骨科感染创面铜绿假单胞菌耐亚胺培南临床分析

目的：探讨骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因和可能机制。方法：检测37株骨科感染创面铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD2及金属β-内酰胺酶的表达情况,分析铜绿假单胞菌感染患者临床情况。结果：37株实验菌株中,15株对亚胺培南敏感,22株对亚胺培南耐药,其中有17例与ICU或呼吸内科住院有关,耐药株患者中APACHEⅡ评分达12以上占45．5％,平均住院时间（26．9±7．5）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者45．5％（10／22）;敏感株患者中APACHEⅡ评分〉12者6．7％,平均住院时间（13．5±6．6）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者0％（0／15）。OprD2相对含量耐亚胺培南菌株组为（2．65±0．54）％,明显低于亚胺培南敏感菌株组的（5．38±0．81）％（P〈0．01）。37株实验菌株中产金属β-内酰胺酶5株（13．5％）,并均在耐亚胺培南菌株组中。结论：他科输入、病情危重免疫力低下、住院时间长、碳青霉烯类抗生素使用是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的主要原因,而OprD2的含量减少和产金属β-内酰胺酶是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的重要机制。     

铜绿假单胞菌耐亚胺培南相关基因OprD2研究

目的研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。 方法取临床分离的铜绿假单胞菌18株，经K-B法检测耐药性，根据耐药性分为耐亚胺培南菌组12株和敏感菌组6株。另设1标准菌株ATCC27853。采用PCR法检测各菌株的OprD2基因，探讨OprD2基因突变与细菌对亚胺培南耐药之间的关系。结果12株耐药菌经OprD2基因扩增，8株阴性，4株阳性；6株敏感菌株及标准菌株扩增全部为阳性。统计学检验结果表明，对亚胺培南耐药菌组和敏感菌组OprD2基因阳性率的差异有极显著性（P＜0.01），且在耐药菌中发现了新的OprD2基因突变方式。 结论OprD2突变是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的重要机制，突变的方式有缺失突变与插入失活。     

体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性的比较

目的通过体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南产生耐药,比较两者产生耐药的时间,分析哪种药更易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。方法收集20株对所有抗生素均敏感的铜绿假单胞菌和20株质控菌株,先用肉汤培养,连续传代7次,再用肉汤稀释法测出其平均抑制浓度(MIC),然后按MIC/2配制亚胺培南和美罗培南浓度。肉汤中分别加入配制的亚胺培南和美罗培南,培养观察其耐药性,如耐药性增加,测出其MIC值,取MIC/2值浓度,继续培养至完全耐药。结果质控铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均4d后就产生耐药,用美罗培南平均16d后产生耐药;患者铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均3d后就产生耐药,用美罗培南平均15d后才产生耐药。结论质控铜绿假单胞菌和患者铜绿假单胞菌对亚胺培南产生耐药的平均时间远小于对美罗培南产生耐药的平均时间,亚胺培南比美罗培南更容易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。     

铜绿假单胞菌耐亚胺培南机制研究

目的研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。方法取临床分离的铜绿假单胞菌35株(对亚胺培南耐药21株,对亚胺培南敏感14株)。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS PAGE分析。同时进行超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶检测。结果铜绿假单胞菌耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01),且检出产ESBLs 9株,AmpC酶5株,同时产AmpC酶和ESBLs共2株。结论OprD2减少及产生ESBLs和AmpC酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性分析及机制探讨

目的:研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及其机制。方法:取痰液中培养分离的铜绿假单胞菌55株,经K-B法检测耐药性。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS-PAGE分析,双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶。结果:根据耐药性分为铜绿假单胞菌亚胺培南菌耐药36株和敏感19株。铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株不同程度OprD2减少,耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P<0.01);产金属β-内酰胺酶6株,检出率10.9%。结论:OprD2的减少和产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究

