神经母细胞瘤组织及裸鼠荷瘤细胞RECK和MMP-14的表达及临床意义

目的检测RECK及膜型基质金属蛋白酶-14（MMP-14）在神经母细胞瘤患者蜡块标本中的表达,进一步检测将患者新鲜肿瘤标本原代培养建立的细胞系接种于裸鼠后自建的裸鼠原位荷瘤及转移瘤细胞系中二者的表达,比较裸鼠两种细胞中二者的表达差异及临床意义。方法首先采用PV-6000免疫组化方法检测临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例及节细胞神经瘤蜡块标本10例中RECK及MMP-14蛋向的表达。其次应用RT-PCR法检测自建裸鼠原位荷瘤及转移瘤细胞中RECK及MMP-14mRNA的表达。结果RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达（16．7％）,并随肿瘤浸润深度的加深及远处转移的发生而降低（P=0．015）。MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中高表达（58．3％）,并随肿瘤浸润深度的加深及远处转移的发生而增高（P=0．002）。裸鼠原位荷瘤细胞系中RECKmRNA的表达较裸鼠转移瘤细胞系中明碾增高（t=3．012,P〈0．05）,MMP-14mRNA表达则明显降低（t=2．802,P〈0．05）。结论本研究提示,RECK及MMP-14蛋白和基因可能与神经母细胞瘤的浸润、转移有关,RECK及MMP-14可能在小儿神经母细胞瘤的发生、发展中起重要作用。     

MMP-2、MMP-9及其抑制剂TIMP-2、TIMP-1与肾脏疾病

肾脏细胞外基质(ECM)合成与降解失衡及其组织重塑导致的ECM积聚,是各种肾脏疾病发展至肾间质纤维化与肾小球硬化乃至终末期肾衰的共同病理表现.基质金属蛋白酶(MMP)是肾脏ECM降解的关键酶,金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-2、-1分别为MMP-2、MMP-9内源性抑制剂.在不同类型的肾脏疾病或同一疾病的不同病理发...     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

神经母细胞瘤与肝母细胞瘤RECK及相关MMPs的表达及与肿瘤转移对比分析研究

目的 检测RECK及相关 MMPs在神经母细胞瘤及肝母细胞瘤细胞中的表达,探讨RECK及相关MMPs在两种肿瘤的转移特性中的不同意义.方法 收集1995年1月至2011年2月手术切除并经病理证实为神经母细胞瘤和肝母细胞瘤的蜡块标本73例,神经母细胞瘤36例,肝母细胞瘤37例.男43例,女30例,年龄6个月～8岁,平均为3.6岁.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法检测神经母细胞瘤和肝母细胞瘤组织中RECK及相关MMPs的表达情况.结果 RECK在肝母细胞瘤组织中的阳性率为43.2％ (16/37),高于神经母细胞瘤27.8％(10/36),MMPs在恶性肿瘤的转移特性巾有明显意义.神经母细胞瘤及肝母细胞瘤肿瘤组织中RECK和MMP-14、MT1 MMP的表达均呈负相关(P＜0.05,r=-0.418,P＜0.05,r=-0.583).结论 MMPs在神经母细胞瘤中的表达高于肝母细胞瘤;RECK和相关MMPs的表达随肿瘤的转移、浸润呈负相关.     

siRNA下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞MMP-9的表达及侵袭能力的影响

目的 观察下调Astrocyte elevated gene-1(AEG-1)基因对神经母细胞瘤细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达以及细胞侵袭能力的影响.方法 根据RNA干扰原理,设计合成AEG-1 siRNA.通过荧光定量RT-PCR和Western blotting观察神经母细胞瘤细胞中AEG-1基因mRNA和蛋白下调情况;采用Western blotting观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞中MMP-9蛋白表达的影响;通过侵袭实验(Transwell法)观察下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞侵袭能力的影响.结论 采用AEG-1 siRNA转染神经母细胞瘤细胞,下调细胞内AEG-1的mRNA和蛋白表达(P＜0.05)后MMP-9蛋白表达抑制率分别为63.1%和58.9%.此外下调AEG-1表达使细胞侵袭能力明显减弱(P＜0.05).结论 AEG-1基因下调使神经母细胞瘤细胞中MMP-9的蛋白表达明显减少、活性明显减弱,同时使细胞的侵袭能力降低.由此可见AEG-1在肿瘤细胞的侵袭转移中可能扮演重要角色,将会成为神经母细胞瘤基因治疗的新靶点.

Abstract：

Objective To investigate the effect of astrocyte elevated gene-1 (AEG-1)siRNA induced inhibition of invasion in neuroblastoma cells.Methods A small interference RNA(siRNA) targeting to AEG-1 mRNA(AEG-1 siRNA) was constructed and transfected into neuroblastoma cells with Lipofectamine 2000.A non-specific siRNA(control siRNA) and non-treatment were used as negative control group and blank group.The expression of AEG-1 mRNA was detected by RT-PCR.The proteins of AEG-1 and MMP-9 were detected by Western blotting.Cell invasion after AEG-1 knockdown was observed by Transwell assay.Results Compared with the control group,the expression of AEG-1 mRNA and protein were significantly decreased in the cells transfected with AEG-1 siRNAs(P＜0.05).AEG-1 knockdown by siRNA markedly decreased the expression of MMP-9 protein by 63.1% in neuroblastoma cells and the ability of cell invasion (P＜0.05).Conclusions The expression of AEG-1 mRNA is down-regulated by AEG-1 siRNA in neuroblastoma cells.Moreover,knockdown of AEG-1 expression in human neuroblastoma cells significantly inhibits the expression of MMP-9 protein and cell invasion.Therefore,AEG-1 may play a key role for MMP-9 activity and cell invasion,making it a potential target gene for gene-therapy in neuroblastoma.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

