黏蛋白5B在鉴别真菌性鼻窦炎组织中曲霉菌和毛霉菌的意义

目的 探讨黏蛋白抗体在真菌性鼻窦炎活检组织中的曲霉菌和毛霉菌鉴别中的意义.方法 选取北京同仁医院病理科2001-2006年间66例真菌性鼻窦炎活检标本存档蜡块,其中真菌球29例,变应性真菌性鼻窦炎12例,慢性侵袭性真菌性鼻窦炎24例,急性侵袭性真菌性鼻窦炎1例;确认曲霉菌属44例(烟曲霉菌31例,黄曲霉菌7例,土曲霉菌6例),毛霉科真菌22例(毛霉菌14例,根霉菌8例).用黏蛋白(MUC)2、MUC5AC和MUC5B抗体以免疫组织化学方法标记真菌,并与过碘酸-雪夫(PAS)和Grocott环六亚甲基四胺银(GMS)特殊染色结果进行对比.结果 MUC5B免疫组织化学结果显示烟曲霉菌、黄曲霉菌和土曲霉菌总阳性率为90.9%,毛霉菌和根霉菌总阳性率为4.5%,二者差异有统计学意义(P＜0.001);MUC2和MUC5AC均为阴性;PAS和GMS染色上述真菌均为阳性.结论 MUC5B抗体可作为检测组织内真菌的有效指标,应用MUC5B抗体可以对真菌性鼻窦炎中曲霉菌属和毛霉科真菌进行鉴别.     

三种改良的阮森吡啶-硝酸银法显示大鼠脊髓组织的比较

目的 对3种改良的阮森吡啶-硝酸银法(Ranson)在显示大鼠脊髓组织中的应用进行比较. 方法 对照组采用传统的阮森吡啶-硝酸银法,即取大鼠的新鲜脊髓组织,在酒精中加纯氨水固定,经纯吡啶、硝酸银、还原液染色,常规石蜡切片并观察.实验组采用改良的阮森吡啶-硝酸银法,即分别采用NaOH溶液、Na2CO3溶液和95%酒精替换在对照组中使用的纯氨水,其他染色步骤同对照组. 结果 实验组的脊髓组织切片分别经3种改良的阮森吡啶-硝酸银法染色,神经元的胞体和突起均呈黄棕色,神经纤维呈棕褐色,切片染色结果与对照组比较无明显差异,尤以酒精替换组的染色效果为最佳. 结论 以改良的阮森吡啶-硝酸银法显示大鼠脊髓组织中神经元及神经纤维染色效果良好,方法更加简便易行,且避免了氨水的刺激气味,有利于改善教学和科研的局部工作环境.     

神经纤维快速染色改良法

神经纤维的染色方法很多 ,技术操作也比较复杂 ,特别是镀银法 ,若操作不当 ,不易成功。本染色法是在镀银法原理的基础上 ,加以改进而建立的神经纤维快速染色法。此方法快捷简便易行可靠 ,光镜下的神经纤维分布和形态改变清晰可见。本染色法目前尚无文献报导。1 .材料和方法　 1 .1　材料 :大白鼠周围神经、腓神经。主要试剂 :硝酸银。由北京化工厂提供。1 .2　方法 :1 )所需试剂 1 0 .5 %酸性高锰酸钾水溶液 5 0 ml,0 .5 %硫酸水溶液5 0 ml,临用前等量混合。 2 2 .5 %铁明矾水溶液 :硫酸铁胺 2 .5 g,蒸馏水 1 0 0 ml。 3胺银溶液 :以四张组…     

介绍一种真菌的染色方法

真菌中含有醛基 ,能将银分子还原为黑色的金属银而显色。日常所用的Ｇｒｏｔｔ Ｇｏｍｏｒｉ六胺银染色法就是利用这一原理进行染色的。但是Ｇｒｏｔｔ Ｇｏｍｏｒｉ六胺银染色法步骤多、要求高、耗时长、银液的浪费也较大。笔者在日常染色中 ,用Ｇｏｍｏｒｉ氨银液代替六胺银液配合微波进行染色 ,两者染色效果差异不大 ,但Ｇｏｍｏｒｉ氨银 微波法省时、省料 ,也较易着色 ,取得了满意的工作效果。一、材料与方法1.试剂及其配制 :(1)Ｇｏｍｏｒｉ氨银液 :用小量杯取 3ｍｌ10 %硝酸银水溶液 ,逐滴加入 10 %ＫＯＨ水溶液 1ｍｌ,产生棕黑色沉…     

