三七总皂苷对Aβ25-35诱导的NG108-15细胞损伤的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对由Aβ25-35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型保护作用的影响.方法:利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变.结果:PNS能增加Aβ25-35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率、细胞突起率和细胞突起平均长度.结论:PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用,表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用.     

补肾益智方对AD细胞模型影响的研究

目的 :观察补肾益智方对由Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞老年性痴呆 (AD)模型的影响。方法 :利用细胞计数、MTT及流式细胞仪测定等方法观察补肾益智方含药血清处理由Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞存活率、形态学及细胞周期的改变。结果 :补肾益智方含药血清能增加Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞存活率和细胞突起 ;细胞增殖周期分析显示 ,含药血清能增加S期细胞数。结论 :补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应 ,表明该方通过拮抗AD的病理发展而发挥对AD的治疗作用     

补肾益智方含药血清对AD细胞模型保护作用的实验研究

目的:通过利用血清药理学方法观察补肾益智方对由Aβ片段毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响,并评价其在研究中药药效学中的作用价值。方法:利用细胞计数、MTT方法确立Aβ25-35片段在建立细胞模型时的浓度及筛选含药血清作用的最佳浓度,分别观察5％、10％、20％正常大鼠(Rat)血清和补肾益智方含药血清培养液及不同浓度(0umol/L、5umol/L、10umol/L)Aβ25～35片段处理老年性痴呆细胞模型后的细胞存活率。结果:以上两种血清5％浓度组的细胞存活率均明显高于10％及20％浓度组(P<0.001.P<0.0001),10％与20％浓度组之间则差异无显著性意义;在5％血清浓度条件下,无Aβ及5μMAβ25-35浓度 组,含药Rat血清组细胞存活率均高于正常Rat血清组,差异有显著性意义(P<0.05)。在10μMAβ25-35浓度时两组组间差异无显著性意义。结论:选用5umol/L Aβ5-35及5％血清浓度条件时,建立NG108-15细胞老年性痴呆模型较为合适;补肾益智方含药血清能使该细胞模型细胞死亡率降低,表明该方能有效地保护Aβ片段对细胞的神经毒性作用。     

补肾益智方对由A_β片段神经毒性诱导NG108-15细胞老年性痴呆模型神经递质释放影响的研究

目的：观察补肾益智方对由Aβ片段神经毒性诱导的NG108－15细胞老年性痴呆（AD）模型神经递质释放的影响。方法：利用免疫印迹检查、免疫放射活性测定及电生理学测定方法，观察补肾益智方含药血清处理Aβ片段神经毒性诱导的NG108－15细胞后的胆碱乙酰基转移酶（ChAT)活性、突触素蛋白（synapsin)水平及功能性突触形成率。结果：补肾益智方含药血清组ChAT活性和突触素蛋白水平高于正常对照血清组；含药血清能调节递质释放能力和提高功能性突触形成。结论：补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应，表明该方能拮抗AD的病理发展，并通过提高神经递质释放能力发挥对AD的治疗作用。     

补肾益智方对由A_β片段神经毒性诱导NG108-15细胞老年性痴呆模型神经递质释放影响的研究

目的:观察补肾益智方对由Aβ片段神经毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆(AD)模型神经递质释放的影响.方法:利用免疫印迹检查、免疫放射活性测定及电生理学测定方法,观察补肾益智方含药血清处理Aβ片段神经毒性诱导的NG108-15细胞后的胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性、突触素蛋白(synapsin)水平及功能性突触形成率.结果:补肾益智方含药血清组ChAT活性和突触素蛋白水平高于正常对照血清组;含药血清能调节递质释放能力和提高功能性突触形成.结论:补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应,表明该方能拮抗AD的病理发展,并通过提高神经递质释放能力发挥对AD的治疗作用.     

补肾益智方拆方含药血清保护Aβ25-35损伤NG108-15细胞的研究

目的；研究中药补肾益智方拆方亚组的含药血清对AD细胞模型生长、分化等方面的影响。探讨该方药物的配伍规律。方法：将补肾益智方拆分为补肾组、益气养血组和去冰片组（即补肾组＋益气养血组）等3个亚组，连同原方组共4组对大鼠灌胃给药分离药物血清，在含各组血清的培养液中，加入Aβ25－35，观察NG108－15细胞的生长状态、细胞增殖数、存活率，突起率及突起平均长度。结果：与AD细胞模型组相比，补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制Aβ25－35对细胞的损伤作用，但各组情况有所不同。各组含药血清对细胞的保护作用由强至弱依次是去冰片组＞补肾益智方组＞补肾组＞益气养血组。结论：补肾药酸伍益气养血药可增强对Aβ25－35损伤NG108－15细胞的保护作用，其中以补肾药的作用为主，方中冰片的功效有待进一步研究。     

柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导内质网应激神经元轴突生长的影响

目的:探讨柴胡疏肝散含药血清对衣霉素(TM)诱导的NG108-15细胞轴突生长的影响。方法:实验采用衣霉素对NG108-15神经细胞进行孵育,诱导其形成内质网应激(ERS)细胞模型,分别用正常兔血清、安理申含药兔血清、高、中、低剂量柴胡疏肝散含药血清进行干预,观察各组细胞轴突生长情况。结果:加入柴胡疏肝散含药血清高、中、低剂量孵育干预后,细胞的突起阳性率和平均突起长度明显优于模型组(P0.01);高剂量组柴胡疏肝散含药血清与低剂量组相比较(P0.05),与西药安理申组含药血清两者之间无明显差异(P0.05)。结论:柴胡疏肝散含药血清可促进衣霉素诱导NG108-15细胞内质网应激模型神经元突起的生长。     

补肾益智方对AD细胞模型钙离子内流、细胞骨架、细胞凋亡的影响

目的：观察补肾益智方含药血清对AD（Alzheimer's Disease)细胞模型钙离子内流、细胞骨架、细胞凋亡的影响。方法：在神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交的NG108－15细胞培养液中加入预先老化4d的Aβ25－35片段共同孵育,建立AD细胞模型。分别加入正常老年大鼠血清、补肾益智方高剂量含药血清和补肾益智方低剂量含药血清培养48h后;应用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度（Ca^2 )的变化情况;荧光显微镜观察细胞骨架的重组情况,流式细胞仪检测细胞的凋亡细胞。结果：与正常大鼠血清加Aβ25－35组比较,高剂量补肾方含药血清组、低剂量补肾方含药血清细胞内Ca^2 浓度的相对荧光值明显降低（P＜0．01）,而他们间两两比较则差异显著（P＞0．05）。正常大鼠血清加Aβ25－35的NG108－15细胞组可以看到,细胞骨架严重解聚并向边缘扩散,细胞形态变性,还有细胞死亡现象;而高、低剂量补肾方含药血清组细胞骨架呈现微弱解聚现象,细胞形态正常,无变性和死亡现象。与正常大鼠血清加Aβ25－35组比较,高、低剂量补肾方含药血清组NG108－15细胞凋亡率明显减少（P＜0．01）。结论：补肾益智方含药血清可以抑制细胞Ca^2 内流,平衡控制细胞内Ca^2 浓度;对Aβ引起NG108－15细胞骨架解聚、细胞变性等有保护作用,能部分保护Aβ25－35诱导的细胞凋亡。     

人参皂苷Rgl对Atβ25-35诱导的BT325细胞株脑啡肽酶表达的影响

目的：本研究拟探讨人参皂苷Rgl对Atβ25-35诱导的BT325细胞株脑啡肽酶表达的影响。方法：应用MTT比色法检测一定剂量Atβ25-35(25μmol／L)和不同浓度人参皂苷Rgl(5、10、20μmol／L)对BT325细胞存活率的影响，应用RT-PCR观察细胞中NEP基因表达的变化。结果：25μmol／L的Atβ25-35作用于BT325细胞株，BT325细胞存活率下降，细胞内NEP的表达降低。人参皂苷Rgl能提高Atβ25-35处理的BT325细胞存活率，使细胞内NEP表达增高。结论：一定剂量的Atβ25-35能造成细胞损伤和细胞内NEP表达降低的模型，人参皂苷Rgl对Atβ25-35造成的细胞毒性具有拮抗作用，增高细胞内NEP的表达。     

补肾益智方拆方含药血清保护Aβ25-35损伤NG108-15细胞的研究

目的 :研究中药补肾益智方拆方亚组的含药血清对AD细胞模型生长、分化等方面的影响 ,探讨该方药物的配伍规律。方法 :将补肾益智方拆分为补肾组、益气养血组和去冰片组 (即补肾组 益气养血组 )等 3个亚组 ,连同原方组共 4组对大鼠灌胃给药分离药物血清。在含各组血清的培养液中 ,加入Aβ2 5 35 ,观察NG10 8 15细胞的生长状态、细胞增殖数、存活率 ,突起率及突起平均长度。结果 :与AD细胞模型组相比 ,补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制Aβ2 5 35对细胞的损伤作用 ,但各组情况有所不同。各组含药血清对细胞的保护作用由强至弱依次是去冰片组 >补肾益智方组 >补肾组 >益气养血组。结论 :补肾药配伍益气养血药可增强对Aβ2 5 35损伤NG10 8 15细胞的保护作用 ,其中以补肾药的作用为主 ,方中冰片的功效有待进一步研究。     