RECK及MMP-14蛋白在神经母细胞瘤组织中的表达及与肿瘤转移关系的研究

目的 检测RECK蛋白及膜型基质金属蛋白酶MMP-14在神经母细胞瘤中的表达,探讨其在神经母细胞瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料齐全的存档神经母细胞瘤蜡块标本36例,另取节细胞神经瘤蜡块标本10例作对照.采用第二代通用型二步法监测系统(PV-6000)免疫组织化学方法 检测RECK及MMP-14蛋白的表达.结果 RECK蛋白在神经母细胞瘤组织中低表达(16.7%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而降低(P=0.015<0.05).MMP-14在神经母细胞瘤组织中高表达(58.3%),并随肿瘤浸润深度的加深、远处转移的发生而增高(P=0.002<0.05).神经母细胞瘤组织中RECK与MMP-14蛋白的表达呈负相关(r=-0.418,P<0.05).结论 神经母细胞瘤组织中RECK低表达,而MMP-14高表达.RECK及MMP-14可能成为评估神经母细胞瘤发生浸润转移的重要指标.     

Fas、FasL在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

近年研究表明，肿瘤细胞的免疫逃避与肿瘤的发生、发展有密切关系。Fas／Fas L系统作为细胞凋亡的重要因素，参与肿瘤组织的免疫逃避。本研究采用免疫组织化学方法检测了Fas、FasL在神经母细胞瘤(neuroblastoma，NB)组织中的表达及其与NB预后的关系，现报告如下。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与神经母细胞瘤

早期转移是神经母细胞瘤最为显著的生物学特征之一。降解细胞外基质是肿瘤浸润和转移过程中最为重要的一步，而基质金属蛋白酶又是降解细胞外基质的最重要的酶类，组织金属蛋白酶抑制剂是其天然抑制剂。许多研究已证实基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达异常和比例失调与神经母细胞瘤的浸润和转移密切相关。抑制基质金属蛋白酶的活性成为抗神经母细胞瘤转移治疗的一个新靶点。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与神经母细胞瘤

早期转移是神经母细胞瘤最为显著的生物学特征之一。降解细胞外基质是肿瘤浸润和转移过程中最为重要的一步,而基质金属蛋白酶又是降解细胞外基质的最重要的酶类,组织金属蛋白酶抑制剂是其天然抑制剂。许多研究已证实基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达异常和比例失调与神经母细胞瘤的浸润和转移密切相关。抑制基质金属蛋白酶的活性成为抗神经母细胞瘤转移治疗的一个新靶点。     

川崎病患儿血清MMP-9与TIMP-1质量浓度变化及其临床意义

目的探讨川崎病(KD)患儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制剂1(TIMP-1)质量浓度的变化在预测发生冠状动脉病变(CAL)风险中的临床意义。方法观察组为2003~2004年在四川大学华西第二医院与四川省人民医院住院的KD患儿32例,静脉注射丙种球蛋白(IVIG)前后各抽取患儿外周静脉血1次,同时抽取20名正常体检儿童(正常对照组)外周静脉血。ELISA双抗体法测定血清MMP-9与TIMP-1质量浓度。用二维超声心动图观察心脏冠状动脉病变。结果观察组患儿急性期血清MMP-9、TIMP-1质量浓度及MMP-9/TIMP-1比值均较正常对照组儿童显著增高(P<0.01);IVIG干预前CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1显著地高于非CAL组患儿(P<0.01);IVIG干预后观察组患儿血清MMP-9质量浓度与MMP-9/TIMP-1显著降低(P<0.01);IVIG干预后CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1仍显著高于非CAL组患儿(P<0.05),而后者MMP-9/TIMP-1基本降至正常儿童水平;观察组患儿血清TIMP-1质量浓度在IVIG干预前后无显著变化。结论MMP-9与TIMP-1可作为KD合并CAL的一种关联因素,动态监测血清MMP-9质量浓度和(或)MMP-9/TIMP-1比值对预测KD并发CAL具有较重要临床意义。     

胆道闭锁肝组织MMP-1、MMP-2、TIMP-1的表达与预后研究

目的探讨胆道闭锁患儿肝组织中MMP-1、MMP-2、TIMP-1的表达及与胆道闭锁预后的关系：方法收集19例胆道闭锁患儿的临床资料和肝脏组织标本,依据Ohkuma’s分级标准将肝组织纤维化程度分为Ⅰ～Ⅳ级：采用免疫组化方法检测肝脏组织MMP-1、MMP-2、TIMP-1的表达,通过图像分析技术进行定量分析。结果根据临床疗效将患儿分为预后良好组（7例）和预后不良组（12例）：预后良好组与预后不良组接受手术时的平均日龄分别为58．57±9．32d、122．25±54．67d,两者比较,差异有显著统计学意义（P〈0．01）：预后良好组肝纤维化程度较预后不良组轻（P〈0．05）。预后不良组MMP-2、TIMP-1的表达明显高于预后良好组（P〈0．01）,而MMP-1在两组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）：结论胆道闭锁肝组织MMP-2、TIMP-1的表达与病人预后有关,其高表达预示患儿肝脏纤维化进展快,预后较差。