全自动特殊染色机在常规病理技术中的应用

正目前大多数科室常规开展的特殊染色项目有PAS染色、抗酸染色、黏液卡红染色、六次甲基四胺银等染色,其易受人为及环境因素影响,质量不易控制。我科室自2016年引进全自动特殊染色机并将其应用于病原微生物特殊染色,取得良好效果,现介绍如下。1材料与方法     

卡氏肺囊虫滋养体和包囊形组合染色

自从作者于1983年发现用Lendrum氏荧光桃红/肼黄法(1947)能很好显示卡氏肺囊虫滋养体以来,经过一段时期摸索。与Gomori—Grocott氏PASM法(经过Mowry,1959年改良)进行组合染色。获得形态图象清晰、色彩对比突出的卡氏肺囊包囊和滋养体。材料和方法卡氏肺囊虫肺炎尸解病例,10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片不厚于5μm。染色程序1、石蜡切片脱蜡入水如常。如组织成分中存在福尔马林色素,必须在染色前用苦味酸无水酒精饱和液除去。2、0.5%高碘酸液氧化10分钟,流水洗2分钟。     

Ziehl-Neelsen改良染色法在痰涂片中的应用

针对结核杆菌菌体含有蜡质的特点和传统Ziehl Neelsen抗酸染色法存在的不足 ,笔者在以前工作的基础上对染色液的配方进行改良〔1,2〕,并结合微波辐射技术建立了一种快速、敏感、简便的痰涂片抗酸染色法。1　材料与方法1.1　材料　 5 3例结核杆菌痰培养阳性的痰液 ,每例涂片 2张 ,95 %乙醇固定 15～ 30min ,分别用Ziehl Neelsen改良染色法和传统的抗酸染色法染色 ,同时设阳性对照、阴性对照。1.2　染液配制　 (1)改良的Ziehl Neelsen染色液 :碱性复红无水乙醇饱和液 (相当 6 %浓度 ) 10ml,活性剂 5ml,蒸馏水85ml,先将碱性复红溶于无水乙醇…     

变应性真菌性鼻窦炎临床病理分析

目的 探讨变应性真菌性鼻窦炎(AFS)的临床病理特征,提高对AFS的认识和病理诊断水平.方法 回顾并分析首都医科大学附属北京同仁医院2002-2006年36例AFS的临床病理和影像学资料,应用阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)、环六亚甲基四胺银(GMS)特殊染色及黏蛋白5B(MUC5B)免疫组织化学(SP法)染色标记真菌,同时选取AFS新鲜活检组织lO例进行透射电镜观察.结果 36例AFS中,男21例,女15例,发病年龄11～53岁.多具有变应性疾病病史.CT平扫示受累的鼻窦充满软组织影,伴斑片状高密度影,窦壁骨质可出现压力性骨破坏.实验室检查:一种或多种真菌抗原皮试阳性(31/36);血清学检查总IgE和(或)真菌特异性lgE增高(20/36);外周血嗜酸性粒细胞数增多(23/36).真菌培养10例阳性.组织病理学:大体典型病变为黏稠的"油灰样"分泌物,镜下为特征性的"嗜酸性黏蛋白",AB-PAS及GMS染色、MUC5B免疫组织化学染色真菌均着色.透射电镜可见嗜酸性粒细胞脱颗粒现象.结论 "嗜酸性黏蛋白"是AFS最具特征性的病理学表现,建议采用AB-PAS、GMS特殊染色及MUCSB免疫组织化学染色等多种方法 联合标记真菌;需对临床症状、影像学特点、实验室检查及病理学表现等多个方面进行综合判断以得出正确诊断.     

一种显示网状纤维的方法

网状纤维是一种嗜银纤维 ,如用一般的银浸染 ,纤维难于分辨 ,而采用碳酸铵银法染色网状纤维的结构则显示得异常清晰。因而 ,碳酸铵银法是一种较理想的显示网状纤维的方法 ,现将该方法介绍如下 :1 .用岑克液或 1 0 %福尔马林固定脾、肝标本。 2 .切片脱蜡后蒸馏水洗数次。 3.将切片放入 0 .3%高锰酸钾内 5 min。 4.切片经水洗后入 5 %草酸漂白 ,至切片上的组织呈现为白色为止。 5 .蒸馏水洗数次后 ,置切片于碳酸铵银内 ( 5 0℃ ) 30 min。铵银液配方 :1 0 %硝酸银 1 0 ml,磷酸钾饱和液 1 0 ml,上述二液混合后产生沉淀 ,倾去上层液体 ,将沉淀…     

一种霉菌染色的新方法

一种霉菌染色的新方法张海，张谷一、材料与方法１．试剂配制（１）５０％硝酸银溶液：取４ｇ硝酸银溶解于８ｍｌ的蒸馏水。（２）０．５％甲酸—明胶溶液：取２ｇ明胶溶解于１００ｍｌ的蒸馏水，加０．５ｍｌ甲酸。（３）改良银染工作液：（１）和（２）以体积２：１均匀...     