柴胡疏肝散对衣霉素诱导内质网应激模型细胞活性的影响

目的:探讨柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导的内质网应激(ERS)细胞模型NG108-15细胞活性的影响。方法:采用衣霉素(TM)孵育NG108-15细胞,诱导ERS细胞模型,并将诱导后的细胞分成五组,模型组、安理申西药组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组,分别采用正常空白血清、安理申含药血清、高、中、低剂量柴胡疏肝散含药血清进行干预,同时设置正常空白血清孵育的未经TM诱导的正常组。观察各组细胞的活性。结果:柴胡疏肝散高、中、低剂量组,细胞的活性明显高于模型组细胞的活性(P0.05);西药安理申组和柴胡疏肝散高剂量组细胞的活性均明显高于其他各组(P0.05),且两者之间无明显差异(P0.05)。结论:柴胡疏肝散含药血清对正常NG108-15神经细胞没有明显毒副作用,但其可明显提高衣霉素诱导的内质网应激NG108-15细胞的生存率,其机制可能与柴胡疏肝散缓解衣霉素诱导的细胞内质网应激有关。     

补肾益智方含药血清保护Aβ25—35—3损伤PCI2细胞的实验研究

目的：探讨补肾益智方含药血清对由Aβ25-35-3诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤（PCI2）老年性痴呆（AD）细胞模型的保护作用。方法：建立PCI2细胞培养方法,用倒置显微镜进行形态学观察,利用WST-8法检测细胞活力以及荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位等方法,观察补肾益智方含药血清对AD细胞模型的影响。结果：补肾益智方5％含药血清对AD细胞模型的保护作用优于5％正常血清,差异均有显著性意义（P〈0．05）。结论：补肾益智方含药血清能在一定程度上减少Aβ25-35-3对PCI2细胞的神经毒性作用。     

补肾益智方含药血清保护Aβ_(25-35)-3损伤PC12细胞的实验研究

目的:探讨补肾益智方含药血清对由Aβ25-35-3诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)老年性痴呆(AD)细胞模型的保护作用。方法:建立PC12细胞培养方法,用倒置显微镜进行形态学观察,利用WST-8法检测细胞活力以及荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位等方法,观察补肾益智方含药血清对AD细胞模型的影响。结果:补肾益智方5%含药血清对AD细胞模型的保护作用优于5%正常血清,差异均有显著性意义(P0.05)。结论:补肾益智方含药血清能在一定程度上减少Aβ25-35-3对PC12细胞的神经毒性作用。     

加味温胆汤含药脑脊液抗Aβ细胞毒性作用及其机制的实验研究

目的：采用脑脊液药理学的方法探讨加味温胆汤治疗AD的作用机制。方法：运用体外细胞培养的方法,观察加味温胆汤含药脑脊液对Aβ25~35诱导的NG108-15细胞损伤的影响。结果：模型组p-JNK和p53的表达均增高,经治疗后均显著降低（P〈0.01）,细胞被阻滞在S期。结论：加味温胆汤含药脑脊液神经保护作用与下调p-JNK和p53的水平有关。     

温胆汤改良方对Alzheimer病细胞模型JNK、c-jun磷酸化水平的影响

目的:探讨温胆汤改良方含药血清对AD细胞模型JNK、c-jun磷酸化水平的影响。方法:经老化处理的Aβ25-35(终浓度为5μmol/L)与NG108-15细胞共同孵育24h建立AD细胞模型,运用中药血清药理学方法,以温胆汤改良方含药血清作用于AD细胞模型,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,SABC免疫组化法检测p-JNK、p-c-jun蛋白的表达。结果:温胆汤改良方能显著性降低NG108-15细胞JNK、c-jun的表达,降低细胞凋亡率。与模型组比较,抑制剂组和含药血清组JNK、c-jun的表达降低有显著性意义(P<0.05)。结论:温胆汤改良方保护由Aβ25-35引起的NG108-15细胞损伤作用,可能与其作用于JNK信号转导通路有着密切的关系。     

