检测支原体污染的一种敏感的微量定量试验IL-2依赖性细胞系增殖的抑制试验

本文报告检测细胞培养中支原体的一种简易、快速及敏感的微量分析法。该法是基于污染细胞的培养上清液能抑制[~3H]胸腺嘧啶核苷结合一种白细胞介素—2(IL—2)依赖性小鼠细胞毒性T细胞系(CTLL)。     

一种高度敏感的检测细胞培养中污染支原体的方法

一种高度敏感的检测细胞培养中污染支原体的方法黄传书，金伯泉，汪美先，张建平，孙凯（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２）陈常庆，顾文琴，喻缨（中国科学院上海生物工程中心，上海２００２３３）支原体个体微小（φ０．３０～８／μｍ），能透过０．４５μ...     

抗原斑点试验:一种检测抗体的高度敏感试验

作者用重氮苯甲氧基甲基纸(diazob-enzyloxy methyl,DBM)和硝基纤维素纸吸附ng量的抗原,用来检查相应的抗体,其敏感性与RIA或ELISA接近。同一纸片上可吸附多种抗原用于检出不同抗体。作者试用了多种抗原,即卵清蛋白,伴清蛋白,牛血清白蛋白(BSA),鲸肌红蛋白,     

46株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测

４６株分泌单抗杂交瘤细胞株支原体污染的检测李秀华，郭玮，高光，范学祥，吕秀华，袁曾麟，尹红章，李德富（中国药品生物制品检定所，北京１０００５０）细胞培养物感染支原体是一个十分严重的问题，尤其是对有重要应用价值的杂交瘤细胞，往往造成细胞生长缓慢、胞浆颗...     

微球分析法:一种检测内皮细胞增殖与抑制的新方法

我们研制了一种能检测可溶性内皮细胞增殖与抑制因子的新方法。将含磁性的微球（直径为４·ＳＩＪｎ。）与血管内皮细胞共孵育时,微球被内皮细胞经吞噬作用而被内在化。微球一经细胞摄入,将停留于细胞内不被排出。带有一定数目微球的细胞（１０～朽个／细胞）对生长刺激信号仍有应答反应。在细胞增殖时,微球将被带人子代细胞。这样,通过对细胞做球平均数的计数就可判断内皮细胞的增殖或抑制状态。应用ｄｙｎａｌ微球的依据有：①微球的大小一致;②光镜下易检测;③微球不被细胞降解;④用磁体易分离带球细胞。分离、培养牛毛细胞血管内…     

一种敏感的检测人IL-8酶联免疫吸附试验(文摘)

IL-8是人T细胞、嗜碱性粒细胞及中性粒细胞的一种趋化因子,可使中性粒细胞释放出胞内酶并调节其粘附,也可使嗜碱性粒细胞释放组织胺。炎症局部产生的IL-8在炎症过程中起着重要作用,而且各种体液中IL-8的水平可因炎症的发展而变化。因此,检测体液中IL-8的水平有助于阐明伴有白细胞增多和/或白细胞浸润的炎症疾病     

MH60.CSF_2细胞株对IL-6依赖性变异的观察

<正> IL-6依赖性MH60.CSF_2细胞株用於测定淋巴细胞培养上清中IL-6生物活性具有灵敏度高、方便易行等优点,但该株细胞在传代培养中易逐渐丧失对IL-6的依赖性。我们将此株细胞亚克隆后,动态观察各代细胞对IL-6依赖性的变化,确定其用於IL-6测定的最好代数、细胞用量和培养时间。现报告如下。1 材料和方法 材料:MH60.CSF_2细胞株由山东省医科院肿瘤生物治疗研究中心田志刚教授惠赠。小鼠rIL-6标准品购自德国Bochringer公司。     

用敏感的ELISA法检测脑脊液IL-2

检测IL-2对中枢神经系统感染和炎症的研究有重要意义.但通常脑脊液(CSF)中的IL-2水平很低,不易测出,且测得的CSF IL-2水平可能代表了体循环经血一脑屏障来的渗出液.文章报道的ELISA法可检测脑膜自身合成的IL-2.用含单克隆抗人IL-2抗体的1%明胶PBS液包被聚氯乙烯微孔板,20u/100μl/孔,37℃1小后4℃过夜.以0.05%吐温-PBS洗板4次后,每孔加150μl 2%明胶PBS,室温1小时,洗板同前(可于孔内加     

一种人白血病T细胞株MOLT16产生IL-2的两种途径:IL-1途径和IL-1非依赖途径

MOLT16是一人T白血病细胞株,经PHA刺激24小时向培养上清分泌IL 2(6μ/ml)。MOLT16在IL-1(5 u/ml)存在下,或与分泌IL-1的细胞株(如HTLV 转化     

一种特异、敏感、快速的ELISA检测微量IgG水平

IgG是人血清中一种主要且含量最多的免疫球蛋白,占血清免疫球蛋白总量的75%。正常人血清中IgG的平均含量约为10mg/ml。因此,在测定方法上不需要非常敏感的方法,一般用环状免疫单扩散法即可测出。但在某些情况或某些分泌液中的IgG含量很少,例如脑脊液中的IgG仅为血清中的1/500,又如支气管灌洗液、眼泪等分泌液中,IgG的含量也很少。此外,在科研中有时也需要检测极微量的IgG水平。为此,本文介绍一种特异、敏感、快速、简便、价廉、安全的酶联免疫吸附试验     