一种显示肥大细胞的好方法——六胺银法

在PASM染色的睾丸组织切片中,我们发现睾丸间质内一些细胞的颗粒能被六胺银很好的显示,并且特异性很好,只显示该种细胞的颗粒,而间质内的其它细胞均不着色。从组织学推测,睾丸间质内有颗粒的细胞只有肥大细胞,其它细胞内均无颗粒。为了证实这一推测,对大鼠的肠系膜铺片进行肥大细胞染色,分别采用六胺银法,六胺银和甲苯胺兰双重染色。结果六胺银显示的正是甲苯胺兰显示的那些颗粒,表明六胺银染的正是肥大细胞的颗粒。现将方法介绍如下:方法一:按六胺银染色的经典方法操作。1冰冻切片经10%甲醛固定10min,然后入水;或石蜡切片常规脱蜡至水。2…     

介绍一种抗酸染色法

抗酸染色法有多种 ,根据本科近 10年来应用不同抗酸染色法的经验 ,对 8例已确诊为结核病的病理切片及细胞学涂片 ,从染色效果、操作难易程度及染色时间方面 ,用 6种不同抗酸染色法〔1～ 4〕反复染色对比实验结果 ,推荐一种经典的、简易的、快速实用性强的抗酸染色法———萋纳石炭酸染色法。1　材料与方法1.1　溶液配制　 (1)萋纳石炭酸复红溶液 :碱性复红乙醇饱和溶液 10ｍｌ,5 %石炭酸溶液 90ｍｌ。 (2 )脱色剂 :浓盐酸 3ｍｌ,95 %乙醇 97ｍｌ。 (3)复染液 (吕弗勒美蓝液 ) :美蓝乙醇饱和溶液 30ｍｌ,10 %氢氧化钾 0 1ｍｌ,蒸馏水 10 0ｍ…     

改良的Cajal—Faworsky组织块神经浸染法在神经病理切片染色中的应用

改良的Cajal-Fanwersky组织块浸染法(简称C-F法),系作者在神经病理科研过程中,经过多种方法的对比,并进行适当改进而成。此法染色性能稳定,效果较好,尤其在观察连续切片时更为适用。一、材料与方法: (一)试剂配制: 1.冰醋酸酒精固定液: 80%乙醇98ml 冰醋酸2ml 2.氨酒精溶液: 95%乙醇100ml 1～2滴浓氨水3.还原液: 焦性没食子酸2g 中性Formalin 10ml 蒸馏水90ml     

恶性肿瘤合并头颈部真菌感染的临床与病理学观察

目的 探讨恶性肿瘤合并头颈部真菌感染的临床与病理特点.方法回顾分析21例恶性肿瘤合并头颈部真菌感染患者的临床和病理资料;用HE染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色和环六亚甲基四胺银(GMS)染色显示组织病变特点及真菌的形态特征,用黏蛋白5B(MUC5B)抗体免疫组织化学EnVision法染色标记真菌;13例组织标本进行了真菌培养.结果患者发病年龄12～72岁(中位年龄48岁),男性17例,女性4例.病理学检查证实合并侵袭性真菌性鼻窦炎(IFS)有8例(38.1%),其中波及眶内者6例(28.6%),侵入颅内1例;原发疾病为白血病(7例)及鼻咽癌(1例);病原真菌为接合菌(5例)和曲霉菌(3例),均有化疗或放疗及使用抗生素的病史.其余13例真菌感染发生于鼻腔鼻窦、咽喉及腭部原发肿瘤的坏死组织内,病原真菌主要为曲霉菌(6例)和念珠菌(4例),7例有放疗等治疗史.真菌培养结果9例阳性(9/13).随访病例14例,死亡6例.结论 恶性肿瘤可合并头颈部真菌感染,以IFS最为多见,好发于白血病化疗后,易累及眼眶,预后较差;病原真菌的类别在IFS以接合菌和曲霉菌多见;病理学检查仍然是尽快确定诊断及初步鉴别常见接合菌和曲霉菌类别的一个重要手段.     

