状态。结果显示,活动性乙型肝炎后肝硬化9例,血清HBV-DNA阳性8例,阳性率88.88%,静止性乙型肝炎后肝硬化17例,HBV-DNA脑性6例,阳性率35.29%。两组比较。血清HBV-DNA阳性率差异显著(P<0.01)。结果表明,应重点对活动性乙型肝炎后肝硬化患者进行抗病毒治疗。 相似文献
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本文运用聚合酶链反应(PCR)检测乙肝病毒DNA(HBVDNA).可检出极微量的HBV感染者,它对乙肝发病机理的研究、判断患者病变活动和传染性以及判定抗病毒药物疗效均具有重要意义。 相似文献
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建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术 总被引:1,自引:1,他引:0
建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88%,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97%,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82%。 相似文献
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为建立检测人巨细胞病毒(HCMV)感染的PCR方法并探讨HCMV与宫颈癌的关系,从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取DNA,用聚合酶链反应体外扩增HCMVEcoRID片段上一段长152bp的核酸序列,再用地高辛末端转移酶标记法标记和扩增片段互补的HCMV寡核苷酸探针,用该探针证实扩增片段的特异性。检测宫颈癌标本43例,阳性率为25.6%(11/43),正常宫颈组织8例,阳性率为0。宫颈癌标本阳性率高于正常宫颈标本,提示HCMV与宫颈癌的发生有关。 相似文献
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用Nested聚合酶链反应(Nested PCR)法检测嗜肺军团菌种。Nested PCR法所用的两对寡核苷酸引物按编码24 kDa嗜肺军团菌表面抗原的基团片段序列设计的。用此两对引物对实验的军团菌种和非军团菌种细菌DNA进行扩增,只有嗜肺军团菌种DNA被扩增,而其他军团菌种和非军团菌属细菌没有被扩增。第1步和第2步PCR分别检测到最小量为10pg和10 fg的靶DNA。对不同量的嗜肺军团菌配制成的痰标本进行检测,能检测到0.1cfu/ml的嗜肺军团菌,只需12h。这些结果显示Nested PCR法检测嗜肺军团菌特异性强,敏感性高。此方法为从临床标本和环境材料中早期、快速检测到嗜肺军团菌提供了有效的工具。 相似文献