目的建立一种检测下呼吸道感染分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南(IMP)耐药的筛选方法并研究其耐药机制。方法114株铜绿假单胞菌，用KB法筛选出亚胺培南耐菌株、可疑耐药株和敏感株；然后提取部分菌株外膜蛋白，进行SDS—PAGE电泳，比较三组菌株外膜蛋白的差异。结果114株铜绿假单胞菌中有13株耐药，37株可疑耐药(IMP抑菌圈内出现散在小菌落)3株中敏，61株敏感。在外膜蛋白SDS-PAGE电泳图谱上发现敏感株存在OprD2、OprE带，但耐药株、可疑耐药株缺乏OprD2；OprE带缺乏或者染色较淡。定量分析发现耐药株和可疑耐药株OprD2、OprE含量明显低于敏感株。结论KB法可以筛选出IMP可疑耐药的铜绿假单胞菌；IMP抑菌圈内出现散在菌落的菌株是耐药株；铜绿假单胞菌对IMP耐药的主要原因与外膜蛋白OprD2和OprE缺失或含量明显减少有关。     

某院革兰阴性杆菌对美罗培南与亚胺培南体外敏感性比较

目的:比较美罗培南和亚胺培南对687株临床分离的革兰阴性杆菌体外抗菌活性,为抗感染治疗的药物选择提供参考。方法:采用MIC法测定同一株革兰阴性菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性,对细菌的耐药结果进行统计学分析。结果:150株大肠埃希菌、245株肺炎克雷伯菌和137株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南的敏感菌株之比是146:147、233:232和24:22,经χ²检验 P>0.05,两药敏感性差异无统计学意义;但铜绿假单胞菌对美罗培南的敏感率高于亚胺培南(P<0.05),鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南的敏感率均小于20%。结论:亚胺培南和美罗培南对肠杆菌科仍保持高活性有同样有效,对于铜绿假单胞菌引起的严重感染,美罗培南体外试验有着较高抗菌活性。亚胺培南和美罗培南对鲍氏不动杆菌疗效不佳。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征及耐消毒剂基因的检测分析

目的 分析和调查我院2005年1月～12月临床分离34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药特点以及耐消毒剂相关基因携带状况。方法 应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和17种药物敏感试验，头孢哌酮／舒巴坦采用KB法。用PCR方法检测季胺类（如苯扎溴铵）、双胍类（如氯己定）耐药相关基因qac EΔ1-sull。结果 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100％敏感外，对哌拉西林、哌拉西林／三唑巴坦敏感率为48％～54％，对第三代及第四代头孢菌素、氨曲南和喹诺酮类等抗菌活性差，敏感率为3％～29％，对美罗培南敏感率为29％，对氨苄西林／舒巴坦、氯霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑全部耐药。34株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌有14株EΔl-sull基因阳性，携带率为41．2％。结论 本组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外，对其它常用抗生素耐药严重，且耐消毒剂相关基因阳性携带率较高，应引起临床微生物和消毒界的重视。     

小儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南耐药性分析及机制探讨

目的 探讨患儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南的耐药性及可能的作用机制.方法 取临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药11株.采用改良三维试验方法 检测ESBLs和AmpC酶.采用外膜蛋白图谱,紫外吸收法测定OprD2含量.采用Etest试验观察氰氯苯腙对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)的影响,以研究细胞内主动外排泵出机制.结果 11株铜绿假单胞菌耐药株中检出单产ESBLs 4株,单产AmpC酶3株,其中同时产AmpC酶和ESBLs共1株.耐药株OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01).有27.3%菌株存在主动外排泵出机制.结论 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生、OprD2的减少及存在主动外排泵出机制是我院住院患儿铜绿假单胞菌对亚胺培南抗生素耐药的主要原因.     

铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药性的动态变化特征及分析

目的:分析我院2000年1月～2005年6月铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药性的变迁,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法:采用K-B纸片扩散法对临床分离的158株铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株进行抗菌药物敏感性测定,并进行统计分析。结果:对铜绿假单胞菌亚胺培南耐药菌株保持较强抗菌活性且耐药率小于35%的抗菌药物有美罗培南、阿米卡星、头孢他啶。结论:铜绿假单胞菌亚胺培南耐药菌株对常用抗菌药物耐药性更强,多重耐药现象十分严重,合理运用抗菌药物可控制和减缓细菌耐药性的增长。     

流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药性及耐药机制研究进展

流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是儿童呼吸道感染的常见致病菌,治疗Hi感染,氨苄西林是历史沿袭的首选药物.近年来,随着抗生素的广泛使用,Hi对氨苄西林的耐药日趋严重,特别是产生β-内酰胺酶(常见的有TEM-1和ROB-1型β-内酰胺酶).β-内酰胺酶阳性的Hi对多种抗生素耐药.此外,β-内酰胺酶阴性的耐氨苄西林Hi(BLNAR)近年报道增加,而BLNAR的耐药机制更复杂,本文就Hi对氨苄西林的耐药性及其耐药机制作一综述.     

人型支原体耐药性监测及耐药机制的研究

目的监测我院2008～2011年人型支原体(Mh)对喹诺酮类药物的耐药性,并从作用靶位氨基酸残基变异这一角度研究其耐药机制。方法收集我院经液体药敏一体法培养的单独Mh感染标本,分别对编码MhⅡ型拓扑异构酶GyrA、GyrB、ParC、ParE亚基的相应基因进行PCR-测序分析,将DNA序列与GenBank中Mh模式菌株ATCC23114翻译后氨基酸序列比对分析(blastn)。按照药敏表型与氨基酸残基变异间的规律对Mh进行分组,并计算各组热点氨基酸残基变异的变异率,用四格表确切概率法进行统计学分析。结果对司帕沙星(SPA)耐药组(R)28株Mh均检出GyrA丝氨酸残基(Ser)83→亮氨酸残基(Leu),变异率为100.0%,高于非耐药组(S+I),差异有统计学意义(P<0.05)。对氧氟沙星(OFX)和左氧氟沙星(LEV)非敏感组(R+I)的40株Mh有36株检测出ParC134位赖氨酸残基(Lys)→精氨酸残基(Arg),变异率为90.0%,高于敏感组(S),差异有统计学意义(P<0.05);而对OFX和LEV R+I组有16株检出ParE 426位天冬氨酸残基(Lys)→天冬酰胺残基(Arg),变异率为40.0%,高于敏感组(S),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Mh GyrA亚基Ser83→Leu是其对SPA耐药的原因之一;ParC亚基Lys134→Arg是其对OFX和LEV耐药的原因之一。     

Multidrug resistance in Serratia marcescens and cloning of genes responsible for the resistance

Six clinically isolated strains of Serratia marcescens were tested for their drug resistance. All showed fairly high resistance to many antimicrobial agents tested including norfloxacin, streptomycin, ampicillin, erythromycin, tetracycline, chloramphenicol, and antimicrobial dyes. Using the drug-hypersensitive strain of Escherichia coli KAM32 as the host, we cloned the genes responsible for multidrug resistance from chromosomal DNA of one of the strains of S. marcescens, NUSM8906. We obtained 28 hybrid plasmids that made host cells resistant to several antimicrobial agents. Many of the transformants harboring each of the plasmids showed multidrug resistance, and some showed resistance to specific drugs. The hybrid plasmids were classified into several groups based on their drug specificity. It appears that each class of plasmid carries different types of drug resistance genes. Analysis of such genes will reveal the multiple mechanisms involved in multidrug resistance in S. marcescens.     