Aβ25-35刺激对海马神经细胞株NG108-15 Toll样受体3、4表达的影响

目的: 研究Aβ刺激对小鼠神经细胞株NG108-15 Toll样受体(TLR)3、TLR4 mRNA表达的影响。 方法: Aβ刺激NG108-15细胞,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α、IFN-β含量,荧光定量PCR法测定TLR3、TLR4 mRNA表达量的变化。 结果: Aβ诱导NG108-15细胞分泌TNF-α、IFN-β的量较正常对照组明显增多(均P<0.01);Aβ可诱导NG108-15细胞TLR3、TLR4 mRNA表达增强,与空白对照组相比,均P<0.01。 结论: Aβ刺激可体外诱导NG108-15细胞TNF-α、IFN-β分泌增多,诱导TLR3、TLR4 mRNA表达增强,提示Aβ致阿尔茨海默病(AD)作用可能与免疫性炎症及TLRs信号转导通路有关。     

人参皂苷Rg1对Aβ25-35诱导的BT325细胞株脑啡肽酶表达的影响

目的 :本研究拟探讨人参皂苷Rg1对Aβ2 5 - 35诱导的BT32 5细胞株脑啡肽酶表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量Aβ2 5 - 35 (2 5 μmol/L)和不同浓度人参皂苷Rg1(5、 10、 2 0 μmol/L)对BT32 5细胞存活率的影响 ,应用RT -PCR观察细胞中NEP基因表达的变化。结果 :2 5 μmol/L的Aβ2 5 - 35作用于BT32 5细胞株 ,BT32 5细胞存活率下降 ,细胞内NEP的表达降低。人参皂苷Rg1能提高Aβ2 5 - 35处理的BT32 5细胞存活率 ,使细胞内NEP表达增高。结论 :一定剂量的Aβ2 5 - 35能造成细胞损伤和细胞内NEP表达降低的模型 ,人参皂苷Rg1对Aβ2 5 - 35造成的细胞毒性具有拮抗作用 ,增高细胞内NEP的表达。     

复方益智颗粒治疗老年性痴呆有效成分的文献研究

文章主要通过文献研究的方法,对复方益智颗粒治疗老年性痴呆的有效成分进行了归纳和分析。结果表明,人参皂苷Rb_1、Rd、Re、Rg_1、Rg_2、Rg_3,能通过不同的分子机制对Aβ引起的神经细胞毒性起到抑制作用;三七皂苷R_1、R_2、R_4、R_6、Fa,也具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用,对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用;绞股蓝皂苷III、IV、Ⅻ、X、Ⅰ、A-AH,可以明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善海马胆碱能系统功能,对诱导Aβ的AD细胞模型具有保护作用;淫羊藿苷对Aβ_(25-35)所致神经细胞损伤具有保护作用,有利于老年性痴呆的治疗;原儿茶酸具有良好的神经保护作用;桑椹花色苷和氧化白藜芦醇都对神经系统有良好的保护作用。研究结果提示,皂苷类和黄酮类成分有可能是复方益智颗粒治疗老年性痴呆的物质基础,可为后续该制剂治疗老年性痴呆物质基础的研究奠定基础。     

芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:研究芍药苷对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:用Aβ25-35造成PC12细胞损伤模型,采用MTT比色法检测细胞存活率,Annexin-V/PI双染流式细胞计量法检测细胞凋亡,JC-1和Fluo-3荧光探针法分别观察线粒体膜电位和细胞内钙离子变化,Western印迹法检测Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,观察芍药苷对PC12细胞损伤的保护作用。结果:芍药苷可抑制Aβ25-35所诱导的PC12细胞毒性和凋亡,并呈剂量相关性,其保护作用可能是通过提高线粒体膜电位、降低Ca2+浓度;增加Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达、抑制凋亡相关蛋白Caspase-3的激活而实现的。结论:芍药苷对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤具有保护作用。     

当归含药血清对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用研究

目的:观察当归含药血清对由Aβ25-35片段毒性诱导的PC12细胞阿尔茨海默病(AD)模型凋亡的影响。方法:利用细胞计数、MTT及流式细胞术测定观察当归含药血清处理由Aβ25-35片段诱导的PC12细胞活力、形态学及细胞凋亡的改变。结果:当归含药血清能增加PC12细胞的活力,降低LDH释放,流式细胞术分析显示,当归含药血清能降低细胞凋亡率。结论:当归含药血清能升高PC12细胞的活力,降低LDH释放,对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡有明显的保护作用。