细菌鞭毛镀银染色法的创新

目的 发明一种新的细菌鞭毛镀银染色方法。方法 染色媒染剂由A、B2种溶液组成，A液是酸化的FeCl3溶液，B液是含有甲醛的丹宁酸溶液，A、B液混合后，微加热，染涂片50s，洗净涂片后镀银染色。共有19属34种228株细菌，每株菌都进行固体培养和液体培养进行鞭毛染色，并采用West氏评分法对鞭毛染色质量进行评价。结果 鞭毛形态及其在菌体的位置极易观察。228株细菌获得良好的鞭毛染色质量，血琼脂平板培养平均每株菌获得4．7分，肉汤培养获得4．6分。与一些肠杆菌株不同，100株非发酵菌血琼脂平板培养鞭毛染色均获得5分，而99株肠杆菌肉汤培养鞭毛染色获得4分以上。一些弧菌科细菌鞭毛位置分布因这2种培养方法的不同而有差异。并发现1株非O1群霍乱弧菌有单侧毛和亚极端毛。结论 这种鞭毛染色方法操作简单、快速，试剂稳定，重复性好。由于可靠性好，可以作为常规方法。非发酵菌适合于固体培养进行鞭毛染色获得最佳效果，液体培养对于一些肠杆菌鞭毛染色更为适合。     

PAS染色技术的改进

糖类的组织化学长期以来主要靠PAS技术且沿用至今。临床上常用于诊断细胞中糖元的丢失,黏液变性,霉菌,肿瘤等多种疾病。作为PAS染色的主要染液Schiff氏液的配制是该染色成功的关键。传统的Schiff氏液的配制,使用异性重亚硫酸钠等。通常一次性大量配制备用,时间存放稍久,效果便不甚满意。笔者在多年工作中,摸索了一种配制Schiff氏液的方法,配制只需2h,放置于4℃冰箱中3～5年可反复使用,染色效果优良,现将该法介绍如下。     

介绍一种腹腔注射肠系膜浸银法

肠系膜浸银显示间皮是教学中常用的试验。我们采用腹腔注射肠系膜浸银法显示间皮取得了较为满意的效果,现介绍如下:1.取小白鼠毁脊髓致死。2.将37—38℃的0.1—0.5%硝酸银液20ml注入小白鼠腹腔內(拨针后钳夹针孔),浸染肠系膜30—40分钟。3.打开小白鼠腹腔,用丝线结扎并剪断胃、十二指肠交界,并用同法剪断直肠。在腹后壁处剪断系膜根部,取出肠管与系膜。4.用蒸馏水洗肠管与系膜。用小剪刀在蒸馏水中将肠管从系膜缘处小心剪下弃去。5.在     

高尔基复合体镀银染色法探讨

光镜下高尔基复合体是位于细胞核附近的一些网状结构，有嗜银性和嗜锇性，用浸银法易于显示。我们在Golgi氏镀银法基础上对一些固定液和染色液浓度、时间、温度等作了部分改进，高尔基复合体显示良好，方法简单，重复性好。     

在普查β-地中海贫血性状中一种有效的渗透脆性管测法

本文评价在希腊、南斯拉夫、泰国等国人群中,用三种缓冲液(0.32%缓冲盐液、0.36%缓冲盐液和台罗德氏溶液“Tyrodesolution”)的渗透脆性管测法作为普查β-地中海贫血性状试验的有效性。作者的方法为:取三个试管分别加入5毫升的0.32%缓冲盐液、0.36%缓冲盐液和台罗德氏溶液,每一试管内加入0.02毫升全     

弹力纤维染色与免疫组织化学双重染色技术

我们采用Gomori醛品红弹力纤维染色法和免疫组织化学SP法结合的双重染色方法 ,可同时显示血管壁上的弹力纤维和某些抗原成分 ,效果满意 ,介绍如下。一、材料与方法1.材料 :大鼠髂动脉粥样硬化标本 35份 (例 ) ,经 4 %甲醛固定 ,常规脱水、石蜡包埋 ,切片厚 5 μm。2 .试剂 :(1)醛品红染液 :碱性品红 0 .5g ,70 %乙醇10 0ml,浓盐酸 1ml,三聚乙醛 1ml,将碱性品红溶于 70 %乙醇 ,然后加入浓盐酸混合均匀后 ,加入三聚乙醛 ,轻轻摇动使混合均匀 ,于室温下静置 2d ,成熟时呈深紫色。过滤于小口砂塞瓶 ,置冰箱备用。 (2 ) 70 %乙醇。 (3)免疫组织…