单纯疱疹病毒1型对抗生素17997的耐药及交叉耐药研究

目的 体外训练单纯疱疹病毒1型（HSV－1）对抗生素17997的耐药突变及体内、外研究抗生素17997与阿昔洛韦（ACV）的交叉耐药。方法 HSV－1在抗生素17997或ACV的存在下连续传代，选择一定代数测定HSV－1野株及训练株的IC50。用HSV－1的ACV耐药株感染兔用膜造模，分别用抗生素17997或ACV局部给药治疗，以局部病损及病毒分离判断疗效。结果 HSV－1在抗生素17997存在下连传41代仍保持对抗生素17997的敏感性，未产生耐药变株；但HSV－1在ACV存在下，仅传一代，就发生耐药变株。抗生素17997与ACV无交叉耐药。抗生素17997对HSV－1 ACV耐药株实验感染角膜炎有明显治疗效果，可减轻病损，降低病毒排出量；阳性对照药ACV无任何疗效。结论 体外HSV－1对抗生素17997不易产生耐药。抗生素17997与ACV体内、外均无交叉耐药。     

HIV resistance and the developing world

Rollout of antiretroviral therapy (ART) in resource-limited countries has been identified as a global public health priority. Human immunodeficiency virus (HIV) treatment in the industrialised world is routinely accompanied by regular virological monitoring. By contrast, the implementation of ART in resource-limited settings requires use of standard first- and second-line therapy. One major consequence is the likely emergence of high-level resistance during first-line therapy since most people will stay on a virologically failing regimen for longer periods, potentially compromising the efficacy of second-line therapy. The evidence regarding resistance to triple-drug ART relates to the time at which virological failure occurs in populations from developed countries, with little data from resource-poor contexts where monitoring strategies, HIV subtypes and drug combinations are likely to differ.     

多重耐药淋病奈瑟菌耐药基因的研究

目的探讨多重耐药淋病奈瑟菌的耐药基因。方法应用KB法与琼脂稀释法测定35株淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性，煮沸法提取菌株DNA，PCR扩增blaTEM基因、tetM基因、erm基因和mefA基因。结果35株淋病奈瑟菌的敏感性测定结果显示多重耐药；blaTEM耐药基因的检出率为88．6％，tetM基因的携带率为11．4％，首次在国内从35株淋病奈瑟菌中检出reef、erm耐药基因，其中2株mefA基因阳性，1株erm基因阳性。结论淋病奈瑟菌的多重耐药与各耐药基因型之间密切相关。     

阿司匹林抵抗与氯吡格雷抵抗的研究进展

目的: 综述近年来国内外学者对阿司匹林抵抗与氯吡格雷抵抗的研究结果,为临床合理用药提供循证依据。方法: 检索国内外的相关文献,进行系统的文献整理和综合分析。结果: 各研究间由于研究对象、研究方案的设计、使用的检测血小板功能的方法及各检测方法对抗血小板药物抵抗的定义不同等,研究结果存在差异。其中与抗血小板药物抵抗相关的可能临床因素包括患者的性别、合并疾病、合并用药、相关实验室检查等,与抗血小板药物抵抗相关的可能分子机制包括与阿司匹林抵抗相关的基因多态性位点(PTGS1和PLA2)和与氯吡格雷抵抗相关的基因多态性位点(ABCB1、CYP2C19、CYP3A4、CYP3A5和P2Y12)。结论: 临床医生可以从临床因素和基因多态性两方面评估患者发生阿司匹林抵抗与氯吡格雷抵抗的风险,并制定合理的给药方案。     

Multidrug resistance in Klebsiella pneumoniae MGH78578 and cloning of genes responsible for the resistance

Klebsiella pneumoniae MGH78578, a clinical isolate, showed high level of resistance to many antimicrobial agents. We cloned genes responsible for drug resistance from chromosomal DNA of K. pneumoniae MGH78578 by shotgun method using Escherichia coli KAM32, a drug hypersensitive strain, as host. We obtained 43 hybrid plasmids that made host cells resistant to several antimicrobial agents. We classified them into 17 groups based on growth properties in the presence of each one of 9 antimicrobial agents and on restriction patterns of each hybrid plasmid. Analysis of the cloned genes must be very useful for investigation of major parts of multidrug resistance systems including multidrug efflux pumps in K. pneumoniae MGH78578 in which genome sequence is available.