类皮质醇与IL-2相互作用:抑制IL-2与IL-2受体的结合

类皮质醇的免疫抑制作用已有许多研究。本实验将PHA激活的人外周血单个核细胞在10~(-6)～10~(-9)M氢化考的松(HC)中与人IL-2共同孵育,结果表明HC有能力分别干扰IL-2与IL-2受体的结合、靶细胞对IL-2的反应性以及受刺激的T淋巴细胞或外周血单核细胞产生IL-2。激活的MNC与HC共同孵育7天后,几乎完全抑制细胞IL-2受体的表达,而已经表达的受体对IL-2的结合能力也受到HC的抑制,并且这种HC剂量依赖方式的对受体     

一个简单敏感的检测IL-2活性的生物学方法

本文介绍了一种简单一次定量的检测IL-2生物活性的方法。它以培养纯CD3~+T细胞为基础,CD3~+T 细胞是从血液的单个核细胞中,用微球(M450)结合CD3McAb 筛选的。培养时,经抗CD3活化的T 细胞将表达IL-2受体而不产生IL-2。加入IL-2后,可引起增殖反应,IL-2浓度在0.01～20U/ml时,可以得到一个线性剂量-反应曲线。细胞对IL-1、IL-4、TNF-α、IFN-α、INF-γ、PHA、ConA 不反应。IL-2的反应性可为TNF-α增强,被IFN-α抑制。试验用的促分裂素不影响增殖反应。抗IL-2和抗IL-2受体的抗体可以抑制IL-2反应,并有一定的剂量依赖关系。本法既简单又特异,不用长期培养实验用的细胞。     

IL-4抑制人T细胞的IL 2受体表达及IL-2依赖的增殖

IL-4曾被称为B细胞生长因子, 现认为是可作用于多种细胞系的多效淋巴因子。此外,它还可与其它淋巴因子相互调节。据报导,IL-2依赖的人LAK 细胞的产生和IL-2诱导的B 细胞或B 细胞系的增生分化均可被IL-4抑制。与此相反,IL-4可与IL-2协同促进丝裂原激活的人T 细胞的生长。本文旨在探查在人静息T 细胞对生理活性刺激物应答中IL-4     

IL-2的另一种副作用

<正> 美国国立癌症研究所的研究者报道,用白细胞介素-2(IL-2)治疗肿瘤病人,出现搔痒和灼热性皮疹等副作用。在任选的10例病人单独用IL-2或用‘IL-2加淋巴因子激活杀伤细胞治疗后2～3天均出现皮疹,首现于局部,逐渐扩散于全身,停药后5天消退。患者未因该反应而停止治疗。润滑剂和抗组胺可使部分病人减轻     

sIL-2R抑制IL-2依赖性细胞增生和细胞毒性:可以解释病人体内NK活性减低

近来注意到,皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)病人血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)-Tac蛋白水平升高,同时还伴有与病期相关的NK活性减低.由于IL-2是NK的刺激因子,而sIL-2R又能     

EGCG抑制肝癌细胞株HepG2增殖及HIF-1α/VEGF的表达

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抑制肝癌生长的分子机制。方法:采用MTT方法观察EGCG对HepG2细胞株增殖的影响;利用体外厌氧培养技术,通过不同剂量的EGCG进行干预,检测肝癌细胞HIF-1α/VEGF的基因转录和蛋白表达;将肝癌细胞种植于裸鼠体内,观察EGCG对肿瘤生长的抑制作用,并且测定HIF-1α/VEGF的表达。结果:体外试验显示EGCG对肝癌细胞株HepG2的增殖有明显抑制作用;明显下调HIF-1α/VEGF蛋白的表达,而对HIF-1α基因转录影响不大;裸鼠体内试验中观察到EGCG对肿瘤生长有明显抑制作用,抑制率达39.8%±5.1%。结论:EGCG可明显抑制肝癌细胞的增殖,干预HIF-1α/VEGF信号转导通路可能是其抑制肿瘤生长的主要机制之一。     

用于检测可溶性人IL-2R的一种竞争性的ELISA

一种用于可溶性人IL-2R的定量检测的固相竞争性ELISA已建立。从固相开始,试剂的连接顺序为(1)源于重组DNA的纯化IL-2R,(2)含有可溶性IL-2R的样品以及与异硫氰酸连接的抗IL-2R的抗体7G7/B6,(3)碱性磷酸酶连接的兔抗FIFC,(4)底物。将此法与检测可溶性IL-2R的夹心ELISA相比,竞争性ELISA没有夹心法     

用滚环扩增技术检测污染细胞的5种支原体

目的 建立滚环扩增技术检测5种常见的细胞污染支原体(猪鼻支原体、发酵支原体、口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体)的方法.方法 使用细胞污染支原体16S-23SrRNA间隔区公共引物(SPS1,SPA2)扩增间隔区靶基因.设计每一种支原体特异性锁式探针,锁式探针与扩增的靶基因杂交结合形成环化单链分子,加入特异性引物在Corbett RotorGeneTM 6000扩增仪滚动扩增环化单链分子,观察结果.结果 滚环扩增技术能敏感和特异的检测上述5种支原体标准株,并能敏感的检测10个拷贝的靶基因.在62个细胞培养物样本的检测中,37个样本检测出一种支原体,14个样本检测出两种支原体,11个样本为支原体阴性.滚环扩增方法检测结果与支原体种特异性PCR检测结果一致.结论 滚环扩增作为一种新的扩增技术能敏感和特异的检测细胞污染支原体.